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6. Mencione los métodos bacteriológicos que se emplean para el aislamiento de Salmonella.

1.Pre-enriquecimiento no selectivo:

 Pesar asépticamente 25 g ó ml de la muestra


 Agregar la muestra a 225 ml de Caldo Cerebro Corazón en un recipiente de 500 mL
 Incubar a 35 - 37°C durante 2 - 6 horas

2. Enriquecimiento:

 A partir del medio de enriquecimiento


 Pipetear 1 mL y sembrar en Caldo Selenite Cistina (incubar a 35°C por 24 h)
 Pipetear 1 mL y sembrar en Caldo Tetrationato (blanco lechoso) o Caldo Rappaport
(incubar a 43°C por 24 h)

3. Siembra en Medios Selectivos:

De cada uno de los medios de enriquecimiento selectivo sembrar con asa en:

 Agar Bismuto Sulfito


 Agar Bilis Verde Brillante
 Agar Hektoen o Agar XLD
 Incubar las cajas a 35°C por 24 horas. Si en Agar Bismuto Sulfito no aparecen colonias
sospechosas, Re incubar por 24 horas

7. Enumere las especies de E.coli que son nocivas para los humanos

8. ¿Cómo actúan las toxinas de E. coli enterotoxigénica?

• Entre los factores de virulencia que portan cepas EPEC se encuentra la adherencia a
células intestinales in vivo y a células cultivadas (in vitro); dicha adherencia está
codificada en un plásmido de 60 mDa, llamado factor adherente EPEC (EAF).

• También cuenta con genes cromosomales


nombrados eae A y B que operan en combinación
con los genes plasmídicos y dan lugar a una
proteína de 94 kDa (intimina) asociada a la
producción de la lesión de adherencia íntima y
esfacelamiento. Esta adherencia íntima de cepas
EPEC produce cambios en el citoesqueleto de la
célula del hospedero, con proliferación de
filamentos de actina por debajo del sitio de
pegamiento de las bacterias.

• Estas cepas tienen genes cromosomales que codifican para una proteína que recibió el
nombre de tir, la cual se transfiere a la membrana de la célula hospedera y le sirve
como receptor que es reconocido por EPEC.

9. Explique el mecanismo por el que E.coli causa infección del tracto urinario.
La característica más importante de las bacterias uropatógenas es la capacidad para adherirse
a las células uroepiteliales; para llevar a cabo esta tarea las cepas UPEC tienen diferentes
apéndices adhesivos en su superficie, los más estudiados son el pili P y el pili tipo-1. La
adherencia de las bacterias induce apoptosis y exfoliación
(desprendimiento celular), y en algunos casos las bacterias
pueden internalizarse en las células uroepiteliales (invadir) y
replicarse dentro de ellas. Esto le da una ventaja de
sobrevivencia, lo que evita que las bacterias sean detectadas y la
elimi-nación por los mecanismos de defensa inmunes del
hospedero. Las células uroepiteliales invadidas que contienen las
bacterias pueden actuar como un reservorio para infecciones
recurrentes. Los sistemas eficientes de adquisición de fierro y la
habilidad de crecer en la orina también son cruciales para la
sobrevivencia del microorganismo

UPEC tiene una gran variedad de factores de virulencia que le permiten evadir las defensas del
hospedero y establecer infección en este nicho único. Estos factores de virulencia están
usualmente codificados en el cromosoma de UPEC y frecuentemente son parte de regiones
cromosomales largas e inestables conocidas como “islas de patogenicidad”. En general, el
genoma de las cepas UPEC es rico en genes que codifican para adhesinas fimbriales y múltiples
sistemas de adquisición de hierro. Los principales factores de virulencia asociados con UPEC
incluyen: i) las fimbrias o pilis (ejemplos pili tipo-1, P, S y F1C); que poseen las adhesinas ii) los
sistemas de adquisición de hierro (sideróforos, aerobactina y enterobactina, ironN); iii) la
producción de toxinas ( -hemolisina, factor necrotizante citotóxico tipo 1 [CNF-1] y una
proteína autotrasportadora conocida como Sat); iv) mecanismos de evasión de las defensas del
hospedero (cápsulas, antígenos específicos o proteínas de membrana). Estos factores de
virulencia tienen su efecto cuando la bacteria se adhiere a las células del hospedero, participan
en la inflamación y daño tisular además inducen la producción de citosinas

10. ¿Cuáles son las especies de Shigella que causan infección en el ser humano? Explique los
factores de virulencia de esta bacteria.

• Hay varias especies diferentes de bacterias Shigella, clasificados en cuatro subgrupos:

– Serogrupo A: S. dysenteriae (12 serotipos)


– Serogrupo B: S. flexneri (6 serotipos)

– Serogrupo C: S. boydii (23 serotipos)

– Serogrupo D: S. sonnei (1 serotipo)

• Los grupos AyC son fisiológicamente similares,


S. sonnei (grupo D) puede ser distinguida del
resto en base de pruebas de metabolismo
bioquímico.1

• Factores de virulencia:

– Adhesinas: manosa sensible, manosa resistente

– Plásmido: codifica antígenos superficiales relacionados con la penetración de


las células epiteliales

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