ABSTRACT
Clove (Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry) is one of the plants used as medicine, society used leaves as
anti-inflammatory drugs at the time of toothache, which at the leaf contained flavonoids. The aim of this study is to
determine the content of total flavonoid of ethanol extract clove leaf (EECL). Clove leaf was extracted using
maceration method with ethanol as a solvent during at 3 x 24 hours. Analysis qualitative of flavonoids compound
using thin layer chromatography method. Determination of total flavonoids content of clove leaves using
spectrophotometri UV-Vis method λ 418 nm. The result of the research with rendamen yield of EECL were 16,1134%,
and total flavonoids content is 73,08 mgRE/g extract with persentation 7,308%.
Keywords: Clove leaf (Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry), Flavonoids
189
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 3 No.2
III. HASIL DAN PEMBAHASAN dengan menambahkan pelarut etanol 96% 1000 mL.
Tabel 1. Hasil perhitungan persen rendamen Penambahan pelarut etanol dilakukan sampai 3 kali
EEDC (Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry) proses ektraksi, sehingga volume pelarut yang
Berat Hasil Rendamen digunakan yaitu 4000 mL filtrat yang diperoleh
.No Sampel Awal Ekstrak Ekstrak kemudian diuapkan dengan menggunakan rotavapor
(g) (g) (%) dibawah titik didih pelarut sehingga didapatkan
1. EEDC 500 80,5671 16,1134 ekstrak kental. Ekstrak kental yang didapat berwarna
hijau tua, dengan persen rendamen yaitu 16,1134%.
Tanaman cengkeh (Syzygium aromaticum
(L.) Merr & Perry) yang digunakan dalam penelitian Tabel 2. Hasil running panjang gelombang
ini yaitu hanya pada bagian daunnya. Daun cengkeh maksimum DPPH 35 ppm
yang diambil, terlebih dahulu dicuci untuk Penyemprotan Pereaksi
menghilangkan kotoran seperti debu ataupun serangga Skrininf AlCl3 Sitroborat Hasil
yang menempel yang nantinya dapat mengganggu Fitokimia (Fluoresensi (Fluoresensi
proses dan hasil ekstraksi. Setelah itu diangin- UV366) UV366)
anginkan, kemudian dilakukan pengubahan bentuk
pada sampel daun cengkeh untuk memperluas Kuning Kuning
Flavonoid +
permukaan daun sehingga dapat mempercepat proses Kehijauan kehijauan
pengeringan. Pengeringan ini dimaksudkan untuk Keterangan: + = Positif
mengurangi kadar air, sehingga dapat mencegah
pembusukan oleh jamur atau bakteri serta reaksi Pemeriksaan flavonoid secara kualitatif
enzimatik tidak berlangsung. dengan menggunakan metode kromatografi lapis tipis
Dalam penelitian ini, sampel daun cengkeh (KLT). Dimana KLT itu sendiri merupakan suatu
yang telah dihaluskan ditimbang sebanyak 500 g dan metode pemisahan suatu senyawa berdasarkan
diekstraksi dengan metode maserasi. Digunakan perbedaan distribusi dua fase yaitu fase diam dan fase
metode maserasi ini karena daun memiliki tekstur gerak. Fase diam yang digunakan adalah silika gel
yang lunak dan juga dalam proses ekstraksinya tidak GF254, dan fase geraknya n-heksan : etil (3:7). Ketika
digunakan adanya pemanasan, dimana pemanasan ini diamati dibawah UV 366 nm terlihat noda sedikit
dapat membuat kadar dari flavonoid berkurang, berfluoresensi atau berpendar, dan setelah disemprot
sehingga digunakan metode maserasi. Maserasi dengan AlCl3 dan sitroborat dan dipanaskan
merupakan cara penyarian sederhana. Dirjen POM kemudian diamati dibawah UV 366 nm, noda yang
(1986) mengatakan, cairan penyari akan menembus berfluoresensi kuning kehijauan semakin intensif
dinding sel tanaman dan masuk ke rongga sel yang sehingga menunjukan adanya flavonoid.
mengandung zat aktif, sehingga zat aktif akan larut Penentuan kadar flavonoid total EEDC
dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara dengan menggunakan metode kolorimetri alumunium
larutan zat aktif di dalam sel dengan yang di luar klorida (Chang, et al., 2002). Mujahid (2011) telah
sel, maka larutan yang terpekat akan didesak keluar. melakukan validasi pada metode ini, dimana ia
Sampel yang telah ditimbang tadi menyatakan bahwa metode ini adalah metode yang
kemudian dimasukkan ke dalam wadah maserasi dan terpilih untuk analisis flavonoid secara spektroskopi
dimasukkan cairan penyari etanol 96% sebanyak 2000 UV-Vis yang dihitung sebagai rutin, karena
mL. Digunakan etanol karena (1) lebih selektif, (2) menghasilkan parameter yang baik. Flavonoid juga
kapang sulit tumbuh dalam etanol 20% keatas, (3) memiliki system karbonil yang terkonjugasi dengan
tidak beracun, (4) netral, (5) absorbsinya baik, (6) cincin aromatic sehingga karakterisasi flavonoid dapat
etanol dapat bercampur dengan air dalam segala dilakukan dengan spektrofotometri (Wildah, 2001).
perbandingan, (7) memerlukan panas yang lebih Oleh karena itu spektrofotometri UV-Vis digunakan
sedikit untuk proses pemekatan, dan (8) zat untuk menentukan kadar flavonoid pada EEDC,
penganggu yang larut terbatas (Tenriugi, et al., 2011). dimana larutan standar yang digunakan yaitu rutin.
Pelarut etanol dipilih sebagai cairan penyari karena Digunakan rutin karena kebanyakan flavonoid paling
senyawa yang akan diekstraksi adalah senyawa sering ditemukan dalam bentuk glikosida seperti
fenolik. Ekstraksi senyawa fenolik dari jaringan kuarsetin 3–rutinosida (Harbone, 1987). Larutan
tumbuhan dalam bentuk glikosida menggunakan standar rutin ini kemudian ditimbang sebanyak 10 mg
pelarut methanol atau etanol pada suhu kamar dengan dan dilarutkan dalam 10 ml metanol kemudian dibuat
cara maserasi (Andersen, 2006; Markham, 1988). beberapa rangkaian konsentrasi yaitu 37,5 µg/ml,
Hasil maserasi yang diperoleh kemudian disaring 62,5 µg/ml, 75 µg/ml, 87,5 µg/ml, dan 100 µg/ml.
untuk memisahkan residu (ampas) dan filtratnya. Rangkaian konsentrasi ini dimaksudkan untuk
Residu yang diperoleh kemudian di ekstraksi kembali mengurangi ketidakpastian analisa sehingga ketelitian
190
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 3 No.2
akan meningkat (Wiryawan, 2008). Dari beberapa Gambar 3. Kurva linear konsentrasi rutin vs
rangkaian konsentrasi tersebut, kemudian dipipet absorban pada λ 418 nm
masing-masing 0,5 ml dan ditambahkan dengan 1,5 Hasil kurva kalibrasi linear rutin yang
ml metanol yang berfungsi sebagai peningkat diperoleh yaitu y =0,0023x – 0,0141 dengan nilai
kelarutan, kemudian ditambahkan 0,1 ml AlCl3 10% koefisien determinasi (R2) yang diperoleh sebesar
yang berfungsi untuk memberikan efek batokromik 0,9279.
dengan melakukan pergeseran kearah panjang Tabel 3. Hasil penetapan kadar flavonoid total pada
gelombang yang lebih panjang, sehingga mengubah EEDC (Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry)
panjang gelombang standar rutin untuk masuk ke
dalam range panjang gelombang UV-Vis. Terjadi juga
efek hiperkromik atau peningkatan intensitas larutan
standar rutin menghasilkan warna yang lebih kuning
(Chang et, al., 2002). Setelah itu ditambahkan 0,1 ml
CH3COOK 1 M yang berfungsi sebagai penstabil.
Kemudian dicukupkan dengan air steril hingga
volume mencapai 5 ml. setelah itu dihomogenkan
dengan menggunakan vortex dan diinkubasi selama
30 menit. Hal tersebut dimaksudkan agar reaksi antara
larutan standar rutin dengan perekasi-pereaksi yang
ditambahkan dapat berlangsung dengan sempurna.
Untuk sampel EEDC, ditimbang 10 mg dan dilarutkan Dari pengujian kuantitatif ini, diperoleh
dalam 10 ml metanol. Dibuat 3 replikasi dengan kadar flavonoid total ekstraketanol daun cengkeh
masing-masing dipipet 0,5 ml dan ditambahkan (Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry) sebesar
dengan 1,5 ml metanol, 0,1 ml AlCl3 10%, 0,1 ml 73,08 mgRE/g ekstrak dengan persentase 7,308 %
CH3COOK 1 M dan dicukupkan dengan air steril yang dihitung sebagai rutin ekuivalen.
hingga volume 5 ml, kemudian di vorteks dan
diinkubasi selama 30 menit. IV. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan
dapat disimpulakan bahwa: Berdasarkan hasil
penelitian, disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun
cengkeh (Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry)
memiliki kadar flavonoid total sebesar 73,08 mgRE/g
ekstrak dengan persentase 7,308%.
DAFTAR PUSTAKA
Achmad SA. 1986. Kimia Organik Bahan Alam.
Jakarta: Departemen Pendidikan dan
Gambar 2. Kurva hasil optimasi pada range 400-500 Kebudayaan Universitas Terbuka.
nm Agoes, A. 2010. Tanaman Obat Indonesia. Salemba
Pergeseran ini disebabkan oleh AlCl3 yang Medika: Jakarta.
membentuk kompleks stabil tahan asam dengan Ahmad, F., J. 2008. Manfaat Tanaman Obat. Edsa
gugus OH pada atom C-5 atau C-3 dan gugus Mahkota: Jakarta.
keton pada atom C-4 (Chang et, al., 2002). Setelah Anderson O. M., and Markham K. R. 2006.
itu dilanjutkan pengukuran absorbansi sampel dan Flavonoids: Chemistry, Biochemistry, and
kurva baku pada panjang gelombang 418 nm. Application. Taylor & Francis Group: USA.
Anonim. 2013. Eugenin.
http://en.wikipedia.org/wiki/Eugenin Diakses
20 Desember 2013.
Anonim. 2013. Eugenitin.
http://en.wikipedia.org/wiki/Eugenitin
Diakses 20 Desember 2013.
Anonim. 2013. Kaempferol.
http://en.wikipedia.org/wiki/Kaempherol
Diakses 20 Desember 2013.
191
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 3 No.2
Anonim. 2013. Rhamnetin. Ekstrak Kasar Buah Pepino (Solanum
http://en.wikipedia.org/wiki/Rhamnetin muricatum Aiton) Berdasarkan Variasi
Diakses 20 Desember 2013. Pelarut. (Skripsi). Malang: Universitas
Anonymous. 2013. Cengkeh. Islam Negeri Malang.
http://www.iptek.net.id/ind/pd_tanobat/view. Integrated Taxonomic Information System. 2013.
php? id=9 Diakses 20 Desember 2013.Pokja http://itis.gbif.net/pls/itisca/taxastep?king=ev
AMPL., 2011, Buku Putih Sanitasi Daerah., ery&paction=containin&taxa=syzygium+ar
diakses pada 11 Februari 2016, omaticum&pformat=&pifx=plglt&plang.
<www://ampl.or.id/50114/overview>. Diakses tanggal 4 Oktober 2013.
Kar, A. 2005. Pharmaceutical Drug Analysis. New
Chang C. Yang M, Wen Hand Chern J. 2002. Age International Publisher: New Delhi.
Estimation of Total Flavonoid Content in Khopkar, S., M. 2008. Konsep Dasar Kimia Analitik.
Propolis by Two Complementary UI-Press: Jakarta.
Colorimetric Methods, J. Food Drug Anal.
Cristobal, M dan Donald, R 2000. Aktifitas Lenny, Sovia. 2006. Senyawa Flavonoid,
Antioksidan Flavonoid. Oregon State Fenilpropanoida dan Alkaloida. Medan:
University. Universitas Sumatera Utara.
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Lumbessy, M., Abidjulu, J., Paendong, J., J., E. 2013.
1986. Sediaan Galenik. Departemen Uji Total Flavonoid Pada Beberapa Tanaman
Kesehatan Republik Indonesia: Jakarta. Obat Tradisonal Di Desa Waitina Kecamatan
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Mangoli Timur Kabupaten Kepulauan Sula
1989. Materia Medika Indonesia Jilid V. Provinsi Maluku Utara. Jurnal Mipa
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. UNSRAT Online 2 (1) 50-54.
Jakarta. Marais J., P., J., Deavours B., Dixon R., A.,
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Ferreiraa D. 2006. The Stereochemistry Of
2000. Parameter Sediaan Umum Ekstrak Flavonoids. In; Grotewold E (ed). The
Tumbuhan Obat. Departemen Kesehatan Science Of Flavonoids. Springer: Ohio.
Republik Indonesia. Jakarta. Markham, K.,R. 1988. Cara Mengidentifikasi
Ferdinanti, E. 2001. Uji aktivitas antibakteri obat Flavanoid. Terjemahan Kosasih
kumur minyak cengkeh (Syzygium Padmawinata, Penerbit ITB: Bandung.
aromaticum (L) Merr & Perry) asal bunga, Miller, A., L. 1996. Antioxidant Flavonoids:
tangkai bunga, dan daun cengkeh terhadap Structure, Function and Clinical Usage. Alt.
bakteri. (Skripsi). Jakarta: Institut Sains dan Med. Rev. 1(2).
Teknologi Nasional. Mujahid, R. 2011. Pemilihan Metode Analisis
Fitria. 2007. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Secara Spektroskopi UV-Vis Serta
Flavonoid dalam daun paliasa. (Skripsi). Penerapannya Pada Seledri (Apium
Universitas Hasanudin: Makassar. graviolens L.) Murbei (Morus alba L.)
Harborne, J., B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Patikan kebo (Euphorbia hirta L.) Dan jeruk
Cara Modern Menganalisa Tumbuhan nipis (Citrus aurantifolia) (Tesis). Fakultas
Terbitan Kedua. Terjemahan Kosasih Farmasi UGM: Yogyakarta.
Padmawinata dan Iwang Soediro. ITB: Mulja, M dan Suharman. 1995. Analisis Instrumental.
Bandung. Universitas Airlangga-Press: Surabaya.
Harborne, J., B. 1996. Metode Fitokimia edisi kedua. Nasution, M., R., Permana, D., & Arif, M. 2011.
ITB: Bandung. Pengaruh Pemberian Rutin dan Kuersetin
Hardjono, L. 1995. Teknologi Kimia Bagian II. Terhadap Keastabilan Pigmen Antosianin
Prandnya Paramita: Jakarta. dari Kelopak Bunga Rosella. Scientia
Haris, M. 2011. Penetapan Kadar Flavonoid Total Vol. 1 No. 2.
dan Aktifitas Antioksidan dari Daun Dewa Nurdjannah, N. 2004. Diversifikasi Penggunaan
(Gynura pseudochina [Lour] DC) Dengan Cengkeh. Perspektif Volume 3 Nomor 2.
Spektrofotometer UV- Visible. (Skripsi). Pourmourad, F, Hosseinimehr, S., J, Shahabimajd, N.
Padang: Universitas Andalas. 2006. Antioxidant Activity, Phenol And
Heinrich, M., Barnes, J., Gibbons, S., Williamson, E., Flavonoid Contents Of Some Selected
M. 2010. Farmakognosi dan Fitoterapi. Iranian Medicinal Plants. African journal of
Penerbit Buku Kedokteran: Jakarta. Biotechnology Vol. 5(11).
Husnah, Muhibbatul. 2009. Identifikasi dan Uji
Aktivitas Golongan Senyawa Antioksidan
192
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 3 No.2
Pramono, S. 1989. Pemisahan Flavonoid. Pasca
Sarjana Fakultas Farmasi Universitas Gajah
Madah: Yogyakarta.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan
Tinggi. Terjemahan Kosasih Padmawinata.
ITB: Bandung.
Sudjadi. 2010. Kimia Analisis Farmasi. Pustaka
Pelajar: Yogyakarta.
Sumarno. 2001. Kromatografi Teori Dasar. Bagian
Kimia Farmasi Fakultas Farmasi UGM:
Yogyakarta.
Suyanto, F. 2009. Efek Larvasida Ekstrak Kulit Buah
Manggis (Garcinia mangostana L.)
Terhadap Larva Aedes aegypti L.
(Skripsi). Fakultas Kedokteran Universitas
Sebelas Maret: Surakarta.
Tenriugu, A.D.P, Alam G, Attamim F. 2008.
Standarisasi Mutu Daun Gedi (Abelmoschus
manihot (L.) Medik) dan Uji Efek
Antioksidan Dengan Metode DPPH (Jurnal).
http://pasca.unhas.ac.id/jurnal/files/d1043b1c
e802ee8dbcb6f1dbb5626d55.pdf Diakses 28
Januari 2014.
Wildah, Dj. 2001. Isolasi dan Identifikasi Flavonoid
Pada Daun Kemuing (Skripsi). Jurusan
Farmasi Fakultas MIPA. Universitas
Hasanudin: Makassar.
Winarno, F., G. dan Sri Laksmi. 1986. Pigmen dalam
Pengolahan Pangan. Dep. Tekn. Hasil
Pertanian, FATAMETA – IPB, Bogor.
Wiryawan, A., dkk. 2008. Kimia Analitik.
Departemen Pendidikan Nasional: Jakarta.
193
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 3 No.2
Jurnal Fitofarmaka Indonesia