δ- δ-
Dióxido de No polar 0.97 (45 °C)
Carbono O C O
• Sombreados en gris
están los aminoácidos
conservados y en rosa
los aminoácidos
importantes para la
función o estructura.
• La Mb es un monoméro
mientras que la Hb es un
heterotetrámero
formado por dos tipos
de subunidades (α y β).
Rosario A. Muñoz-Clares
CONSERVACIÓN DE ESTRUCTURA TERCIARIA
EN PROTEÍNAS HOMÓLOGAS
En proteínas
homólogas, que
proceden de un gen
ancestral común, la
estructura terciaria se
conserva más que la
estructura primaria.
Rosario A. Muñoz-Clares
MIOGLOBINA Y HEMOGLOBINA
Rosario A. Muñoz-Clares
ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE LA
MIOGLOBINA Y HEMOGLOBINA
• La Mb y las subunidades
de Hb están formadas por
ocho hélices α.
Rosario A. Muñoz-Clares
GRUPO HEMO
(PROTOPORFIRINA IX)
Protoporfirina IX + Fe(II)
Proteínas Función
Rosario A. Muñoz-Clares
Coordinación del átomo de Fe(II)
• Desoximioglobina (DesoxiMb) o
desoxihemoglobina (DesoxiHb)
• Penta-coordinado con
• 4 N del anillo de la porfirina
• 1 N del residuo de histidina
proximal
• Oximioglobina (OxiMb) u
oxihemoglobina (OxiHb)
• Hexa-coordinado con
• 4 N del anillo de la porfirina,
• 1 N del residuo de histidina
proximal,
• la molécula de O2
Rosario A. Muñoz-Clares
HISTIDINAS PROXIMAL Y DISTAL EN
MIOGLOBINA Y HEMOGLOBINA
Histidina distal
• La histidina proximal
está unida por un
enlace de coordinación
al ión Fe2+.
Rosario A. Muñoz-Clares
UNIÓN DEL O2 Y DEL CO EN MIOGLOBINA Y
HEMOGLOBINA
• En la degradación del
grupo hemo, que
normalmente se lleva a
cabo en el hígado, se
produce monóxido de
carbono.
• La biliverdina y la
bilirrubina son las
responsables de los
colores de los
hematomas.
• Las diferencias en
los espectros de
absorción de las
oxiMb u oxiHb con los
de las desoxiMb o
desoxiHb permiten
conocer la proporción
de las formas
oxigenadas a
diferentes
concentraciones de
O2.
Rosario A. Muñoz-Clares
UNIÓN DEL O2 A LA MIOGLOBINA
Se establece el equilibrio:
desoxiMb + O2 oxiMb
Rosario A. Muñoz-Clares
SATURACIÓN POR O2 DE LA Mb
• La unión hiperbólica y la
afinidad de la MB por el O2
implica que la Mb oxigenada
sólo puede soltar el O2 si la
concentración de éste
disminuye mucho.
• Dada la afinidad de la Mb
por el O2, casi toda la Mb
está oxigenada en un 90% a
la concentración de O2 que
existe en los capilares del
músculo, pero desoxigenada
en las inmediaciones de la
membrana externa de la
mitocondria de los miocitos,
donde la concentración de
O2 es casi cero.
Rosario A. Muñoz-Clares
ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE LA
HEMOGLOBINA
• Las cadenas
polipeptídicas de la
hemoglobina se
ordenan en forma
simétrica.
• El arreglo
simétrico de las
subunidades es
muy frecuente en
las proteínas con
estructura
cuaternaria.
Rosario A. Muñoz-Clares
UNIÓN DEL O2 A LA HEMOGLOBINA
Se establecen cuatro equilibrios:
P501
Hb + O2 HbO2
P502
HbO2 + O2 Hb(O2)2
P503
Hb(O2)2 + O2 Hb(O2)3
P504
Hb(O2)3 + O2 Hb(O2)4
P501 > P502 > P503 > P504
Cooperatividad positiva
La YO2 depende en forma sigmoidal de la concentración de
oxígeno, de acuerdo a la siguiente ecuación:
MIOGLOBINA
HEMOGLOBINA
Rosario A. Muñoz-Clares
SATURACION POR O2 DE LA Hb
• La saturación
sigmoidal de la Hb
por el O2 indica
cooperatividad
positiva entre las
subunidades de
Hb, de manera que
el O2 se une cada
vez mejor a
medida que estas
subunidades se
van llenando. Y
viceversa, se une
peor a medida que
estas subunidades
se van vaciando.
P50
Rosario A. Muñoz-Clares
RELEVANCIA FISIOLÓGICA DE LA
COOPERATIVIDAD POSITIVA DE UNIÓN
DEL O2 EN LA HB
Rosario A. Muñoz-Clares
LA MIOGLOBINA NO NECESITA UNIR AL O2
COOPERATIVAMENTE PARA
TRANSPORTARLO EFICIENTEMENTE
• El O2 fluye de la Hb
hacia la Mb debido a
las diferencias de afinidad
de estas dos proteínas y a
la cooperatividad positiva
de la Hb. La Mb se carga
con el O2 que suelta la Hb.
Rosario A. Muñoz-Clares
RELEVANCIA FISIOLÓGICA DE LA
COOPERATIVIDAD POSITIVA DE UNIÓN
DEL O2 EN LA HB
Rosario A. Muñoz-Clares
MECANISMO MOLECULAR DE LA
COOPERATIVIDAD POSITIVA DE UNIÓN DEL O2
EN LA HB
Rosario A. Muñoz-Clares
LA HEMOGLOBINA POSEE DOS ESTADOS
CONFORMACIONALES
• A medida que se satura, la Hb pasa
de un estado de baja afinidad por el O2
a uno de alta afinidad, y viceversa a
medida que libera el O2 .
• En ausencia de O2 la forma
termodinámicamente más estable es la T.
Rosario A. Muñoz-Clares
CAMBIOS EN EL GRUPO HEMO AL UNIR EL O2
Estado T Estado R
(DesoxiHB) OxiHb
Rosario A. Muñoz-Clares
TRANSICIÓN DESOXIHb→OXIHb
! El movimiento de la
histidina proximal
arrastra a la hélice α a la
que este residuo
pertenece.
! A su vez, el
movimiento de la hélice
se transmite a la
estructura terciaria de la
subunidad.
! Finalmente, este
cambio conformacional
se transmite a las otras
subunidades a través de
las interacciones de las
intercaras entre ellas.
Rosario A. Muñoz-Clares
DOS ESTADOS CONFORMACIONALES DE LA Hb
Estado T Estado R
(desoxiHb) (OxiHb)
Rosario A. Muñoz-Clares
FACTORES QUE REGULAN EL GRADO DE
OXIGENACIÓN DE LA HEMOGLOBINA
Rosario A. Muñoz-Clares
FACTORES QUE REGULAN LA OXIGENACIÓN
DE LA HEMOGLOBINA
• Concentración de CO2
CO2
OxiHb O2 + DesoxiHb DesoxiHb-COO- + H+
• Concentración de H+
xH+
OxiHb O2 + DesoxiHb DesoxiHb protonada
Rosario A. Muñoz-Clares
TRANSPORTE DE CO2 POR LAS SUBUNIDADES β
DE LA DESOXIHEMOGLOBINA
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTO DEL pH SOBRE LA UNIÓN DEL O2 EN LA HB
(Efecto Bohr)
• La menor afinidad
por el O2 de la Hb a
medida que baja el
pH se mide por el
aumento en la P50
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTO DEL pH SOBRE LA UNIÓN DEL O2 EN LA HB
(Efecto Bohr)
CO2 + H2O -HCO + H+
3 • La afinidad por el O2 de la Hb
disminuye a medida que baja
el pH.
• El metabolismo oxidativo
hace que baje el pH de los
tejidos por la producción de
CO2.
• A la concentración de O2 de
los tejidos la Hb está saturada
casi un 50% a pH 7.6,
aproximadamente un 35% a
pH 7.4 y sólo un 20% a pH 7.2.
• A la concentración de O2 de
los pulmones la Hb está
saturada casi un 100% a
cualquiera de estos valores
de pH.
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTO DEL pH SOBRE LA UNIÓN DEL O2 EN LA HB
(Efecto Bohr)
• La Hb toma O2 al
pasar de un pH 7.4
a un pH 7.6, aunque
exista la misma
concentración de
O2 en el medio.
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTO DEL pH SOBRE LA UNIÓN DEL O2 EN LA HB
(Efecto Bohr)
• Y viceversa, la Hb
cede O2 al pasar de
un pH 7.4 a un pH
7.2, aunque exista
la misma
concentración de
O2 en el medio.
Rosario A. Muñoz-Clares
BASES ESTRUCTURALES DEL
EFECTO BOHR
• En la desoxiHb, pero no en la oxiHb, el residuo de His del
carboxilo terminal de las subunidades β está próximo a un
residuo de Asp , por lo que se disminuye el pKa de esta His.
Rosario A. Muñoz-Clares
DOS ESTADOS CONFORMACIONALES DE LA Hb
Estado T Estado R
(desoxiHb) (OxiHb)
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTOS DEL BPG SOBRE LA UNIÓN DEL O2 A LA HB
• La Hb en la sangre
completa tiene
menor afinidad por
el O2 que la Hb
aislada en presencia
de CO2, y su afinidad
es aun menor que la
de la Hb sola.
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTOS DEL BPG SOBRE LA UNIÓN DEL O2 A LA HB
• Si se añade BPG a la
disolución de Hb
aislada se disminuye
su afinidad por el O2,
pero la afinidad es
aún mayor que la de
la Hb en sangre
completa.
Rosario A. Muñoz-Clares
EFECTOS DEL BPG SOBRE LA UNIÓN DEL O2 A LA HB
• La afinidad de la Hb
aislada por el O2 iguala a
la de la Hb en sangre
completa cuando se
añade a la disolución de
Hb aislada BPG y CO2.
• A las concentraciones
de O2 que existen en los
pulmones la saturación
de la Hb es casi igual
con y sin BPG y CO2.
Rosario A. Muñoz-Clares
CORRELACIÓN ENTRE LOS CAMBIOS EN LA
CONCENTRACIÓN DE BPG Y LA AFINIDAD DE LA
HEMOGLOBINA POR EL O2
Rosario A. Muñoz-Clares
BASES ESTRUCTURALES DEL EFECTO DEL BPG
SOBRE LA UNIÓN DEL O2 A LA HB
Rosario A. Muñoz-Clares
BASES ESTRUCTURALES DEL EFECTO DEL BPG
SOBRE LA UNIÓN DEL O2 A LA HB
Rosario A. Muñoz-Clares
CAVIDAD CENTRAL DE LAS MOLÉCULAS DE
DESOXI Y OXIHEMOGLOBINA
Desoxihemoglobina Oxihemoglobina
Rosario A. Muñoz-Clares
FLUJO DEL O2 DE LA HEMOGLOBINA
MATERNA A LA HEMOGLOBINA FETAL
• La afinidad de la Hb
fetal por el O2 es mayor
que la de la Hb materna
porque está formada
por dos subunidades γ
en las que no existen
los residuos de His que
interaccionan con el
BPG.
Rosario A. Muñoz-Clares
ERITROCITOS NORMALES
Rosario A. Muñoz-Clares
ERITROCITOS EN ANEMIA FALCIFORME
Rosario A. Muñoz-Clares
RUPTURA DE ERITROCITOS EN
ANEMIA FALCIFORME
• En la anemia
falciforme se
forman
fibras de
desoxiHb
que rompen al
eritrocito.
Rosario A. Muñoz-Clares
MUTACIÓN EN LA HEMOGLOBINA FALCIFORME
• La formación de fibras de
Hb se debe a una mutación
en las cadenas β
Rosario A. Muñoz-Clares
FORMACIÓN DE FIBRAS DE HEMOGLOBINA
FALCIFORME
Rosario A. Muñoz-Clares