Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios

Nº 76

Manual de Procedimientos para la toma y análisis

de muestra biológica

Maestro: Gilberto Rodríguez Contreras

Semestre: 2º Especialidad: Análisis Clínicos

Elaboro: Irma Estefanía Uscanga Tufiño

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 Contenido

Introducción 3

Toma de muestra venosa 4

Extensión de sangre (Frotis) 7

Examen General de Orina 9

Examen General de heces 13

Exudado Uretral 16

Exudado Faríngeo 18

Exudado Vaginal 20

Espermatobioscopia 23

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 Introducción

La elaboración de un manual para la toma de muestras de un

laboratorio clínicos es de suma importancia dado que la
herramienta mas importante dentro de un análisis es la
muestra, y esta debe ser tomada de la manera mas
cuidadosamente posible para obtener un materia biológico
de calidad que le sirva al analista para ofrecer el mismo
modo un resultado confiable y verídico.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
Modulo normas establecidas
3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

Extracción de Sangre con sistema de tubos al vacio

Fundamento

La extracción de sangre con este sistema es un factor importante para el

flebotomista ya que forma parte del desarrollo que llevara a una correcta

interpretación y entrega de resultados.

Adquirir estos conocimientos requiere de un proceso sistemático y riguroso que

debe llevarse a cabo con seguridad, cuidado y responsabilidad.

Objetivo

Adquirir el conocimiento práctico y teórico para llevar a cabo una extracción

venosa con sistema de tubos al vacio.

Materiales

Torniquete
Torundas 10
Guantes
Holder
Tubo al vacio (con o sin anticoagulantes dependiendo de estudio a realizar)
Aguja
Procedimiento

Identificación del paciente:

Nombre, edad, sexo, fecha de nacimiento, estudia a realizar.

Extracción de Sangre

1.- Verificar que la calidad del material a usar:

2- Tomar la aguja, destapar el extremo que va a romper el diafragma del tubo y

enroscarlo al Holder.
3.- Localizar la vena a puncionar colocando el torniquete unos centímetros arriba

del área seleccionada.

4.- Desinfectar el área a puncionar con una torunda con alcohol bien exprimida.
5.- Retirar el protector de la aguja y con el bisel hacia arriba, sosteniendo

firmemente el Holder, introducir la aguja en la vena.

6.- Con la otra mano, colocar e tubo seleccionado según el estudio a realizar e

introducirlo en el Holder hasta que la aguja rompa el diafragma y el tubo no pueda

introducirse más.
7.- Una vez obtenida la muestra, retirar el tubo y colocarlo en una gradilla, desligar

el torniquete, y colocar otra torunda bien exprimida sobre la zona de punción sin

presionar.
8.- Retirar el Holder y una vez que la aguja este fuera de la piel, presionar la

torunda en la zona de punción y doblar el brazo del paciente.

9.- Desechar los residuos en RPBI según su naturaleza infecciosa,

(punzocortantes en un recipiente rojo, las torundas utilizadas en una bolsa roja de 10

polietileno.) y la NOM 087 ECOL.

10.- en caso de haber utilizado un tubo con anticoagulante, homogenizar la sangre

y el aditivo cuidadosamente evitando la hemolisis de la muestra; en caso contrario

dejar reposar para coagular.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
Modulo normas establecidas
3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

Extensión de Sangre en laminilla

Objetivo

Realizar un correcto barrido de sangre para realizar una correcta interpretación de

resultados en los análisis que lo requieran.

Materiales Muestra Biológica

2 laminillas Sangre

1 Pipeta Pasteur

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Procedimiento

1.- Colocar una laminilla en la mesa de trabajo procurando no contaminarla. La

cual será el porta soporte

2.- Con la pipeta colocar una gota de sangre en la parte superior del portasoporte.

3.- Colocar un extremo de porta extensor (la otra laminilla) sobre el portesoporte

por delante de la gota de sangre.

4.- Desplazar suavemente hacia la gota de sangre el porta extensor, hasta

alcanzarla.

5.- Dejar que la gota de sangre se extienda a lo largo del portaextensor.

6.- Antes de que la sangre alcanzar el extremo de los borde, deslizar el porta

extensor hacia delante, con un movimiento firme y uniforme, este desplazamiento

debe acabar aproximadamente a 1 cm del final del portasoporte.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
Modulo normas establecidas
3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

Examen General de Orina

Fundamento

La orina es un líquido acuoso transparente y amarillento, de olor característico,

secretado por los riñones y eliminado al exterior por el aparato urinario se abrevia u o uri.

El examen general de orina comprende tres aspectos importantes: el examen físico, el

examen químico y el examen microscópico del sedimento urinario.

Objetivo

Conocer y llevar a cabo la técnica de la realización de un examen de orina.

Materiales Sustancias

Frasco clínico de 100 ml Muestra de orina en frasco

2 tubos de ensaye
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Portaobjetos

Cubreobjetos

Microscopio óptico

Centrifuga clínica
 Desarrollo
Examen físico

1. En la tarja correspondiente; y después de la respectiva identificación de frasco según

el paciente, vaciar orina en un tobo de ensaye.

2. Observar las características físicas de la orina depositada en el tubo. Densidad, color

y aspecto.

Examen Químico

1. colocar una tira reactiva en la orina del tubo de ensaye, dejar reposar 120 segundos.

2. Leer el color de cada área de la tira según el colorímetro del recipiente del cual es

originaria.

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 Examen Microscópico

1. Nivelar el tubo de ensaye con orina y otro tubo de ensaye con agua.

2. Colocar ambos tubos en la centrifuga de forma cruzada. Centrifugar a 2000 RPM

durante 5 minutos.

3. Decantar la orina en la tarja correspondiente.

4. Colocar una gota de sedimento urinario en el portaobjetos y cubrir con el

cubreobjetos.

5. Observar con el microscopio comenzando con el seco débil 10x y posteriormente el

seco fuerte 40x.

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 Conclusión
Al realizar el examen general de orina es una herramienta de gran utilidad en el

diagnostico general de varios padecimientos al encontrar o no ciertas sustancian que

son indicadores de cierto diagnostico.

Este examen se divide en tres aspectos:

º Examen físico: consiste en observar las características físicas de la orina, como el

color, el volumen y el aspecto.

º Examen químico: consiste en medir la concentración de una serie de sustancias

mediante tiras reactivas.

º Examen microscópico: consiste en una observación de l sedimento urinario para

detectar posibles sustancias no normales o normales y su concentración.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
Modulo normas establecidas
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Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

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aprendizaje

Examen General de Heces

Fundamento

Esta prueba diagnostica consiste en analizar las heces de un apersona e busca

de bacterias patógenas.

Dicha herramienta es útil en el diagnóstico de enfermedades al analizar las

características físicas, químicas y microscópicas de las heces.

Objetivo

Aprender a realizar un examen general de heces.

Materiales Sustancias

Aplicador de madera Heces en un recipiente

Laminilla y cubreobjetos
Lugol 10

Microscopio
Tiras reactivas
Procedimiento

1.- Marcar la muestra con la identificación de paciente, la fecha y la hora de la

recolección y las características observables de la misma.

2.- La muestra debe ser suficiente para todos los estudias a realizar,

aproximadamente 6ml.

3.- La muestra debe ser analizada máximo una hora después de ser tomada.

4.- No dejar la muestra expuesta al aire. No aceptar muestras mezcladas con

orina.

Examen Físico

1.- Observar las características como el olor, el color, la densidad y el volumen de

la muestra.

a) Cantidad: Depende de los residuos alimentacios procedentes de la dieta.

b) Consistencia: Normalmente debe ser solida y forme. Aunque se puede

presentar blanda y liquida.

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c) Color: Normalmente es de color pardo o marrón más o menos oscuro en el

adulto. En los lactantes es color amarillo caniario. Con una dieta carnearía se

hace marrón.

d) Olor: El olor fecal, característico, se hace fétido en todos los procesos que

cursan con putrefacción de las proteínas ingeridas o endógenas.

e) Moco: Su aparición en deposiciones suele ser reconocido ya que será

macroscópicamente o microscópicamente.

Examen Químico

1.- Se toma un poco de muestra con el aplicador de madera y se coloca sobre

los campos de la tira reactiva,

2.- Esperar el tiempo marcado para cada área.

3.- una vez terminado el tiempo leer la tira reactiva con el colorímetro del

recipiente donde es originaria.

Examen Microscópico

1.- Colocar en la laminilla 3 gotas de lugol.

2.- Tomar con el aplicador de madera una pequeña porción de muestra y colocarla

en el lugol.

3.- Homogenizar la muestra y cubrirla con el cubreobjetos.

4.- O bservar al microscópico con 10x y 40x. Recorrer la laminilla en sentido

direccional izquierda- derecha o arriba- abajo.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
Modulo normas establecidas
3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

Exudado Uretral

Fundamento

La uretra masculina constituye una de las porciones terminales de sistema

urinario y reproductor y en hombres sexualmente activos esta expuesta a

diferentes factores internos y externos los cuales inducen a la presencia de

cambios celulares que pueden ser valorados a través de un estudio citológico.

Objetivo

Aprender la teoría acerca de cómo realizar un exudado uretral.

Material

Citocepillo uretral
3 laminillas
3 cubreobjetos
Citospray

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Procedimiento

1. Fijar la uretra utilizando guantes y abriendo ligeramente el meato urinario.

2. Introducir el citocepillo uretral estéril a una profundidad de 2 a 5 cm en el

canal de la uretra.
3. Realizar un giro suave del citocepillo.
4. Retirar el citocepillo con suavidad
5. Realizar 3 frotis, extendiendo inmediatamente en las laminillas limpias.
6. Fijarlos Frotis con citospray.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
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3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

EXUDADO FARINGEO

FUNDAMENTO

Se utiliza para el diagnóstico de faringitis estreptocóccica. Excepcionalmente se

pueden requerir búsqueda de otros patógenos (por ejemplo: Neisseria

gonorrhoeae) consultar con el laboratorio.

MATERIALES

Bajalenguas ( imprescindible)
Hisopo de algodón con medio de transporte. ( Stuart , Amies)

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TECNICA

Bajo visión directa, con la ayuda del bajalengua, se tocará con el hisopo en todas

las partes con exudado, membranas o inflamación. Se deben frotar las criptas

tonsilares y la faringe posterior. En lo posible no tocar la mucosa oral, lengua,

úvula ni dientes.

NÚMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN.

Basta con un hisopo.

TRANSPORTE Y CONSERVACION.

Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).

Si no es posible, conservar en heladera a 4ºC hasta 12 horas.

OBSERVACIONES.

Se investigará rutinariamente la presencia de Streptococcus beta-hemolítico del

grupo A (S. pyogenes) y otros grupos beta hemolíticos como C y G.

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3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
Submodulo

Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

TRACTO GENITAL FEMENINO

EXUDADO VAGINAL

FUNDAMENTO

Esta muestra se utiliza para conocer la etiología en casos de vaginitis y vaginosis.

Puede utilizarse para búsqueda de portadoras de Streptococcus del grupo B en

embarazadas. Los exudados vaginales se realizan en el Laboratorio de

Microbiología. En el único caso que se aceptarán muestras realizadas fuera del

Laboratorio es si la paciente se encuentra internada e imposibilitada de

movilizarse.

MATERIALES

Camilla ginecológica
Espéculo estéril
Hisopos de alginato cálcico o Dracon, con medio de transporte.
Tubo con 1 mi de suero fisiológico y pipeta descartable.

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Condiciones previas

La paciente no debe tomar antibióticos, ni utilizar soluciones antisépticas

vaginales, óvulos ni pomadas en los días previos a la recolección de la muestra.

No debe mantener relaciones sexuales 48 hs antes de la toma de muestra.

TÉCNICA

-Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin

lubricante” (si fuera necesario lubricar, utilizar solo agua tibia)

-Recoger la muestra, bajo visión directa, con un hisopo del fondo del saco vaginal

posterior.

-Repetir la operación con un segundo hisopo.

-Recoger con la pipeta una muestra de fondo de saco y descargar en el tubo con

suero fisiológico.

NÚMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN

Se obtendrán dos hisopos, uno destinado al estudio microscópico y otro al cultivo.

La muestra en suero fisiológico se destinará al examen en fresco para

investigación de Trichomonas vaginalis.

TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN
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El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible. Cuando la

muestra no pueda procesarse antes de 15 minutos deberán emplearse hisopos

con medio de transporte tipo Stuart- Amies, que se mantendrán a temperatura

ambiente, o preferentemente, en estufa 35-37ºC hasta su procesamiento, que

deberá ser antes de 3-6 horas. El examen en fresco deberá observarse

inmediatamente o de lo contrario mantener en estufa a 37ºC por no más de 1

hora.

OBSERVACIONES

Cuando se sospeche la infección por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia

trachomatis, Mycoplasma hominis o Ureaplasma urealtycum, deberá enviarse

muestra endocervical.

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 2 Organizar operaciones básicas del laboratorio con base en
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3 Realizar la toma de muestras biológicas del cuerpo humano
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Resultados Aplicar las técnicas y procedimiento para la toma de muestras en

de el cuerpo humano
aprendizaje

ESPERMATOBIOSCOPÍA

Fundamento

La espermatobioscopía es el estudio que consiste en una evaluación

macroscópica y microscópica del semen,el cual esta formado por una mezcla de

espermatozoides suspendidos en un líquido llamado plasma seminal.

También conocido como espermograma, espermiograma, espermatograma o

seminograma, es el estudio de la calidad de una muestra de esperma. Los

parámetros que se evalúan en la espermatobioscopía son: el volumen de la

muestra, el número de espermatozoides que contiene cada mililitro de semen y el

porcentaje de ellos que presentan movilidad.

Objetivo

Aprender a realizar un estudio de semen de manera correcta apegado a sus

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principios científicos.
Materiales Muestra Biológica

Tira Reactiva para PH Semen

Pipeta Pasteur
2 laminillas
1 cubreobjetos

Procedimiento
Los caracteres organolépticos que se evalúan en el semen son: el color, aspecto,

olor, volumen , viscosidad, turbidez, licuación y pH.

El color normal del semen va de blanco amarillento a blanco grisáceo. El color

anormal amarillento puede indicar pio permia (presencia de pus por infección

bacteriana) o abstinencia sexual; el color verde es por infección específicamente

por gonococo; y el color rojo por hemospermia.

El aspecto del semen recién eyaculado es heterogéneo, después se modifica con

la licuación y se hace homogéneo. El olor característico del semen es mohoso.

ESPERMATOBIOSCOPIA DIRECTA

La espermatobioscopía directa consiste en la toma de una muestra de semen,

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obtenida en el laboratorio por medio de masturbación. Se estudian diferentes

factores del líquido seminal y su contenido:

 Características Valores de Referencia
Generales
Cantidad Mayor a 2.0 ml
Ph /grado de acidez y 7.2 a 7.8
alcalinidad
Aglutinación Menor a 10%
Viscosidad Normal
Licuefacción Normal
Espermatozoides por Mayor a 20 mill./ml
ml.

Morfología Valores de Referencia

Normales Mayor de 50%
Macrocéfalos Menor a 0.5%
Microcéfalos Menor a 1.5%
Cabezas dobles Menor a 1.5%
Cabezas ausentes Menor a 5%
Amorfos Menor a 40%

Movilidad Valores de Referencia 10

Móviles Mayor a 50%
Grado 0-4 (donde 4= Muy buena, 3 Buena, 2 Moderada, 1 a 0
Mala)