Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan ISSN 2231 - 4423

Vol. 1 (3), Juli-September 2011

CENTRIFUGAL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

Naval Kulkarni, Mayank Mandhanya *, DK Jain

College of Pharmacy, IPS Academy,

Rajendra Nagar, AB Road, Indore - 452.012, MP

ABSTRAK

Kromatografi lapis tipis sentrifugal adalah teknik kromatografi preparatif yang menggunakan gaya sentrifugal untuk pemisahan sistem
multi-komponen. Sebuah instrumen khas yang digunakan dalam teknik ini disebut sebagai Chromatotron. The Chromatotron adalah
preparatif sebuah, sentrifugal dipercepat, radial, lapisan tipis

kromatografi. Sampel dipisahkan diterapkan, sebagai solusi, dekat pusat disk berputar dilapisi dengan lapisan tipis dari sorben. Elusi oleh
bentuk-bentuk pelarut band melingkar dari komponen terpisah yang berputar off dari tepi rotor bersama-sama dengan pelarut. Sebuah
sistem pengumpulan Novel membawa eluat ke tabung output. Sistem Cyclograph adalah perangkat sentrifugal dipercepat untuk
melakukan pemisahan kromatografi preparatif. perangkat berputar lapisan bahan adsorben dilapisi sebagai cincin datar di atas dasar kaca.
Fase diam untuk instrumen cyclograph (rotor) yang mirip dengan piring TLC preparatif tetapi bulat bukan persegi panjang. Metode
kromatografi sentrifugal dapat diterapkan dalam dua versi: linear dan versi radial. Dalam versi radial dari TLC sentrifugal, sistem
kromatografer berputar pada porosnya sehingga pergerakan fase gerak dipercepat oleh gaya sentrifugal. The Cyclograph sistem
kromatografi sentrifugal menggabungkan keunggulan dari kedua preparatif TLC dan kromatografi kolom. Ini memberikan cepat,
pemisahan efisien. Kebanyakan pemisahan terjadi dalam dua puluh menit atau kurang. pemisahan cepat adalah hasil dari tindakan
sentrifugal dari Rotor berputar mengemudi fase gerak melalui lapisan adsorben.

Kata kunci: - Chromatotron, Cyclograph.

Sesuai Penulis Email: - mayankmandhanya@gmail.com, Mob: +919424583386

Menerima: 27/08/2011 Diterima: 29/09/2011

PENGANTAR partisi antara fase mobile dan stasioner. perbedaan halus

dalam hasil koefisien partisi senyawa di retensi diferensial
kromatografi [ 1]
pada fase diam dan dengan demikian mengubah
Kromatografi adalah istilah kolektif untuk satu set laboratorium
pemisahan.
teknik untuk pemisahan
Kromatografi mungkin preparatif atau analitis. Tujuan dari
campuran. Campuran dilarutkan dalam cairan yang disebut
kromatografi preparatif adalah untuk memisahkan komponen dari
"fase gerak", yang membawanya melalui struktur memegang
campuran untuk digunakan lebih lanjut (dan dengan demikian
bahan lain yang disebut "fase diam". Berbagai konstituen
merupakan bentuk pemurnian). kromatografi analitis dilakukan
campuran pada kecepatan yang berbeda, menyebabkan
biasanya dengan jumlah yang lebih kecil dari bahan dan untuk
mereka untuk memisahkan. Pemisahan ini didasarkan pada
mengukur proporsi relatif dari analit dalam campuran. Keduanya
diferensial
tidak

294 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com Mengulas artikel

294
Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan ISSN 2231 - 4423
Vol. 1 (3), Juli-September 2011

saling eksklusif. integritas kimia dari komponen sampel sensitif pelarut: Cocok dengan semua

dapat dipertahankan bahkan dengan menggunakan adsorben kromatografi pelarut,

silika gel aktif. termasuk asam asetat; tidak cocok untuk
digunakan dengan asam mineral.
SENTRIFUGAL TIPIS LAPISAN
KROMATOGRAFI [ 2]

The Chromatotron Keuntungan khusus:

The Chromatotron adalah preparatif, sentrifugal dipercepat,

radial, lapis tipis kromatografi. Ia menggantikan pelat TLC
preparatif, kolom kecil dan HPLC. Secara keseluruhan dimensi
30x35x30 cm.
Tidak ada "bercak" dari sampel atau gesekan band. Pemisahan selesai
dengan cepat, biasanya dalam waktu 20 menit.
Sebuah tutup transparan UV memungkinkan pengamatan langsung
dari UV menyerap atau berwarna senyawa selama perpisahan.

ketebalan lapisan dari 1, 2, 4 atau 8 mm memberikan kapasitas tinggi.

Lapisan penyerap mudah diregenerasi in situ untuk digunakan kembali.

Pelarut yang digunakan hemat. elusi gradien mudah.

Gambar 1: The Chromatotron Suasana nitrogen mencegah oksidasi sampel.

Prinsip operasi Compact (mudah dipindahkan dari laboratorium ke laboratorium), beberapa

kontrol, tidak ada tekanan tinggi.

Sampel dipisahkan diterapkan, sebagai solusi, dekat pusat disk Harga rendah. Setengah lusin Chromatotrons biaya kurang dari persiapan
berputar dilapisi dengan lapisan tipis dari sorben. Elusi oleh HPLC tunggal.

bentuk-bentuk pelarut band melingkar dari komponen terpisah Senyawa tanpa kromofor terdeteksi dalam fraksi dielusi
yang berputar off dari tepi rotor bersama-sama dengan pelarut. dengan TLC konvensional. Koneksi ke indeks bias dan UV
Sebuah sistem pengumpulan Novel membawa eluat ke tabung monitor tidak dianjurkan.
output.

Dapat digunakan dengan kolektor fraksi meskipun koleksi tangan

memadai.
Kapasitas: Upto 500 mg per komponen, 1-2 g
total, misalnya dimetil dan dietil Cyclograph: centrifugal Chromatography
ftalat dalam heksana - etil asetat 9: sistem [ 3]
1 pada layer 4 mm silika gel. fitur
• Variabel kecepatan motor (100-1400 RPM).
• lampu UV 4-watt terintegrasi untuk handsfree melihat sampel.
sorbents: Silika gel, alumina dan silika gel - perak

nitrat; tidak berguna dengan agen • On / Off switch untuk lampu bermotor dan UV.
penyerap RP.

295 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com Mengulas artikel

295
 Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan
Vol. 1 (3), Juli-September 2011
• Adjustable pengaturan sudut bidang kapal (0-30 derajat).
• Ultra tenang & akurat aliran rendah pompa pelarut (015ml / min).
• Kompatibel dengan semua pelarut kromatografi
umum termasuk asam asetat.
• chamber dengan mudah dilepas untuk pembersihan submersible.
Cyclograph
Sistem Cyclograph adalah perangkat sentrifugal dipercepat
untuk melakukan pemisahan kromatografi preparatif.
perangkat berputar lapisan bahan adsorben dilapisi sebagai
cincin datar di atas dasar kaca. Sebuah pompa pelarut yang
digunakan untuk menerapkan sampel dan fase gerak ke
pusat cincin berputar adsorben. Tindakan sentrifugal
mempercepat aliran fase gerak melalui adsorben,
memisahkan komponen sampel sebagai band melingkar.
Fase gerak mengelusi terus menerus ke saluran koleksi
berbentuk khusus dalam tubuh instrumen. band komponen
dikumpulkan secara manual dalam tabung tes atau opsional
oleh kolektor fraksi otomatis (tidak termasuk). Pemisahan terjadi
dengan cepat, biasanya dalam waktu 20 menit, versus khas 90
sampai 120 menit untuk kromatografi lapis tipis
preparatif
(TLC) atau
Kromatografi.
Prinsip operasi
Fase diam untuk instrumen cyclograph disebut rotor. Sebuah
rotor mirip dengan pelat KLT preparatif tetapi bulat bukan
persegi panjang. Dukungan kaca bundar dari rotor memiliki
lubang di tengah sehingga dapat dipasang pada motor
cyclograph tersebut. motor akan berputar rotor di 720 RPM.
Bahan adsorben dari Rotor dilapisi sebagai cincin yang tidak
memperpanjang ke dalam lubang pusat kaca. zona bening ini
kaca di pusat adalah
296 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com
ISSN 2231 - 4423
dimana sampel dan fase gerak akan diterapkan. Sampel
diterapkan pertama sebagai solusi dengan cara pompa
pelarut atau jarum suntik tangan. Tindakan berputar rotor
akan memaksa cairan sampel mengalir sebagai band putaran
seragam di tepi bagian dalam cincin adsorben. Pompa pelarut
kemudian beralih ke fase gerak yang dipilih untuk
memisahkan komponen-komponen sampel. Tindakan
berputar rotor, dan untuk tingkat yang lebih rendah laju aliran
pompa, memberikan kekuatan motif dari fase mobile.
Komponen sampel akan bermigrasi melalui adsorben Rotor
sebagai band melingkar dan harus berbeda afinitas untuk
adsorben versus fase mobile. Hal ini menyebabkan mereka
bermigrasi pada tingkat yang berbeda yang mempengaruhi
pemisahan. Band melingkar akhirnya bermigrasi ke tepi luar
cincin adsorben. Aliran fase mengalir ponsel yang berisi band-
band komponen dikeluarkan dari tepi Rotor seperti air dari
ban basah berputar. Saluran koleksi berbentuk khusus di
sekeliling luar Rotor mengumpulkan fase gerak eluting.
Seluruh kapal koleksi miring sehingga gravitasi mengalir eluen
ke port keluar di tempat yang dapat dikumpulkan. Desain
kapal mempertahankan integritas band sampel sehingga
mencegah remixing band komponen sampel.
Kolom
Faktor yang mempengaruhi [ 4]
kromatografi sentrifugal, pertama kali diusulkan sebagai
varian dari kromatografi kertas, kemudian digunakan dalam
TLC [ 5]. Metode ini diterapkan dalam dua versi: linear dan
versi radial. Dalam radial atau versi melingkar dari TLC
sentrifugal, sistem kromatografer berputar pada porosnya
sehingga
pergerakan fase mobile
dipercepat oleh gaya sentrifugal, seperti pada versi linear.
Dalam sentrifugal TLC radial, fase gerak dipasok ke pusat
dari serapan melingkar
Mengulas artikel
296
Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan
Vol. 1 (3), Juli-September 2011
sistem. Laju aliran fase gerak dapat diatur dengan cara
micropump a. Menurut penulis [ 6], kekuatan sentrifugal
memainkan peran yang sama seperti tekanan dalam HPLC.
Dalam linear sentrifugal TLC, kuantitas setara dengan tekanan P
di HPLC dapat dinyatakan oleh hubungan [ 6]: -
P = ρω 2 Z f / 2 ............... (1)
Dimana, ρ adalah densitas dari fase mobile, ω kecepatan sudut
piring, dan Z f jarak dari titik pasokan ke depan fase mobile.
Atas dasar hal tersebut, sentrifugal TLC dapat digolongkan
sebagai metode TLC dengan aliran paksa dikendalikan. Aliran
distabilkan dengan menggunakan kondisi TLC terus menerus
dan laju elusi diatur oleh laju rotasi dukungan. Kita dapat
mencatat bahwa tingkat elusi berbanding lurus dengan
kuadrat dari kecepatan sudut [ 6].
Sebuah rinci kritis Komentari sentrifugal
kromatografi [ 7], ditulis pada tahun 1964, tidak kehilangan
pentingnya hari ini. Para penulis [ 7] percaya bahwa ekonomi
waktu di elusi lapis tipis kromatogram oleh sentrifugal TLC tidak
sangat besar. Tidak mungkin untuk sepenuhnya setuju dengan
pandangan ini. Untuk pemisahan yang sangat panjang, metode
ini tidak diragukan lagi ekonomis dibenarkan dan telah terus
digunakan dalam praktek analitis dalam beberapa tahun terakhir:
fase terbalik sentrifugal TLC telah berhasil digunakan untuk
pemisahan senyawa polar yang berasal dari tumbuhan dan versi
pertukaran ion dari sentrifugal TLC telah digunakan untuk
penentuan Fe, Co, Ni, Cu, Hg, dan logam lainnya. aspek yang
berbeda dari penerapan sentrifugal TLC telah dibahas dalam
sejumlah studi [ 8]. Kemungkinan TLC sentrifugal untuk pemisahan
preparatif telah dibuktikan oleh Stahl dan Muller [ 9], yang
menunjukkan bahwa tertentu
297 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com
ISSN 2231 - 4423
biaya sampel dalam metode ini dapat berjumlah antara 10
dan 1000 mg per milimeter dari ketebalan lapisan
penyerapan untuk satu senyawa. Hasil studi rinci yang
menarik tidak hanya untuk persiapan tetapi juga untuk
kromatografi analitis. Gbr.2 [ 9] menggambarkan
ketergantungan dari waktu pemisahan pada laju aliran
keseluruhan dari fase gerak. Ini mengikuti dari data yang
disajikan bahwa peningkatan laju aliran lead fase gerak
untuk signifikan pemendekan itu
Proses kromatografi, yang terutama diucapkan di wilayah
suku bunga rendah. Gambar. 3 [ 9]
menyajikan ketergantungan faktor pemisahan untuk
hydrazones (pewarna) pada tingkat volume pasokan dari
fase gerak dan laju rotasi dari sistem kromatografi. Resolusi
maksimal untuk laju aliran rata-rata fase gerak (2-
3,5 ml min 1) diperoleh di wilayah tingkat yang relatif rendah
rotasi sistem kromatografi (~ 750 rev min 1). Di
perbandingan persiapan
sentrifugal TLC dengan preparatif tradisional TLC dan
kromatografi kolom, penulis [ 9]
tiba pada kesimpulan dibenarkan bahwa metode ini memiliki kelebihan
yang pasti.
Gambar 2. Ketergantungan dari waktu pemisahan D pada laju aliran volume fase
gerak F; kondisi eksperimental: stasioner fase-silika gel dengan 1,5% dari acronal,
fase-80 bergerak: 20 heksana-etil asetat campuran, tingkat rotasi 750 putaran /
menit [ 9]
Mengulas artikel
297
Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan
Vol. 1 (3), Juli-September 2011
Perhatian harus diambil untuk penampilan baru-baru ini
beberapa metode baru dan varian dari aparat yang melibatkan
sentrifugal TLC [ 10]. Sebuah metode baru kromatografi preparatif
planar adalah sentrifugal berurutan
lapisan kromatografi (SCLC) [ 10].
Menurut penulis [ 10], menggabungkan
keuntungan dari preparatif dan analitis sentrifugal, anti radial,
dan berurutan TLC.
Peralatan untuk SCLC memungkinkan untuk melakukan
kromatografi melingkar dengan sentrifugasi pada tingkat
yang berbeda rotasi. Pasokan eluen untuk setiap titik di piring
memungkinkan untuk memisahkan tambahan komponen
individu menggunakan fase gerak individu. Selain itu, ada
kemungkinan melaksanakan anti
radial
kromatografi di bawah pengaruh gaya kapiler. Dengan
demikian metode SCLC sebenarnya prosedur hybrid yang
memperluas kemungkinan sentrifugal TLC. Sebuah
kromatografi arus balik sentrifugal baru untuk kromatografi
partisi telah diusulkan oleh peneliti Jepang [ 11].
Gambar 3. Ketergantungan dari faktor pemisahan Rs untuk pewarna hidrazon
pada tingkat rotasi sistem n kromatografi; kondisi eksperimental: stasioner fase-
silika gel 60 dengan 1,5% dari acronal, ponsel fase-80: 20 hexaneethyl campuran
asetat, tingkat volume pasokan dari fase mobile untuk sistem kromatografi (ml /
min1):
1) 3,5; 2) 2.1; 3) 1.1; 4) 5.2; 5) 7.1; 6) 8,8.
Sebuah pemisahan preparatif cepat dari serangkaian
campuran asam amino, gula, dan asam alifatik jenuh telah
dicapai dengan bantuannya. Kemungkinan sentrifugal TLC
untuk signifikan
298 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com
ISSN 2231 - 4423
peningkatan laju aliran fase gerak di HPTLC telah dibuktikan.
Telah terbukti bahwa hasil yang diperoleh dalam pemisahan
tiga menit dengan sentrifugasi setara dengan pemisahan 12
menit dengan bantuan biasa TLC melingkar. Metode
kromatografi sentrifugal kertas, kemungkinan-kemungkinan,
dan prospek pengembangannya telah dipertimbangkan
dalam tinjauan. Kemungkinan memperoleh tingkat aliran
tinggi dari fase gerak dalam kromatografi sentrifugal terbatas.
Saya taku s
percaya bahwa penggunaan suku rotasi di mana tekanan di
atas 1 atm diciptakan [lihat Eqn. (1)] akan menyebabkan
pecahnya kolom pelarut dan pencampuran udara dengan
pelarut pada titik diperkenalkan. Namun keterbatasan lain
terkait dengan penerapan lapisan terbuka sorben di
kromatografi sentrifugal: peningkatan perlawanan dari lapisan
sorben dengan peningkatan laju elusi dapat menyebabkan
"menumpahkan" eluen melalui sorben. Ini sebenarnya
mengapa kromatografi sentrifugal tidak mengizinkan
pencapaian tingkat aliran tinggi yang sama dari fase gerak
seperti dalam HPLC.
Keuntungan [ 12]
1) The Cyclograph sistem kromatografi sentrifugal menggabungkan
keunggulan dari kedua preparatif TLC dan kromatografi kolom. Ini
memberikan cepat, pemisahan efisien. Kebanyakan pemisahan terjadi
dalam dua puluh menit atau kurang.
2) pemisahan cepat adalah hasil dari tindakan sentrifugal dari
Rotor berputar mengemudi fase gerak melalui lapisan adsorben.
Kecepatan dari fase gerak memungkinkan penggunaan
adsorben partikel yang lebih kecil. The rotor untuk Cyclograph
menggunakan tempat tidur partikel adsorben 15 mikron rata-
rata, mirip dengan TLC. partikel ini kecil tidur versus dipotong
35-75 mikron
khas kolom tekanan rendah
Mengulas artikel
298
Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan ISSN 2231 - 4423
Vol. 1 (3), Juli-September 2011

kromatografi memungkinkan tingkat yang lebih tinggi Sumber dapat digunakan untuk mendeteksi pd hakekatnya

efisiensi pemisahan. komponen neon.

3) Tindakan sentrifugal dikombinasikan dengan penggunaan pompa 8) Bahan kimia integritas sampel sensitif

pelarut untuk menerapkan fase gerak memungkinkan kontrol penuh komponen dapat dipertahankan bahkan dengan menggunakan adsorben
dari profil kecepatan pelarut. tingkat aliran khas adalah dalam kisaran silika gel aktif. Tidak seperti TLC di mana sampel

sekitar 2-3 ml / menit per milimeter ketebalan adsorben. band yang pelarut aku s menguap sebelum

ketat berarti pecahan dielusi dapat dikumpulkan dalam volume kromatografi, itu mencicipi diperkenalkan pada

minimal pelarut. Cyclograph perlu pernah terkena kering adsorben. Ini

4) Pompa metering pelarut juga membuat penggunaan langkah
gradien mudah untuk melakukan dengan Cyclograph. Inlet
pompa dapat beralih dari pelarut lemah untuk pelarut yang lebih
polar selama berlari. Hal ini memungkinkan senyawa dengan
berbagai polaritas untuk dipisahkan. sampel kompleks seperti
produk alami yang cepat dipisahkan ke dalam kelas komponen.
5) Menyapu polaritas fase gerak dari lemah untuk kuat membuatnya
mudah untuk menggunakan kembali Rotor bagi banyak pemisahan
sampel. Dengan menyimpulkan jalankan dengan pelarut yang kuat, jika
tidak kuat teradsorpsi senyawa akan memerah dari Rotor. Hal ini
memungkinkan Rotor untuk digunakan kembali untuk puluhan sampel.
meminimalkan kemungkinan reaksi dari komponen sampel pada
permukaan adsorben aktif. kontrol lebih lanjut dari atmosfer
dimungkinkan dengan pembilasan kapal dengan gas nitrogen
selama kromatografi.
REFERENSI
1. “Chromatography”;
http://en.wikipedia.org/wiki/Chromatography, diakses pada
21/08/2011.
2. “Sentrifugal Kromatografi lapis tipis”;
http://www.harrisonresearch.com/chromatotron/spec
s.html, diakses pada 21/08/2011.
3. “Cyclograph: Centrifugal Chromatography Sistem”;
http://www.ichromatography.com/cyclograph.html, diakses pada
21/08/2011.
4. "Faktor yang mempengaruhi"; http://iopscience.iop.org/0036-

021X / 56/4 / R06.pdf, diakses pada 22/08/2011.

6) Pemisahan pada Cyclograph skala mudah dan cepat. Rotor
5. Rosmus J., Pavlicek M. dan Deyl Z. (1964) Tipis-
yang tersedia dari 1 mm tebal hingga 8 mm ketebalan. Untuk
Kromatografi lapisan, Elsevier Publikasi, Amsterdam, PP 119.
kasus-kasus sulit, komponen dielusi yang hanya sebagian
diselesaikan, dapat bersepeda kembali ke Rotor berputar. Hal ini
secara efektif memungkinkan kromatografer untuk 6. DL Saunders dan LR Snyder (1970). “Tampilan baru pada kekuatan

meningkatkan "panjang kolom" tanpa kelemahan yang terkait. pelarut, selektivitas, dan pembangunan berkelanjutan”, The Journal
of kromatografi Sains, 8 (1970), 706-710.

7. Z. Deyl, J. Rosmus dan M. Pavlicek (1964). “Planar

7) Pemisahan pada Cyclograph dapat dipantau karena kromatografi lapis dalam analisis polutan anorganik”, Chromatogr.
mereka terjadi dengan built in lampu UV254. zat dipisahkan Putaran., 6 (1964), 19 - 22.
yang menyerap cahaya 254 nm akan terlihat melawan 8. F. Derguini, V. Balogh-Nair dan K. Nakanishi (1979).
hijau neon “Sintesis (+) -, (-) - dan (±) -7'-
latar belakang Rotor. Opsional UV366 sebuah

299 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com Mengulas artikel

299
 Asian Journal Farmasi dan Sains Kehidupan ISSN 2231 - 4423
Vol. 1 (3), Juli-September 2011

Asam hydroxyabscisic”, Tetrahedron Surat, 51 (1979),

4899-4901.
9. Egen Stahl dan Josef Muller (1982). “Parameter
Persiapan Lapisan tipis Kromatografi”,
Chromatographia, 1982, 15 (8), 493-497.
10. S. Nyiredy, CAJ Erdelmeier dan O. sticher (1985). “Faktor
yang Mempengaruhi Reverse Phase
kromatografi Pemisahan”, Jurnal Resolusi Tinggi
Chromatography & Chromatography Komunikasi, 8 (1985), 73-77.

11. Watura Murayama, Tetsuya Kobayashi, Kosuge Yasutaka,

Hideki Yano, Yoshiaki Nunogaki, dan Kanishi
Nunogaki (1982). “ Counter-saat
kromatografi”, Journal of Chromatography, 239, (1982),
643-646.
12. "Keuntungan dari Cyclograph”;
http://www.ichromatography.com/cyclograph.html, diakses pada
21/08/2011.

300 | usia P Tersedia secara online pada www.ajpls.com Mengulas artikel

300