Formulasi dan studi toksikologi in vivo dari siklosporin A tetes mata dengan

nanopartikel siklodekstrin

Abstrak
Siklosporin A (CyA) adalah obat imunosupresif yang digunakan secara topikal
untuk mengobati gangguan inflamasi okular
seperti penyakit mata kering (DES). Ini adalah peptida siklik lipofilik dengan
berat molekul 1202,6 Da. Tujuan
dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan surfaktan bebas 0,2% (b / v)
tetes mata CyA encer di mana obat ini hadir di
kendaraan berair yang mengandung nanopartikel CyA / cyclodextrin (CyA /
CD) dan kemudian melakukan tiga bulan
uji toksikologi pada kelinci. Lima formulasi konsentrasi CD yang berbeda
dipelajari, semuanya
mengandung 12,5% (b / v) a-cyclodextrin (aCD) dan berbagai jumlah g-
cyclodextrin (gCD) (mulai
dari 0 hingga 12,5% b / v). aCD digunakan untuk melarutkan obat dan gCD
untuk mempromosikan pembentukan kompleks
agregat. Agregat kompleks CyA / CD dibentuk di semua formulasi yang diuji.
Namun, itu
formulasi yang mengandung 12,5% (w / v) aCD dan 12,5% (w / v) gCD
menciptakan lebih banyak nanopartikel CyA / CD dari
ukuran yang sesuai dan karena itu diuji secara in vivo. Tetes mata tidak
menyebabkan iritasi mata atau sisi beracun
efek pada pemberian topikal pada kelinci sekali atau dua kali sehari selama tiga
bulan.

pengantar
Siklosporin A (CyA) adalah peptida imunosupresif yang memiliki
terbukti bermanfaat untuk pasien dengan sindrom mata kering (DES) (Di
Tommaso et al., 2012; Nussenblatt dan Palestina, 1986; Tatlipinar
dan Akpek, 2005). Peptida lipofilik biasanya diformulasikan dalam
tetes mata berbasis minyak (Restasis1, Ikervis1). Tetes mata berminyak bisa
menjengkelkan mata. Kami mengusulkan bahwa tetes mata berbasis air bebas
minyak
akan lebih baik ditoleransi dan karena itu lebih bermanfaat bagi mata kering
pasien. Dalam penelitian ini kami memformulasikan tetes mata CyA sebagai
nanopartikel
suspensi dalam air dan menguji tolerabilitas mereka pada kelinci.
DES adalah gangguan okular umum yang disebabkan oleh penurunan air mata
produksi yang mengakibatkan ketidaknyamanan, gangguan visual dan sobekan
ketidakstabilan film, dengan potensi kerusakan pada permukaan okular. ini
disertai dengan peningkatan osmolaritas film air mata dan
peradangan pada permukaan okular (Anon., 2007). CyA menurun
jumlah sel T yang diaktifkan dan ekspresi inflamasi
penanda di konjungtiva pasien mata kering dan, dengan demikian, menurun
peradangan lokal (Rao, 2010). Untuk mencapai ocula terapeutik ingkat obat,
konsentrasi sistemik tinggi dari CyA harus diberikan yang dapat menyebabkan
efek samping yang serius, seperti nefrotoksisitas dan
hipertensi, dan akibatnya administrasi CyA topikal ke
mata lebih disukai (Di Tommaso et al., 2012). Ini bisa menantang
baik karena kemampuan mata untuk menyingkirkan zat asing
melalui drainase cairan air mata dan berkedip (Urtti, 2006), serta yang tinggi
berat molekul CyA, kelarutan berair yang buruk dan
sifat hidrofobik. CyA adalah obat oligopeptida siklik netral,
dengan berat molekul 1202,6 Da. Ini dibentuk oleh 11 asam amino,
tujuh di antaranya adalah N-methylated, yang membuat peptida sangat tinggi
lipofilik (Survase et al., 2011). Ini memiliki kelarutan berair dari
0,008 mg / ml pada suhu kamar dan logPoctanol / air (yaitu
logaritma koefisien partisi oktanol-air) sebesar 2,92 pada
21 C (Loftsson dan Hreinsdôttir, 2006; Tayar et al., 1993).
Sebelumnya kami mendeskripsikan pengembangan 0,05% formulasi tetes mata
CYA siklodekstrin berair, dimana kami menggunakan
a-cyclodextrin alami (aCD) untuk meningkatkan kelarutan obat
0,5 mg / ml dan natural g-cyclodextrin (gCD) untuk dipromosikan
pembentukan partikel CyA / CD berukuran nano (Johannsdottir et al.,
2015). Nanopartikel dapat meningkatkan waktu kontak dengan CyA
permukaan mata dan dengan demikian meningkatkan tingkat obat terapi di
jaringan okuler.

Cyclodextrins (CD) adalah eksipien farmasi yang

digunakan untuk melarutkan obat yang sulit larut. Mereka adalah oligosakarida
siklik yang berasal dari pati yang mengandung enam (aCD), tujuh (bCD),
delapan (gCD) atau lebih (a-1,4) - unit glucopyranose (Gbr. 1). Mereka
berbentuk kerucut dengan kelompok hidroksil primer membentang dari
tepi sempit dari kerucut dan kelompok sekunder dari yang lebih luas
tepi. Dalam lingkungan berair, gugus hidroksil ini dapat terbentuk
ikatan hidrogen dengan molekul air di sekitarnya, yang memberi
molekul permukaan luar hidrofilik. Bagian dalam dari kerucut adalah
dilapisi dengan karbon skeletal dan oksigen halus, yang memberikan
Karakter hidrofobik rongga CD. Dalam larutan hidrofobik berair
obat-obatan, atau moietik hidrofobik molekul obat yang lebih besar, bisa masuk
rongga untuk membentuk kompleks inklusi yang dapat menyebabkan
peningkatan
kelarutan berair dari obat yang sulit larut (Brewster dan Loftsson,
2007; Loftsson dan Brewster, 1996).
Tidak ada ikatan kovalen yang terbentuk atau rusak pada pembentukan
kompleks inklusi, dan dalam molekul obat larutan air
terletak di dalam rongga CD berada dalam keseimbangan dinamis dengan gratis
molekul obat (Stella et al., 1999). Sama seperti CD dapat membentuk inklusi
kompleks dengan molekul lipofilik dalam larutan berair, mereka
juga mampu membentuk kompleks non-inklusi dengan CD sekitarnya
dan / atau kompleks CD / obat. Ini terjadi ketika gugus hidroksil aktif
permukaan molekul CD membentuk ikatan hidrogen dengan lainnya
Molekul CD dan / atau CD / kompleks obat. CD dan CD / obat
kompleks dapat merakit sendiri dalam larutan berair untuk terbentuk
ukuran nano agregat dan struktur mirip-seperti mik (Brewster dan
Loftsson, 2007; Loftsson dan Duchêne, 2007; Messner et al., 2010).
Ikatan yang menahan agregat ini bersama-sama lemah dan
agregat akan membongkar pada pengenceran (Messner et al., 2011).
Semua CD alami mampu membentuk ini sendiri
agregat, gCD alami memiliki kecenderungan parutan untuk melakukannya.
GCD juga memiliki kelarutan air tertinggi dari CD alami
dan profil toksikologi yang paling menguntungkan dari farmasi CD yang dapat
diterima (Saokham and Loftsson, 2017). Ini membuat gCD an
pelarutan farmasi yang menarik dalam formulasi tetes mata. Untuk
meringkas, CD mampu meningkatkan kelarutan berair dari
obat yang sulit larut melalui pembentukan kompleks inklusi. Ini
kompleks kemudian dapat membentuk sendiri untuk membentuk nanopartikel
dan kecil
mikropartikel. Dalam tetes mata tetes CD keduanya dapat meningkatkan
kelarutan obat lipofilik yang sulit larut dan meningkatkannya
waktu kontak dengan permukaan mata.
Di sini kami menjelaskan formulasi obat tetes mata yang mengandung 0,2% (w
/
v) CyA dalam campuran aCD dan gCD, dan
evaluasi toksikologi tetes mata pada kelinci.