OLEH :
Marwah Utama (152210101114)
Meranti Bekti Pertiwi (152210101117)
I Wayan Seniarta (152210101118)
Siti Nur Azizah H (152210101127)
Ganevi Resta Savitri (152210101134)
Mohammad Thahir (152210101135)
Pergiwati D Rahayuningtyas (152210101143)
Mayrani Sholihania (152210101143)
Achmad Syarifudin Noor (152210101148)
Amrina Rosyada Fajriyanti (162210101026)
Ziyan Nihlatull Millah (162210101039)
Nargiss Lukman Hakim S.B (162210101046)
Dieta Ariesta Putri P (162210101048)
Dayu Lantika ( 162210101049)
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS JEMBER
2018
BAB 1
Pendahuluan……………………………..……………………………………..1
1.1 Latar Belakang………………………………………………………1
1.2 Rumusan Masalah……………………………………………...........3
1.3 Tujuan Penelitian……………………………………………............3
1.4 Manfaat Peneltian……………………………………………...........3
1.3 Tujuan
Adapun tujuan dari penelitian ini adalah :
1. Mengetahui apakah minyak lemak dari bubur buah Caryocar coriaceum
Wittm memiliki aktivitas anti inflamasi.
2. Mengetahui efek in vivo minyak lemak dari bubur buah Caryocar
coriaceum Wittm.
3. Mengetahui efek in vitro minyak lemak dari bubur buah Caryocar
coriaceum Wittm
1.4 Manfaat
Beberapa manfaat yang dapat diperoleh dari penelitian ini antara lain :
1. Memberikan informasi bahwa minyak tetap dari daging buah biji buah
Caryocar coriaceum Wittm memiliki aktivitas anti inflamasi.
2. Memberikan informasi tentang efek in vivo minyak lemak dari bubur buah
Caryocar coriaceum Wittm.
3. Memberikan informasi tentang efek in vitro minyak lemak dari bubur buah
Caryocar coriaceum Wittm.
BAB II
METODE PENELITIAN
2.2 Obat
Obat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu obat Tiloxapol dan
Gemfibrozil yang berstandar analisis.
2.6 Evaluasi potensi penurun lipid OFCC pada tikus dengan dislipidemia
yang disebabkan oleh Triton WR-1339
Enam kelompok hewan dengan pemberian selama 15 hari dengan : saline
(1 ml/kg; p.o.), saline (1ml/kg; p.o.), Gemfibrozil (100mg/kg; p.o.), OFCC
(500mg/kg; p.o.), OFCC (1000mg/kg; p.o.) dan OFCC (2000mg/kg; p.o.).
Mengikuti metodologi yang sama seperti yang digunakan oleh Mathur, setelah 15
hari pemberian, dislipedimia diinduksi oleh Triton WR-1339 (Tyloxapol) pada
400 mg/kg ip. Pada jam ke 24 dan 48 sampel darah dikumpulkan sebanyak 2 ml. 2
ml tabung serum dengan pemisah gel dan dievaluasi untuk mengetahui parameter
biokimia : total cholesterol, HDL-C, LDL-C dan trigliserida. Penentuan masing-
masing analit dilakukan sesuai metode kolorimetrik yang dijelaskan oleh pabrikan
(Labtest). Untuk setiap hewan, aorta, jantung dan hati dengan cepat dibedah dan
tetap dalam formalin (10%). Setelah fiksasi, fragmen stent pada permukaan
dipotong dari masing-masing segmen 5 mm. Fragmen-fragmen terpilih dengan
hati-hati menarik keluar dari parafin-embedding. Jaringan dalam parafin dipotong
pada ketebalan 5 μm dan diwarnai dengan hematoxylin-eosin dan dievaluasi
dengan mikroskop.
2.7. Evaluasi efek anti-inflamasi in vivo OFCC
Berbagai kelompok hewan diobati dengan OFCC pada dosis 500, 1000,
2000 mg / kg, dan 0,9% saline (po) selama 7, 15, 30 hari serta pada akhir setiap
periode, volume awal (Vi) dari kaki belakang sebelah kanan diukur menggunakan
plethysmograph (Ugo Basiles). Setelah 1 jam, setiap hewan diinjeksi dengan
carrageenan secara intra-plantar 2% (b / v) di kaki belakang kanan (0,2 ml / paw).
Volume kaki belakang kanan setiap hewan dievaluasi lagi dengan plethysmograph
pada jam ke 1, 2, 3, dan 4 setelah diinjeksi agen phlogistic. Hasilnya dinyatakan
sebagai perbedaan antara volume akhir kaki pada setiap waktu (Vf) dan volume
awal (Vi) diwakili oleh rumus: Ve¼VfVi, di mana Ve adalah volume edema (ml).
Kemudian, satu kelompok hewan diobati dengan Indomethacin 10 mg / kg, i.p.
sebagai kontrol untuk efek anti-inflamasi.
3.1 Hasil
Dalam penelitian diperoleh rerata 4,5 g minya pulp dengan persentase
4,5%. Menggunakan analisis GC/MS dapat mengidentifikasi keberadaan senyawa
tidak jenuh (64,2%), dibandingkan senyawa dengan asam lemak jenuh (35,8%)
(Tabel 1). Selama pemerian dengan OFCC pada dosis 500 mg/kg, 1000mg/kg dan
2000 mg/kg , tidak terjadi perubahan perilaku, perubahan fisik, atau kematian
pada kelompok eksperimental. Tidak ada peningkatan berat badan yang
signifikan (Tabel 2), profil lipid pada hewan (Tabel 3) dan selama 30 hari
pengobatan, menunjukkan kadar kolesterol serum total mengalami penurunan
16% pada kelompok yang diinjeksikan OFCC 2000 mg/kg dibandingkan dengan
kontrol saline. Demikian pula, kadar trigliserida mengalami penurunan sebesar
23% pada kelompok yang diinjeksikan OFCC 2000 mg/kg dibandingkan kontrol.
Pengobatan dengan OFCC secara signifikan meningkatkan kadar HDL-C pada
hewan yang diobati selama 15 hari [500 mg/kg (35%), 1000 mg/kg (41%) dan
2000 mg/kg (39%)], dan pada 30 hari [500 mg/kg/hari (44%), 1000 mg/kg/hari
(62%), dan 2000 mg/kg/hari (71%)]. Tidak ada perubahan dalam profil lipid yang
diamati dengan pengobatan OFCC selama tujuh hari.
Hipertrigliseridemia yang diinduksi dengan Tyloxapol dikurangi oleh
OFCC pada ketiga dosis yang diuji dalam percobaan bila dibandingkan dengan
kontrol yang diterapi dengan saline (Tabel 4). OFCC menyebabkan peningkatan
serum HDL-C pada 24 jam [1000 mg/kg (26%) dan pada 48 jam [1000 mg/kg
(100%) setelah induksi dislipidemia]. Pentingnya OFCC memiliki efek yang mirip
dengan Gemfibrozil yang dengan sendirinya tidak dapat meningkatkan kadar
HDL-C plasma seperti halnya OFCC.
Pengobatan dengan OFCC selama 7 hari secara signifikan mengurangi
edema pada kaki yang diinduksi oleh karaginan (T0-T24). Indomethacin (10
mg/kg, p.o.) mengurangi jumlah edema secara signifikan dibandingkan dengan
kelompok kontrol [dalam T3 (30%)]. Pengobatan dengan OFCC selama 15 hari
secara signifikan mengurangi edema kaki yang diinduksi oleh karaginan pada
dosis 500 mg/kg dibandingkan dengan kelompok yang diobati dengan saline.
Indomethacin (10 mg/kg, po) mengurangi jumlah edema secara signifikan
dibandingkan dengan kelompok kontrol, tetapi tidak ada perbedaan dibandingkan
dengan hewan yang diberi streata. Pengobatan dengan OFCC selama 30 hari juga
secara signifikan mengurangi edema pada kaki pada dosis 500 mg/kg, 1000 mg/kg
dan 2000 mg/kg dibandingkan dengan kontrol salin. Demikian pula, indometasin
(10 mg/kg, po) secara signifikan mengurangi volume edema dibandingkan dengan
kelompok yang diobati dengan saline (Table 5), tanpa ada perbedaan dalam
kaitannya dengan kelompok hewan yang diobati dengan OFCC.
Analisis histopatologi aorta dan jantung tidak menunjukkan perubahan
pada jaringan pola struktur setelah pemberian 2000 mg/kg, 1000 mg/kg dan
500mg/kg minyak konstan (OFCC) pada tikus dalam 7, 15 dan 30 hari. Namun,
liver menunjukkan steatosis fokal hanya dalam dua kali perawatan hewan selama
30 hari dengan dosis 2000 mg/kg, kemudian OFCC menunjukkan efek biphasic
pada aktivitas myeloperoxidase. Pada konsentrasi rendah (0,05 μg/ml, 0,1 μg/ml,
dan 1 μg/ml) minyak mampu menghambat aktivitas MPO sama dengan
indometasin 37,7 μg/ml. Di sisi lain, pada konsentrasi yang lebih tinggi yaitu 10
μg/ml, 50 μg/ml, 100 μg/ml, dan 200 μg/ml, penghambatan aktivitas enzimatik
MPO menghilang.
Analisis histopatologi aorta dan jantung tidak menunjukkan perubahan
pada pola struktur jaringan setelah pemberian 2000 mg/kg, 1000 mg/kg dan 500
mg/kg minyak atsiri (OFCC) pada tikus selama 7, 15 dan 30 hari (Gambar 2, 3
dan 4). Tapi, pada hati menunjukkan steatosis fokal hanya pada dua dari sepuluh
hewan uji selama 30 hari dengan dosis 2.000 mg/ kg (Gambar 5).
OFCC menunjukkan efek biphasic pada aktivitas myeloperoxidase. Pada
konsentrasi rendah, minyak mampu menghambat aktivitas MPO sama
dibandingkan dengan indometasin. Di sisi lain, pada konsentrasi yang lebih tinggi
meyebabkan hilangnya aktivitas inhibisi enzimatik MPO 6.5 (Gambar 1).
3.2 PEMBAHASAN
Karagenan digunakan dalam model edema cakar sebagai agen untuk
menyebabkan inflamasi, meningkatkan vasodilatasi, permeabilitas darah, dan
nyeri. Satu jam setelah pemberian karagenan, terjadi pelepasan histamin, dan
serotonin, serta mediator inflamasi awal lainnya, peningkatan volume telapak
dapat diamati. Puncak pembengkakan maksimum terjadi pada jam ke 3 - 4,
bertepatan dengan peningkatan eicosanoid pro inflammatory (mediator lambat).
Pengobatan dengan OFCC selama 7, 15 dan 30 hari secara signifikan mengurangi
edema yang disebabkan oleh karagenan pada semua dosis yang diuji. Dalam
literatur, beberapa penelitian menunjukkan bahwa keberadaan asam lemak dalam
OFCC mungkin terkait dengan aktivitas antiinflamasi. Mekanisme perlindungan
asam oleat terhadap inflamasi telah dikaitkan dengan penurunan kadar asam
linoleat LDL. Asam lemak oleat dan palmitat terbukti menghambat agregasi
trombosit secara moderat seperti yang diinduksi oleh asam arakidonat, dan sedikit
menghambat pembentukan tromboksan.
Dalam penelitian Henry dkk. (2002) mengamati bahwa asam oleat
menunjukkan aktivitas penghambatan yang sedang terhadap COX-1 yaitu sebesar
25% (Henry et al., 2002). Asam oleat dan palmitat, menjadi komponen utama
OFCC, ditemukan dalam kandungan kimia dan dengan pemberian oral terbukti
dapat memberikan penurunan aktivitas inflamasi. Asam linoleat, merupakan
lemak poli tak jenuh ditemukan di OFCC, telah diidentifikasi dalam literatur
sebagai anti-inflamasi. Penelitian ini menunjukkan bahwa asam linoleat dapat
menghambat COX-1 dan COX-2 secara in vitro, dan pada sel THP-1 monositik
manusia yang diobati secara in vitro dengan LA menunjukkan penurunan yang
signifikan pada sekresi IL-6, IL-1β , TNF-α, dan faktor transkripsi NF-kB (Zhao
et al., 2005).
Myeloperoxidase (MPO) adalah protein dengan berat molekul 144 kD,
terdiri dari dua dimer, mengandung satu subunit dengan rantai ringan dan berat,
dan dengan kelompok heme yang identik secara fungsional yang digabungkaan
oleh jembatan disulfida. Enzim ini adalah konstituen utama granul azurofil dari
neutrophil yang juga ditemukan di monosit dan jaringan makrofag. Enzim ini
berasal dari leukosit dan mengkatalisis pembentukan banyak spesies oksidan
reaktif, berkontribusi terhadap respon imun bawaan tubuh, dan pada kerusakan
jaringan selama inflamasi. Dalam penelitian ini, OFCC pada konsentrasi rendah
mengurangi pelepasan MPO dari sell polimorfonuklear. Hasil ini menguatkan
efek anti-inflamasi secara in vivo pada OFCC.
3.3 Kesimpulan
Caryocar coriaceum memiliki efek anti inflamatori baik secara in vivo dan
in vitro. Penelitian ini menunjukkan bahwa asam linoleat yang terdapat dalam
Caryocar coriaceum dapat menghambat COX-1 dan COX-2 secara in vitro, dan
pada sel THP-1 monositik manusia yang diobati secara in vitro dengan LA
menunjukkan penurunan yang signifikan pada sekresi IL-6, IL-1β , TNF-α, dan
faktor transkripsi NF-kB dan OFCC pada konsentrasi rendah mengurangi
pelepasan MPO dari sell polimorfonuklear.
3.4 Saran
Dibutuhkan penelitian lebih lanjut untuk membuktikan aktifitas tumbuhan
tesebut secara klinis.