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Práctica No.7 Absorción de glucosa

Fisiología (Universidad Nacional Autónoma de México)

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Laboratorio de Fisiología.
Grupo 10/ 24 de octubre de 2014

Informe práctico 7: « ABSORCIÓN DE GLUCOSA EN EL INTESTINO DELGADO DE

RATA.»

Por: Cancino Villeda Ana Laura.___________ / De la Rosa Moreno Pedro Rene._____________

Dunzz Martínez Valeria._____________ / Hernández Benítez Luis Joshua._____________

Piña Medina Jose Carlos._____________ / Torres Santander Fernando. _____________

 Objetivos.
-Observar la variación de glucosa que presenta el intestino de la rata en su estado basal.

-Observar cómo se modifica la absorción de glucosa en ausencia de oxigeno

-Obtener el mecanismo de acción que llega a tener el intestino de la rata cuando éste se
encuentra en una solución de 2,4-dinitrofenol.

 Material y Método.

1. Experimento control
Se registró la actividad basal del intestino de la rata cuando éste se encontró con solución
salina de Tryode en el interior con una solución de Tryode-glucosa al exterior del saco. Las
mediciones de la glucosa se registraron cada 15 minutos.

2. Efecto de la ausencia de oxigeno

Teniendo las fracciones de intestino en sus respectivas cámaras se llenó cada una con variantes
dentro y fuera del intestino en el caso del efecto de la ausencia de oxígeno. La solución que estaba
fuera del intestino era Tyrode-glucosa 2% y dentro del intestino solución salina de Tyrode.

3. Efecto del 2,4-dinitrofenol

Se registro la actividad de acción que presentaba el intestino de la rata cuando este se
encontraba en una solución Tyrode-glucosa 2% y 2,4-dinitrofenol, a partir de la obtención de
la concentración de glucosa dentro y fuera del saco intestinal. Estas mediciones se hacían
cada 15 minutos.

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 Resultados.
1. Experimento control

Tabla 1. Datos obtenidos de las mediciones de concentración de glucosa.

Evento Interior del Exterior del

Intestino intestino (solución
(solución salina Tyrode-glucosa)
de Tryode)
0 negativo 17
15 5.5 -
30 17 -
45 2.5 -
60 55 55

Variación de la concentración de glucosa en el

experimento basal
60
50
Conc. de glucosa

40
30
Interior del intestino
20
Exterior del intestino
10
0
0 15 30 45 60
Tiempo

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 Efecto de la ausencia de oxigeno

Tabla 2. Efecto de la falta de oxígeno.

Tiempo Concentración de glucosa dentro Concentración de glucosa fuera

(min) (mmol/L) (mmol/L)
0 Negativo 17
15 2.8 -
30 5.5 -
45 17 -
60 17 5.5

Gráfica de datos experimento B.

Concentracion de Glucosa en ausencia de oxígeno

20
18
16
Concentracion (mmol/L)

14
12 concentracion de glucosa dentro
10
concentracion de glucosa fuera
8
6 Lineal (concentracion de glucosa
4 fuera)

2
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Tiempo (min)

 Efecto del 2,4-dinitrofenol en la absorción intestinal de glucosa

Tabla 3. Datos obtenidos de las mediciones de concentración de glucosa.

Evento Intestino (Int.) Sol. 2,4-dinitrofenol

(Ext.)
0 - 17
15 2.8 -

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30 5.5 -
45 5.5 -
60 5.5 17

20 Efecto del 2,4-dinitrofenol en la absorción intestinal de

glucosa
15
Conc. de glucosa

Intestino (Int.)
10
2,4-dinitrofenol (Ext.)

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Tiempo

 Análisis de resultados.
1. Experimento control
Como se observa en la gráfica, el saco intestinal de la rata contenido con una solución salina
de Tryode sumergido en una solución de Tryode-glucosa produjo con el paso del tiempo un
aumento en la concentración de glucosa dentro del saco intestinal. Cabe destacar que se
obtuvo un pequeño error después de 45 minutos de la medición del tiempo, donde la
concentración de glucosa dentro del intestino disminuyó en vez de haber aumentado como se
tenía esperado. Por parte del exterior del intestino con la solución Tryode-glucosa los valores
de la concentración fueron aumentando conforme el tiempo fue pasando.

2. Efecto de la ausencia de oxigeno

En el experimento donde se privó de oxígeno al intestino, se notó una disminución en los
niveles de glucosa con respecto a la absorción de glucosa normal.

3. Efecto del 2,4-dinitrofenol en la absorción intestinal de glucosa

Como podemos observar, con los datos obtenidos en la práctica, en este caso cuando el saco
intestinal se encuentra en presencia del 2,4-dinitrofenol, un veneno metabólico, se lleva a
cabo una pequeña absorción de glucosa, pero después de un tiempo ésta se vuelve constante
a una concentración baja, a comparación del experimento control (núm 1.), donde la
concentración de glucosa iba aumentando conforme el tiempo.

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 Discusión de resultados.

Los resultados del experimento control coinciden con los reportado por Guyton (2011). La
glucosa se transporta por un mecanismo de cotransporte con el sodio. Si no hay transporte de sodio
en la membrana intestinal, apenas se absorberá glucosa. La razón es que la absorción de glucosa se
produce mediante un mecanismo de cotransporte con el transporte activo de sodio. Carbó et al (2007)
indican que la glucosa y la galactosa entran en las células epiteliales intestinales en contra de sus
gradientes de concentración por un mecanismo de cotransporte dependiente de sodio (Na +). El ion
Na+ proporciona la fuerza motriz para el movimiento de la glucosa al interior celular. El gradiente
químico de Na+ que impulsa el transporte de la glucosa se mantiene por acción de la bomba de Na+ y
potasio (K+), llamada también ATPasa de Na+/K+ por utilizar trifosfato de adenosina (ATP) como
fuente de energía.

El transporte de sodio a través de la membrana intestinal se divide en dos etapas. En primer

lugar, el transporte activo de los iones sodio, que cruza las membranas basolaterales de las células del
epitelio intestinal hacia la sangre, provoca el descenso de la concentración intracelular del ion. En
segundo lugar, esta reducción del sodio intracelular induce el paso de sodio desde la luz intestinal al
interior de la célula epitelial a través del borde en cepillo, gracias a un transporte activo secundario.
El sodio se combina primero con una proteína de transporte, pero esta no podrá llevar a cabo su
función si no se combina con alguna otra sustancia adecuada, como la glucosa. La glucosa intestinal
se combina también con la misma proteína de transporte, de modo que tanto el sodio como la glucosa
se transportan juntos hasta el interior de la célula. La menor concentración de sodio dentro de la célula
«empuja» literalmente al ion y a la glucosa que lo acompaña hacia el interior del enterocito. Una vez
allí, otras proteínas de transporte y enzimas facilitan la difusión de la glucosa hacia el espacio
paracelular a través de la membrana basolateral, y de allí a la sangre. (Guyton, 2011). El Na + que
ingresó al interior celular junto con la glucosa o la galactosa es bombeado hacia fuera nuevamente,
manteniéndose el gradiente a favor de la entrada de este ión. (Carbó et al. 2007)

El motor central de la absorción de sodio es el transporte activo del ion desde el interior de
las células epiteliales, a través de sus paredes basal y laterales, hasta los espacios paracelulares. Este
transporte activo obedece a las leyes habituales de dicho proceso: necesita energía y el proceso
energético está catalizado por las enzimas trifosfatasas de adenosina (ATP) correspondientes de la
membrana celular (Guyton, 2011)

En el dispositivo dos, no teníamos la presencia de un suministro de oxígeno, lo cual provocó

como lo podemos ver en la tabla dos y en la gráfica dos que la absorción de glucosa se llevara a cabo
de una manera más lenta que en el dispositivo uno que si tenía suministro de oxígeno. Esta
disminución de la absorción de glucosa en el intestino delgado de la rata se debe a que como no hay
oxígeno, no hay producción quimiosmótica de ATP. Sin oxígeno para “empujar” los electrones cuesta

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abajo por la cadena transportadora, la energía almacenada en el NADH no podría ser extraída y
utilizada para sintetizar ATP. Al no haber ATP disponible para hidrolizar, no funciona la bomba de
Na+/K+, y por lo tanto no se mantienen las bajas concentraciones de Na+ en el interior de la célula lo
cual evita que el Na+ del exterior de la célula entre a la célula por gradiente de concentración y
“arrastre” consigo a la glucosa. De esta manera la glucosa no puede atravesar la membrana de las
células epiteliales del intestino delgado de la rata.

El ion Na+ proporciona la fuerza motriz para el movimiento de la glucosa al interior celular. El
gradiente químico de Na+ que impulsa el transporte de la glucosa se mantiene por acción de la bomba
Na+ y K+ (Sodio-Potasio) llamada también ATPasa de NA+/K+ por utilizar trifosfato de adenosina
(ATP) como fuente de energía.

El dinitrofenol (DNP) es un agente desacoplante, porque tiene la capacidad de aislar el flujo de los
electrones y el bombeo de H+ de la síntesis de ATP. Esto significa que la energía de la transferencia
de electrones no se puede usar para la síntesis de ATP en la fosforilación oxidativa.

Los agentes desacoplantes actúan como ácidos lipofílicos débiles, que se asocian con protones en el
exterior de la mitocondria, que pasan a través de la membrana unidos a un protón, y que se disocian
del protón en el interior de la mitocondria. Estos agentes causan tasas de respiración máxima pero el
transporte de electrones no genera ATP, debido a que los protones translocados no regresan a la matriz
mitocondrial a través de la ATP sintetasa.

Por consecuencia la absorción de la glucosa se ve inhibida por la presencia de DNP aunque existe la
presencia de SGLT y GLUT estos se ven disminuidos en funciones por la carencia neta de ATP como
fuente de energía. (Fundamentos de bioquimica, 2007)

Nuestros resultados son coherentes con la teoría pues se mantiene constante el valor de la glucosa.

 Conclusiones.

 La ausencia de oxígeno inhibe la absorción de glucosa por el intestino de la rata, esto debido
a que el oxígeno participa activamente en la producción de ATP.
 La adición de 2-4 dinitrofenol provoca una inhibición en la absorción de glucosa por el
intestino de la rata, esto debido a que detiene el flujo de protones y electrones de la cadena
respiratoria.
 Es muy importante mantener las condiciones óptimas para que el intestino lleve sus procesos
fisiológicos de manera normal y se pueda apreciar la absorción de glucosa.
 El transporte de glucosa al interior del intestino es por medio de un cotransportador (SGLT).
Se dice que es un transporte activo secundario ya que el sodio al salir necesita energía en
forma de ATP. Ya en el interior del enterocito el transporte es facilitado por medio del canal
GLUT

 Bibliografía.

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 Fox Stuart. 2011. “Fisiología humana”. 12° edición. McGraw Hill. pp 182-183, 650.
 Juli Peretó. 2007. Fundamentos de bioquímica. Universitat de Valencia. pp 218-220.
 Guyton, A. y Hall, J. 2001. Tratado de Fisiología Médica. 11º edición. Mc Graw Hill
796. pp 79.

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