UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

USO DE MICROSCOPIO

LABORATORIO N°2 DEL CURSO MICROBIOLOGÍA – SA323K

GUILLEN MANCHA, WILLIAM

DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS

Lima – Perú

2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RIA
Facultad de Ingeniería Ambiental

INDICE
RESUMEN................................................................................................................ 4
SUMARY .................................................................................................................. 4
I. INTRODUCCIÓN ............................................................................................... 5
II. OBJETIVO ......................................................................................................... 5
III. MARCO TEÓRICO ........................................................................................ 5
IV. RESULTADOS ............................................................................................... 7
V. CONCLUSIONES: ............................................................................................. 8
VI. RECOMENDACIONES: ................................................................................. 8
VII. CUESTIONARIO ............................................................................................ 9
VIII. FUENTES DE INFORMACIÓN: ................................................................... 10
IX. ANEXOS: ..................................................................................................... 11
X. APENDICE ...................................................................................................... 12
1. DIAGRAMA DE FLUJO ................................................................................ 12
2. PROCEDIMIENTO ....................................................................................... 13

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INDICE DE ILUSTRACIONES
Ilustración 1.Fotografía de la (Pulex irritans) con el objetivo 10X.. ......................... 11
Ilustración 2.Fotografia microscopio....................................................................... 12

INDICE DE FIGURAS

Figura 1. Principales componentes del microscopio. ................................................ 6

Figura 2. El poder de resolución de los instrumentos nos permite detectar objetos
cada vez más pequeños ......................................................................................... 11
Figura 3. Principales pasos en la obtención de datos utilizando el microscopio.. .... 12

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RESUMEN
El microscopio se compone del sistema mecánico, óptico y el sistema de iluminación
por lo que es importante conocerlos para poder usarlos y examinar muestras no
visibles a la vista.El uso del microscopio nos permite observar más detalle
características morfológicas que no se puedan ver a simple , en la muestra (Pulex
irritans) se pudo observar con el objetivo 10X y conocer algunas características de
forma,color,tamaño entre otros.

SUMARY
The microscope consists of the mechanical, optical and lighting system so it is
important to know them in order to use them and examine samples not visible to the
eye. The use of the microscope allows us to observe more detail morphological
characteristics that can not be seen in simple , in the sample (Pulex irritans) could be
observed with the objective 10X and know some characteristics of shape, color, size
among others

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I. INTRODUCCIÓN
El microscopio es un instrumento de laboratorio que es útil para observar
microorganismos que no pueden ser observados a simple vista así como son la
bacterias, protozoarios hongos, levaduras y virus; aunque estos últimos requieren
microscopios más potentes como el electrónico para ser observados. Aparato óptico
formado por un juego de lentes que permiten la observación de la imagen de un objeto
amplificado. Existen varios tipos, siendo los más usados el óptico de campo claro
(hasta 2000x) y el electrónico (hasta 100000x), además existen otros con fines
específicos como los microscopios ópticos de inmunofluorescencia, el de campo
oscuro y el de contraste de fases. Es usado para reconocer características
morfológicas, tintoriales y detectar las diferentes estructuras que poseen los
microrganismos.

II. OBJETIVO
- Identificar y reconocer las partes del microscopio, así como hacer su uso para
observar las muestras con el objetivo 10X.

III. MARCO TEÓRICO

MICROSCOPIO
Aparato óptico formado por un juego de lentes que permiten la observación de la
imagen de un objeto amplificado. Existen varios tipos, siendo los más usados el óptico
de campo claro (hasta 2000x) y el electrónico (hasta 100000x), además existen otros
con fines específicos como los microscopios ópticos de inmunofluorescencia, el de
campo oscuro y el de contraste de fases. Es usado para reconocer características
morfológicas, tintoriales y detectar las diferentes estructuras que poseen los
microrganismos.
Partes.
 Mecánica.
 Óptica.
 Sistema de Iluminación.

A. Mecánica:
a) Pie.
b) Platina (Circular o rectangular fija o móvil, el vernier y el sistema de
movimiento o tren)
c) Tubo óptico, Revólver.
d) Sistema de Enfoque: Tornillos Micrométricos y Macrométricos (Cremallera)

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B. Sistema Óptico:
a) Oculares: 05 – 10 – 20x
b) Objetivos: 05 – 10 – 40 – 100x

Figura 1. Principales componentes del microscopio.

Fuente: Joaquín De Juan Herrero. FUNDAMENTOS Y MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
COMPUESTO COMÚN. COMPONENTES DEL MICROSCOPIO OPTICO.Recuperado de:
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/13097/1/Microscopio.pdf (Extraído 10-04-2018)

Microscopio óptico compuesto en el que se indican, mediante números,sus

principales componentes. (1) Ocular; (2) Tubo; (3) Cabezal; (4) Revolver; (5)Objetivo;
(6) Platina; (7) Pinzas para sujetar el portaobjetos; (8) Condensador; (9)Fuente
luminosa con diafragma; (10) Base o pie; (11) Interruptor; (12) Brazo;
(13)Macrométrico; (14) Micrométrico); (15 y 16) Mandos para de desplazamiento de
la platina; (17) Botón regulador de intensidad.

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IV. RESULTADOS
Tabla 1. Características de muestra utilizada grupo 04
GRUPO MUESTRA OCULAR OBJETIVO AUMENTO DESCRIPCION
UTILIZADA
Pulex irrtans 10X 10,40X,43X 100X,400X,430X Con el objetivo 10X se observó parte
del cuerpo de la especie (cabeza
N° 4 abdomen y patas) de color pardo
rojizo. aproximadamente de 3mm
de tamaño.La cabeza es
trapezoidal y con el vértice frontal
romo, posee dos ojos simples,
intensamente pigmentados y
situados en zonas medias
laterales, que faltan en algunas
especies. Por detrás de los ojos y
alojadas en un surco o pliegue
cuticular están las antenas

Nota. Fuente: Grupo 04.

Tabla 2. Características de muestra utilizada grupo 04

GRUPO MUESTRA OCULAR OBJETIVO AUMENTO DESCRIPCION
UTILIZADA

Trichoderma sp 10X 10X 100X Se observó filamentos con forma

irregular delgados que salen de otro
más grueso de color verde oscuro.
N° 5
.
Ulex irritans 10X 10,40X,43X 100X,40X,43X Con el objetivo 10X se observó el
escamoso cuerpo entero del artrópodo
(cabeza abdomen y 6 patas) de color
rojizo.

Con el objetivo 40X 43X se logró

observar los pelos de las patas.

Nota. Fuente: Grupo 05.

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V. CONCLUSIONES:
GRUPO 04:

 En el microscopio de ocular 10X,objetivo 10X,se observó las características

morfológicas de la pulga(Pulex irritans) de manera clara.
 La dimensión que se observó de la especie Pulex irritans fue
aproximadamente de 3mm, su coloración es pardo-rojiza, más o menos
oscura, cabeza trapezoidal,ojos simples de intensa pigmentación,con antenas
en la parte posterior del abdomen.
GRUPO 05:

 En la Trichoderma sp se observó con el ocular 10X (objetivo 10X),filamentos de forma

irregular con color verde oscuro.

La ubicación de la luz en la parte inferior del microscopio ayuda a la resolución del

mismo, como la abertura. Gracias a estos se pudieron observar las muestras con gran
nitidez.
Se reconoció adecuadamente las partes del microscopio y pudo utilizarse para la
observación y reconocimiento de las bacterias en cada muestra analizada.

VI. RECOMENDACIONES:
PARA CUIDADOS DEL USO DEL MICROSCOPIO
a) El microscopio debe llevarse siempre agarrándolo con las dos manos, una de ellas
en el brazo y la otra con la palma hacia arriba sosteniendo la base o pie.
b) Los tornillos (macrométrico y micrométrico) y el revolver deben moverse siempre
con cuidado y sin apresuramiento para evitar que los lentes se rompan o se rayen.
c) No se debe usar la luz solar como fuente de iluminación.
d) Nunca debe bajar el tubo portalentes mientras se observa por él.
e) Para limpiar los lentes deberá usarse solo papel lente, puesto que otro material
puede rayarlos.
f) Ningún líquido debe mojar pieza alguna del microscopio. Las láminas que se
colocan en las platina deberán estar siempre secas.
g) Después de usar el objetivo de inmersión limpiarlo con el papel lente humedecido
con alcohol isopropílico.

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VII. CUESTIONARIO
Uso de Microscopio
1. Establecer la diferencia entre el poder resolución y la apertura numérica.

PODER DE RESOLUCION APERTURA NUMERICA

Es la capacidad de medir o distinguir dos puntos Es una medida de la apertura del
adyacentes como distintos y separados. objetivo. Utiliza el ángulo que está
determinado por el eje óptico y los rayos
más externos que aun capta el objetivo
Está restringida por la apertura numérica y la longitud Está restringida por el índice de
de onda de la luz visible. refracción(medio donde se encuentra).
Su fórmula es: Su fórmula es:
𝐿𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑑𝑒 𝑜𝑛𝑑𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑙𝑢𝑧(𝜆) 𝐴𝑁 = 𝑛𝑠𝑒𝑛𝜃
𝑃𝑜𝑑𝑒𝑟 𝑑𝑒 𝑟𝑒𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 =
𝐴𝑁𝑜𝑏𝑗𝑒𝑡𝑖𝑣𝑜 + 𝐴𝑁𝑐𝑜𝑛𝑑𝑒𝑛𝑠𝑎𝑑𝑜𝑟 Θ:ángulo de desviación
n:índice de refracción del medio por el
que pasa la luz
El límite de resolución se consigue con la longitud de Es Limitado la máxima apertura
onda más corta de luz visible y un objetivo que tenga numérica para un objetivo seco es
el máximo AN. menos de 1 y en los objetivos de
inmersión es algo más de 1(1.2
a1.4)(PELCZAR 1982)

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2. Completar la siguiente tabla

Tenemos los siguientes:
Partes del Microscopio. Función
Ocular Ampliar la imagen del objetivo
Objetivo Amplía la imagen, es un elemento vital que
permite ver a través de los oculares.
Condensador Lente que sirve para concentrar los rayos
luminosos que inciden sobre la
preparación. El condensador de la parte
de abajo también se llama FOCO y es el
que dirige los rayos luminosos hacia el
condensador.
Diafragma metris se encuentra sobre el reflector de la luz. A
través de este se puede regular la
intensidad de la luz abriéndolo o
cerrándolo.
Tornillo de ajuste fino Ayuda a enfocar la muestra con un
enfoque exacto y nítido a través del
movimiento casi imperceptible de la
platina. Los movimientos son a través de
un tambor que tiene divisiones de 0,001
mm. Y que también sirve para medir el
grosor de los objetos acoplados.
Tornillo de ajuste grueso Hace que el tubo del microscopio se
deslice verticalmente gracias a un sistema
de cremallera. Estos movimientos
permiten que se enfoque rápidamente la
preparación.

VIII. FUENTES DE INFORMACIÓN:

M.J.PELCZAR Jr. Y R.D.REID.MICROBIOLOGíA Editorial Mc.Graw-Hill Book
Co.Inc.New York 2da.Edic.1982. (pág. 45-57).

Ibáñez Ártica Miguel (2015).Biodiversidad del Reino Monera. Formas de bacterias.

Recuperado de: http://naturarchives.blogspot.pe/2015/08/biodiversidad-el-reino-
monera.html(extraido 11-04-2018).

Joaquín De Juan Herrero. Fundamentos y manejo del microscopio Óptico compuesto

común. COMPONENTES DEL MICROSCOPIO OPTICO.Recuperado
de:https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/13097/1/Microscopio.pdf (Extraído 11-
04-2018)

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IX. ANEXOS:

Figura 2. El poder de resolución de los instrumentos nos permite detectar objetos cada vez más pequeños
Fuente: Joaquín De Juan Herrero. FUNDAMENTOS Y MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
COMPUESTO COMÚN. COMPONENTES DEL MICROSCOPIO OPTICO.Recuperado de:
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/13097/1/Microscopio.pdf (Extraído 07-04-2018)

Ilustración 1.Fotografía de la (Pulex irritans) con el objetivo 10X..

Fuente: Grupo 4.

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Ilustración 2.Fotografia microscopio.

Fuente: Grupo 4

X. APENDICE
1. DIAGRAMA DE FLUJO

USO DE MICROSCOPIO

OBJETO IMAGEN
MICROSCOPICO MICROSCOPICA

MODELO
OBSERVADOR
MICROSCOPICO

Figura 3. Principales pasos en la obtención de datos utilizando el microscopio..

Fuente: Elaboración propia.

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2. PROCEDIMIENTO
Reconocimiento previo:
a) En el microscopio que tiene delante reconozca todas las partes de importancia:
PARTE MECANICA
- Brazo y pie
- Tubo portalente y cremallera
- Tornillo macrométrico
- Tornillo micrométrico
- Platinas y pinzas
- Tornillo condensador
- Soporte del espejo

PARTE OPTICA
- Ocular
- Objetivos 10X,43X,97X
- Espejo con dos caras
- Condensador con diafragma
b) Cerciórese del número de aumentos marcado en el ocular. Compare con otros
oculares de diferentes aumentos.
c) Observe los objetivos de su microscopio y los aumentos de cada uno de ellos.
d) Calcule con las diferentes combinaciones de lentes los aumentos que puede tener
en su microscopio.
ENFOQUE

a) Primero buscar el objetivo de menor aumento 10X y colocarlo en el tubo del

revólver, el objetivo hará su ruido característico al estar en posición correcta.
b) Acomode la cara del espejo (plana para la luz natural y cóncava para la luz
artificial) a fin de iluminar todo el campo que se observa por el ocular.
c) Prepare el objetivo que va a observar, en nuestro caso es el portaobjetos con
muestra de bacterias.
d) Poner el portaobjetos en la abertura de la platina y centrar el objeto a observar.
e) Mirando por el costado bajar el objetivo utilizando el tornillo micrométrico hasta
que esté muy cerca de la lámina.
f) Observar por el ocular del microscopio y levantar el objetivo utilizando el tornillo
macro métrico hasta ver la imagen.
g) Usar el tornillo micrométrico para enfocar con mayor nitidez.

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h) Abrir o cerrar el diafragma para mejorar la calidad de imagen.

Para cambiar de aumento:
i) Centree cuidadosamente la parte que va ser examinada.
j) Levante el tubo portalentes por medio del macrométrico cambie el objetivo siga
con el el ítem “e”.
Para observar con el objetivo de inmersión:
k) Centre la preparación y levante el tubo portalente por medio del tornillo
macrométrico giré el revolver para colocar el objetivo de inmersión (97X).
l) Coloque una gota de aceite de cedro sobre la preparación.
m) Mirando por el costado haga descender el objetivo con el tornillo macrométrico
hasta que toque la gota de aceite.
n) Mirando por el ocular enfoque cuidadosamente utilizando el tornillo
macrométrico,afinando con el micrométrico.
o) Recuerde que mirar a través del microscopio requiere no solamenete el uso de
los ojos,sino también el uso de las manos una en el tornillo macrométrico y la otra
en la platina para mover la preparación.

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