Artikel

Dalam antioksidan dan radikal-pemulungan kapasitas vitro dari colocynthes

Citrullus ( L) dan Artemisia absinthium
ekstrak menggunakan prometazin hidroklorida kation radikal dan tes
kontemporer

M. Nadeem Asghar, I. Ullah Khan dan N. Bano

Abstrak
Sebuah uji dekolorisasi baru, cepat dan ekonomis berdasarkan generasi kation radikal terbuat dari promethazine hydrochloride (PMZH) dijelaskan untuk
penyaringan aktivitas antioksidan tanaman / ekstrak herbal. kation radikal PMZH, diproduksi melalui reaksi antara PMZH dan kalium persulfat (K 2 S 2 HAI 8)
dalam medium asam fosfat, memiliki serapan maksimum pada 515nm di urutan pertama spektrum derivatif mereka. Konsentrasi chromagen dan K 2 S 2 HAI
8 dioptimalkan (konsentrasi akhir PMZH dan K 2 S 2 HAI 8

adalah 0.166mM dan 0.11mM, masing-masing) untuk stabilitas yang lebih baik dan kepekaan dari kation radikal yang dihasilkan. Sebuah korelasi linear
yang baik yang ditemukan antara persentase penghambatan dan meningkatnya jumlah antioksidan standar, dengan koefisien korelasi berkisar
0,989-0,999. assay baru dikembangkan dipekerjakan untuk mengevaluasi kapasitas antioksidan colocynthes Citrullus L. dan Artemisia absinthium ekstrak.
assay yang diusulkan melibatkan kation radikal lebih stabil dan hanya diperlukan 1 jam untuk persiapan solusi kerja dibandingkan dengan 2,2 0- azinobis
(asam 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonat) (ABTS) assay radikal kation decolorizaion, yang dilaporkan menjadi kurang sensitif pada pH rendah dan
hampir 12-16 h diminta untuk persiapan solusi ABTS bekerja. tes lain yang digunakan untuk mengevaluasi antioksidan kapasitas potensial dan
radikal-pemulungan dari ekstrak adalah besi-mengurangi kekuatan antioksidan, 2,2 0- diphenyl-1picrylhydrazyl radikal, jumlah assay isi fenolik, isi total
flavonoid dan aktivitas logam-kelat tes, dan nilai peroksidasi lipid dalam sistem asam linoleat emulsi. Hasil menunjukkan bahwa kedua tanaman memiliki
aktivitas radikal-pembilasan bebas ampuh dan kemampuan untuk mencegah peroksidasi lipid dan reaksi berantai radikal.

Kata kunci
Prometazin hidroklorida, ABTS radial kation, Citrullus colocynthes L, Artemisia absinthium, aktivitas antioksidan

Tanggal diterima: 13 April 2009; direvisi: 30 Nov 2010

PENGANTAR
spesies tidak hanya terlibat dalam lipid merusak, karbohidrat, protein dan
stres oksidatif, yang dikembangkan sebagai hasil dari kelebihan produksi asam nukleat, tetapi juga menyebabkan kerusakan makanan (Aruoma,
oksigen dan nitrogen spesies reaktif (ROS / RNS), menyebabkan 1994; Kehrer, 1993; Miller et al, 1995;. Sasaki et al, 1996;. Spiteller, 2001;
sejumlah komplikasi patologis seperti trombosis koroner, gangguan saraf,
diabetes mellitus, arthritis dan sebagainya. ROS / RNS
Departemen Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, GC University, Lahore-54000, Pakistan.

Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5) 481-494 Penulis yang sesuai:
! Penulis (s) 2011 Cetak ulang dan perizinan: M. Nadeem Asghar, Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, GC University,
sagepub.co.uk/journalsPermissions.nav DOI: 10,1177 / Lahore-54000, Pakistan dan Departemen Kimia, FC College (A University Chartered),
1082013211399495 fst.sagepub.com Lahore-54600, Pakistan Email: mnasghar2003@yahoo.com

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015


Valdez dkk., 2000; Yoshikawa et al., 2000). sistem pertahanan
antioksidan terhadap ROS / RNS termasuk enzim endogen diproduksi
seperti glutathione reduktase, katalase, dan molekul kecil hadir dalam
tubuh seperti asam urat, glutathione berkurang, asam askorbat dan
seterusnya, dan polifenol makanan kaya termasuk buah-buahan, sayuran
dan ekstrak herbal .
Kecenderungan meningkatnya orang untuk menggunakan tanaman
asli / ekstrak herbal terhadap penyakit degeneratif telah membujuk para
ilmuwan makanan untuk mengembangkan tes baru untuk penentuan total
aktivitas antioksidan tanaman / ekstrak herbal ini. Sebagian besar tes,
yang saat ini dalam mode, menentukan konsentrasi spesifik antioksidan
biomarker, hadir dalam fluida fisiologis atau tanaman / ekstrak herbal.
Pendekatan alternatif mengevaluasi parameter yang mampu
menunjukkan jumlah atau kumulatif fluks komponen antioksidan hadir
dalam cairan fisiologis atau ekstrak diselidiki (Ghiselli et al., 2000). tes
dekolorisasi yang didasarkan pada generasi in vitro dari spesies berwarna
dan dekolorisasi selanjutnya pada reaksi dengan sampel antioksidan yang
sering digunakan untuk evaluasi total aktivitas antioksidan karena
kesederhanaan mereka, kemudahan operasional dan aspek ekonomi
(Cao et al., 1995; Ghiselli et al, 1995;. Lonnrot et al, 1996;. Miller et al,.
1993, 1996; Rice-Evans dan Miller, 1985, 1994, 1996; Rice-Evans et al.,
1996; Salah dkk., 1995; Wang et al., 1996; Wayner et al., 1985;
Whitehead et al., 1995). Dalam kelanjutan dari studi sistematis untuk
pengembangan tes dekolorisasi Novel berdasarkan kation radikal
fenotiazin dan para- amina diganti aromatik, (Asghar dan Khan, 2008;
Asghar et al, 2007;. Asghar et al, 2008;.. Khan et al, 2008), kami telah
mengembangkan tes antioksidan baru menggunakan kation radikal
promethazine hydrochloride (PMZH). PMZH telah digunakan sebagai obat
antipsikotik, namun aplikasinya untuk pengukuran aktivitas antioksidan
dari ekstrak herbal dan antioksidan murni tidak pernah dimanfaatkan.
Dalam sistem obat tradisional benua India, sebagian besar orang
menggunakan tanaman / ekstrak herbal untuk pengobatan di ff erent
¿Aliments? Beberapa herbal yang diklaim memiliki aktivitas antioksidan
juga (Kim et al, 1994;. Su, 1992). Jadi mungkin ada beberapa hubungan
bahan tanaman dan ekstraksi
antara aktivitas antioksidan dan antidisease dari produk-produk herbal. colocynthis
Citrullus
(L.) (Cucurbitaceae) dan Artemisia absinthium adalah tanaman obat asli
dari benua India. C. colocynthis ( L.) secara tradisional digunakan sebagai
aborsi dan untuk mengobati sembelit, edema, infeksi bakteri, kanker dan
diabetes (Al-Ghaithi et al, 2004;. Kumar et al, 2008).. Minyak esensial dari
berbagai spesies
Artemisia telah ditandai dengan jumlah tinggi myrcene, trans-thujone,
trans-sabinyl asetat, (Z) -anethole, (Z) -beta-ocimene, (E) -beta-ocimene,
limonene, methyleugenol, kamper, 1,8- cineole, chemezulene,
download dari fst.sagepub.com
Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)
muciferol propionat, muciferol butanoate, alpha terppineol, spathulenol,
cubenol, beta-eudesmol, terpinen-4-ol dan 5,6,3 0, 5 0- tetramethoxy hidroksi
fl avone (P7F; Kordali et al, 2005a, 2005b;.. Lee et al, 2004;. Lopes-Lutz
et al, 2008). tes antimikroba telah menunjukkan penghambatan e ff ects
minyak ini terhadap pertumbuhan bakteri dan jamur (Blagojevic et al,
2006;. Caner et al, 2008.). Dalam penelitian ini, selain alat tes baru
dikembangkan, kami juga dipekerjakan lainnya antioksidan kontemporer
dan radikal-pemulungan tes untuk mengevaluasi in vitro aktivitas
antioksidan total tanaman ini.
MATERIAL DAN METODE
Semua bahan kimia yang digunakan adalah dari analisis reagen grade
dari perusahaan ternama. Trolox (6-hidroksi
2,5,7,8-tetramethylchroman-2-karboksilat asam), butylated hidroksi anisol
(BHA), butylated hidroksi toluena (BHT), asam galat, Besi (II) sulfat,
2,4,6-tri (2-piridil ) -
s- triazina (TPTZ), 2,2 0- azinobis (asam 3-ethylbenzothiazoline6-sulfonat)
(ABTS), 2,2 0- diphenyl-1-pikrilhidrazil (DPPH),
asam trikloroasetat, Follin-Ciocalteau ini
reagen, Ferrozine (3- (2-pyridyl) -5,6-difenil-1,2,4triazine-4 0, 4 00- Asam
disulfonic monosodium garam), kalium persulfat (K 2 S 2 HAI 8; di-kalium
peroxdisulfate), asam askorbat, quercetin, Sebuah- tokoferol, catechin
hidrat, glutation tereduksi, asam urat dan kaempferol diperoleh dari Fluka
(United Kingdom) dan kinerja tinggi kromatografi cair-grade etanol dari
Rathburn Chemicals Ltd (Walkerburn, Peebleshire, Skotlandia). PMZH
adalah ramah disumbangkan oleh JAVA Farmasi, Lahore, Pakistan.
Semua pengukuran spektrofotometri dilakukan pada UV-1700
PharmaSpec UV-Visible Spectrophotometer, Shimadzu, Jepang,
dilengkapi dengan perangkat kontrol suhu. Semua solusi dibuat dalam
rangkap tiga dan percobaan dilakukan tiga kali. Hasilnya rata-rata dan
analisis garis regresi dilakukan dengan menggunakan program MS Word
of Microsoft O FFI ce 2003.
sampel tanaman kering C. colocynthis dan A. absinthium
yang dibeli dari pasar lokal (Lahore, Pakistan). Sebuah jumlah tanah nely
fi sama dengan 200 g masing-masing C. colocynthis kupas (CP), C.
colocynthis bubur (CPP), C. colocynthis tunas (CS), A. absinthium tunas
(AS) dan A. absinthium daun (AL) direndam dalam metanol di 1:20
berat-by-volume (w / v) di cork- fi tted fl meminta secara terpisah selama
24 jam pada 30 C dan 180 rpm. Ekstrak yang diperoleh hari berikutnya
yang disaring dan disimpan pada 4 C, sedangkan residu reextracted
dalam metanol di bawah kondisi yang sama. Kedua ltrates fi diperoleh
dicampur dan terkonsentrasi di 30 C di bawah tekanan berkurang.
482
oleh tamu di 19 Januari 2015
Asghar et al.
Residu metanol yang reextracted di n heksana dan etil asetat. The
konsentrat (metanol,
n heksana dan etil asetat) menjadi sasaran tes antioksidan.
metode
Assay protokol: yang prometazin hidroklorida
radikal kation dekolorisasi assay. Salah satu mL dari larutan stok PMZH
(0.75mm) itu benar-benar mixedwith 0.5ml (1mM) K 2 S 2 HAI 8 dan asam
3mLphosphoric (H 3 PO 4). Setelah 1 jam inkubasi pada 25 C, pembacaan
absorbansi larutan disesuaikan menjadi 0,7 0,02 di 515 nm dengan
bantuan asam ortofosfat. Tidak ada perubahan berarti dalam absorbansi
larutan ini tercatat untuk jangka waktu 2 bulan pada 4 C dan dapat
digunakan untuk penentuan aktivitas antioksidan total. Untuk aktivitas
antioksidan dari ekstrak tumbuhan dan antioksidan standar, sampel
diencerkan dalam pelarut yang sesuai sedemikian rupa bahwa setelah
penambahan 10 m L sampel untuk 2.99mL dari PMZH solusi kation radikal,
20-60% penghambatan (% saya di 515 nm) kosong itu diproduksi. Persentase
penghambatan ditentukan sebagai% saya di 515 nm ¼ ( 1 - A f / SEBUAH Hai) 100,melarutkan 200 g anhidrat natrium karbonat dalam 800ml air suling
di mana A Hai adalah absorbansi pada 515 nm dari solusi kation radikal
unscavenged, sementara A f adalah absorbansi setelah penambahan
sampel antioksidan. Absorbansi dipantau untuk 8 menit setelah
penambahan larutan antioksidan. Semua pengukuran dilakukan dalam
rangkap tiga pada setiap konsentrasi dari sampel standar dan pelarut,
dengan makhluk kosong pelarut yang tepat digunakan untuk setiap assay.
The Trolox setara kapasitas antioksidan (TEAC) dari sampel ditentukan
oleh perbandingan dengan kurva standar trolox.
3.16mL air suling ganda ditambahkan. reagen Folin- Ciocalteu ini (200 m L)
ABTS þ radikal kation dekolorisasi assay. The ABTS kation radikal (ABTS þ) assay
protokol, seperti yang dikembangkan oleh Re et al. (1999), dengan
perubahan kecil diikuti untuk penentuan TEAC sampel. Secara singkat,
diizinkan untuk berdiri pada 40 C selama 30 menit dan absorbansi
ABTS dilarutkan dalam air suling ganda untuk konsentrasi 7-mM. ABTS þ diproduksi
dengan mereaksikan ABTS larutan stok dengan 2.45mM K 2 S 2 HAI 8
(Konsentrasi nal fi) dan memungkinkan campuran untuk berdiri dalam
gelap pada suhu kamar selama 12-16 jam sebelum digunakan. Untuk
mempelajari aktivitas antioksidan standar antioksidan dan tanaman
sampel, larutan stok ABTS diencerkan dengan bu fosfat ff ered saline
(PBS) bu ff er (pH 7,4) ke absorbansi 0.70 0,02 di 734 nm dan
diseimbangkan pada 25 C. Untuk ekstrak herbal, pengenceran dibuat di
pelarut organik masing-masing dengan yang mereka telah diekstrak dari
suspensi berair. Setelah penambahan 10 m L sampel rapi atau diencerkan
(yang diperlukan) untuk
2.99mL dari diencerkan ABTS þ solusi (A ¼ 0.700
0,020), absorbansi tercatat sebesar 25 C, dengan interval tepat 1min untuk
8 menit. kosong pelarut dijalankan di setiap assay untuk pembacaan yang
akurat. semua penentuan
483
download dari fst.sagepub.com
dilakukan setidaknya tiga kali berturut-turut, dan dalam rangkap tiga pada
setiap tingkat konsentrasi terpisah dari standar. Persentase
penghambatan absorbansi dihitung dengan rumus berikut.
% Inhibisi di 734 nm ð Þ¼ 1 Aðf = SEBUAH Hai Þ? 100
dimana Hai adalah absorbansi larutan kation radikal sebelum penambahan
sampel / antioksidan standar dan A f adalah absorbansi setelah
penambahan sampel / antioksidan standar. Data yang dihasilkan diplot
antara konsentrasi antioksidan dan bahwa dari trolox untuk kurva
referensi standar.
Isi total fenolik assay. Isi total fenolik dari ekstrak ditentukan dengan
menggunakan metode yang dikembangkan oleh Slinkard dan Singleton
(1977). larutan stok asam gallic dibuat dengan melarutkan 0,5 g asam
gallic di 10 mL etanol dalam volumetrik 100 ml fl bertanya dan menipiskan
volume dengan air suling ganda. larutan natrium karbonat dibuat dengan
ganda. Setelah mendidih dan pendinginan berikutnya dari solusi,
beberapa kristal natrium karbonat ditambahkan. Larutan didiamkan
selama 24 jam, disaring dan volume diangkat ke 1L dengan air suling
ganda. Untuk mempersiapkan kurva kalibrasi, 0, 1, 2, 3, 5 dan 10 mL
larutan stok fenol ditambahkan ke volumetrik 100mL fl meminta secara
terpisah dan kemudian diencerkan dengan volume dengan air suling
ganda. Solusi yang dihasilkan mengandung konsentrasi 0, 50, 100, 150,
250 dan 500 mg / L asam galat.
Dari setiap solusi kalibrasi dan sampel atau kosong, 40 m L yang
dipipet ke cuvettes terpisah dan masing-masing
ditambahkan dan dicampur dengan baik. Setelah 8 menit, 600 m L larutan
natrium karbonat dicampur secara menyeluruh dalam larutan. Solusinya
masing-masing larutan tercatat sebesar 765 nm terhadap kosong (tanpa
solusi fenolik). Konsentrasi vs Plot linear absorbansi yang diperoleh.
Konsentrasi total senyawa fenolik dari masing-masing fraksi AS, AL, CP,
CPP di miligram setara asam galat (GAE) ditentukan dengan
menggunakan persamaan standar berikut.
absorbansi ¼ 0: 118 x þ 0: 0824 mg asam ðGalia = L Þ:
Isi total flavonoid. Jumlah konten avonoid fl ditentukan dengan
menggunakan metode kolorimetri dijelaskan oleh Dewanto et al. (2002).
Secara singkat, 0.25mL ekstrak tanaman atau standar quercetin solusi
dicampur dengan 1.25mL air suling dalam tabung reaksi diikuti dengan
penambahan 75 m L dari 5% natrium nitrit (NaNO 2) larutan. Setelah
oleh tamu di 19 Januari 2015

5 menit, 150 m L dari 10% aluminium triklorida hexahydrate (AlCl 3 6H 2 O)
solusi ditambahkan dan didiamkan selama 6 menit. Sebanyak 0.5ml dari
1Msodiumhydroxide (NaOH) solusi ditambahkan dan volume campuran
dinaikkan menjadi 2,5 ml dengan air suling dan dicampur dengan baik.
Absorbansi diukur segera terhadap kosong pada 510 nm dan
dibandingkan dengan kurva standar quercetin. Isi avonoid fl dinyatakan
sebagai miligram quercetin setara per gram residu.
Ferri-mengurangi kekuatan antioksidan. Kapasitas mengurangi ekstrak
tanaman diukur menurut metode Benzie dan Regangan (1999). Baru siap
besi-mengurangi kekuatan antioksidan (FRAP) solusi terkandung 25 mL
dari 300mMacetate bu ff er (pH 3,6),
2.5ml larutan 10mMTPTZ dalam asam 40mMhydrochloric (HCl) solusi dan
2.5ml 20mm solusi klorida. Themixture diinkubasi pada 37 C selama
periode pemantauan. Sebanyak 3 ml dari FRAP reagen dicampur dengan
100 m L sampel dan 300 m L air suling. Absorbansi pembacaan diambil
pada 593 nm setelah setiap menit untuk 6min. Hasilnya dibandingkan
dengan kurva standar sulfat besi.
2, 2 0- diphenyl-1-pikrilhidrazil kapasitas radikal-pemulungan assay. The
DPPH aktivitas radikal-pembilasan bebas ditemukan menggunakan
metode dilaporkan sebelumnya (Shimada et al., 1992). Secara singkat,
solusi DPPH (3ml, 25mg / L) dalam metanol dicampur dengan volume
yang sesuai solusi sampel rapi atau diencerkan. Kemajuan reaksi
campuran dipantau di 517 nm selama periode waktu 40 menit. Setelah
pengurangan yang sesuai, warna ungu dari solusi berubah menjadi
diphenylpicrylhydrazine kuning. Persentase DPPH sisa (% DPPH rem) dihitung
sebagai:
% DPPH rem ¼ DPPH
½ t¼t=½
DPPH t¼0 100
di mana [DPPH] t ¼ 0 adalah konsentrasi DPPH radikal sebelum reaksi
dengan antioksidan sampel dan
[DPPH] t ¼ t adalah konsentrasi DPPH radikal setelah reaksi dengan
sampel antioksidan pada waktu t. Kurva kinetik menunjukkan pemulungan
dari DPPH radikal dalam hal penurunan absorbansi pada 517 nm sebagai
fungsi waktu (menit) diplot untuk setiap fraksi sampel. EC 50 nilai, yang
merupakan konsentrasi zat yang akan mengurangi jumlah DPPH radikal
untuk setengah dari konsentrasi asli di bawah kondisi percobaan, juga
ditentukan untuk masing-masing fraksi.
Jumlah aktivitas antioksidan dalam sistem asam linoleat emulsi dengan
metode tiosianat besi. Jumlah aktivitas antioksidan dari ekstrak air dan
organik dari kedua
download dari fst.sagepub.com
Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)
tanaman ditentukan sesuai dengan metode yang digunakan oleh Mitsuda
et al. (1996). Solusi, yang berisi 100 m L masing-masing ekstrak tanaman
rapi atau diencerkan dari kedua tanaman di 2.5ml kalium fosfat bu ff er
(0.04M, pH 7,0) ditambahkan ke 2.5ml emulsi asam linoleat kalium fosfat
bu ff er (0.04M, pH 7,0). Setiap solusi kemudian diinkubasi pada 37 C
dalam botol tertutup, dalam gelap. Solusi tanpa ekstrak ditambahkan
digunakan sebagai kosong, sedangkan solusi yang mengandung 100 m L
(50 m g / 20 m L) dari trolox dan BHA digunakan sebagai kontrol positif.
Pada interval 24 jam selama inkubasi, 0.1ml dari setiap solusi
dipindahkan ke gelas yang berisi 3.7mL etanol. Setelah penambahan
0.1ml setiap besi (II) klorida (FeCl 2;
20mm 3,5% HCl) dan solusi tiosianat (30%) untuk sampel etanol, larutan
diaduk selama 1 menit. Setelah inkubasi selama 5 menit pada 37 C,
nilai-nilai penyerapan (nilai peroksidasi lipid) diambil pada 500 nm.
Logam-kelat aktivitas. ion besi (Fe þþ) chelation oleh tanaman / ekstrak
herbal diperkirakan sesuai dengan metode yang digunakan oleh Dinis et
al. (1994). 100 m L ditambahkan ke dalam larutan 2mm FeCl 2 ( 0.05mL).
reaksi dimulai dengan penambahan 5mm ferrozine (0.2mL) dan total
volume disesuaikan dengan 4ml etanol. Kemudian, campuran dikocok
dengan kuat dan kiri berdiri pada suhu kamar selama 10 menit. Setelah
campuran telah mencapai kesetimbangan, absorbansi larutan itu
kemudian diukur spektrofotometri pada 562 nm. Hasilnya dinyatakan
sebagai persentase penghambatan ferrozine-Fe 2 þ pembentukan kompleks.
Persentase penghambatan ferrozine-Fe 2 þ pembentukan kompleks dihitung
menggunakan rumus yang diberikan di bawah ini:
% Kegiatan chelating
¼ SEBUAH Kontrol SEBUAH = sampel SEBUAH Kontrol 100
dimana Kontrol adalah absorbansi kontrol, dan A Mencicipi adalah absorbansi di
hadapan sampel herbal / sampel.
HASIL DAN DISKUSI
The prometazin hidroklorida kation radikal assay dekolorisasi
obat fenotiazin yang setelah oksidasi univalen diubah menjadi radikal
masing-masing kation
(Michaelis et al., 1940). Sebuah reaksi warna-memproduksi antara satu
senyawa tersebut, PMZH, dan K 2 S 2 HAI 8 dalam medium asam
dikembangkan dan dibakukan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan
dari berbagai antioksidan standar dan ekstrak tanaman obat.
Struktur PMZH ditunjukkan pada Gambar 1. Ini adalah
pertama-generasi reseptor H1 antagonis antihistamin dan obat antiemetik.
PMZH larut dalam air,
484
oleh tamu di 19 Januari 2015
Asghar et al.

S S S
- e- - e-
. HCl . HCl . HCl
(SEBUAH) (B)
NR NR NR

1 1 1

asli PPH PPH kation radikal

+H2O (C)

S
R 1 = - CH 2 CH (CH 3) N (CH 3) 2 S+
1O
OH
. HCl . HCl

NR
NR 1

PPH sulfoxide

Gambar 1. representasi struktural menunjukkan konversi promethazine hydrochloride (PMZH) ke (A) monocation radikal; (B) PMZH dication radikal dan (C) tidak
berwarna PMZH sulfoksida.

Fenotiazin kation radikal memiliki oksidasi potensial mirip dengan

radikal hidroksil, tetapi in vitro jauh lebih stabil yang menyebabkan mereka
yang digunakan untuk mengukur aktivitas antioksidan sampel biologis dan
abiological (Asghar dan Khan, 2008;. Re et al, 1999 ). Reaksi oksidasi
dari PMZH diwakili oleh Gambar 1. Pada langkah pertama, PMZH,
setelah kalah satu pemilu, yang reversibel teroksidasi menjadi berwarna
semiquinone radikal bebas. Hilangnya kedua elektron mengubah radikal
bebas menjadi ion phenothiazonium berwarna. Hidrolisis berikutnya
mengubahnya menjadi PMZH sulfoksida. Pembentukan sulfoksida adalah
proses ireversibel dan setelah terbentuk, tidak dapat diubah menjadi baik
monocation bentuk PMZH radikal atau asli dengan penambahan reduktor
apapun. Stabilitas PMZH monocation radikal telah ditemukan rendah
pada pH netral dan dasar rendering itu tidak cocok untuk

antioksidan pengukuran. Puzanowska-

Gambar 2. penyerapan spektrum overlayed dari (A) promethazine
hydrochloride asli (PMZH), (B) PMZH monocation radikal dan (C) PMZH
sulfoksida bentuk.
alkohol dan metilen klorida. Dalam media berair PMZH bereaksi dengan K 2
S 2 HAI 8, menghasilkan kation radikal pinkishred berwarna, yang metastabil
dan di media netral atau dasar segera berubah menjadi produk yang tidak
berwarna.
Gambar 2 menunjukkan overlayed spektrum penyerapan solusi dari
PMZH asli, monocation radikal dan dari PMZH sulfoksida berwarna. Hal
ini jelas dari sosok bahwa daerah penyerapan PMZH monocation radikal
yang cukup berbeda dari orang-orang dari PMZH asli dan dari sulfoksida
nya.
Tarasiewicz et al. (1975) mengemukakan bahwa oksidasi satu elektron
tergantung pada jenis oksidan, keasaman larutan, suhu dan jenis turunan
fenotiazin. Kehadiran atau tidak adanya rantai samping alkil pada R 1 posisi
dan keasaman media reaksi sangat ff ects stabilitas kation radikal.
Kehadiran rantai samping pada R 1 Posisi meningkatkan stabilitas radikal
dan media asam memberikan sebuah stabilitas termodinamika e ff ect
(Jelinek et al, 1991;. Pawelczyk, 1986). Kami eksperimental hasil con fi rm
bahwa jika reaksi kromogenik dilakukan dalam media asam dari pH
rendah, stabilitas meningkat kation radikal banyak lipatan.
Reaksi dari jumlah yang tetap dari PMZH dengan konsentrasi di ff
erent dari K 2 S 2 HAI 8 menunjukkan

485

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

 Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)

Gambar 4 menunjukkan e ff ect dari nilai pH dalam mediumon berair

0,9
absorbansi awal dan stabilitas PMZH kation radikal. Hal ini menunjukkan
0,8
bahwa absorbansi awal adalah lebih tinggi untuk solusi lebih asam. Jadi
0,7
kation yang lebih radikal adalah terbentuk, namun stabilitas tetap sama
0,6 dalam semua kasus. Tidak ada penurunan yang cukup dalam pembacaan
absorbansi

0,5 absorbansi yang dicatat pada 515 nm ketika larutan disimpan pada 4 C
0,4 dalam gelap selama 2 bulan. The sulfoxide, sekali terbentuk, tidak dapat

0,3 dikonversi kembali ke dalam monocation radikal atau PMZH asli di semua
tapi kondisi yang paling drastis (Michaelis et al., 1940). Dengan demikian
0,2
dapat diasumsikan bahwa bentuk berwarna diperoleh dengan reaksi kation
0,1
radikal dengan reduktan lagi bentuk asli berwarna dari PMZH.
0

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

Waktu (menit)

Sebuah korelasi linear tinggi diamati antara pemulungan warna kation

Gambar 3. Tentu saja waktu pembentukan kation radikal promethazine
hydrochloride (PMZH) menggunakan empat konsentrasi yang berbeda (0.5, 1.0,
1.5 dan 2.5mm) kalium persulfat dengan konsentrasi tetap PMZH (0.166mM) dalam
medium asam ortofosfat. (^) Persulfate 0,5, (~) Persulfate 0,1, (&) Persulfate 1.5
dan ( ) Persulfate 2,5.
radikal dan konsentrasi menambahkan antioksidan standar seperti trolox,
BHA, asam galat, quercetin, catechin hidrat, kaempferol, glutathione
berkurang, asam askorbat, asam urat, BHT dan Sebuah- tokoferol
(Gambar 5). Hal ini menunjukkan potensi metode untuk penentuan
aktivitas antioksidan dari kedua antioksidan lipofilik dan hidrofilik. Reaksi
antioksidan standar ditemukan cepat dengan titik akhir membaca menjadi
stabil praktis dalam 1-2menit.

1.2
Nilai-nilai TEAC di spesifik titik waktu (yaitu, 8 menit setelah awal
pencampuran) diperoleh dengan membandingkan persentase
0.8 1
penghambatan sampel dengan kurva standar diperoleh dengan
absorbansi

0,6
menggunakan trolox (Gambar 6). Uji PMZH telah terbukti sangat
0,4
direproduksi. Nilai-nilai TEAC diperoleh untuk berbagai fraksi A.
0,2
absinthium
0
dan C. colocynthis menggunakan PMZH uji baru dikembangkan berkisar
0 5 10 15 20 25 30 35 40
1,392-6,578, ,5702-1,52, 0,29-1,846, 0,295-1,754 dan 0,295-2,649 m M
Waktu (menit)
trolox setara untuk AL, AS, CP, CPP dan CS, masing-masing. Uji baru
berlaku untuk kedua antioksidan hidrofilik dan lipofilik. Selain stabilitas
Gambar 4. Tentu saja saat promethazine hydrochloride (PMZH) pembentukan yang lebih besar, uji baru hanya membutuhkan 1 jam untuk persiapan
kation radikal dalam media berair kekuatan asam yang berbeda (3, 6, 9, 12 dan solusi kation radikal dibandingkan dengan ABTS radikal kation
asam fosfat 14.83M [H 3 PO 4], masing-masing). Konsentrasi akhir PMZH dan kalium dekolorisasi assay di mana hampir 12-16 h diperlukan untuk persiapan
persulfat (K 2 S 2 HAI 8) adalah 0,166 dan ABTS solusi kation radikal stabil. Masa solusi kation radikal cukup
panjang (sekitar 2 bulan) dalam gelap pada 4 C.
0.11mM, masing-masing. (^) Phosphosric asam 3M, (~) Phosphosric asam 9M, ( )
Phosphosric asam 14.83M, (&) Phosphosric asam 6M dan ( ) 12M asam
Phosphosric.

peningkatan proporsional dalam absorbansi membuatnya menjadi kandidat

ABTS þ assay dekolorisasi
yang menjanjikan untuk penentuan nilai antioksidan melalui penyerapan
pada 515 nm (Gambar 3). The ABTS dekolorisasi assay, yang merupakan uji berbasis
Meskipun kurva diperoleh dengan mereaksikan 1-2.5mM K 2 S 2 HAI 8 tampaknya
electrontransfer, diterapkan untuk mengevaluasi kapasitas antioksidan
sama-sama diterima baik dari segi stabilitas dan intensitas penyerapan, dari berbagai ekstrak C. colocynthis dan
kita lebih suka konsentrasi minimum yaitu, 1mM dari persulfat untuk A. absinthium. Potensial redoks dari ABTS kation radikal hampir sama
reaksi kromogenik untuk menghindari campur tangan yang berlebihan K 2 S 2 dengan yang radikal hidroksil, yang dianggap radikal yang paling dahsyat,
HAI 8 selama pengukuran aktivitas antioksidan. yang dihasilkan in vivo. Komponen antioksidan yang lebih rendah dalam
pengurangan potensi dibandingkan dengan radikal ABTS

486

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

 (Sebuah) 100
(B) 80

80
60

% Penghambatan
60

%Inhibisi
40
40

20 20

0
0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20

konsentrasi ( m M)
konsentrasi ( m M))

(C) 40 (D) 80

30 60
% Penghambatan

% Penghambatan
20 40

10 20

0 0

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20

konsentrasi ( m M) konsentrasi ( m M)

(E) 80 (F) 80

60 60
% Penghambatan

% Penghambatan
40 40

20 20

0 0

4 12 20 28 36 44 52 60 4 12 16 20 8 24 28 32 36 40

konsentrasi ( m M) konsentrasi ( m M)

(G) (H) 25

20 20
% Penghambatan
% Penghambatan

15
16
10
12
5
48
0
0
4 12 20 28 36 44 52 60
4 12 20 28 36 44 52 60
konsentrasi ( m M)
konsentrasi ( m M)

(saya)
(J) 25

20 20
% Penghambatan

15
% Penghambatan

16
10

5
12
0

48 4 12 20 28 36 44 52 60

konsentrasi ( m M)
0

4 12 20 28 36 44

konsentrasi ( m M)

(K)

20
% Penghambatan

16

12

48

4 12 20 28 36 44 52 60

konsentrasi ( m M)

Gambar 5. Pengaruh konsentrasi antioksidan pada penghambatan promethazine hydrochloride (PMZH) monocation radikal. (A) trolox, y ¼ 9,2288 x þ 0,9873, R 2 ¼ 0,9948,
(B) butylated hidroksi anisol (BHA), y ¼ 6,525 x þ 2,5052,
R 2 ¼ 0,9913, (C) kaempferol, y ¼ 3,6426 x - 4,3107, R 2 ¼ 0,9929, (D) quercetin, y ¼ 6,7785 x - 5,2074, R 2 ¼ 0,9992, (E) katekin hidrat, y ¼ 4,9942 x - 3,7348, R 2 ¼ 0,9932,
(F) Sebuah- tokoferol, y ¼ 5,8065 x - 0,6955, R 2 ¼ 0,9889, (G) glutation tereduksi, y ¼ 1,1024 x þ 0,3266, R 2 ¼ 0,9975, (H) asam askorbat, y ¼ 1,4661 x - 1,3139, R 2 ¼ 0,9979,
(I) asam galat,
y ¼ 1,4793 x - 1,0635, R 2 ¼ 0,9941, (J) butylated toluena hidroksi (BHT), y ¼ 1,4695 x - 2,2594, R 2 ¼ 0,9925 dan (K) asam urat,
y ¼ 1,1723 x þ 0,0953, R 2 ¼ 0,9909.

487

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

 Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)

(B) 8 20
(Sebuah)

7 18

TEAC (mikromolar)
6 16
TEAC (mikromolar)

5 14

4 12

3
10

2
02.468

1 n-heksana Etil asetat metanol

Pecahan
0
(B) 25
n-heksana Etil asetat metanol
20
Pecahan

TEAC (mikromolar)
15
(B) 2,5
10

5
TEAC (mikromolar)

0
1,5 2
n-heksana Etil asetat metanol
Pecahan

0,5 1 Gambar 7. analisis komparatif nilai TEAC dari berbagai bagian (A): Artemisia
absinthium, (&) AL dan (&) AS. (B): colocynthis Citrullus menggunakan 2,2 0- azinobis
0 (asam 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonat) (ABTS) radikal uji kation, (&) CP, (&) CP
n-heksana Etil asetat metanol dan ( & ) CPP.

Pecahan

Gambar 6. analisis komparatif nilai TEAC dari berbagai bagian (A): Artemisia
absinthium, (&) AL dan (&) AS. (B): Citrullus colocynthis, menggunakan
promethazine hydrochloride (PMZH) radikal uji kation dekolorisasi, (&) CP, (&) CP
dan ( & ) CPP.
stabil pada pH 7,4 (Cano et al, 1998;. Erel, 2004;. Ozgen et al, 2006).
Semakin tinggi nilai-nilai TEAC menggunakan ABTS kation radikal mungkin
disebabkan sebagian ketidakstabilan ABTS radikal.

Jumlah fenolik dan flavonoid isi

kation dapat mengais warna kation solusi radikal proporsional dengan
jumlah mereka. Nilai-nilai TEAC diperoleh dengan membandingkan nilai
persentase penghambatan sampel dengan kurva kalibrasi diperoleh
dengan menggunakan trolox sebagai antioksidan standar. Grafik batang
diplot untuk nilai-nilai TEAC dari masing-masing fraksi dari sampel
(Gambar 7).
Di antara di ff erent bagian dari A. absinthium, ekstrak AL
menunjukkan aktivitas antioksidan yang relatif lebih besar. Nilai-nilai
TEAC berkisar ,246-17,14, 0,18 untuk
10,788, 0,223-21,856, 0,033-11,878 dan 0,239 untuk
11,588 m M untuk AL, AS, CP, CPP dan CS, masing-masing.
Kecenderungan umum dari peningkatan nilai TEAC dengan meningkatnya
polaritas pelarut ekstraksi dapat dilihat pada nilai-nilai TEAC diperoleh
ABTS dan PMZH tes (Angka 6 dan 7). Hal ini jelas dari data bahwa
nilai-nilai TEAC dari ekstrak yang diperoleh dengan menggunakan ABTS
kation radikal yang cukup tinggi dari yang diperoleh dari PMZH assay.
The ABTS assay telah dilaporkan
Total uji fenol digunakan sebagai uji routing untuk menilai antioksidan
fenolik karena kesederhanaan dan reproduktifitas. senyawa fenolik
memiliki kemampuan untuk mengurangi Folin-Ciocalteu reagen dan reaksi
dapat diikuti dengan mengukur perubahan warna larutan dari kuning
intens untuk spektrofotometri biru. Isi Total fenolik dari C. colocynthis dan A.
absinthium dievaluasi mengikuti uji sudah dilaporkan. Semua fraksi dari
kedua herbal menunjukkan nilai yang tinggi dari isi total fenolik (TPC).
Metanol> etil asetat> n heksana, metanol> n heksana> etil asetat, metanol> n
heksana> etil asetat, metanol> etil asetat> n heksana, metanol> etil asetat> n
heksana, metanol> etil asetat> n heksana untuk AL, AS, CP, CPP dan CS,
masing-masing (Tabel 1 dan 2). Kedua metanol dan etil asetat ditemukan
pelarut yang baik untuk ekstraksi senyawa fenolik dari kedua tanaman.
TPC tinggi dan jumlah fl konten avonoid (TFC) nilai untuk A. absinthium pecahan

488

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

Asghar et al.

Tabel 1. Isi total fenolik (TPC) dan jumlah isi flavonoid (TFC) dari fraksi yang
(Sebuah)
berbeda dari daun dan pucuk 120
A. absinthium
100

TPC GAE (mg TFC QE (mg / 80

FRAP Nilai (mikromolar)

/ L) / g residu L) / g residu
60
bagian tanaman pecahan
40
Daun-daun n heksana 253,93 808,51
20
Etil asetat 1663,26 4136,78

metanol 7950,63 4900,11 0

n-heksana Etil asetat metanol
tunas n heksana 829,33 820,10
Pecahan
Etil asetat 3301,13 1666,36

metanol 6308,80 2132,48 (B)

120
GAME: gallic acid setara, QU: quercetin setara.
100

80

FRAP Nilai (mikromolar)

60
Meja 2. Isi total fenolik (TPC) dan jumlah isi flavonoid (TFC) dari fraksi yang
berbeda dari kulit, pulp dan biji C. colocynthis 40

20

TPC GAE (mg / TFC QE (mg / 0

L) / g residu) L) / g residu n-heksana Etil asetat metanol
bagian tanaman pecahan Pecahan

Kulit n heksana 1122,20 4468,53

Etil asetat 23 444,50 8928,94 Angka 8. Perbandingan mengurangi kekuatan dari segi nilai besi-mengurangi
kekuatan antioksidan (FRAP) dari fraksi yang berbeda colocynthis Citrullus dan Artemisia
metanol 13 456,50 2406,00
absinthium.
Bubur n heksana 1772,21 9616,11
(A): (&) AL dan (&) AS. (B): (&) CP, (&) CS dan ( & ) CPP.
Etil asetat 3841,15 1024,55

metanol 3405,44 785,75

Biji n heksana 5677,08 3388,80

Etil asetat 20 395,55
metanol 3887,11
GAME: gallic acid setara, QU: quercetin setara.
sesuai dan membenarkan nilai-nilai tinggi yang diperoleh ABTS dan
PMZH assay. Namun, tidak ada signifikan korelasi antara isi fenolik dan
nilai-nilai TEAC ditemukan dalam kasus C. colocynthis. Hal ini dapat
dikaitkan dengan fakta bahwa isi total fenolik saja tidak mewakili biaya
total antioksidan. Lebih lanjut, e ff ects sinergis antara di ff antioksidan
erent dalam sampel juga dapat menyumbang nonsigni fi kan korelasi.
et al. (2005). Jadi setiap spesies dengan potensi penurunan lebih rendah
10 364,92
dari 0,7 V dapat mengurangi Fe 3 þ -TPTZ untuk Fe 2 þ -TPTZ dan sehingga
1074,95
memberikan kontribusi untuk nilai FRAP. Uji FRAP sehingga menentukan
kekuatan spesies apapun untuk mengurangi Fe (III) TPTZ ke Fe (II) TPTZ
pada pH 3,6. Penurunan ini dipantau dengan mengukur perubahan
serapan pada 593 nm. Sebuah warna biru intens menunjukkan adanya
mengurangi komponen dalam sampel. Dalam uji FRAP standar Benzie
dan Regangan (1996) ditetapkan interval 4-menit setelah penambahan
sampel untuk TPTZ reagen untuk pengukuran absorbansi, karena
besi-TPTZ kompleks diklaim stabil pada titik waktu ini. Tapi ketika kita
menerapkan sampel kami, tercatat bahwa bahwa absorbansi membaca
tidak mencapai keadaan stabil bahkan setelah interval 4-min. Jadi kita
meningkatkan durasi waktu untuk pengukuran untuk 6min untuk kedua
standar dan sampel. Kekuatan mengurangi dari fraksi

Ferri-mengurangi kekuatan antioksidan

Uji FRAP melibatkan pengurangan elektron tunggal dari Fe (TPTZ) 2 ( III)
kompleks (kuning pucat) ke Fe (TPTZ) 2 ( II) kompleks (blue) oleh tunggal
donor elektron spesies / antioksidan. Penurunan potensial standar Fe (III)
garam TPTZ sekitar 0,7 V seperti dilansir Dejian
C. colocynthis dan A. absinthium diukur dan kemudian dibandingkan
dengan kurva kalibrasi diperoleh dengan menggunakan besi (II) sulfat
sebagai reduktor standar (Gambar 9). Nilai-nilai FRAP ditemukan dalam
urutan menurun dari metanol> etil asetat> n heksana untuk kedua A.
absinthium dan C. colocynthis ( Angka 8).

489

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

 Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)

mempertimbangkan. kurva kinetik yang diperoleh dengan memplot

120
persentase DPPH tersisa melawan waktu menunjukkan bahwa ekstrak C.
100
colocynthis dan A. absinthium dalam etil asetat dan metanol yang
80 terkandung tingkat tertinggi DPPH agen radikal-pemulungan. Reaksi dari
konsentrasi ( m M)

60 komponen antioksidan dan radikal bebas DPPH hampir selesai dalam

5-10 menit pertama. Setelah itu, kurva masih sedikit menurun, namun
40
dengan penurunan jauh lebih lambat (Gambar 9). respon tergantung
20
waktu ini menunjukkan keberadaan kedua cepat-dan lambat bereaksi
0
agen antioksidan dalam ekstrak herbal, dengan yang fastreacting menjadi
0 5 10 15 20 25 30 35
spesies dominan. kinetika serupa diamati untuk semua fraksi dari kedua
Waktu (min)
tanaman. EC 50 nilai, yang merupakan konsentrasi zat yang akan
mengurangi jumlah DPPH radikal untuk setengah dari konsentrasi asli di
Gambar 9. Tentu saja saat DPPH aktivitas radikal-pembilasan dari Artemisia bawah kondisi percobaan, juga ditentukan untuk setiap fraksi (Tabel 3).
absinthium daun (AL). Konsentrasi akhir trolox dan butylated anisol hidroksi (BHA)
adalah 10 m M. ( ,)
n heksana, (~) 1, butanol, ( ) Tolox, (&) etil asetat, (&) kosong dan (*) BHA.

Untuk A. absinthium, EC 50 nilai berkisar dari 49,71 ke

Tabel 3. EC 50 nilai-nilai pecahan yang berbeda C. colocynthes 358,26 dan 77,41-346,10 m g berat kering (DW) per mL DPPH solusi
dan A. absinthium di T ( 35 menit) untuk AL dan AS, masing-masing. Untuk
C. colocynthis, EC 50 nilai berkisar dari 214,61 ke
EC 50 ( m g / mL)
505,08, 771,34-1.009,42 dan 221,43-763,06 m g DW per mL DPPH solusi
fraksi ( C. colocynthes) Kulit Kulit Kulit untuk CP, CPP dan CS, masing-masing. Atas dasar data ditampilkan,
Jelaslah bahwa fraksi etil asetat dari semua bagian dari kedua tanaman
n heksana nd 1 nd 1 nd 1
exhibitedmuch lebih rendah EC 50 nilai-nilai membuktikan untuk menjadi
Etil asetat 214,61 214,61 214,61
media terbaik untuk ekstraksi komponen antioksidan.
metanol 505,08 505,08 505,08

fraksi ( A. absinthium) Daun-daun tunas

n heksana nd 1 nd 1

Etil asetat 49,71 77,41

metanol 358,26 346,10
1 nd: tidak terdeteksi.
The metanol dan etil asetat fraksi menunjukkan nilai FRAP tinggi, yang
mungkin disebabkan adanya jumlah tinggi mengurangi isi dalam ekstrak
tersebut. Di samping itu, n fraksi heksana dari kedua tanaman
menunjukkan kapasitas mengurangi setidaknya atau hampir diabaikan
dalam hal nilai FRAP.
2,2 0- diphenyl-1-pikrilhidrazil assay
radikal-pemulungan
Uji DPPH dianggap metode yang mudah dan tepat untuk menilai
kapasitas radikal-pemulungan dari sampel, karena DPPH adalah
preformed stabil radikal dan tidak perlu untuk menghasilkan radikal
melalui reaksi kimia dengan agen oksidasi. Ini juga meminimalkan
gangguan mungkin karena kehadiran agen pengoksidasi yang berlebihan
dalam campuran reaksi. The DPPH assay dilakukan oleh parameter
mengambil, konsentrasi antioksidan dan waktu untuk penyelesaian reaksi
antioksidan,
Jumlah aktivitas antioksidan dalam sistem asam linoleat emulsi
dengan metode tiosianat besi
Metode tiosianat digunakan untuk menentukan aktivitas antioksidan total
ekstrak C. colocynthis
dan A. absinthium. radikal peroksida, yang dihasilkan karena oksidasi
asam linoleat, memiliki kemampuan untuk mengoksidasi Fe 2 þ untuk Fe 3 þ. Nilai
peroksidasi tercatat spektrofotometri sebagai peningkatan absorbansi
pada 500 nm karena pembentukan kompleks besi (III) dengan ion
tiosianat (SCN-). Karena tidak adanya agen antioksidan kekosongan, ada
kenaikan terbatas di absorbansi. Padahal, anitoxidants dalam standar
atau contoh solusi akan mencoba untuk menghambat atau oksidasi
perlambatan asam linoleat dan karena itu akan, mengakibatkan menjadi
nilai peroksidasi rendah. Dengan demikian, nilai peroksidasi rendah
menunjukkan peroxyl kekuatan radikal-pemulungan tinggi sampel dan
sebaliknya. Standar antioksidan trolox dan BHA digunakan sebagai
kontrol positif. Peningkatan tingkat oksidasi untuk ekstrak tumbuhan
diamati sebagai fungsi waktu. Awalnya, tingkat kenaikan absorbansi
(peroksidasi lipid pada 500 nm) lambat dan tetap sebanding antara
standar dan ekstrak untuk fewhours tapi setelah hampir 5 jam absorbansi
meningkat tajam, dan serapan maksimum adalah

490

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

Asghar et al.

(Sebuah)
(B)

2,5 3 2,5 3

Lipid nilai peroksidasi (500 nm)

Lipid nilai peroksidasi (500 nm)

1,5 2 1,5 2

0,5 1
0,5 1

0
0
0 24 48 60 72 84 96
0 24 48 60 72 84 96
Waktu (h) Waktu (h)

(C) 2.8 (D) 2.8

2.4 2.4

Lipid nilai peroksidasi (500 nm)

Lopid per nilai oksidasi

1,6 2
1,6 2
(500 nm)

1.2
1.2

0,8
0,8

0,4
0,4

0
0
0 24 48 60 72 84 96
0 24 48 60 72 84 96
Waktu (h)
Waktu (h)

(E)

2,5 3
Lipid per nilai oksidasi (500 nm)

1,5 2

0,5 1

0
0 24 48 60 72 84 96
Waktu (h)

Gambar 10. nilai-nilai peroksidasi lipid tergantung waktu dari fraksi yang berbeda: (A) AL, (B) AS, (C) CP, (D) CPP dan (E) CS. ( ,)
n heksana, ( ) Metanol, ( ) Etil asetat, (_ | _) kosong, (__ ) Trolox dan (-) butylated anisol hidroksi (BHA).

Kegiatan logam-chelating
diamati untuk trolox diikuti oleh BHA, fraksi etil asetat, n fraksi heksan dan
fraksi metanol, masing-masing. Setelah 24 jam, sebuah signifikan di ff logam transisi terutama Iron (II) ditemukan dalam sistem biologis dapat
selisih absorbansi tercatat. Di sisi lain, pembacaan absorbansi untuk bertindak sebagai pro-oksidan. Sebuah pro-oksidan tidak merugikan
kosong mencapai nilai maksimum dalam 72 jam, setelah itu mereka mulai biomolekul langsung tetapi memfasilitasi produksi spesies tersebut yang
menurun tajam. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semua fraksi dari dapat menyebabkan kerusakan biomolekul. ion besi (Fe þþ) chelation oleh
kedua tanaman memiliki aktivitas antioksidan yang sebanding dengan tanaman / ekstrak herbal diperkirakan oleh assay Ferrozine (Dinis et al.,
trolox dan solusi BHA (2,5 m g / m L; Gambar 10). 1994). Ferrozine membuat kompleks dengan besi (II), yang dapat diukur
secara spektrofotometri

491

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

 Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)

assay ekonomis, yang dapat digunakan untuk mengevaluasi aktivitas

60
(Sebuah)
antioksidan antioksidan murni lipofilik dan hidrofilik dan ekstrak tanaman
50 obat. Hasil yang diperoleh dengan mempekerjakan para ABTS / PMZH

40
tes radikal kation dekolorisasi, FRAP itu, tiosianat kalium, TFC, TPC dan
Kegiatan Chelating%

aktivitas tes logam-kelat sugestif bahwa C. colocynthes dan A. absinthium merupakan

30
sumber penting dari antioksidan alami dengan aktivitas
20 radikal-pemulungan baik. Menjaga dalam melihat total antioksidan dan
aktivitas radikal-pembilasan dari
10

n-Hexane Etil asetat metanol

C. colocynthes dan A. absinthium ekstrak sebanding dengan yang sintetis,
Pecahan dapat digunakan untuk melawan penyakit kronis dan industri makanan lainnya.

(B) 80

70

60
PENDANAAN
% Logam pengkhelat

50
Kami mengakui dukungan keuangan dari Tinggi Komisi Pendidikan
aktivitas

40
Pakistan di bawah -nya
30
Adat 5000-Ph.D. Fellowship Scheme (Batch II, 042-121.235-PS2-286).
20

10

n-Hexane Etil asetat metanol

REFERENSI
Pecahan
Al-Ghaithi F, El-Ridi MR, Adeghate E dan Amiri MH.
(2004). Efek biokimia dari colocynthis Citrullus pada tikus normal dan diabetes. Molekul
Gambar 11. Persentase Fe 2 þ- Kegiatan pengkhelat dari fraksi yang berbeda Artemisia
dan Cellular Biochemistry 261 (1-2): 143-149. Aruoma OI. (1994). Gizi dan
absinthium dan Citrullus colocynthis. ( A): (&) AL dan (&) AS. (B): (&) CP, (&)
kesehatan aspek RAD bebas
CS dan ( & ) CPP.

icals dan antioksidan. Makanan dan Kimia Toksikologi

32 (7): 671-683.
Asghar MN dan Khan IU. (2008). Pengukuran antioxi-
di 562 nm. Kabarnya, senyawa polifenol ikut campur dalam pembentukan
kompleks ini dan menyebabkan penurunan absorbansi. Hasilnya Kegiatan dant dengan trifluoperazine dihidroklorida kation radikal. Brasil

dinyatakan sebagai persentase dari penghambatan ferrozine-Fe 2 þ pembentukan Journal of Medical dan Penelitian Biologi 41 (6): 455-461.
kompleks. Persentase penghambatan ferrozine-Fe 2 þ
pembentukan kompleks dihitung untuk semua fraksi dari kedua tanaman
dan digambarkan dalam hal persentase terikat besi terhadap fraksi yang
sesuai. Persentase terikat besi untuk di ff fraksi erent berkisar
46,25-48,44, 39,67-47,4, 35,06-36,33, 29,29-54,44 dan
25,72-70,81 untuk AL, AS, CP, CPP dan CS, masing-masing (Gambar
11). Tidak ada signifikan korelasi antara aktivitas metalchelating dan
nilai-nilai TPC untuk semua fraksi dari kedua tanaman itu melihat. Hal ini
Asghar MN, Khan IU, Arshad MN dan Sherin L. (2007).
Evaluasi aktivitas antioksidan menggunakan DMPD ditingkatkan radikal kation
dekolorisasi assay. Acta Chimica Slovenica 254: 295-300.
Asghar MN, Khan IU, Zia saya, Ahmad M dan Fqureshi FA.
(2008). dimodifikasi 2,2 0- azinobis (3-ethylbenzo thiazoline) asam -6sulphonic
radikal assay kation dekolorisasi untuk aktivitas antioksidan plasma manusia
dan ekstrak tanaman obat tradisional. Acta Chimica Slovenica
55 (2): 408-418.

menunjukkan kemungkinan baik beberapa tindakan sinergis yang
signifikan antara senyawa fenolik atau kehadiran agen chelating selain
senyawa fenolik. Etil asetat fraksi dari C. colocynthis menembak
menunjukkan aktivitas logam-chelation tertinggi yaitu, 70%. Namun,
secara keseluruhan A. absinthium
ekstrak menunjukkan aktivitas chelating yang relatif lebih besar.
Benzie IEF dan Regangan JJ. (1996). The besi mengurangi kemampuan
plasma (FRAP) sebagai ukuran '' kekuatan antioksidan '': The FRAP assay. analitis
Biokimia 239 (1): 70-76. Benzie IFF dan Regangan JJ. (1999). antioksidan
mengurangi Ferri
kekuatan assay: ukuran langsung dari aktivitas antioksidan total dari cairan
biologis dan versi modifikasi untuk pengukuran simultan dari total daya
antioksidan dan konsentrasi asam askorbat. Metode dalam enzim 299: 5-27.
Blagojevic P, Radulovic N, Palic R dan Stojanovic G. (2006).

Komposisi Cehmical dari minyak esensial dari Serbia tumbuh liar Artemisia
KESIMPULAN
absinthium dan Artemisia vulgaris. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 54
Dari penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa PMZH kation radikal (13): 4780-4789.
dekolorisasi assay adalah cepat dan

492

download dari fst.sagepub.com oleh tamu di 19 Januari 2015

Asghar et al.
Caner A, Doskaya M, Degirmenci A, Can H, Baykan S, Uner
A, et al. (2008). Perbandingan efek Artemisia vulgaris dan Artemisia
absinthium yang tumbuh di barat Anatolia terhadap
trichinellosis (Trichinella spiralis).
Parasitologi eksperimental 119 (1): 173-179. Cano AJ, Hernandze-Ruiz F,
Garcia-Canovas M dan Acosta
MB, Arnao. Sebuah metode titik akhir untuk estimasi dari total aktivitas
antioksidan dalam bahan tanaman. Analisis fitokimia 9 (4): 196-202.
Cao G, Verdon CP, Wu AHB, Wang H dan Prior RL. (1995).
Otomatis assay oksigen radikal absorbansi
kapasitas dengan COBAS FARA II. Kimia klinik
41 (12 Pt 1): 1738-1744.
DejianH, BoxinOand Sebelum RL. (2005). kimia di belakang
tes antioksidan. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 53 (6): 1841-1856.
Dewanto V, Wu X, Adom KK dan Liu RH. (2002). Panas
pengolahan meningkatkan nilai gizi tomat dengan meningkatkan aktivitas
antioksidan total. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 50 (10): 3010-3014.
Dinis TCP, Madeira VMC dan Almeida LM. (1994). Tindakan
dari turunan fenolik (acetoaminophen, salisilat dan 5-aminosalycilate) sebagai
inhibitor dari peroksidasi lipid membran dan sebagai pemulung radikal peroxyl. Archives
of Biokimia dan Biofisika 315 (1): 161-169. Erel O. (2004). Anovel metode
pengukuran langsung otomatis
total kapasitas antioksidan menggunakan generasi baru, lebih stabil ABTS
kation radikal. Biokimia klinis 37 (4): 277-285.
Ghiselli A, Serafini M, Maiani G, Azzini E dan Ferro-Luzzi A.
(1995). Sebuah metode berbasis fluoresensi untuk mengukur kemampuan total
antioksidan plasma. Radikal Bebas Kimia, Biologi dan Kedokteran 18 (1):
29-36.
Ghiselli A, Serafini M, Natela F dan Scaccini C. (2000). Total
kapasitas antioksidan sebagai alat untuk menilai status redoks: pandangan
kritis dan data eksperimen. Radikal Bebas Kimia, Biologi dan Kedokteran 29
(11): 1106-1114.
Jelinek saya, Nemcova I dan Rychlovsky PO. (1991). Efek dari
garam pada stabilitas kationik radikal turunan fenotiazin. Talanta 38 (11):
1309-1313.
Kehrer JP. (1993). Radikal bebas sebagai mediator dari cedera jaringan
dan penyakit. CRC Kritis Ulasan Toksikologi 23 (1): 21-48. Khan IU, Asghar
MN dan Sherin L. (2008). evaluasi
Aktivitas antioksidan Grewia asciatica berry menggunakan 2,2 0-
azinobis- (asam 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonat) dan N, N- dimetil-p-phenylenediamine
tes kation radikal dekolorisasi. Asian Journal of Chemistry 20: 5123-5232. Kim
SY, Kim JH, Kim SK, Oh MJ dan Jung MY. (1994).
kegiatan antioksidan ekstrak herbal oriental yang dipilih.
Journal of American Oil Chemical Society 71 (6): 633-640. Kordali S, Cakir A,
Mavi A, Kilic H dan Yildirim A. (2005b).
Skrining komposisi kimia dan antijamur dan kegiatan antioksidan dari minyak
esensial dari tiga spesies Artemisia Turki. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan
53 (5): 1408-1416.
Kordali S, Kotan R, Mavi A, Cakir A, Ala A dan Yildirim A.
(2005a). Penentuan komposisi kimia dan aktivitas antioksidan dari minyak
esensial dari Artemisia dracunculus dan dari antijamur dan antibakteri dari
Turki Artemisia absinthium, A. dracunculus, Artemisia
493
download dari fst.sagepub.com
santonicum, dan Artemisia spicigera minyak esensial. Jurnal Pertanian dan
Kimia Makanan 53 (24): 9452-9458. Kumar S, Kumar D, Jusha M, Saroha K,
Sigh N dan
Vashishta B. (2008). potensi antioksidan dan freee radikal dari Citrullus
colocynthis (L.) Schrad, ekstrak buah metanol. Acta Pharmaceuica 58 (2):
215-221. Lee HG, Kim H, Oh WK, Yu KA, Choe YK, Ahn JS, et al.
(2004). Tetramethoxy hydroxyflavone P7F downregulates mediator inflamasi
melalui penghambatan faktor nuklir kappaB. Annals of NewYork Academy of
Sciences 1030: 555-568.
Lonnrot K, Metsa-Ketela T, Molnar G, Ahonen JP, Latvala
M, Peltola J, et al. (1996). Pengaruh suplementasi askorbat dan ubiquinone
pada plasma dan CSF total kapasitas antioksidan. Radikal Bebas Kimia, Biologi
dan Kedokteran 21 (2): 211-217.
Lopes-Lutz D, Alviano DS, Alviano CS dan Kolodziejczyk
PP. (2008). Skrining komposisi kimia, antimikroba dan kegiatan antioksidan
dari minyak esensial Artemisia.
fitokimia 69 (8): 1732-1738. Michaelis L, SchubertMP andGranick S. (1940).
Semiquinone
radikal dari thiazines. Journal of American Chemical Society 62 (1): 204-211.
Miller NJ, Castelluccio C, Tijburg L dan Rice-Evans CA.
(1996). Sifat antioksidan theaflavin dan ester gallate mereka - pemulung radikal
atau chelators logam? FEBS Surat 392 (1): 40-44.
Miller NJ, Diplock AT dan Rice-Evans CA. (1995).
Evaluasi total aktivitas antioksidan sebagai penanda kerusakan jus apel dalam
penyimpanan. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 43 (7): 1794-1801. Miller
NJ, Rice-Evans CA, Davies MJ, Gopinathan V dan
Milner A. (1993). Sebuah metode baru untuk mengukur kapasitas antioksidan
dan aplikasi untuk memantau status antioksidan pada neonatus prematur. Ilmu
klinis 84 (4): 407-441.
MitsudaH, YuasumotoKand Iwami K. (1996). antioxidation
tindakan senyawa indol selama autoksidasi asam linoleat. Eiyo ke Shokuryo 19
(3): 210-214. Ozgen M, Reese NR, Tulior Jr AZ, Scheerens JC dan Miller
AR. (2006). dimodifikasi 2,2 0- azino bis--3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonat asam
(ABTS) metode tomeasure kapasitas antioksidan dari buah-buahan kecil yang
dipilih dan dibandingkan dengan besi mengurangi kekuatan antioksidan (FRAP)
dan 2,2 0- diphenyl-1picrylhydrazyl metode (DPPH). Jurnal Pertanian dan Kimia
Makanan 54 (4): 1151-1157. PawelczykE. (1986). Chap. 2.3.2. Kimia Farmasi.
Warsawa: PZWK.
Puzanowska-Tarasiewicz H. (1975). sifat analitis 2-
dan 10-Disubstituted turunan fenotiazin kualifikasi tesis; Nicolas Copernicus
University, Torun. Ilmu analitis 12 (2):. 161-170 ((1996) Re R, Pellegrini N,
Proteggente A, Pannala A, Yang M dan
Rice-Evans CA. (1999). aktivitas antioksidan menerapkan perbaikan ABTS
kation radikal dekolorisasi assay. Radikal Bebas Biologi dan Kedokteran 26
(9-10): 1231-1237. Rice-Evans CA dan Miller NJ. (1985). Antioksidan: kasus
untuk buah dan sayuran dalam diet. British Food Journal
97 (9): 35-40.
oleh tamu di 19 Januari 2015

Rice-Evans CAandMiller NJ. (1994). Status antioksidan total
dalam plasma dan cairan tubuh. Metode dalam enzim 234: 279-293.
Rice-Evans CA dan Miller NJ. (1996). kegiatan antioksidan
flavonoid sebagai komponen bioaktif dari makanan. Transaksi biokimia
Masyarakat 24 (3): 790-795.
Rice-Evans CA, Miller NJ dan Paganga G. (1996). Struktur-
hubungan aktivitas antioksidan flavonoid dan asam fenolat. Radikal Bebas
Kimia, Biologi dan Kedokteran
20 (7): 933-956.
Salah N, Miller NJ, Paganga G, Tijburg L, Biolwell GP dan
Rice-Evans CA. (1995). flavonol polifenol sebagai pemulung radikal fasa air
Andas chainbreakingantioxidants.
Archives of Biokimia dan Biofisika 322 (2): 339-346. Sasaki S, Ohta T dan
Decker EA. (1996). aktivitas antioksidan
air fraksi larut jaringan salmon spremary. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 44:
1682-1686. Shimada K, Fujikawa K, Yahara K dan Nakamura T. (1992).
Sifat antioksidan dari xanthin pada autoksidasi dari minyak kedelai di
siklodekstrin emulsi. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 40: 945-948.
Slinkard K dan Singleton VL. (1977). Total fenol analisis:
otomatisasi dan perbandingan dengan metode manual.
American Journal of Enology dan Vitikultur 28 (1): 49-55.
download dari fst.sagepub.com
Ilmu dan Teknologi Pangan Internasional 17 (5)
Spiteller G. (2001). Peroksidasi asam linoleat dan eratnya nya
tion penuaan dan usia penyakit tergantung. Mekanisme Aging dan
Pembangunan 122 (7): 617-657. Su JD. (1992). Investigasi aktivitas antioksidan
dan
Isi tokoferol pada simplisia Cina buah-buahan dan biji-bijian. Food Science
(Taipai) 19: 12-24. Valdez LB, Lores Arnaiz S, Bustamante J, Alvarez S, Costa
LE
dan Boveris A. (2000). Radikal bebas kimia dalam sistem biologi. Penelitian
biologi 33 (2): 65-70. Wang H, Cao G dan Prior RL. (1996). Jumlah antioksidan
kapasitas buah-buahan. Jurnal Pertanian dan Kimia Makanan 44 (3): 701-705.
Wayner DDM, Burton GW, Ingold KU dan Locke S. (1985).
pengukuran kuantitatif dari total peroxyl kemampuan antioksidan perangkap
radikal dari plasma darah manusia oleh peroksidasi dikendalikan. FEBS Surat 187
(1): 33-37. Whitehead TP, Robinson D, Allaway S, Syms J dan Hale A.
(1995). Pengaruh konsumsi anggur merah pada kapasitas antioksidan serum. Kimia
klinik 41 (1): 32-35. Yoshikawa T, Toyokuni S, Yamamoto Y andNaitoY. (2000).
Radikal Bebas Kimia, Biologi dan Kedokteran. London: OICA Internasional,
47-49.
494
oleh tamu di 19 Januari 2015