Review: Selección de parámetros característicos involucrados en

la producción de carotenoides
P.Y. Rodríguez Cortés, L.A. Cadena Pinto, A.C. Angarita Gómez, L.T. Murillo Cordero,
J.G. Jaramillo Arango, P.A. Álvarez Vargas.
Resumen diferentes condiciones que se ajustaran a
la realidad colombiana, entre ellas: la
La necesidad de carotenoides en el
obtención del sustrato, al ser este un país
consumo humano destaca la importancia
agroindustrial, produce gran cantidad
de realizar estudios que permitan conocer
desechos orgánicos que pueden
su obtención de manera económica y
aprovecharse de manera rentable. Otro de
rentable, es por esto que se decide realizar
los criterios utilizados para la depuración
una revisión bibliográfica para encontrar
de la información, es el resultados los
parámetros óptimos como el
rendimientos obtenidos para cada
microorganismo(s) y sustrato(s) más
investigación de interés, pues una vez
adecuados en el contexto colombiano. Se
descartados aquellos que no cumplieran
investigan artículos que contienen
con los requerimientos del sustrato, se
información sobre microorganismos
evaluaron los restantes, comparando los
capaces de producir carotenoides a partir
rendimientos de producto con respecto a
de diferentes sustratos, con el objetivo de
biomasa y los rendimientos de producto
elegir un solo microorganismo capaz de
con respecto a sustrato. Una vez realizada
alcanzar una tasa elevada de producción
la comparación se determinó que el
de carotenoides con un sustrato de fácil
microorganismo con mayor capacidad de
obtención y bajo costo. Esto se realizó
producción de carotenoides fue la levadura
utilizando criterios que permitieran llegar a
Rhodotorula Mucilaginosa, utilizando
una conclusión clara dentro de la
como sustratos melaza y suero de leche.
búsqueda, es decir, fue preciso evaluar

1. Introducción átomos de carbono, formado a partir de

ocho unidades de isopreno. Este
Los carotenoides son compuestos
esqueleto básico puede modificarse por
naturales presentes en diversas
hidrogenación, deshidrogenación,
estructuras de plantas, animales, algas,
ciclación, migración del doble enlace,
hongos y bacterias; pigmentan algunas
acortamiento o extensión de la cadena,
flores, frutos (para favorecer la polinización
reordenamiento, isomerización, oxidación
y dispersión de semillas), algunas
o por combinaciones de estos procesos,
estructuras animales como plumas y picos
dando como resultado una gran variedad
de algunas aves, el exoesqueleto de
de estructuras. Los carotenoides
crustáceos y el músculo o la piel de
hidrocarbonados se denominan carotenos
algunos peces. [1]
y aquellos que contienen oxígeno se
Son considerados indispensables para la denominan xantofilas. [2]
vida, principalmente debido a las funciones
El rasgo característico de los carotenoides
que llevan a cabo en relación con la
es su cadena poliénica, que es un sistema
fotosíntesis. [1]
extenso de dobles enlaces conjugados,
La estructura básica de los carotenoides consiste en alternar enlaces carbono-
es un tetrapenteno simétrico y lineal, de 40 carbono simples y dobles. Esta cadena es
la responsable de la capacidad de estos
pigmentos de absorber luz en el visible, en
consecuencia, de su color. La longitud de
onda a la que absorben los carotenoides
aumenta con el número de dobles enlaces
conjugados [2]
Además, son famosos por su actividad
anticancerígena y antioxidante, su función
pro-vitamina A, su estabilidad a la luz,
calor y pH. Es por esto que se usan en
suplementos alimenticios, colorantes
alimentarios, aditivos cosméticos y
farmacéuticos. La demanda de
carotenoides aumenta año tras año en el
mercado global, aunque los carotenoides
sintetizados químicamente son los que
controlan el mercado, en la actualidad la
demanda de éstos obtenidos
naturalmente, aumenta debido al deseo de
productos orgánicos. Por esto el desarrollo
de manera natural de carotenoides se ha
convertido en un tema de gran
importancia. [2]
La levadura es un candidato potencial para
su producción gracias a su alta tasa de
crecimiento y fácil incubación. La levadura
roja del género Rhodotorula es
considerado un microorganismo
Antecedentes:
Los carotenoides son tetraterpenoides,
que consisten en derivados de isopreno
altamente insaturados. En general, esos
compuestos son la clase de pigmentos
más ampliamente distribuida en la
naturaleza, mostrando color amarillo,
naranja o rojo. Actúan como antioxidantes
protectores de la membrana que eliminan
eficazmente el 1 O 2(oxígeno molecular
singlete) y radicales peroxilo y la eficacia
antioxidante está aparentemente
relacionada con su estructura específica.
[23] A continuacion se citan algunas
investigaciones acerca de la producción de
carotenoides:
carotenogénico; los principales pigmentos
que ésta produce incluyen β-caroteno,
toruleno, y torularodina. En general, el
número de dobles enlaces conjugados en
los carotenoides relaciona
proporcionalmente su capacidad como
antioxidante. Actualmente el toruleno y la
torularodina no se encuentran disponibles
comercialmente, pero sus dos dobles
enlaces conjugados son dos veces más
que los del β-caroteno comercial. Zoz et al.
Indicó que el toruleno y la torularodina
pueden tener aplicaciones potenciales en
un futuro. [20]
En la actualidad, la tecnología para la
producción de carotenoides es robusta, el
problema que enfrenta son altos costos, ya
que los sustratos que se utilizan para la
producción de estos son de alto costo [20].
El objetivo principal del presente estudio
es la selección de un sustrato de bajo
costo que además ayude a mitigar efectos
medio ambientales producidos por
industrias teniendo en cuenta factores
como condiciones de operación, costos de
pretratamiento, rendimiento de biomasa
y/o producto y fácil acceso a
investigaciones previamente realizadas.
Asker y Ohta (2002) produjeron
carotenoides usando Haloferax
alexandrinus a diferentes concentraciones
de cloruro de sodio y en condiciones no
asépticas, encontraron que a una
concentración de cloruro de sodio entre
20-25% se evita una contaminación del
cultivo, por otro lado, demostraron también
que en cultivos de alta concentración de
cloruro de sodio mediante una lisis
espontánea con agua se pueden extraer
directamente los carotenoides de las
células. [45]
Cifuentes y col. (2003) determinaron las
condiciones óptimas para biomasa y
producción de astaxantina en
Haematococcus pluvialis, donde la más de los microorganismos más
alta producción de carotenoides de 4,9 prometedores para la producción
mg/L se obtuvo en cultivos pre-incubados comercial de carotenoides mediante el uso
en nitrato a luz baja. [46] de desechos agrícolas como una fuente de
carbono barata.
Aksu Z.,Tugba A. (2005) determinaron
que la levadura R. Mucilaginosa sería uno

2. Ruta metabólica los isopreniodes. La vía de biosíntesis más

conocida de IPP es la del mevalonato que
Los carotenoides comparten las etapas a partir de acetil-coenzima A produce IPP,
iniciales de su biosíntensis, con las vías de teniendo como intermediarios la
síntesis de una gran variedad de hidroximetilamina y la D-1-desoxixilulosa.
isoprenoides y sus derivados: Esta vía se ha descrito en eubacterias, en
monoterpenos, sesquiterpenos, algas verdes, en plantas superiores, en
giberelinas y esteroles. El isopentenil algas unicelulares y en cianobacterias.
pirofosfato (IPP) es el precursor de todos

Fig 1. Ruta metabólica para biosíntesis de carotenoides

3. Selección de factores para establecer la ruta de producción de carotenoides
Tabla 1. Análisis de factores como año de publicación del estudio, accesibilidad del sustrato y
sobrecostos operacionales que impidan seleccionar un proceso de producción de carotenoides.

Microorganismo Sustrato Observaciones Referencia

Efluentes de [4]
cervecería
Medio preparado Realizado en 2001 [5]
de agua de mar

Mosto de uva Realizado en 2000 [6]

concentrado
Salmuera [7]
fermentada de
rábano
Sustrato obtenido de [8]
Glicerol crudo una planta de
biodiesel.
Rhodotorula glutinis Glucosa [9]
Residuos de harina Sustrato de Tailandia [10]
de frijol mungo y de USA
hidrolizado
Melaza de caña de Estudio realizado en [11]
azúcar 2001.
Residuos de Sustrato de acceso [12]
núcleos de limitado.
nísperos
Melaza y suero de [13]
leche
Residuos [14]
agroindustriales
Mosto de uva [15]
concentrado
Agua de mar [16]
artificial
Jarabe de maíz [17]
hidrolizado
Malta [18]
Solución de papa y [19]
glicerol
Desechos [20]
alimenticios

Rhodotorula Leche desnatada, Altos costos de [21]

mucilaginosa dextrosa-papa pretratamiento.
Residuos [22]
agrícolas:
Melaza
Café molido [23]
 Rhodotorula Suero de leche y
glutinis , Rhodotorula extracto de patata [24]
mucilaginosa,
Sporobolomyces roseus
Rhodotorula rubra Extractos de turba Realizado en 1993. [25]
Suero ultrafiltrado Realizado en 2004. [26]
R. Mucilaginosa Malta de agar de [27]
R. Graminis extracto de malta
R. Glutinis YM
R. Minuta
Sporobolomyces
Sporobolomyces Glicerol crudo y Biorreactor [28]
ruberrimus puro especializado hecho
para la investigación.
Sporidiobolus Glicerol, licor de Equipos [29]
pararoseus maceración de especializados de
maíz y agua de difícil acceso.
arroz precocida
Jugo de Yucca Sustrato propio de [30]
fillifera México.
Xanthophyllomyces Realizado en 2006. [31]
dendrorhous Residuos de
mostaza
hidrolizada

Bacillus megaterium y Café molido [32]

Burkholderia cepacia
Phaffia rhodozyma Hidrolizados de Realizado en 1998. [33]
eucalipto
Phaffia rhodozyma Hidrolizado de Realizado en 1998. [34]
Desmodesmus sp. F51 turba
Medio sintético
Bristol Modificado

[35]
Scenedemus sp. Medio Basal
Modificado
Medios sintéticos y
reactores
[36]
especializados que
Coccomyxa acidophila Urea representan altos
suplementada costos de operación.

[37]
Coccomyxa onubensis Medio sintético K9

[38]
 Chlorella sorokiniana Medio Sintético
Arnon Modificado
Chlorella minutissima Medio Sintético
BBM modificado
MCC-27
Scenedesmus Medio Sintético
incrassatulus EDTA
Autumnale phormidium Aguas residuales
de matadero
Después de realizar una exhaustiva
investigación acerca de los antecedentes en
la producción de carotenoides realizadas por
expertos en el tema, y teniendo en cuenta
que en el presente estudio se realiza una
comparación para depurar la información
obtenida examinando en primer lugar
aspectos considerados de gran importancia,
como son, el microorganismo, el sustrato, su
obtención y el año de publicación, se hace un
análisis detallado de cada uno de estos
factores referido a cada artículo de
investigación encontrado en la bases de
datos de la Universidad Industrial de
Santander.
En la tabla 1 se observa que una columna
lleva el nombre de “observaciones”, allí se
expone la razón por la cual no es favorable
examinar a fondo el artículo en cuestión, una
de las principales razones es la manera de
obtener el sustrato, ya que en este contexto
se deben referenciar procesos de obtención
que se adapten a la realidad colombiana.
En algunos de los artículos, adquieren el
sustrato de grandes industrias que no se
encuentran localizadas en el país, como por
ejemplo una planta de biodiesel [8]; en otros
de estos, aunque no especifican en que
industria o localidad es encontrado el
sustrato, sí especifican que se encuentra en
países como Estados Unidos [10] y México
[39]
[40]
[41]
Sustrato no [42]
caracterizado.
[30], y por tanto son de difícil acceso; o
simplemente porque los autores no
establecen cual fue el sustrato utilizado [9].
Este elemento es minuciosamente analizado
debido a que hasta 80% del costo del cultivo
microbiano es causado por la fuente de
carbono requerida, proveniente del sustrato
[4] y se usa para alimentar el microorganismo
que efectúa la producción de carotenoides,
esto requiere el fácil acceso y bajo costo del
sustrato.
Otro de los motivos que hacen desfavorable
emplear cierto artículo de investigación es su
correspondiente año de publicación, dado
que una de las restricciones del presente
estudio es emplear publicaciones elaboradas
hace 10 años o menos, esto para contar con
información actualizada y asegurar
veracidad en los resultados.
Fueron encontradas también en la literatura
diversas publicaciones que trabajan con
microalgas y alcanzan el producto deseado,
sin embargo, todos los fermentadores en los
que se usan este tipo de células requieren
una incidencia de radiación, con un reactor
específico (PhotoBioreactor PBR), un
burbujeo constante de aires enriquecidos y
en algunos casos agitación, o muchos otros
requieren costos elevados de
pretratamientos [43]; por tanto, son de las
opciones menos viables debido a que todo lo
 anterior repercute en costos operacionales y
en lazos de control mucho más rigurosos,
esto hace prescindir de enfatizar en ese tipo
de métodos para obtener carotenoides.
Luego de haber analizado los aspectos
anteriormente descritos, se resalta un factor
que se ve reflejado claramente en la Tabla 1,
el hecho de que, en numerosas
investigaciones, y a su vez en la mayoría de
las expuestas allí, se emplean
repetitivamente dos microorganismos en
especial: Rhodotorula Glutinis y Rhodotorula
mucilaginosa. Estos pertenecen al reino de
los hongos, específicamente a las levaduras,
división Basidiomycota, Clase
Pucciniomicetos, orden Sporidiobolaceae, su
género como sus nombres lo indican es
Rhodotorula, y a pesar de que existen
aproximadamente 80 especies, en este caso
las de interés son Glutinis y Mucilaginosa. El
Género Rhodotorula es un habitante común
del ambiente, este tipo de microorganismo es
considerado mesófilo, neutrófilo y trabaja en
presencia de oxígeno, se puede cultivar a
partir de muestras de suelo, agua, leche
zumos de fruta, aire, etc. Así mismo se
conoce que las levaduras Rhodotorula
producen carotenoides característicos, como
β-caroteno, toruleno, y torularhodina en
diversas proporciones. R. mucilaginosa es
productora de carotenoides y sintetiza β-
caroteno como el principal carotenoide [22] y
R. Glutinis también es una levadura que
puede producir ciertos carotenoides, a saber,
β-caroteno, torularodina, y toruleno en el
curso de la fermentación microbiana. [4]
Por estas razones, se seleccionan estos
microorganismos como principal objeto de
análisis en la producción de carotenoides, y
se resalta la cantidad considerable de
información que existe acerca de ellos,
siendo el sustrato utilizado el siguiente
aspecto a examinar a fondo en los artículos
que trabajan con esos microorganismos.

Tabla 2. Análisis de sustrato utilizado, fuente de nitrógeno, condiciones de operación y tipo de

reactor en los diferentes procesos de obtención de carotenoides.

Obtención de Fuente de Condiciones de

Microrganismo Sustrato Reactor Referencia
sustrato N operación
Luz de lámparas
Rhodotorula No se Sulfato de LED y
Glucosa Batch de 5L [9]
glutinis especifica. amonio temperatura de
30°C
pH 6, T 30 ° C,
tasa de aireación,
Melaza y Ankara Sugar concentración
Rhodotorula Sulfato de
suero de Industry inicial de sulfato Batch [13]
glutinis amonio
leche (Turquía). de amonio y de
aceite de semilla
de algodón
Mosto de Reactor
Ácido
Rhodotorula uva Residuos de Mantenido en modelo LT-V
nicótico y
glutinis (DBVPG concentrado viñedos MGYP agar a 25- (Adolf Kuhner [6]
nitrógeno
3853) europeos 35 , pH 5 AG, Birsfelden,
soluble
Suiza)
Rhodotorula Obtenidos de Batch, con
Agua de No se Salinidad de 34%,
glutinis NCIM himedia en agitación y [16]
mar artificial especifica. pH 8 y 28° C.
3353 Mumbai, India aireación
 Bioreactor de
tanque agitado
Suministrada Nitrógeno de 3 l (Biostat
Salmuera 30 ° C, ph 6 y
Rhodotorula por una fábrica presente B, B. Braun
fermentada 80% de oxígeno [7]
glutinis DM28 local de en la Biotechnology
de rábano disuelto
pepinillos salmuera International,
Goettingen,
Alemania)
Nitrógeno
Rhodotorula
Jarabe de Residuo disuelto Temperatura 30 Batch – Feed
glutinis DBVPG [17]
maíz agroindustrial en el C, ph 5. batch
3853
sustrato.
Amonio
Efluentes Recolectado en Temperatura
R. Glutinis presente Erelnemeyer,
de una cervecería 25°C, agitación, [4]
(ATCC 15125) en el agua por lotes
cervecería local. pH 5
residual
pH, temperatura,
humedad,
Rhodotorula Sulfato de Biorreactores [18]
Malta concentración de
glutinis amonio de columna
inóculo y de
inductor.
pH, temperatura,
tasa de aireación,
concentraciones
iniciales de
Rhodotorula Industria de Sulfato de azúcar, sulfato de Nivel de escala [22]
Melaza
mucilaginosa azúcar amonio amonio y de lote –batch
activador (aceite
de semilla de
algodón y Tween
80
La melaza de
caña de azúcar
Desechos fue provista por
Nitrógeno
Rhodotorula alimenticios: la Universidad
presente Batch con
mucilaginosa F- Kétchup y Nacional de Ph 5 y 25 ° C [20]
en los agitación
1 melaza de Ciencia y
desechos
caña Tecnología
Yunlin, Yunlin,
Taiwán)
El suero se
R. Glutinis (CCY
obtuvo de la
20-2-26,
industria láctea Temperatura28 °
). R. Suero de
y el extracto de C, iluminación
Mucilaginosa leche y Sulfato de
papa se obtuvo permanente, Batch de 2L [24]
(CCY 20-7- extracto de amonio
como agitación y
31) S. papa
suplemento aireación
Roseus (CCY 19-
alimenticio
4-8)
microbiano
 R. Graminis-
Peptona 25ºc durante 5 Batch - matraz,
125
(caldo de días, agitación, con agitación,
R. Glutinis Malta [27]
extracto sin iluminación, a pequeña
S.Roseus
de malta) pH alrededor de 6 escala
R. mucilaginosa
R. Glutinis 25-30°C, 24 h, Batch - matraz,
Mosto de
R. 250 ml con 50 con agitación,
uva [15]
Mucilaginosa ml del medio de a pequeña
concentrado
R. Rubra cultivo escala
Papa de
variedad Irga.
El glicerol fue Batch de
R. Glutinis var. Extracto de
obtenido de la Proteínas 28 ºc, 4.0 < ph < capacidad 0.5
Rubescens papa y [19]
empresa de la papa 7.0 L, volumen de
LOCKR13 glicerol
Avantor reacción 0.1 L
Performance
Materials, Inc.
BIOSTAT
S. Roseus, R. Concentración de
Máquina (biorreactor de
Mucilaginosa, R. Café molido Sulfato de azúcares [23]
automática de laboratorio) por
Glutinis, C. agotado amonio iniciales, Tiempo
café lote y lote
Capitatum de cultivo
alimentado

En este orden de ideas, esta discusión tuvo
como eje principal la comparación de los
sustratos utilizados por cada grupo de
investigadores, es decir, tipo de sustrato, su
procedencia y asequibilidad, así como
también el impacto económico y ambiental
que implica su uso.
Por ejemplo, si sustratos como desecho de
kétchup [20] son contemplados en el
contexto colombiano, no representan una
problemática ambiental importante que
requiera implementación de estrategias
mitigantes, esto debido a que dicha industria
posee protocolos robustos de conservación
y almacenaje, tanto, que la pérdida del
producto no es lo suficientemente importante
para alimentar un biorreactor, además,
cuando hay fallos en el lote poseen rutas
específicas para su disposición, por ejemplo
compostaje para generar abono para sus
cultivos de tomate. Ahora, al analizar el
mosto de uva como posible sustrato [14] [15]
no se aprecia un suministro importante en la
región, debido a que el cultivo de uva es
escaso y solo una pequeña fracción de su
producción es destinada a la elaboración de
vinos, se observa que tiene un gran potencial
de aplicación en países donde la producción
de vino represente una parte significativa de
su economía, es decir, se produzca en
grandes proporciones. Por otro lado, se
analiza el agua de mar, [16] inicialmente se
destaca que, si bien es una materia prima
abundante, los resultados no generan
confianza debido a que los investigadores
hacen una simulación de dicho sustrato, en
lugar de obtenerlo en su estado natural y
esto limita a escala teórica su composición.
También se observa salmuera fermentada
de rábano [7] como un posible sustrato para
la producción de carotenoides, sin embargo,
ésta usa el vegetal en su estado natural, y al
ser empleado como sustrato, trae consigo
altos costos, comparado con otro tipo de
sustrato.
Sustratos como residuos de cervecería [4],
residuos de café, [23] suero de leche y
extracto de papa [19] comparten importancia
en la industria colombiana, estas industrias
generan desechos que requieren un
tratamiento para su correcta expulsión al
ambiente, sin embargo, pueden ser
aprovechados en la producción de
carotenoides asignándoles un valor
agregado, esto quiere decir que son
sustratos con un gran potencial en el
presente estudio. Ahora, al considerar la
melaza como sustrato [13],[22] se puede
afirmar que, si bien tiene una demanda fija,
principalmente como aditivo agropecuario,
puede ser aprovechado por su alto contenido
de azucares, fácil obtención y bajo costo, en
consecuencia, representa también un
sustrato potencial en la producción de
carotenoides.
Tabla 3. Análisis de rendimientos
Luego de examinar la fuente de nitrógeno se
observa que la más utilizada en este tipo de
indagaciones es el sulfato de amonio, pero
cabe destacar que además de esta se utiliza
también en nitrógeno contenido en el
sustrato, por tanto este aspecto no es
relevante en la selección del proceso de
obtención del producto en cuestión; también
se nota que condiciones de operación como
temperatura y pH están alrededor de 30°C y
6 respectivamente; en cuanto al tipo de
reactor, predomina la utilización del reactor
batch teniendo en cuenta que es necesario
agregar aireación y agitación al proceso.

Rendimiento
Microrganismo Sustrato 𝒀𝑿/𝑺 𝒀𝑷/𝑿 𝒀𝑷/𝑺 Referencia

Melaza y
R. glutinis suero de 35 mg/g 11,1 mg/g [13]
leche
Melaza y 35,5 mg/g 13,3 mg/g
R. mucilaginosa suero de [22]
leche

Efluente de 0,074 µg/g 0,743 mg/g

R. glutinis (ATCC 15125) [13]
cervecería

R. Glutinis(CCY 20-2- Suero de R. glutinis:

26) leche y 1,022 mg/g
[24]
R. Mucilaginosa (CCY 20- extracto de R.
7-31) papa. mucilaginosa:
1,866 mg/g

R.glutinis: R. glutinis:
R. glutinis: 0.16 mg/g 0.42 mg/g
0.40 g/g
R. mucilaginosa, Café molido
[23]
R. glutinis. agotado R. R. R.
mucilaginosa: mucilaginosa: mucilaginosa:
10.33 g/g 0.94 mg/g 1,76 mg/g
Para finalizar, el ultimo parámetro a evaluar
es el rendimiento máximo (𝑌𝑋/𝑆 , 𝑌𝑃/𝑋 , 𝑌𝑃/𝑆 ),
se observa que no todas los estudios
reportan los mismos, por tanto, se analiza
únicamente el que relaciona la producción de
carotenoides con respecto a la biomasa
(𝑌𝑃/𝑋 ). El sustrato que reporta el menor
rendimiento es el efluente de cervecería [4],
con un valor de 0,074 µg/g; por ende ya no
se tiene en cuenta en el proceso de
selección.
En los estudios con café molido agotado [8]
y suero de leche-extracto de papa [7], en los
que se realiza la comparación directa de las
dos especies de Rhodotorula, se obtiene
para ambos casos que el rendimiento de R.
mucilaginosa es mayor, con valores de 0,94
mg/g y 1,866 mg/g respectivamente. Este
resultado se observa también en los estudios
realizados con melaza y suero de leche [11],
[10] como sustrato, éstos fueron realizados
por los mismos autores, bajo las mismas
condiciones de operación; esto es relevante
pues es posible comparar directamente la
capacidad de producción de cada levadura,
llegando a la conclusión de que R.
mucilaginosa presenta también un mayor
rendimiento, no solo con respecto a la
biomasa sino también con respecto al
sustrato.
Teniendo en cuenta el análisis anteriormente
realizado se concluye que el microrganismo
que posee una mayor capacidad de
producción de carotenoides es R.
mucilaginosa utilizando melaza y suero de
leche.
4. Métodos de extracción
Teniendo en cuenta que los carotenoides
son productos intracelulares, existen
diferentes técnicas para extraerlos de las
células de Rhodotorula:
4.1 Técnica química
Se realiza utilizando sulfóxido de dimetilo
(DMSO) a 60°C, se añadie a la biomasa y se
incuba durante 1 hora [44]
4.2 Técnicas físicas y mecánicas
4.2.1. Ultrasonido
Se prepara una solución de biomasa en
etanol o acetona y se sometió a ciclos de
ultrasonidos de 40 kHz durante 30 [44]
4.2.2. Microonda
Se prepara una solución de biomasa en
agua, etanol o acetona, y se somete a un
tratamiento con microondas (600 W y 90 °C
durante 15 min). [44]
4.2.3. Molino de perlas
Se disuelve la biomasa en agua destilada, y
se le somete a trituración por medio de un
molino de perlas (1mm de diámetro).
(DINO® MILL ML-090736) [44]
4.3 Técnicas enzimáticas
4.3.1Lisis enzimática
Se lleva a cabo utilizando la enzima β-1,3-
glucanasa a partir de Trichoderma
harzianum, sobre la pared celular de las
Rhodotorula. [44]
Después la biomasa se somete a presencia
de acetato de sodio, la mezcla se incubó a
55°C con agitación. [44]
Los restos celulares se recuperan por medio
de centrifugación, el sobrenadante se
desechó y se añadió acetona para la
extracción de los carotenoides. La
concentración de carotenoides se determina
por medio de espectrofotometría a 470 nm.
[44]
5.Conclusiones
Teniendo en cuenta el análisis de cada
parámetro característico del proceso, se
concluye que el microrganismo que posee
mayor capacidad de producción de
carotenoides es R. mucilaginosa utilizando
melaza y suero de leche, ya que, en el
contexto colombiano existe una alta tasa de
producción de caña de azúcar, y a su vez de
panela, teniendo en cuenta que la melaza es
un subproducto en la fabricación de ésta, se
asegura fácil obtención y bajo costo del
sustrato, al igual que el suero de leche,
puesto que en varias zonas del país la
industria lechera tiene gran importancia y la
eliminación de éste se convierte en un
problema de contaminación, por lo tanto, el
uso de suero de leche como un medio
económico para los procesos de
fermentación ha sido durante mucho tiempo
de interés industrial. La lactosa en el suero
es una fuente de carbono adecuada para
muchos microorganismos. Además, el suero
de leche es rico en minerales y contiene
vitaminas que pueden proporcionar
nutrientes valiosos para estimular el
crecimiento celular y la formación de
productos. En este proceso se establece el
sulfato de amonio como fuente de nitrógeno,
y trabaja a temperatura de 30°C y pH de 6 en
un reactor batch con agitación y aireación
como condiciones de operación.
Referencias
[1] CAROTENOIDES. (2012). Recuperado
de
www.sanutricion.org.ar/files/upload/files/car
otenoides.pdf
[2] Alquézar B.(2007).Caracterización
Bioquímica y Molecular de la
Carotenogénesis en Frutos Cítricos (Tesis
de doctorado). Universidad de Valencia.
Valencia, España.
[3] Los pigmentos vegetales y la fotosíntesis.
Recuperado de
http://passel.unl.edu/pages/informationmodu
le.php?idinformationmodule=1011797732&t
opicorder=4&maxto=10
[4] Schneider T, Graeff-Honninger S, French
W, Hernández R, Merkt N, Claupein W,
Hetrick M, Pham P. Lipid and carotenoid
production by oleaginous red yeast
Rhodotorula glutinis cultivated on brewery
effluents. Energy. 61 (2013) 34-43.
[5] Bhosale, P., & Gadre, R. Short
communication: Production of β-carotene by
a Rhodotorula glutinis mutant in sea water
medium. Bioresource Technology,
76(2001),53-55
[6] Buzzini, P. An optimization study of
carotenoid production by Rhodotorula
glutinis DBVPG 3853 from substrates
containing concentrated rectified grape must
as the sole carbohydrate source. Jou
[7] Malisorn, C., & Suntornsuk, W.
Optimization of β-carotene production by
Rhodotorula glutinis DM28 in fermented
radish brine. Bioresource Technology,
99(7)(2008), 2281-2287
[8] Saenge C., Cheirsilp B,
Tachapattaweawrakulb S, Burtoom T.
Potential use of oleaginous red
yeast Rhodotorula glutinis for the
bioconversion of crude glycerol from
biodiesel plant to lipids and carotenoids.
Process Biochemistry. 46 (2011) 210-218.
[9] Zhang Z., Zhang X., Tan T. Lipid and
carotenoid production by Rhodotorula
glutinis under irradiation/high-temperature
and dark/low-temperature cultivation.
Bioresource Technology. 157 (2014) 149-
153.
[10] J. Tinoi, N. Rakariyatham, R.L. Deming.
Simplex optimization of carotenoid
production by Rhodotorula glutinis using
hydrolyzed mung bean waste flour as
substrate. Process Biochemistry. (2004)
[11] Bhosale P. ,Gadre R, β-carotene
production in sugarcane molasses by a
rhodotorula glutinis mutant. Journal of
Industrial Microbiology and Biotechnology 26
(2001) 327-332
[12] Takis M, Erdal S. Production of
carotenoids by Rhodotorula glutinis MT-5 in
submerged fermentation using the extract
from waste loquat kernels as substrate.
Journal of the Science of Food and
Agriculture. 91 (2011) 1440-1445
[13] Aksu Z.,Tugba A. Production of
carotenoids by the isolated yeast
of Rhodotorula glutinis. Biochemical
Engineering Journal. 35 (2007) 107-113
[14] Buzzini P., Martini A..Production of
carotenoids by strains of Rhodotorula glutinis
cultured in raw materials of agro-industrial
origin Bioresource Technology 71 (1999)
41±44
[15] Buzzini P. An optimization study of
carotenoid production by Rhodotorula
glutinis DBVPG 3853 from substrates
containing concentrated rectificado grape
must as the sole carbohydrate source.
Journal of Industrial Microbiology &
Biotechnology (2000) 24, 41-45
[16]Bhosale P, Gadre R.Production of beta-
carotene by a Rhodotorula glutinis mutant in
sea water medium. Bioresource technology.
76(2007) 53-55
[17] Buzzini P, Batch and fed-batch
carotenoid production by Rhodotorula
glutinis- Debaryomyces castellii co-cultures
in corn syrup.Journal of Applied
Microbiology 90(2008) 843-847
[18] Hernández A, Montañez J, Martinez C,
Roodriguez R, Aguilar C. Carotenoid
production by Rhodotorula glutinisYB-252 in
solid-state fermentation. Food Bioscience. 7
(2014) 31-36.
[19] Anna M., K., Stanisław, B., Agnieszka,
K., Joanna, B., Iwona, G., Anna, B., & ...
Lidia, R. (2017). Effect of initial pH of medium
with potato wastewater and glycerol on
protein, lipid and carotenoid biosynthesis by
Rhodotorula glutinis. Electronic Journal Of
Biotechnology, 27 (2017), 25-31
[20] Cheng, Y., & Yang, C. Using strain
Rhodotorula mucilaginosa to produce
carotenoids using food wastes. Journal Of
The Taiwan Institute Of Chemical Engineers,
61(2016), 270-275.
[21] Yoo, A. Y., Alnaeeli, M., & Park, J. K.
Production control and characterization of
antibacterial carotenoids from the yeast
Rhodotorula mucilaginosa AY-01. Process
Biochemistry, 51 (2016), 463-473
[22] Aksu Z.,Tugba A. Carotenoids
production by the yeast Rhodotorula
mucilaginosa: Use of agricultural wastes as a
carbon source. Process Biochemistry. 40
(2005) 2985-2991
[23] Petrik S.,Obruca S., Benesova P., Marov
I. Bioconversion of spent coffee grounds into
carotenoids and other valuable metabolites
by selected red yeast strains. Biochemical
Engineering Journal. 90 (2014) 307-315
[24] Marova I., Carnecka M., Halienova A.,
Certik M., Dvorakova T., Haronikova A. Use
of several waste substrates for carotenoid-
rich yeast biomass production. Journal of
Environmental Management. 95 (2012) 338-
342
[25] Martin A, Lu C, Patel T. Growth
parameters for the yeast Rhodotorula rubra
grown in peat extracts. Journal of
Fermentation and Bioengineering. 76 (1993)
321-325
[26] Simova E, Frengova G, Beshkova D.
Synthesis of carotenoids by Rhodotorula
rubra GED8 co-cultured with yogurt starter
cultures in whey ultrafiltrate. Journal of
Industrial Microbiology and Biotechnology.
31 (2004) 115-121
[27] R. Maldonade, B. Rodriguez-
Amaya,R.P. Scamparini. Carotenoids of
yeasts isolated from the Brazilian ecosystem.
Food chemistry. 107 (2008) 145–150
[28] Cardoso L, Jackelb s, Karp S,
Framboisier X, Chevalot L, Marc l.
Improvement of Sporobolomyces ruberrimus
carotenoids production by the use of raw
glycerol. Bioresource Technology.200(2016)
374-379
[29] ValdugaE, Rausch A, Cence K, Colet
R, Tiggemann L, Zeni J, Toniazzo
G.Carotenoids production from a newly
isolated Sporidiobolus pararoseus strain
using agroindustrial substrates. Biocatalysis
and Agricultural Biotechnology 3(2014)207-
214.
[30] Luna C.H., Ramírez J., Pelayo C., Femat
R., Herrera E. Batch and fed-batch modeling
of carotenoids production
by Xanthophyllomyces
dendrorhous using Yucca fillifera date juice
as substrate. Biochemical Engineering
Journal.53 (2010) 131-136.
[31] Tinoi J, Rakariyatham N, Deming R.
Utilization of mustard waste isolates for
improved production of astaxanthin by
Xanthophyllomyces dendrorhous. Journal of
Industrial Microbiology and Biotechnology.
33 (2006) 309-314
[32] Obruca S, Benesova P, Kucera D, Petrik
S, Marova I. Biotechnological conversion of
spent coffee grounds into
polyhydroxyalkanoates and carotenoids.
New Biotechnology. 32 (2015) 569-574
[33] Parajó J, Santos V, Vázquez M.
Production of carotenoids by Phaffia
rhodozyma growing on media made from
hemicellulosic hydrolysates of Eucalyptus
globulus wood. Biotechnology and
Bioengineering. 59 (1998) 501-506
[34] Vázquez M, Martin A. Optimization of
Phaffia rhodozyma continuous culture
through response surface methodology.
Biotechnology and Bioengineering. 57 (1998)
314-320
[35] Xie, Y., Ho, S., Chen, C. N., Chen, C.,
Ng, I., Jing, K., Chang, J. S., & Lu, Y. (2013).
Phototrophic cultivation of a thermo-tolerant
Desmodesmus sp. for lutein production:
effects of nitrate concentration, light intensity
and fed-batch operation. Bioresource
Technology, 144 (2013), 435-444
[36] Yen, H., Sun, C., & Ma, T. (2011). The
comparison of lutein production by
Scenesdesmus sp. in the autotrophic and
the mixotrophic cultivation. Applied
Biochemistry And Biotechnology, 164(3),
353-361.
[37] Carlos, V., Carlos, C., Maria, C., & Jose
Maria, V. (2010). Enhanced Productivity of a
Lutein-Enriched Novel Acidophile Microalga
Grown on Urea. Marine Drugs, 9 (2010), 29-
42 (2010).
[38] Vaquero, I., Ruiz-Domínguez, M. C.,
Márquez, M., & Vílchez, C. (2012). Cu-
mediated biomass productivity enhancement
and lutein enrichment of the novel microalga
Coccomyxa onubensis. Process
Biochemistry, 47 (2012), 694-700.
[39] Maria Angeles, V., Herminia, R., Rosa,
L., Baldo F., C., Irina, O., & Inmaculada, C.
(2011). Enhancement of Lutein Production in
Chlorella sorokiniana (Chorophyta) by
Improvement of Culture Conditions and
Random Mutagenesis. Marine Drugs, 9
(2011), 1607-1624.
[40] Dineshkumar, R., Dhanarajan, G., Dash,
S. K., & Sen, R. (2015). An advanced hybrid
medium optimization strategy for the
enhanced productivity of lutein in Chlorella
minutissima. Algal Research, 7 (2015), 24-
32.
[41] García-Cañedo, J., Cristiani-Urbina, E.,
Flores-Ortiz, C., Ponce-Noyola, T., Esparza-
García, F., & Cañizares-Villanueva, R.
(2016). Batch and fed-batch culture of
Scenedesmus incrassatulus: Effect over
biomass, carotenoid profile and
concentration, photosynthetic efficiency and
non-photochemical quenching. Algal
Research, 13 (2016), 41-52
[42] Rodriguez Daniel, Flores E, Barin J,
Mercadante A, Lopes E, Zepka L.
Production of carotenoids from microalgae
cultivated using agroindustrial wastes, Food
Research International. 65(2014) 144-148.
[43] Přibyl, P., Cepák, V., Kaštánek, P., &
Zachleder, V. Elevated production of
carotenoids by a new isolate of
Scenedesmus sp. Algal Research, 11
(2015), 22-27
[44] Hernández A., Navarro V., Aguilar O.,
Aguilar M., Aguilar C. Carotenoids extraction
from Rhodotorula glutinis cells using various
techniques: A comparative study. Indian
Journal of Experimental Biology, 55 (2017)
479-484
[45] Asker D, Ohta Y. Production of
canthaxanthin by Haloferax alexandrinus
under non-aseptic conditions and a simple,
rapid method for its extraction. Appl
Microbiol Biotechnol. 58(2002) 743–750.
[46] Cifuentes A, González M, Vargas S,
Hoeneisen M, González N. Optimization of
biomass, total carotenoids and asthaxanthin
production in Haematococcus pluvialis
Flotow strain Steptoe under laboratory
conditions. Biol. Res. 36 (2003) 343-357.