EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE TÉ NEGRO EN LA

SÍNTESIS DE NANOPARTÍCULAS DE PLATA

Resumen: El presente documento presenta la síntesis de nanopartículas de plata mediante un método

químico y sustentable. Las nanopartículas mencionadas han sido utilizadas potencialmente para
aplicaciones de diversos procesos industriales y tecnológicos, pero su síntesis ha llevado varias
desventajas y mediante el proceso que se plantea a continuación se busca resolver dicha problemática,
además de ser capaz de observar el efecto que poseen los reactivos utilizados en dicha síntesis.

1. Introducción
La nanotecnología como término, es un concepto
relativamente nuevo, pero su campo de trabajo ha
sido explotado desde hace siglos aunque ciertamente
no era intencionado​[1]​.
El primer ejemplo conocido es la copa de bronce
Lycurgus del siglo IV d.C. Dicha copa está
compuesta por una aleación de nanopartículas (NPs)
de plata y de oro en una proporción 7:3 con tamaños
que aproximados a 70 nm. Esta mezcla de NPs
metálicas le da a la copa la peculiaridad de dispersar
la luz verde y transmitir luz roja​[1] siendo,
respectivamente Ag y Au los causante del cambio de
color que a tantos atrae.
Como caso específico, las NPs de plata (AgNPs)
poseen diversas aplicaciones ya sean biomédicas
como antimicrobiano (virus, bacterias y hongos) y
cicatrizante; o en aplicaciones destinadas a
consumibles diarios, tales como detergentes
purificadores de agua​[1]​; en la industria textil para
manufacturar prendas de vestir e incluso se hace uso
de ellas en el campo electrodoméstico formando parte
de superficies y baterías​[2].
La síntesis de NPs se pueden clasificar
principalmente en dos categorías: ​top-down ​y
bottom-up​. El primer método, se genera cuando
materiales de tamaño macroscópico se disgrega en
piezas más pequeñas de forma uniforme, hasta
alcanzar un tamaño nanométrico. Esta técnica es
utilizada en industria, ya que es de bajo costo, simple
de llevar a cabo y posee un alto rendimiento; sin
embargo, es una técnica menos reproducible y
homogénea. Por otro lado, la segunda categoría
(​bottom-up)​ se caracteriza en la síntesis de NPs por
medio de la nucleación de átomos, los cuales crecen
hasta tener dimensiones nanométricas​[3,4]​ (Fig. 1).
Figura 1. Síntesis de AgNPs por ​bottom-up​. Mecanismo de
formación de AgNPs a partir de la reducción química de nitrato de
plata (AgNO​3​).
La mayoría de los métodos desarrollados están
asociados con ciertas desventajas, como la
participación de productos químicos peligrosos, los
requisitos de alta energía, el aumento de la toxicidad
ambiental y la ineficacia de los costos​[5]​. Por ello, la
síntesis verde de NPs metálicas ha llamado la
atención como una alternativa que se contrapone a
tales problemáticas.
Existen diversas metodologías para la síntesis de NPs
metálicas, pero generalmente, esta se basa en la
reducción de una sal metálica en presencia de un
agente reductor y un estabilizador ​[1,6]​.
Las plantas contienen una amplia gama de
metabolitos secundarios, como los fenólicos,
terpenoides, polisacáridos y flavonoides, que tienen
una capacidad redox. Por lo tanto, es ideal para
utilizarlo en una síntesis de NPs​[7]​.
El té verde y el negro son productos obtenidos de
Camellia sinensis​, la cual es una fuente rica de
polifenoles y sus moléculas biológicas actúan como
agentes reductores y limitadores durante la síntesis de
NPs metálicas ​[8]​.
El preciso control del tamaño es extremadamente
importante, pues de acuerdo al tamaño de las NPs
cambian sus propiedades​[9]​. Una forma de controlar la
distribución de tamaños y la forma o morfología de
las nanopartículas pueden ser variando la
concentración de los reactantes, del reductor y del
estabilizante así como la naturaleza del medio
dispersante​[10]​.
Por ello, es de suma importancia conocer el efecto de
la concentración de té negro en la síntesis de NPs.
Para su estudio se realizó una síntesis de AgNPs
usando dos concentraciones distintas de té negro
como agente reductor y agente estabilizante, de esa
forma luego se procedió a la caracterización de las
NPs mediante espectrofotometría, microscopía
electrónica de barrido (SEM) y microscopía
electrónica de transmisión (TEM).
2. Materiales y métodos
2.1 Materiales
Agitador magnético, 2 vasos precipitados de 25 mL,
celda espectrofotométrica de cuarzo con paso óptico
de 1 cm, espectrofotómetro Jasco V730, pipeta,
propipeta y micropipeta de 1 mL, barra magnètica de
2 cm, centrífuga Heraeus Megafuge serie 16, Quanta
TM​
250 FEG (Scanning Electron Microscope).
2.2 Metodología
2.2.1 Preparación de distintas concentraciones de
Té negro Supremo.
A un vaso precipitado de 200 mL, se le añaden 125
mL de agua mili Q y 0,1018 g de Té Royal
Darjeeling o 0,5011 g del compuesto ya mencionado.
Al sistema se le añade una barra de agitación y se
coloca sobre un agitador magnético, con este equipo
se mantiene con agitación constante durante sesenta
segundos. Luego, para finalizar, se filtra la solución
acuosa trasvasando el líquido a un nuevo vaso
precipitado.
El procedimiento descrito entrega una concentración
de té negro efectiva igual a 0,8144 g/L y 4,0088 g/L,
respectivamente.
2.2.2 Síntesis de nanopartículas de plata mediante
un método químico.
En un vaso precipitado de 25 mL se añaden 3
mililitros de AgNO​3 (0,1 M), debido a que este
compuesto es fotosensible, se procura cubrir la
solución evitando la exposición a luz directa durante
el procedimiento.
La solución se sitúa sobre la placa del agitador
magnético, luego se adiciona una barra magnética
posicionandola en el centro del recipiente quedando
sobre el magneto rotatorio del agitador. Los
parámetros que se han controlado en este instrumento
son temperatura (25ºC) y revoluciones por minuto
(590 rpm).
2
Figura 2. ​Cambio de color de la solución al utilizar té negro al 0,8
g/L. A) tiempo 0; B) 5 min; C) 15 min y D) 30 min.
Se incorporan 18 mL de Té negro Supremo a la
solución por goteo. Las proporciones AgNO​3​: Té
negro debe ser 1:6. Una vez finalizada la adición se
deja el sistema funcionando sin necesidad de proteger
el sistema de la luz directa.
El procedimiento señalado es realizado una vez con
cada una de las concentraciones de AgNO​3 descritas
anteriormente.
A una de las condiciones (Té negro 0,8 g/L) se le
realizó un post-tratamiento, siendo la centrifugación
y eliminación del medio de reacción los principales
involucrados en ello.
2.2.3 Caracterización de las nanopartículas
Para realizar la caracterización de las AgNPs
formadas, se midió el espectro de absorbancia en los
tres tiempos distintos durante la síntesis, para ello se
utilizó el espectrofotómetro y las celdas de cuarzo
con paso óptico es de 1 cm mencionadas en los
materiales.
Para este paso se tomaron durante la síntesis,
muestras de alícuotas a los 5, 15 y 30 minutos, este
tiempo es medido desde que se termina de adicionar
el té negro a la solución de AgNO​3​. Junto a ello,
también se mide el espectro de absorbancia de la
muestra de té negro que ha sido centrifugada luego de
terminar el proceso.
El rango de longitud de onda analizado va desde los
350 nm hasta los 700 nm y el blanco corresponde a
agua mili Q.
2.2.4 Microscopía electrónica de barrido (SEM) y
microscopía electrónica de transmisión (TEM)
Las muestras estudiadas fueron fijadas en agua
desionizada, posteriormente se deposita una gota de
la suspensión resultante sobre una rejilla de cobre
cubierta por una película delgada de carbón,
soportada por un polímero plástico. Las muestras se
dejaron secar a temperatura ambiente y se llevaron al
microscopio electrónico de barrido, Quanta TM ​ 250
FEG.
3. Resultados y Discusión
3.1 Caracterización de nanopartículas de plata
sintetizadas con Té negro 0,8 g/L (condición 1)
Los cambios de color observados durante la síntesis
de AgNPs en estas condiciones fue de forma gradual
sin llegar a encontrarse demasiado concentrado al
final de los 30 minutos (Fig. 2).
Figura 3: Espectros de absorción AgNPs en síntesis químico
con té negro 0,8 g/L​. Comparación del espectro de absorción en
distintos tiempos, para determinar la formación de NPs de plata. A)
5 min de reacción, no se aprecia un máximo; B) 15 min de
reacción, máximo x: 425 nm hasta 430 nm e y: 0,785; C) 30 min
de reacción, máximo x: 433,5-434 nm e y:1348; D) comparación
de los espectros a los diferentes tiempos estudiados.
Se realizaron estudios espectroscópicos, durante el
transcurso de la reacción entre el nitrato de plata y el
té a una concentración de 0,8 g/L, para generar NPs
de plata. A los 15 min se comienza observar un pico
definido entre los 425 y 430 nm (Fig. 3B) y con el
transcurso del tiempo, a los 30 min este se hace más
pronunciado y se desplaza a la derecha
manteniéndose entre 433 y 434 nm (Fig. 3C).
La amplitud generada por las AgNPs disminuyó
luego de realizar el tratamiento posterior y su pick se
desplaza hacia los 431 y 432 nm (Fig. 4)
Dados dichos resultados, podemos calcular el tamaño
de las NPs mediante la siguiente fórmula:
Con la cual se obtiene el diámetro de las partículas
sintetizadas. Los resultados son:
- A los 5 minutos no se puede determinar, pues no
se observa ningún máximo en el espectro
obtenido (Fig. 3A).
- A los 15 minutos se ha obtenido un tamaño
máximo de partículas entre 37,5 nm y 41,07 nm
- Al minuto 30 se han sintetizado NPs de 41,43
nm - 43,93 nm.
- Luego de centrifugar la cantidad de NPs
disminuyó, pero se mantuvieron tamaños de
41,79 nm a 42,5 nm.
Al medir el diámetro de partículas mediante el uso de
un microscopio electrónico de barrido de emisión de
campo (FESEM), este da tamaños de 25,04 nm a
34,41 nm (Fig. 5).
Figura 4 Comparación AgNPs luego de quitar el medio de
reacción. Ambas curvas corresponden a las mismas NPs hechas
con una concentración de té negro 0,8 g/L. El espectro de la línea
anaranjada, pertenece a las NPs luego de centrifugar. El máximo
de absorbancia del espectro azul (antes del tratamiento) es de 1348
el cual se alcanza a una longitud de onda de 433,5 nm y 434 nm.
Máximo de absorbancia post-tratamiento (anaranjado) es de 0,887
y se alcanza a una longitud de onda entre 431-432 nm.
Figura 5. ​AgNPs observación mediante FESEM. A) Se observa la
superficie de las NPs gracias al SEM, en este caso se logra apreciar
un halo, el cual está compuesto por los polifenoles del té:
flavonoides, teaflavina y tearubigina. B) Determinación del tamaño
de partìcula con ayuda de la función TEM que posee el FESEM.

3.2 ​Caracterización de NPs de plata: Condición 2

(Té negro 4 g/L).
A diferencia de las nanopartículas sintetizadas en la
condición anterior, este procedimiento cambio de
color a uno un poco más concentrado (Figura 6).
Como resultado del estudio espectrofotométrico se
pudo observar que el único espectro que es posible
analizar corresponde al de los 30 minutos, pues los de
5 y 15 minutos no poseen máximos con los que se
permita el aproximamiento de características físicas
como el diámetro (Fig. 7A y 7B).
En dicho espectro se observa que la absorbancia
máxima corresponde a 1592, y se encuentra entre las
longitudes de onda 431 y 430 (Fig, 7C).
Calculando el diámetro con la fórmula otorgada
anteriormente se obtiene que en la solución hay
AgNPs con un tamaño aproximado de de 41,07 nm y
41,79 nm.

Figura 7: Espectros de absorción AgNPs en síntesis químico

Figura 6. ​Cambio de color de la solución al utilizar té negro en
concentración 4 g/L. A) tiempo 0; B) 5 min; C) 15 min y D) 30
min.
con té negro 4 g/L​. Comparación del espectro de absorción en
distintos tiempos, para determinar la formación de NPs de plata. A)
5 min de reacción, no se aprecia un máximo; B) 15 min de
reacción, no se aprecia màximo; C) 30 min de reacción, máximo x:
430 y 431 nm e y: 1592 ; D) comparación de los espectros a los
diferentes tiempos estudiados.

4
 polifenoles del té, esto se debe a la interacción entre
ambos ​[9]​.

4 Conclusión
La síntesis de AgNPs utilizando dos concentraciones
de té negro (0,8g/L y 4g/L) y su posterior estudio de
espectros, permite afirmar que la concentración del té
negro afecta la cantidad de NPs que se formarán,
debido a su acción como oxidante.
5. Abreviaturas y Acrónimos
min minutos
NPs Nanopartículas
Figura 8. ​Comparación de los dos métodos a un tiempo
determinado (30 minutos). Se puede observar que la amplitud de SEM Microscopía electrónica de Barrido
las NPs sintetizadas con una mayor concentración de té negro, es
mayor que las sintetizadas con una menor concentración. Los TEM Microscopía de transmisión
máximos de ambos son similares, por lo tanto el tamaño de
partículas también lo es. electrónica
4. Discusión FESEM Microscopio electrónico de barrido
de emisión de campo
Se estudió el efecto de la concentraciones iniciales de
extracto de té negro en la formación de NPS de Ag a Agradecimientos
temperatura ambiente. La formación de las NPs de
Le agradecemos a los profesores del curso
Ag se indicó por la aparición de un color café marrón
“Introducción a la nanotecnología” Dra Lorena
[9]​. Para comprobar esto además se realizó análisis
espectroscópicos, los cuales coinciden con los Barrientos y Jorge Recio, junto al ayudante del
resultados visuales, con una pico característico de la mismo Sebastián Romero, por haber otorgado la
formación de las NPs de Ag ​[11]​. Al comparar el posibilidad de sintetizar nanopartículas y por abrir la
espectro de absorción a los 30 minutos de ambas,
instancia de una nueva forma área de aprendizaje.
estas poseen una longitud de onda máxima similar,
pero la amplitud de absorbancia es distinta. Mediante Además, también le queremos agradecer al encargado
la ley de Lambert-Beer se conoce que la absorbancia del FESEM por haber otorgado las imágenes junto a
es directamente proporcional a la concentración y
las medidas explícitas y además por habernos
esto se correlaciona aún más si se está midiendo el
mismo analito. explicado cómo funciona el mismo equipo.

Lo anterior conlleva a indicar que la concentración Referencias

del té negro afecta en la cantidad de nanopartìculas
[1] Monge, M. Nanopartículas de plata: métodos de
que se formarán gracias a su acción como agente
síntesis en disolución y propiedades
reductor. Junto a ello, los resultados del espectro
bactericidas. En ​Anales de Química​, 2009.
obtenido a los 30 minutos parece demostrar que su
España. Vol. 105 (1), pp. 33-41.
poder estabilizador genera NPs de menor tamaño, las
cuales no se podrían determinar dado que no se [2] Rashid MU, Bhuiyan MKH, Quayum ME.
encuentran dentro del espectro UV-Vis, para Synthesis of silver nanoparticles (Ag-NPs) and
comprobar tal parámetro es necesario recurrir a their uses for quantitative analysis of vitamin C
técnicas más sensibles. O bien también es posible que tablets. Dhaka Univ J Pharm Sci.
los flavonoides, fenoles y taninos presentes en el té 2013;12:29–33.
negro se encuentren en altas cantidades en la
[3] Basnet, Parita, T. Inakhunbi Chanu, Dhrubajyoti
concentración de té correspondiente a los 4g/L y esté
Samanta, and Somenath Chatterjee. 2018. 'A
ocasionando interferencias en la medición pues
review on bio-synthesized zinc oxide
absorben a una longitud de onda entre los 258-510
nanoparticles using plant extracts as reductants
nm los flavonoides y los fenoles y taninos
and stabilizing agents', ​Journal of
aproximadamente 700 nm.
Photochemistry and Photobiology B: Biology,​
Las imágenes FESEM de las NPs de Ag con té negro 183: 201-21.
(0,8 g/L), donde se observa que poseen una forma
[4] Wang, Yuliang, and Younan Xia. 2004.
casi esférica, la cual se condice con lo descrito en
'Bottom-Up and Top-Down Approaches to the
literatura. Como se observa en la figura 5 las NPs de
Synthesis of Monodispersed Spherical Colloids
plata presentan un halo el cual corresponde a los
 of Low Melting-Point Metals', ​Nano Letters,​ 4: [9] Uddin, Md., Chaudhuri, B., Pramanik, K.,
2047-50. Middya, T. and Chaudhuri B. Black tea leaf
extract derived Ag nanoparticles-PVA
[5] Asghar MA, Zahir E, Shahid SM, Khan MN,
composite film: Structural and dielictric
Asghar MA, Iqbal J, Walker G. Iron, copper
properties. Materials Science and Engineering.
and silver nanoparticles: Green synthesis using
2012: 1741-1747
green and black tea leaves extract and
evaluation of antibacterial, antifungal and [10] Rodolfo Z. Metodologías para la síntesis de
aflatoxin B1 adsorption activity. LWT – Food nanopartículas: controlando forma y tamaño.
Science and Technology, 2018; 90: 98-107. Mundo Nano, 2012; 5(1), 69-81
[6] Lebaschi, S., Hekmati, M. and Veisi, H. Green [11] Begum, A., Mondal, S., Basu, S., Laskar, R. and
synthesis of palladium nanoparticles mediated Mandal D. Biogenic synthesis of Au and Ag
by black tea leaves (​Camellia sinensis​) extract: nanoparticles using aqueous solutions of black
Catalytic activity in the reduction of tea leaf extracts. Colloids and surface. 2009:
4-nitrophenol and Suzuki-Miyaura coupling 113-118
reaction under ligand-free conditions. J. of
colloid and interface Science. 2017; 223-231.
[7] Sun Q, Cai X, Li J, Zheng M, Chen Z, Yu CP.
Green synthesis of silver nanoparticles using tea
leaf extract and evaluation of their stability and
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Physicochemical and Engineering Aspects,
2014; 444:226–231
[8] Shah RK, Boruah F, Parween N. (2015).
Synthesis and characterization of ZnO
nanoparticles using leaf extract of Camellia
sinesis and evaluation of their anti-microbial
efficacy. International Journal of Current
Microbiology and Applied Sciences, 2015;
4(8):444–450