SESION PRACTICA Nº 1
INTRODUCCION
La palabra "Protozoo" significa etimológicamente "primeros animales" o
"animales primitivos". Constituyen un grupo heterogéneo formado por
aproximadamente 50000 organismos unicelulares que poseen orgánulos celulares
típicos (eucariotas) rodeados por una membrana. Puesto que casi todos son
móviles y muchos de ellos son heterotróficos, hasta hace algún tiempo se
consideraba que este grupo era sólo un Phylum dentro del Reino Animalia: el
Phylum Protozoa. En la actualidad, el grupo está formado por varios phyla
unicelulares diferentes, los cuales, junto con la mayor parte de los phyla de algas,
pertenecen al Reino Protista.
Existen protozoarios donde quiera que haya humedad: en el mar, en todo tipo
de aguas dulces y en el suelo; hay especies comensales, mutualistas y muchas
parásitas.
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COLECTA Y CONSERVACION
La colecta de protozoarios en general ofrece pocas dificultades, ya que habitan
en casi cualquier tipo de
agua; pero la búsqueda de un
determinado grupo o especie
es difícil y depende del
conocimiento de su hábitat y
hábitos. Son múltiples los
factores que pueden
determinar que en cierto lugar
habite una determinada
población de protozoarios.
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Muchas especies de rizópodos, entre ellas las amibas o géneros como Arcella,
Pelomyxa y Difflugia se encuentran en las aguas estancadas sombreadas o que
tengan un mínimo de acceso a la radiación solar. Se desplazan sobre los fondos
lodosos cubiertos de vegetación muerta o de materia orgánica en descomposición.
El material colectado debe ponerse en frascos limpios y llevarse al laboratorio.
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Océanos Indico y Pacífico. Se pueden recoger de igual forma que los Foraminíferos,
por dragado, y secarse de forma similar.
Entre los talos de las algas marinas se encuentran algunos protozoarios que
habitan estos sitios. Colecte las algas y lávelas en un frasco con agua del medio.
Las redes y los tamices de mallas finas pueden utilizarse para concentrar los
protozoarios en limitados volúmenes de agua. También se pueden matar y
concentrar, agregando gota a gota a las muestras de protozoarios una cantidad
pequeña de formol neutro al 3%, hasta que mueran los protozoarios y se depositen
en el fondo. En seguida, el agua se decanta dejando sólo una pequeña cantidad del
fondo junto con el material sedimentado. Este puede fijarse y dejarse en alcohol de
70%.
FIJACION
Entre los fijadores más recomendables están los de Schaudin, Goldschmidt,
Boui y Guilson. El material fijado en estos líquidos se puede usar para elaborar
preparaciones fijas. Los flagelados, como Euglena, se pueden fijar con el líquido de
Noland, que produce la muerte instantánea del protozoario y permite la observación
clara del flagelo.
Solución de Noland:
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Se debe mezclar el colorante con un poco de agua, antes de agregar los otros
ingredientes. No debe quedar fenol en suspensión.
Agregue a una gota del cultivo de protozoarios, una gota de la mezcla. Los
cilios y flagelos se tiñen claramente. Este es un método útil para el estudio de
ciliados que poseen cirros.
DIVISION SISTEMATICA*
Reino Protista
Subreino Protozoos
Filo Sarcomastigóforos
Subfilo Mastigóforos
Clase Fitomastigóforos
Clase Zoomastigóforos
Subfilo Opalinados
Subfilo Sarcodinos
Superclase Rizópodos
Clase Lobosos
Clase Eumicetozoos
Clase Filosos
Clase Granulorreticulosos
Superclase Actinópodos
Clase Acantarios
Clase Policistineos
Clase Feodarios
Clase Heliozoos
Filo Labirintomorfos
Filo Apicomplejos
Clase Perkinsidos
Clase Esporozoos
Filo Mixozoos
Filo Microsporidios
Filo Ascetosporos
Filo Cilióforos
LOGROS DE APRENDIZAJE
Al término de la Práctica el estudiante reconoce e identifica los principales
protozoarios de vida libre de nuestra Región, así mismo, identifica las principales
estructuras y características de los diversos grupos taxonómicos de protozoarios
observados, haciendo uso de las diversas técnicas de colección, conservación,
fijación y observación microscópica.
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MATERIALES
MATERIAL BIOLOGICO:
METODOLOGIA
I. OBSERVACION DE PROTOZOARIOS DE VIDA LIBRE
Con el material necesario y las muestras de agua con protozoos proceder según las
técnicas de observación siguientes:
1. TECNICAS DE OBSERVACION:
1. 1.EXAMEN DIRECTO:
Este examen permite la observación de los protozoos vivos, su morfología,
locomoción, reacciones, etc., durante la observación se requiere de enfocar
adecuadamente y diafragmar convenientemente.
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Los colorantes vitales son de naturaleza ácida o básica, en soluciones muy diluidas
son poco tóxicos. Entre los colorantes vitales más usados tenemos a los siguientes:
- Rojo neutro. - Azul pirrol.
- Azul de metileno. - Verde Jano.
- Tinta china. - Azul de tripan.
- Rojo Congo. - Amarillo anilina
- Pardo de Bismark. - Verde de metilo.
- Carmín latinado. - Cristal violeta.
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Los colorantes más usados para el caso son: el azul de metileno al 1/500 y el azul
de toluidina fenicado.
Azul de toluidina fenicado:
- Azul de toluidina...............................0.5 g
- Acido fénico......................................3.0 g
- Alcohol etílico de 95º......................10.0 cc
- Agua destilada................................90.0 cc
Las preparaciones así obtenidas son muy interesantes, pues en ellas los protozoos
simplemente secos no han sufrido alteración por los reactivos fijadores y los
caracteres morfológicos se han conservado muy bien.
Líquido de Noland:
- Solución saturada de fenol en
agua destilada................................... 80.0 cc
- Formol al 40%.................................... 20.0 cc
- Glicerol............................................... 4.0 cc
- Violeta de Genciana............................ 20.0 mg
1.6.1. Fijadores:
- Fijadores Físicos: calor, frio.
- Fijadores Químicos: simples, compuestos.
1.6.2. Coloraciones:
- Hematoxilina - Eritrocina - Orange G.
- Hematoxilina Férrica de Heidenhain.
- Impregnación Argéntica.
- Shorr.
- Giemsa.
- Leisshmann
- Hemalumbre de Mayer.
- Hematoxilina - Método A.
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2. OBSERVACION DE FLAGELADOS:
Realizando las preparaciones que considere necesarias, proceda a observar y
reconocer los protozoarios flagelados más comunes, identificar los organelos
constituyentes, graficar sus observaciones y ubicarlos sistemáticamente.
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3. OBSERVACION DE CILIADOS:
Proceda a preparar y observar muestras de ciliados, diferencie los diversos
organelos, graficar sus observaciones y ubicarlos sistemáticamente.
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CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son los factores o condiciones ambientales que influyen en el
desarrollo de los protozoarios dulceacuícolas?
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BIBLIOGRAFIA
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