LA REPLICACIÓN DEL ADN

La molécula de ADN tiene la capacidad de hacer copias de si misma, es decir, de autoduplicarse. Pero
para que esto ocurra existen cuatro requisitos importantes:
 El ADN debe actuar como molde para el apareamiento de las bases complementarias
 Deben estar presentes en el núcleo de los cuatro desoxirribonucleótidos: dATP, dGTP, dCTP y
dTTP (tener en cuenta que en la forma trifosfato aportarán energía para las uniones necesarias)
 Se necesita de enzimas que catalicen las reacciones y acerquen el sustrato al molde.
 Se necesita una fuente de energía que lleve a cabo este proceso de síntesis.

La replicación se hace en dos pasos:

1- El ADN se desnaturaliza (desenrolla) en un punto de la doble cadena, separando cada una de
ellas para que queden como molde para el apareamiento con los nuevos nuecleótidos.
2- Los nuevos nucleótidos se aparean por enlaces covalentes con los otros en la nueva cadena y por
puentes de hidrógeno con las bases complementarias de la cadena molde.

En los extremos 3´ de la cadena que se va formando (cadena creciente)

se encuentra un grupo oxidrilo (-OH) libre en la desoxirribosa. Es allí
donde la enzima ADN polimerasa cataliza la unión con los desoxirribonu-
cleótidos que se van enlazando. Al romperse las uniones de los grupos
fosfato de los desoxirribonucleótidos trifosfato, la energía liberada es
utilizada para enlazar los nucleótidos que formarán la nueva cadena y con
las bases de la cadena molde. Se liberan dos grupos fosfato que se utili-
zarán para formar nuevos nucleótidos y el tercero formará parte de la
nueva cadena.

Varias enzimas son las que actuarán en la replicación del ADN:

 La Topoisomerasa libera las tensiones que mantienen enrollada sobre si misma al ADN
 La Helicasa rompe los puentes de hidrógeno separando las cadenas simples
 Un grupo de proteinas se unen a las cadenas simples impidiendo que éstas se vuelvan a unir.
 La ARN primasa fabrica una secuencia de ARN que sirve como iniciador o cebador del proceso
de replicación.
 La ADN polimerasa agrega nucleótidos al cebador y que son complementarios al molde, hace la
lectura, la corrección de prueba y lo repara si es necesario.
 La ADN ligasa cataliza las uniones entre fosfatos y desoxirribosas sellando la estructura final
del ADN replicado.

Cuando se observa el ADN en la etapa S de la

interfase, de detectan puntos en donde co-
mienza el proceso de replicación llamados hor-
quillas de replicación como se aprecia en la fo-
tografía.
Las topoisomerasas hacen que se liberen las
tensiones que mantienen enrolladas la las ca-
denas de ADN, permitiendo que la Helicasa
rompa los puentes de hidrógeno que mantienen
a las cadenas antiparalelas unidas por sus ba-
ses, quedando disponibles así las dos cadenas
simples que servirán de moldes. Para que no
vuelvan a juntarse ni se enrosquen en si mis-
mas, existen un conjunto que proteínas que se
adhieren a las cadenas molde “sosteniéndolas”
separadas y permitiendo que actúen las demás
enzimas encargadas de la síntesis de las nue-
vas cadenas complementarias.

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 La ADN polimerasa puede sintetizar la cadena de
nucleótidos uniéndolos unos a otros, pero no puede
iniciar el proceso. Es por eso, que se requiere de
un cebador o iniciador de la replicación, represen-
tado por un pequeño fragmento de ARN, que se
ubique en una secuencia específica y proporcione
un grupo -OH en el carbono 3´ para que actúe el
ADN polimerasa. Este ARN es sintetizado por una
enzima llamada ARN primasa y tiene la secuencia
de nucleótidos complementaria al ADN molde. La
ADN polimerasa va uniendo nucleótidos al cebador
hasta haber completado la síntesis de la molécula
en esa sección. Luego el ARN es degradado por
otra ADN polimerasa y es reemplazado por un
nuevo ADN sintetizado.

Como se dijo antes, la ADN polimerasa solo puede

ir uniendo nucleótidos en la dirección 5´- 3´. Esto
no representa ningún problema para la síntesis de
la cadena complementaria del molde 3´-5´ puesto
que se sintetizan a medida que se abre la horquilla
de replicación y al resultado de esta copia se la
denomina cadena adelantada. Pero sí es un proble-
ma para la cadena molde que quedó con dirección
5´-3´ puesto que no se puede sintetizar en senti-
do contrario. Esto se resuelve formando pequeños
fragmentos simultáneos de ADN a medida que se
abre la orquilla de replicación. Estas porciones de
ADN comienzan un terminan de la misma manera
que la cadena adelantada pero lleva más tiempo de
sintetizarla completamente, porque habrá que
“unir los pedazos discontinuos” para formar la ca-
dena completa; por ello, se las denomina cadena
retrazada. Esos fragmentos sintetizados se llaman
fragmentos de Okazaki. Un solo cebador y una sola
de cada una de las enzimas nombradas alcanza para
la síntesis de la cadena adelantada, pero se necesi-
tarán varias enzimas y cebadores como fragmen-
tos se sinteticen para formar la cadena retrazada.
Cuando una ADN polimerasa de un fragmento de
Okazaki se encuentra con el cebador de otro
fragmento que ya fue sintetizado, éste es degra-
dado y se sintetiza en su lugar la secuencia de
ADN correspondiente, pero falta unir el grupo
fosfato del fragmento anterior a la desoxirribosa
del nuevo fragmento para completar la unión de los
fragmentos. Esta tarea la realiza una enzima lla-
mada ADN ligasa permitiendo la unión covalente
correspondiente con gasto de energía extra pro-
porcionada por el ATP.
Toda la síntesis del ADN implica un gasto de energía importante. La mayor parte de ésta se obtiene de
los desoxirribonucleótidos y otra parte lo aporta la célula a través de ATP.
Trabajando en conjunto y organizadamente todas las enzimas nombradas hacen posible el proceso de
replicación del ADN que ocurre en la etapa S de la interfase de las células.

Diferencias entre la replicación en procariotas y eucariotas.

El proceso como se explicó hasta acá es similar en los dos tipos de células. Pero en la células eucariotas
se presentan algunos aspectos más a tener en cuenta:
 El ADN eucariota está asociado a histonas. Esto dificulta un tanto la acción de las ADNpolime-
rasas y, además, es necesario que se sinteticen histonas coordinadamente con la replicación.

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  La replicación de ADN procariota tiene un solo punto de inicio de replicación, mientras que en la
eucariotas existen varios puntos de inicio que producen varias horquillas de replicación a lo largo
de la cadena.
 El tamaño de los fragmentos de Okazaky son menores en procariotas que en eucariotas.

Fidelidad de copia
El ADN debe ser copiado exactamente a lo largo de las múltiples divisiones celulares a las que se some-
ten las células de un organismo. Esto se logra a partir de enzimas que controlan la duplicación y corrigen
los posibles errores que se cometan durante el proceso.
Los mecanismos que aseguran la fidelidad de la copia son:
 La selección de desoxinucleótidos la realiza una ADN polimerasa denominada III. Lo que sucede
es que la estabilidad del complejo formado por esta enzima, el ADN molde y el desoxinuceótido
trifosfato se logra si las bases son complementarias.
 La corrección de pruebas la realiza el ADN polimerasa I que al detectar un nucleótido no com-
plementario, detiene la continuidad del proceso eliminando a dicho nucleótido.
 La corrección de errores es más complicada. Las enzimas deben reconocer, quitar y reemplazar
por otro al nucleótido mal apareado. El problema está en distinguir la cadena molde de la recién
sintetizada. Todavía está en estudio este proceso.
A pesar de estos mecanismos, de todas maneras, se producen fallas en el proceso de replicación. Estos
errores se denominan mutaciones y favorecen la variabilidad genética y por ende los procesos evolutivos
de las especies. Los efectos de estos errores dependen del organismo y de las condiciones del medio en
el que se desarrollen. Por lo tanto, la ventaja o desventaja de las mutaciones dependen en definitiva del
proceso de evolución biológica.

Texto: Roberto Donelli

Imágenes: Purves y otros, “ Vida. La ciencia de la Biología”, sexta edición, Ed. Panamericana, 2003
Curtis Barnes, “Biología”, sexta edición, Ed. Panamericana, 2000

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