UNIVERSIDAD MANUELA BELTRÁN

FACULTAD DE INGENIERÍA
INGENIERÍA BIOMÉDICA

EVALUACIÓN DE LAS PROPIEDADES BACTERICIDAS Y

RECONSTRUCTIVAS DE UN SISTEMA POLIMÉRICO BIOARTIFICIAL
MEZCLADO CON NANOPARTÍCULAS DE PLATA PARA EL TRATAMIENTO
DEL PIE DIABÉTICO SÉPTICO

DIEGO NICOLAS BALLÉN

WILMER ALEXANDER NÚÑEZ BAUTISTA

BOGOTÁ D.C 13 DE ABRIL DE 2018

 UNIVERSIDAD MANUELA BELTRÁN
FACULTAD DE INGENIERÍA
INGENIERÍA BIOMÉDICA

EVALUACIÓN DE LAS PROPIEDADES BACTERICIDAS Y

RECONSTRUCTIVAS DE UN SISTEMA POLIMÉRICO BIOARTIFICIAL
MEZCLADO CON NANOPARTÍCULAS DE PLATA PARA EL TRATAMIENTO
DEL PIE DIABÉTICO SÉPTICO

DIEGO NICOLAS BALLÉN

WILMER ALEXANDER NÚÑEZ BAUTISTA

TESIS DE GRADO
ASESOR DE PROYECTO LICENCIADO ANDRES BERNAL BALLÉN

BOGOTÁ D.C 13 DE ABRIL DE 2018

 1. PRESENTACIÓN
1.1. Título
Evaluación de las propiedades bactericidas y reconstructivas de un sistema
polimérico bio-artificial mezclado con nanopartículas de plata para el tratamiento del
pie diabético séptico

1.2. Contexto
La lesión de pie diabético es una dolencia que común que frecuentemente termina
en amputación de miembros[1]. En este sentido, se ha conocido que el pie
diabético es consecuente de un 70 % de las amputaciones y esta condición
involucra una suma elevada de dinero, así como recursos usados para tratar la
enfermedad de origen. No obstante, en algunos estudios realizados se observó
que con un nivel de prevención es posible disminuir las amputaciones hasta en un
85 %. [2]. Dentro de las estrategias de solución planteadas para enfrentar este
problema, la ingeniería de tejidos ha hecho un aporte considerable y cuenta
además con el apoyo de otras disciplinas tales como la bioingeniería, química,
física, biología y demás. El enfoque de esta rama es ayudar a resolver problemas
relacionados con el desgaste de tejido o daño que merma la función de órganos.
Por tanto, la meta es desarrollar sustitutos que restauren, mantengan o mejoren la
función del tejido perdido o lesionado [3] dentro de los que se pueden incluir los
tejidos afectados por la presencia del pie diabético.

La elaboración de la investigación se llevará a cabo en la Universidad Manuela

Beltrán, y en otros establecimientos de formación superior con las que se tengan
alianzas estratégicas, con el fin de favorecer un trabajo de calidad en el campo de
los biomateriales, línea de investigación del grupo de investigación en ingeniería
biomédica (GIIB-UMB).

1.3. Descripción
1.3.1. Planteamiento del problema
Diabetes
Los pacientes diabéticos pueden sufrir serios problemas de las extremidades
inferiores. Dentro de las principales afecciones encontradas se encuentran la
enfermedad vascular periférica (circulación anormal) y neuropatía diabética
(perdida de la función nerviosa normal). Estos padecimientos pueden llevar a
úlceras de pie diabético séptico, siendo este el más habitual en esta clase de
pacientes.
La diabetes melitus es un malestar crónico. Según la literatura para el año 2006 la
diabetes Mellitus fue una de las cinco principales fuentes de fallecimiento en al
rededor del mundo. Se cree que por lo menos unos 246 millones de personas en
el mundo son acreedoras de esta molestia llegando a una prevalencia aproximada
al 5,9 % en personas adultas. La cifra podría escalar cerca del año 2025 a unos
380 millones teniendo una prevalencia para las personas adulta de un 7,1 %. [2]
Según la Asociación Colombiana de Diabetes (ACD), En Colombia, las personas
con diabetes son un 7,4 y un 9,4% de la población general, es decir, cerca al 1,7
millón de personas padecen diabetes; de los cuales, cerca de un 50% tienen
riesgo de padecer de pie diabético debido la neuropatía o enfermedad periférica.
[4]
Pie diabético
El pie diabético es una infección, ulceración o pérdida de tejidos profundos del pie
relacionado con neuropatía o enfermedad circulatoria periférica sufriendo
mayormente las extremidades inferiores de personas que padecen diabetes. Se
cree que por una úlcera diabética un aproximado de 85% de los pacientes pueden
ser amputados. [5]
Las úlceras de pie diabético que no cicatrizan llevan a necrosis y, por
consiguiente, amputación.

NPAg
La plata tiene la ventaja de tener una amplia actividad antibacteriana en contra de
bacterias Gram-negativas y Gram positivas, y también un mínimo desarrollo de
resistencia bacterial. [6]
En este ensayo solo se abordarán a los materiales poliméricos y su práctica en el
trato de la herida diabética o mejoría de heridas, no obstante cabe aludir que otros
tipos de materiales además han sido utilizados con estos fines, como las
soluciones coloidales de plata, pertenecientes al grupo de los materiales
metálicos. [5]
Efectividad o capacidad bactericida
El uso de la plata como agente antimicrobiano ha sido reconocido desde hace
mucho. Soluciones diluidas de nitrato de plata han sido usadas desde el siglo XIX
para el tratamiento de infecciones y quemaduras antes de la introducción de la
crema de sulfidiazina de plata. De las formas usadas comúnmente de aplicaciones
de plata de la actualidad, apósitos impregnados con plata han demostrado ser
efectivos matando un amplio rango de bacterias como la crema base, que resulta
menos irritante y mejor tolerada que la solución de nitrato de plata. Apósitos
impregnados de plata son usados extensamente para manejo de heridas,
particularmente heridas de quemaduras, úlceras crónicas de pie, heridas diabéticas
y heridas traumáticas. [6]

Frente a ello, se han desarrollado diversos sistemas que ayuden a reducir las
complicaciones, y así, disminuir la cantidad de amputaciones. En años recientes
se ha implementado el uso de vendajes con diferentes materiales para mejorar la
cicatrización de la herida de manera más rápida, usando biomateriales que
promuevan el crecimiento del tejido (proliferación de fibroblastos y queratinocitos).
[3] Por otra parte, se han desarrollado apósitos con nanopartículas de plata para
controlar la infección, pues la plata es un antimicrobiano utilizado durante muchos
años para el tratamiento y control de diferentes heridas. Se ha utilizado como un
limpiador y recientemente se utilizó como cremas mezclado con antibióticos. [7]
La incorporación de plata en apósitos de actualidad o en revestimiento de
productos médicos puede por lo tanto jugar un rol importante en la era de la
resistencia antibiótica. [6]
De esta manera han podido controlar úlceras de pie diabético en grados bajos,
reduciendo la infección y reconstruyendo tejido perdido haciendo que la
cicatrización sea más rápida [8], sin embargo, cuando la úlcera no ha recibido el
tratamiento adecuado de prevención y esta avanza a niveles más altos se hace
más difícil cicatrizar la herida, debido a que las bacterias (bacterias
Gramnegativas) que se hace resistente a los antibióticos. [4]
Por lo antes expuesto, se hace necesario evaluar un nuevo apósito que aproveche
las propiedades bactericidas de la plata y, a su vez, ayude en la reconstrucción del
tejido. En este sentido, el uso de polímeros como la policaprolactona y el
polietilenglicol favorecen dichos procesos. Por lo tanto, el problema de investigación
es: ¿en qué medida un sistema polimérico bioartificial (apósito) con nanopartículas
de plata favorecen la cicatrización de úlceras de pie diabético séptico?

DELIMITACIÓN PENDIENTE
Determinar la capacidad de los apósitos con nanopartículas de plata para
interrumpir procesos celulares bacterianos provocados por Staphylococcus
aureus, Pseudomona Aeruginosa y enterobacterias (bacterias gram-negativas) en
úlceras de pie diabético séptico disminuyendo el crecimiento de estos
microorganismos y acelerando la cicratización de la herida para evitar necrosis
con la ayuda del biomaterial Poli(caprolactona) -poli(etilenglicol) diamina para a su
vez la reconstrucción del tejido.
 1.3.2. Justificación
Las úlceras de pie diabético séptico son un inconveniente para la salud pública
llegando a afectar a gran cantidad de pacientes en quienes hay dificultades para
lograr la cicatrización, causando además necrosis de tejidos que pueden conducir
a amputaciones de extremidades inferiores. Aunque existen sistemas de control y
prevención, en algunos casos esto no es suficientes y la enfermedad avanza a
niveles muy complicados de tratar en los cuales la carga bacteriana es muy fuerte
haciendo que las bacterias sean resistentes a antibióticos y, por consiguiente,
dificultan la cicatrización. [1] Esto ha llevado a que muchos investigadores evalúen
diferentes mecanismos de control de la carga bacteriana en las úlceras y, aunque
se han obtenido resultados positivos estos tratamientos no llegan a ser una
solución eficiente para las úlceras en niveles avanzados. [7]
Uno de esos tratamientos incluye la combinación de nanopartículas de plata con
polímeros que tengan aplicaciones en el campo médico. Es de esperarse que esta
combinación sea un mecanismo capaz de controlar la carga bacteriana en úlceras
de pie diabético y que a la vez ayude en la reconstrucción del tejido para mejorar y
acelerar la cicatrización.
En ese contexto, existe abundante literatura en la que se reporta que la plata se
puede utilizar en el trato de úlceras ocasionadas a partir de pie diabético séptico
obteniendo buenos resultados. No obstante, estos sistemas se pueden mejorar al
mezclarlos con biomateriales que ayuden a reconstruir el tejido perdido a causa de
la carga bacteriana y la falta de nutrientes en las células por mala circulación
sanguínea. Por esto, es importante la preparación de un sistema polimérico
bioartificial que tenga propiedades reconstructivas de la piel, mezclado con
nanopartículas de plata que ayude en el control del crecimiento de la infección
debido a sus propiedades bactericidas. [3]
La valoración de estos apósitos busca dar un aporte importante a la comunidad
científica ya que ayuda a remediar una de las dificultades más graves que tiene la
diabetes como es el pie diabético séptico llegando a generar amputaciones de
extremidades inferiores y poniendo en peligro la existencia del paciente. Por otra
parte, los costos de diversos tratamientos para controlar la enfermedad resultan
ser muy elevados y de larga duración, lo cual afecta la disposición de vida de
quien sufre esta enfermedad. [1]

1.3.3. Objetivos: General y específicos

Objetivo general: Determinar la capacidad inhibidora bacteriana de un sistema
polimérico bioartificial con nanopartículas de plata en úlceras de pie diabético
séptico.
Objetivos específicos
- Combinar el apósito de plata con Poli(caprolactona) - poli(etilenglicol) diamina
para la reconstrucción del tejido al tiempo.
-Identificar otros posibles microorganismos que puede inhibir la nanopartícula a
nivel de laboratorio
-Establecer la vida útil del apósito realizando un ensayo a nivel de laboratorio
%Realizar un ensayo in vivo

1.4. Bases Teóricas

1.4.1. Estado del Arte
El tratamiento para la úlcera de pie diabético contiene raspado de la úlcera y
administración de cualquier infección, proceso de revascularización en el momento
que se requiera se requiera y reducción de la úlcera. Otros métodos también han
sido sugeridos dentro de los que se incluyen la terapia hiperbárica de oxígeno, el
uso de productos avanzados para heridas, y terapia de presión negativa. Sin
embargo, hasta ahora no se ha probado la eficacia y una buena relación costo
beneficio de estas alternativas. [9]
Los apósitos son una herramienta invaluable en el campo de la medicina por su
capacidad en la curación de heridas. Ahora se han venido combinando con muchos
componentes para su mejoramiento y efectividad. La implementación de un apósito
revestido (o impregnado) de nano partículas de plata combinado a su vez con
polímeros de uso médico puede ser fundamental en el control y tratamiento de
úlceras de pie diabético séptico, donde a pesar de haber tratamientos, el nivel de
éxito es todavía limitado. A continuación, se muestran estudios orientados a la
actividad bactericida de las nanopartículas de plata en apósitos así como de algunos
biomateriales para regeneración de tejidos.
Una de estas investigaciones fue llevada a cabo en el año 2014 por estudiantes de
de medicina en la universidad Autónoma del Estado de México, donde consultaron
acerca de aquellos materiales de origen polimérico que puedan ser sustitutos de la
piel. En su trabajo hicieron una revisión de diferentes fuentes donde, actualmente
están en desarrollo de investigaciones para el trato de la úlcera diabética y
cicatrización de heridas. Los materiales más utilizados para este tratamiento
encontrados en esta investigación fueron clasificados en diferentes tipos de
sistemas divididos en: hidrocoloides, hidrogeles, espumas y filmes siendo
catalogados como materiales especializados que se perfeccionan con materiales
más simples y con apósitos antimicrobianos. Estos materiales poliméricos son
obtenidos de fuentes naturales, sintéticas y semisintéticas. De los polímeros
naturales uno de los que más ha adquirido importancia debidos a sus propiedades
de baja inmunogenicidad es el colágeno, el cual se ha utilizado de manera
específica en hidrogeles puesto que tiene similitud con la estructura de la matriz
extracelular biológica e impulsan la proliferación, migración y adhesión de las
células. Los materiales sintéticos usados para el cierre de heridas obtenidos por
síntesis química como los geles de Polivinilpirrolidona son específicamente
empleados como redes poliméricas ya que se comportan como reconstructores de
tejidos y más en úlceras de pie diabético donde las pérdidas de células por invasión
de bacterias son muy altas. [3]
Pese al gran número de estudios realizados sobre estos materiales, algunos no son
llevados a aplicaciones clínicas y es por esto por lo que no se puede conocer a
ciencia cierta la capacidad de reconstrucción en tejidos de úlceras de pie diabético.
En otro investigación realizada recién por investigadores de la Universidad
Pontificia Bolivariana de Medellín desarrollaron matrices nano compuestas de
alcohol de polivinilo (PVA) celulosa bacteriana (CB) para el desarrllo celular y la
regeneración de tejido, mediante la fermentación de una bacteria. Fue llevado a
cabo por medio de un apósito de silicona, de manera que fuera utilizado para
contener el medio de cultivo. Después de 10 días de incubación se fue retirado el
apósito y analizado con el fin de comprobar el desarrollo de fibroblastos en los
biomateriales. En los resultados que obtuvieron se identificó que los fibroblastos se
desarrollaron en mayor cantidad con poros más pequeños a los normales. En su
análisis consideran que esto se puede aplicar en la recuperación de tejidos de
heridas y úlceras causadas por necrosis. [10]

Se quiere crear un sustituto de piel para poder tratar la úlcera diabética, se usan
biomateriales, para crear diferentes tipos de posibles sustitutos de la piel, el más
eficiente fue el Poli (etilenglicol). Se usó este elemento para poder hacer una doble
cadena de ADN para hacer un material similar a la piel y sus funciones usadas. [3]
De igual forma, los estudios acerca de la eficacia de los materiales usados en
úlcera diabética no son evidentes, no obstante, en la literatura se reporta un mayor
número de pacientes que han alcanzado el cese de la herida con apoyo de
distintos tipos de biomateriales puesto al lado de cuando únicamente se usa
solución salina y gasas. En una investigación llevada a cabo en Inglaterra, se
empleó la técnica de polimerización por plasma para crear un filme de un polímero
en el que los queratinocitos se pueden unir, en este análisis se obtuvo la
cicatrización completa en seis úlceras de nueve, en seis pacientes con diabetes.
Debido a lo cual, la importancia de los biomateriales es clara y es necesario
extender el conocimiento que se tiene en esta área. [5]
El uso de vendajes de diferentes materiales, ya sean sintéticos o naturales, para
asistir los procesos de reparación de las heridas comenzó buscando una sola
funcionalidad: la protección de la lesión, es decir una función pasiva. Promover la
regeneración del tejido (por ejemplo: proliferación de fibroblastos y queratinocitos)
y ayudar que las heridas sanen de forma más rápida es la idea por la cual ha
progresado el fin de crear materiales los cuales involucren un fin activo. [5]
Una de las prevenciones para tratar las complicaciones de la úlcera diabética es la
higiene de mantenimiento, el calzado protector, y por medio de un buen manejo
clínico de la diabetes, entre otros, sin embargo, aun así, con todos estos métodos
es un hecho que las úlceras en extremidades inferiores atacan a gran cantidad de
pacientes siendo esto un problema grave. Desde otra perspectiva, pese a que
para el tratamiento de ulceraciones existen diferentes tipos de vendajes y/o
apósitos, ninguno no se ha estudiado lo suficiente para establecer cuál es el más
eficiente, por esta razón dependiendo de la institución o el hospital las guías de
tratamiento varían, así como de los recursos económicos disponibles. Igualmente,
para la comparación efectiva de los estudios disponibles en literatura no hay
estudios estandarizados que lo. Finalmente, la ingeniería tisular debe de proponer
nuevas alternativas que mejoren la funcionalidad y disponibilidad de biomateriales
que sean convenientes en aspectos de costo-beneficio desde la investigación de
biomateriales. [5]

En una investigación usaron cinco apósitos con materiales antimicrobianos.Todos

los 5 apósitos impregnados de plata investigados ejercieron actividad bactericida,
particularmente en bacterias Gram-negativas, incluyendo especies de
Enterobacterias, especies de Proteus y E.coli. El espectro y rapidez de la acción
oscila ampliamente para varios apósitos. Acticoat y Contreet fueron muy efectivos
y tuvieron un rápido y amplio espectro de actividades bactericidas en las bacterias
analizadas. Acticoat probó ser muy efectivo para S. aureus y su efecto fue también
respaldado en un reciente modelo animal infectado (Heggers et al.,2005). Contreet
fue también efectivo para bacterias Gram-positivas, pero se caracterizó por ser
bactericida de rápida acción, particularmente en contra de bacterias Gran-
negativas. Una ventaja de la rápida acción bactericida puede ser que permite
proceder a la curación de la herida sin interferencias bacterianas y reduce la
probabilidad de el desarrollo de resistencia. [6]

1.4.2 Marco Legal

En Colombia hay bastantes leyes, acuerdos, resoluciones, decretos para el

tratamiento de enfermedades crónicas no transmisibles, se nombran en seguida
los más importantes en los parámetros de la ley colombiana:
Referencias

[1] W. J. Jeffcoate and K. G. Harding, “Diabetic foot ulcers.,” Lancet, vol. 361,
pp. 1545–1551, 2003.
[2] G. Seguel, “Por que debemos preocuparnos del pie diabetico? Importancia
del pie diabetico,” Rev. Med. Chil., vol. 141, no. 11, pp. 1464–1469, 2013.
[3] “, Dr. Jaime Flores-Estrada,” 2014.
[4] M. R. Amarís, J. B. Rojas, A. G. Batista, C. G. Chaparro, J. P. García, and L.
V. Rodríguez, “Factores asociados al pie diabético en pacientes
ambulatorios. centro de diabetes cardiovascular del caribe. Barranquilla
(Colombia),” Salud Uninorte, vol. 28, no. 1, pp. 65–74, 2012.
[5] M. Flores-reyes, M. S. Camarillo-romero, and J. F. M. V Flores-merino,
“Sustitutos de piel poliméricos para el tratamiento de úlcera en pie
diabético,” vol. 3, no. 205, pp. 74–78, 2015.
[6] M. Ip, S. L. Lui, V. K. M. Poon, I. Lung, and A. Burd, “Antimicrobial activities
of silver dressings: An in vitro comparison,” J. Med. Microbiol., vol. 55, no. 1,
pp. 59–63, 2006.
[7] M. Mishra, H. Kumar, and K. Tripathi, “Diabetic Delayed Wound Healing and
the Role of Silver,” Dig. J. Nano, vol. 3, no. 2, pp. 49–54, 2008.
[8] Consenso del grupo de trabajo Wounds International, “Consenso
Internacional. Uso adecuado de los apósitos de plata en las heridas,”
Wounds Int., p. 24, 2012.
[9] K. Alexiadou and J. Doupis, “Management of diabetic foot ulcers,” Diabetes
Ther., vol. 3, no. 1, pp. 1–15, 2012.
[10] M. Osorio Delgado et al., “Matrices nanocompuestas de alcohol de polivinilo
(PVA)/celulosa bacteriana (CB) para el crecimiento celular y la ingenieria de
tejidos,” Rev. Colomb. Mater., no. 5, pp. 338–346, 2014.