Transporte de sustancias a través de

las membranas celulares

Difusión: Movimiento continuo de moléculas entre sí en los líquidos
o los gases. A favor de un gradiente electroquímico (descendente)
(diferencia de concentración y de voltaje) y sin gasto de energía.
Movimiento molecular aleatorio de las sustancias, a través de
espacios intermoleculares de la membrana o en combinación con una
proteína transportadora.
A) Difusión simple:
A través de una abertura de la membrana o a través de espacios
intermoleculares sin usar proteínas transportadoras de la
membrana. Se puede producir:
1) A través de los intersticios de la bicapa lipídica si la sustancia que difunde es
liposoluble (oxígeno, nitrógeno, anhídrido carbónico, alcoholes,
hormonas esteroideas, ácidos orgánicos débiles y bases) y 2) Por
canales acuosos que penetran en la bicapa a través de grandes
proteínas transportadoras (agua y sustancias hidrosolubles).
Puede ocurrir a través de los poros: canales proteínicos que unen a
dos células, como la unión comunicante, o las aberturas de las
células, como en los endotelios capilares, o los intersticios entre
células cercanas en una barrera celular, o incluso los intersticios de
una membrana basal, como en el glomérulo renal.
La bicapa lipídica no permite el paso de moléculas hidrofílicas grandes y sin carga
como la glucosa o moléculas grandes con carga (aminoácidos) o pequeñas (iones
sodio, potasio, cloro, calcio). Moléculas pequeñas y sin carga polar como agua y
urea difunden por la bicapa lipídica en pequeña cantidad. Mayor cantidad de agua
pasa por canales de acuaporina. Estos canales se almacenan en endososomas y se
traslocan a la membrana celular rápidamente. La urea tambien usa transportadores
específicos.
La velocidad de difusión depende de la gradiente de concentración y de la
permeabilidad de la membrana al soluto.
Obedece a la LEY de FICK : J= A/S. D. (C₁ -C₂),
Donde J indica el flujo del compartimiento 1 al 2, A el área y S el espesor de
la membrana; D es el coeficiente de difusión, y C₁ y C₂ las concentraciones
en los dos compartimientos.
De acuerdo a esta ley, la difusión crece de manera lineal con la diferencia de
concentración y las cinéticas de equilibrio a través de la difusión son de
primer orden (exponenciales).
A) Difusión simple
En las membranas lipídicas la difusión depende en esencia de la
dimension y la lipofilia de la molécula. Cuando la difusión es a través
de poros, el número y dimension de estos es más importante que el
área y el espesor de la membrana. Además moléculas de dimensiones
parecidas tienen un coeficiente de filtración diferente en función de su
carga.
La gradiente de concentración depende de las diferencias de
concentración del soluto a ambos lados de la membrana y la
permeabilidad depende del tamaño* de la molécula, su solubilidad
en lípidos y su carga eléctrica.
La carga positiva atrae los iones negativos, mientras que la carga negativa los
repele. A la temperatura corporal normal (37 °C), la diferencia eléctrica que
permitirá que se alcance el equilibrio entre una diferencia de concentración
dada de iones univalentes, como los iones de sodio (Na+), se puede determinar
a partir de la ecuación de Nernst: FEM(en milivoltios) = ―61 log. C1/ C2
Muy importante para comprender la transmisión de los impulsos nerviosos.
La presión es 20 mmHg mayor en el interior del capilar sanguíneo que en el
exterior y permite la difusión de los nutrientes a los tejidos.
El flujo sanguíneo a los tejidos disminuye en la hipotensión, como en el shock
séptico, hasta detenerse en el paro cardiaco.
 Difusión a través de poros y canales proteicos:
Poros: proteínas integrales de membrana  tubos abiertos
 selectividad: diámetro y cargas eléctricas.
Acuaporinas o canales de agua
• Poro estrecho moléculas de agua se difundan en una única fila.
Demasiado pequeño para permitir el paso de iones hidratados.
• Densidad de acuaporina-2 según diferentes condiciones
fisiológicas.
Canales proteicos: Difusión regulada
1) Permeables de manera selectiva a ciertas sustancias.
2) Se pueden abrir o cerrar por compuertas reguladas por señales
eléctricas (canales activados por voltaje) o sustancias químicas
que se unen a las proteínas de canales (canales activados por
ligandos).
Permeabilidad selectiva de los canales proteicos
• Depende del producto: número de canales abiertos*conductancia y
de la fluctuación de los canales entre estado abierto y cerrado.
• Se regula (el canal se abre o cierra en respuesta a las interacciones con el
campo eléctrico o ligandos extra o intracelulares) y modula ( las
interacciones con segundos mensajeros y proteínas, fosforilaciones y otras
modificaciones postraduccionales del canal modifican las cinéticas de
abertura y cierre).
• Se debe a su diámetro, forma y naturaleza de las cargas eléctricas y
enlaces químicos que están situados a lo largo de sus superficies
internas.
• Canales de K: oxígenos de carbonilo, permiten paso de iones
deshidratados mil veces más q Na.
• Canales de Na: superficies internas revestidas con aminoácidos
que tienen carga intensamente negativa. Pueden arrastrar
pequeños iones de sodio deshidratados hacia el interior de
estos canales.
 Activación de los canales proteicos
1. Activación por voltaje: La conformación molecular de la compuerta o de
sus enlaces químicos responde al potencial eléctrico que se establece a
través de la membrana celular. Obedecen a ley del Todo o Nada.
• Cuando el interior de la membrana pierde su carga negativa estas
compuertas se abrirían súbitamente y permitirían que cantidades muy
grandes de sodio entraran a través de los poros de sodio. Es el
mecanismo básico para generar los potenciales de accion nerviosos.
• Las compuertas de potasio están en los extremos intracelulares de los
canales de potasio, y se abren cuando el interior de la membrana celular
adquiere carga positiva. La apertura de estas compuertas es responsable
en parte de poner fin al potencial de acción.
2. Activación química (por ligando):
• Canal de la acetilcolina: poro de carga negativa de 0,65 nm de
diámetro que permite que lo atraviesen moléculas sin carga o
iones positivos menores de este diámetro (Na). Es muy
importante para la transmisión de las señales nerviosas desde
una célula nerviosa a otra y desde las células nerviosas a las
células musculares para producir la contracción muscular.
 Difusión facilitada
Por una proteína transportadora específica.
La velocidad de difusión depende del gradiente de concentración, el
número de portadores disponibles* y la velocidad de unión y
disociación del portador y su sustrato. La velocidad del transportador
no puede exceder la Vmax porque la velocidad a la que se pueden transportar
moléculas nunca puede ser mayor que la velocidad a la que la molécula proteica
transportadora puede experimentar el cambio conformacional o
químico en un sentido y en otro entre sus dos estados. Ej. El transporte de:
1) Glucosa: Cinco moléculas transportadoras, que pueden transportar fructosa
y galactosa. La insulina aumenta 20 veces la difusión de glucosa en músculo
esquelético y adipocitos, mediante la recirculación exocitósica y endocitósica
de vesículas con GLUT4 sobre su membrana. Así acumulan glucosa cuando hay
hiperglicemia.
2) Aminoácidos (la mayoría).
El uniportador transporta una sola sustancia. Si transporta más de una sustancia en
la misma dirección se denomina cotransportador o simportador. Cuando transporta
2 sustancias en direcciones opuestas se conoce como contratransportador o
antiportador.
 Difusión facilitada
Lo más probable es el mecanismo de ping-pong para la proteína
transportadora. En estado ping se expone a concentraciones bajas de soluto y
en pong a concentraciones altas. La transición entre los estados recibe energía
liberada del enlace cuando el portador se une al soluto.
Es más rápida que la difusión simple pero limitada por la disponibilidad del
portador. La cinéticas es del orden 1 para las concentraciones bajas y del
orden cero para las concentraciones altas.
Es proporcional a la concentración del sustrato cuando hay concentraciones
limitadas del sustrato y tiene una Vmax cuando hay concentraciones elevadas
del sustrato, dependiendo del número de moléculas del transportador y del
tiempo que necesita la proteína transportadora para realizar un ciclo de
transporte.
Puede ser regulada por hormonas. La insulina incrementa el transporte
celular de glucosa al movilizar los transportadores de glucosa desde el
reservorio intracelular hacia la membrana.
Hay cotransporte facilitado de sodio con monosacáridos o aminoácidos en las
células tubulares renales y de la mucosa intestinal. Ejemplo de
contratransporte facilitado es el antiportador cloruro-bicarbonato de las
células de los túbulos renales y las parietales del estómago.
Ósmosis a través de membranas con permeabilidad
selectiva:
• Es el movimiento neto de agua que se debe a la diferencia de
concentración del agua. El agua se traslada de la solución
menos concentrada hacia la más concentrada.
• Presión osmótica de la solución de cloruro sódico es la presión
necesaria para detener la osmosis. Esta determinada por el
número de partículas de la solución (moléculas o iones) por
unidad de volumen del liquido, no por la masa de las
partículas. (la concentración molar si es una molécula no
disociada).
Esta presión osmótica impide la salida de agua de los vasos
sanguíneos, ayuda a mantener la volemia.
Las proteinas constituyen solutos no permeantes generan la
presión osmótica denominada coloidosmótica u oncótica,
que es de 25 mm Hg.
 El osmol
Un osmol es el peso molecular-gramo de un soluto osmóticamente activo.
Un osmol de glucosa es 180 g . Si un soluto se disocia en dos iones, un peso
molecular-gramo del soluto se convertirá en dos osmoles porque el numero
de partículas osmóticamente activas es ahora el doble. Cuando esta
disociado, un peso molecular gramo de cloruro sódico, 58,5 g, es igual a dos
osmoles. La osmolalidad se expresa en osmoles/kg de solución.
Osmolaridad es expresada en osmoles por litro de solución.
Para las soluciones diluidas como las que se encuentran en el cuerpo las
diferencias cuantitativas entre la osmolaridad y la osmolalidad son menores
del 1%. Es más practico medir la osmolaridad. La osmolaridad normal de los
líquidos extracelular e intracelular es de 300 mosmol por kilogramo de
agua.
La osmolalidad efectiva o tonicidad se estima mediante:
Tonicidad= 2[Na] + glucosa/18 + BUN/ 2.8.
Remplazando= 2(138) + 90/18 + 18/2.8
Tonicidad = 276 + 5 + 6.4 = 287.4 mOsm/kg. Como vemos la concentración de sodio
es el principal responsible de la osmolaridad. La osmolaridad puede aumentar en la
diabetes por la hiperglicemia y en la insuficiencia renal por la acumulación de úrea.
 Transporte activo
• Transporta moléculas o iones «contra corriente» contra
una gradiente de concentración, eléctrica o de presión
(ascendente) y requiere aporte de energía. Incluye iones
sodio, potasio, calcio, hierro, hidrógeno, cloruro, yoduro,
diversos azucares y la mayor parte de aminoácidos.
• Depende de proteínas transportadoras que penetran a
través de la membrana celular, al igual que en la difusión
facilitada. Sin embargo, la proteína transportadora es
capaz de impartir energía a la sustancia transportada para
moverla contra el gradiente.
 Transporte activo primario
• Mediante proteinas transportadoras llamadas bombas, que tienen
actividad enzimática pues catalizan la hidrólisis del ATP o de otro
compuesto de fosfato de alta energía. Sodio, potasio, calcio,
hidrogeno, cloruro. La energía obtenida es proporcional al logaritmo
del grado en que se concentra la sustancia, segun la fórmula:
Energía (en calorías por osmol) = 1.400 log C₁/C₂
• Bomba de sodio-potasio: En todas las células, transporta 3 iones de
sodio hacia el exterior y 2 iones de potasio hacia el interior. Al perder
una carga positiva genera una corriente eléctrica. Puede funcionar a
la inversa.
• Bombas de calcio: Transportan calcio fuera de la célula y hacia el
interior de retículo sarcoplásmico o mitocondrias. El calcio
almacenado puede liberarse al estimular receptores para IP₃ y
receptores de rianodina. El calcio es diez mil veces menor que en el
extracelular.
• De iones hidrógeno. 1) Secreción de ácido clorhídrico en las
glándulas gástricas del estómago, 2) Eliminación de acidez por los
túbulos contorneados distales y conductos colectores de los riñones,
3) ingreso de iones hidrógeno al interior de los lisosomas para
activar sus enzimas.
 Bomba de sodio potasio
1. Formada por una subunidad α con peso molecular de 100.000
y subunidad β con peso de 55.000. Tiene sitios de unión para
el sodio y el ATP en la cara citoplasmática y sitio de unión para
el potasio en la cara extracelular.
2. Mantiene las concentraciones de sodio extracelular y potasio
intracelular y su gradiente.
3. Contribuye al PMR con -4mV. Electrógena.
4. Permite transmitir las señales nerviosas.
5. Ayuda a controlar el volumen celular. Na jala agua fuera de la
célula.
6. Contribuye al transporte activo secundario de glucosa y
aminoácidos junto con el sodio.
7. Actuaría como receptor para ouabaína en músculo de rata.
Transporte activo secundario
Cotransporte (Simporte): La energía extra de difusión del sodio hacia el interior de la
célula, creada gracias a la bomba de Na-K, permite el ingreso, contra su gradiente, de glucosa
o de aminoácidos junto al sodio (en diferentes proteínas transportadoras) en el intestino
delgado y túbulos renales. Hay neurotransportadores para los neurotransmisores pequeños de tipo amínico y
aminoacídico, como GAT para GABA, DAT para dopamina, NET para noradrenalina y aminas biógenas, SERT para serotonina y
transportadores de glicina y colina. Pueden ser bloqueados: la tiagabina inhibe la recaptación de GABA y es antiepiléptica, la
cocaína inhibe DAT y NET produciendo efectos estimulantes y dependencia. También hay neurotransportadores de glutamato y
Aspartato. Hay cotransporte de cloruro, yoduro, hierro y urato.
El cotransportador K/Cl (KCC) lleva al exterior una pareja de iones de potasio y cloro.
Mientras que el cotransportador N/K/2CL (NaKCC) ingresa un sodio, un potasio y dos cloros.
Contratransporte (Antiporte): Proteína intercambiadora.
A) De sodio-calcio: Sodio adentro, calcio afuera en todas las células, además del transporte
activo 1° de calcio en algunas. Se activa cuando aumentan las concentraciones citosólicos de
calcio. Los Digitálicos al inhibir la bomba de sodio-potasio y reducir el gradiente de sodio
disminuyen la salida del calcio favoreciendo la contraccion ventricular.
B) De sodio-hidrógeno: Sodio adentro, hidrógeno afuera. Mantiene el pH intracelular
principalmente en túbulo contorneado proximal renal. Permite la reabsorción del
bicarbonato: Al salir el H⁺ se une al bicarbonato→ H₂CO₃↔H₂O+ CO₂.
El CO₂ reingresa en las células tubulares regenerando el H⁺ y HCO₃. El bicarbonato reingresa a
la sangre en el lado basolateral a cambio de cloro, y el sodio que había ingresado se expulsa
en el lado basolateral por la bomba de sodio-potasio.
C) De neurotransmisores- hidrogenión: Las ATPasas protónicas vesiculares generan una
gradiente para cargar las organelas intracelulares con neurotransmisores. Sale el ión
hidrogenión a cambio del ingreso del neurotransmisor que se almacena en las vesículas
presinápticas.
Transporte mediado por un transportador
Saturación. Las proteínas portadoras tienen un número limitado de
sitios de unión para el soluto. Cuando todos los sitios de unión están
ocupados, se alcanza la saturación en un punto llamado transporte
máximo o Tm. La cinética del transporte mediado por portador es
similar a la cinética enzimática de Michaelis-Menten. (La Tm es similar a
la Vmáx de la cinética enzimática.)
Estereoespecificidad. El transportador de glucosa en el túbulo proximal
renal reconoce y transporta el isómero natural (la d-glucosa) pero no
reconoce ni transporta el isómero no natural (la l-glucosa). En cambio,
la difusión simple no distingue entre los dos isómeros de glucosa
porque no interviene ninguna proteína transportadora.
♦ Competición. El transportador de glucosa es específico de la d-
glucosa, pero también reconoce y transporta un azúcar muy
relacionado (la d-galactosa). Por tanto, la presencia de d-galactosa
inhibe el transporte de d-glucosa al ocupar algunos de los sitios de
unión, haciendo que no estén disponibles para la glucosa. La
FLORIDZINA limita la absorción intestinal de glucosa. Hay inhibición
competitiva (reversible) y no competitiva (irreversible).
Endocitosis: Requiere consume de ATP
Proceso por el cual las células eucariotas captan moléculas pequeñas, macromoléculas,
partículas grandes, incluso pequeñas células del ambiente extracelular mediante
invaginación de la membrana plasmática. Se forma una vesícula endocítica que transfiere
su contenido hacia organelos mediante fusión de sus membranas.
A) Fagocitosis (ingestion celular) es la endocitosis de células, bacterias, virus o detritus.
Propia de protistas unicelulares y leucocitos. Es actina dependiente ya que requiere la
reorganización del citoesqueleto dependiendo de la actina.
B) Pinocitosis (bebida celular) es la endocitosis de agua (pinocitosis de fase fluida), o
sustancias disueltas.
C) Endocitosis mediada por receptores (de absorción), traslada macromoléculas
específicas (nutrientes). Depende de moléculas de clatrina que se unen a los receptores
formando fositas. Proceso rápido y eficiente de sustancias que pueden escasear en el LEC.
Ej. la endocitosis de hormonas proteicas, factores de crecimiento, anticuerpos y proteinas
transportadoras de hierro (complejo transferrina –receptor) o colesterol (LDL ) o de virus
(hepatitis, polio, SIDA). También de colesterol y triglicéridos.
D) De segmentos de membrana celular.
Exocitosis:
Liberación de macromoléculas sintetizadas hacia el exterior a través de la fusion de la
membrana de la vesícula con la membrana celular. También para expulsar sustancias
indigeribles. Permite la reconstrucción de la membrana, incorporación de antígenos,
formación de la matriz extracelular (colágeno), liberación de hormonas (insulina) y
neurotransmisores. Secreción de inmunoglobulinas.