LABORATORIO VII

ACCION DE UNA ENXIMA DE TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES

RESUMEN

En este laboratorio realizaremos experimentos para observar la reacción de un

catalizador orgánico MnO2 y otro catalizador inorgánico Peroxidasa este se
encuentra en tejidos animales y vegetales.
Esto produce una reacción química
2H202------------------ 2H2 + 02
OBJETIVOS
1. Observe el efecto de la enzima: Peroxidasa que se halla presente en tejidos
tanto animales como vegetales.
2. Compare la acción de la peroxidasa (catalizador orgánico) y el bióxido de
manganeso (Catalizador inorgánico) sobre el mismo sustrato (Agua
oxigenada)
3. Compruebe el efecto de la variación de la temperatura en la actividad
enzimática
METODOLOGIA
1. Acción de un catalizador inorgánico (Mn02) sobre el agua
oxigenada

Marcamos 3 tubos de ensayo 1,2 y 3 a cada uno le agregamos una pequeña

porción de Mn02 y realizamos los siguientes procedimientos:

Tubo 1: Le agregamos 2ml de agua oxigenada H202 con la pipeta

Observamos que hay una reacción química con una gran liberación
de oxigeno por que vemos una gran cantidad de oxígeno.
El Mn02 tiene el papel catalizador acelerando la reacción tiene la
tendencia de ganar electrones cuando entra en reacción, por lo
tanto, durante una reacción química, el catalizador (MnO2) gana
electrones, este proceso se denomina reducción y el H202 permite
la oxidación de la reacción intoxicando la célula y además hay un
desprendimiento de calor por lo tanto es una reacción exotérmica.

Tubo 2: Tomamos el tubo de ensayo con Mn02 y lo ponemos en un baño maría

por 10 minutos, lo retiramos y rápidamente le agregamos 2 ml de agua oxigenada
y observamos.

En este tubo de ensayo la reacción es de una mayor

intensidad puesto que el calor generado por el baño maría
funciona como catalizador acelerando y elevando la
reacción.

Tubo 3: Tomamos el tubo de ensayo con el MnO2 y ponemos en un balde con

hielo durante 10 minutos, lo retiramos e inmediatamente le agregamos los 2ml de
agua oxigenada H2O2.
 En este tubo de ensayo hay una reacción más lenta y menor
a la del tubo anterior, hay un desprendimiento de calor
mínimo y tenemos una liberación de O2 ya que hay
presencia de burbujas.
La disminución de temperatura actúa como un catalizador,
pero en este caso lo que hace es disminuir la velocidad de la
reacción.

2. Acción de un catalizador de origen animal (hígado de vaca) sobre

el agua oxigenada.

Para este experimento marcamos 4 tubos de ensayo de la forma 1,2,3 y 4.

Tubo 1: A este le agregamos un pedazo pequeño de hígado y luego le agregamos
2ml de agua oxigenada observamos la reacción.

Hay una reacción entre el agua oxigenada y el hígado

generando burbujas rápidamente, gran cantidad de burbujas
por la liberación de O2 y hay una liberación de calor, reacción
exotérmica.
El papel que desempeña el hígado en la reacción es que
contiene la enzima catalizadora peroxidasa y la naturaleza de
esta sustancia es de carácter animal.

Tubo 2: Tomamos un pedazo de hígado parecido al anterior y lo sometemos a un

baño maría durante unos 10 minutos, luego lo retiramos y rápidamente agregamos
2ml de agua oxigenada.
 En este tubo de ensayo observamos como el hígado
cambia de color por la presencia de temperatura el cual
desnaturaliza la enzima peroxidasa, por lo tanto, no hay
reacción a diferencia que en el tubo 2 con Mn02.

Tubo 3: Tomamos un pedazo de hígado pequeño aproximadamente del mismo

tamaño al tomado en los tubos anteriores, luego lo ponemos en un balde con hielo
durante 10 minutos para disminuir la temperatura.
Observamos una reacción química en donde hay una
liberación de energía y de oxígeno, la reacción es menor a la
del tubo 1 con hígado a temperatura ambiente, esto sucede
por la disminución de la temperatura actúa como catalizador
de la reacción haciéndola más lenta y débil.
Si dejáramos que la muestra volviera a temperatura ambiente
y le agregáramos 2ml de agua oxigenada , la intensidad de la
reacción es diferente ya que en el tubo 1 no se ha expuesto a
ningún catalizador y por esto reacciona, en cambio en el tubo
3 ya hubo exposición y esto hace que no haya menos
reacción.

Tubo 4: Agregamos una pequeña cantidad de hígado macerado haciendo una

porción parecida a las anteriores tomadas, lego le agregamos 2ml de agua
oxigenada.

Ocurre una reacción muy rápida y exotérmica puesto que hay

una gran liberación de calor, también tenemos una gran
cantidad (Más que en las muestras anteriores) de liberación de
O2.
Esto sucede por que al macerar el hígado hay más libertad y
disponibilidad de la enzima peroxidasa
Ahora a el Tubo 2 Con MnO2 y el tubo 2 con hígado ya que están a temperatura
ambiente les agregamos nuevamente 2ml de agua oxigenada a cada uno.

Observamos que hay una pequeña reacción en el la muestra de MnO2 liberando

un poco de calor y un poco de oxígeno, esto sucede por que el calor afecta la
enzima catalizadora y la consume.
En la muestra de hígado sigue sin reaccionar esto se debe a que la enzima
peroxidasa esta desnaturalizada

3. Acción de un catalizador de origen vegetal papa sobre el agua

oxigenada.
Marcamos los 4 tubos de ensayo del 1 al 4: 1,2,3 y 4
Tubo 1: Le agregamos un pedazo de papa pequeño y luego 2ml de agua
oxigenada y observamos

Observamos una reacción donde da como resultado calor

y burbujas por esto es una reacción exotérmica y hay
desprendimiento de O2.
El papel que desempeña la papa en la reacción es de
catalizador, ya que tiene peroxidasa, la naturaleza
química de esta sustancia es de origen vegetal es una
molécula orgánica que acelera la reacción.

Tubo 2: En este tubo agregamos una pequeña porción de papa de igual tamaño al
anterior y lo sometemos a baño maría durante 10 minutos, luego de esto le
agregamos rápidamente 2ml de agua oxigenada y observamos.
 Observamos que no hay reacción química, no hay presencia de
calor ni de burbujas, porque al someter la muestra a el baño
maría desnaturalizamos las enzimas catalizadoras
Esto es muy diferente a lo que sucede en el tubo 2 de Mno2 ya
que ahí la reacción es mucha más fuerte porque la temperatura
actúa como catalizador aumentando la velocidad de la reacción.

Tubo 3: Agregamos un pequeño trozo del mismo tamaño que los tomados
anteriormente, lo ponemos en el tubo de ensayo y lo llevamos a aun balde con
hielo donde lo dejamos 10 minutos. Lo sacamos y rápidamente agregamos 2ml de
agua oxigenada y observamos.

Observamos que hay reacción exotérmica y además hay un desprendimiento de

oxígeno, pero su proporción es menor a la de la muestra a temperatura ambiente,
ya que la disminución de la temperatura actúa como catalizador disminuyendo la
velocidad e intensidad de la reacción.
Si esperáramos que la muestra estuviera a temperatura ambiente, ¿qué pasaría?
Cuando dejamos que la papa vuelva a su temperatura ambiente, la intensidad de
la reacción es diferente ya que en el tubo 1 no se ha expuesto a ningún catalizador
y por esto reacciona, en cambio en el tubo 3 ya hubo exposición y esto hace que
no haya reacción.

Tubo 4: En este tubo agregamos una pequeña porción de papa macerada y luego
le adicionamos 2ml de agua oxigenada.
 En esta muestra la reacción es mucha mas fuerte, hay un
desprendimiento de calor mayor a el de los antes mencionados
y mayor liberación de oxigeno (Más presencia de burbujas).
Esto sucede debido a que la enzima esta expuesta y puede
reaccionar más.

Esperamos que el tubo 3 con papa este a temperatura ambiente y le agregamos 2

ml más de agua oxigenada, esto mismo lo hacemos con el tubo 3 con MnO2 y
observamos:

Miramos que en la papa no hay reacción por que la enzima ya

esta desnaturalizada, a diferencia de la muestra con MnO2
que, si tiene reacción, pero no de la misma intensidad que
tubo, primeramente.

Ahora comparamos los tubos sometidos a baño maría con hígado y papa ya que
están a temperatura ambiente.
Agregamos 2 ml de agua oxigenada a cada uno y observamos que ninguno de los
2 tienen reacción.
como conclusión tenemos que las enzimas orgánicas tanto animales como
vegetales se desnaturalizan con la temperatura.
Otra conclusión es que la intensidad de las reacciones es más fuerte cuando se
utiliza hígado, esto es por que en los catalizadores de origen animal hay una
mayor y mas accesible presencia de catalasa.

PREGUNTAS
1. ¿En toda reacción enzimática hay liberación de energía? Explique.
R//No necesariamente puesto que en algunos casos esta energía podrá ser
almacenada para luego poder ser utilizada en otras reacciones o mecanismos
(Ejemplo: Funcionamiento de las Enzimas Celulares).
2. Siempre que en una reacción enzimática se libera energía ¿es en forma de
calor? Explique.
R//Generalmente las reacciones catabólicas como en este caso, cuando presentan
una liberación de energía es en forma de calor, debido a que los metabolismos
más complejos tienen enlaces de alta energía que al romperse generan dicho
calor. Sin embargo, la efervescencia que produce la liberación de un gas (oxigeno)
también se considera como liberación de energía.
3. ¿Qué cambios pueden sufrir, con relación a la estructura química y al número
inicial de moléculas, el sustrato y la enzima en una reacción?
R//Durante una reacción química el sustrato puede transformarse, es decir, perder
o ganar moléculas dependiendo de los compuestos y el medio con el cual
reaccione (en este caso pierde porque se degrada). En cuanto a la enzima esta se
puede desnaturalizar como vimos por acciones externas (temperatura), cambiar su
configuración química dependiendo de la situación o el factor, pero conservando
su cualidad catalizadora.
4. Si usted hace reaccionar agua oxigenada con peroxidasa y espera hasta que
termine la reacción, ¿Cómo comprobaría que la enzima conserva su poder
catalítico?
R//Podríamos adicionar nuevamente agua oxigenada a la muestra, una vez
termine la reacción dejar que la enzima actúe completamente y quede libre de
nuevo, luego ver si todavía esta puede ser catalizada generando más oxígeno.
También podríamos eliminar el oxígeno que se produjo en la reacción inicial del
tubo de ensayo y adicionar nuevamente agua oxigenada una vez la enzima este
libre y naturalizada para una nueva reacción.

5. ¿En cuál organela celular se sintetizan las enzimas?

R//En el retículo endoplasmático rugoso, generalmente en los ribosomas que es
donde se da la síntesis de proteínas, como las enzimas son proteínas entonces
los ribosomas sintetizan de igual manera a estas, aunque hay algunas enzimas
que son sintetizadas en las mitocondrias, pero se emplean únicamente allí y son
muy pocas.
6. ¿Las enzimas naturales actúan únicamente en el interior de las células?
Explique por medio de varios ejemplos.
R//Muchas de las enzimas se encuentran en el citoplasma de la célula, otras están
unidas a otras células como las enzimas respiratorias que catalizan el
metabolismo del ácido láctico, también las sustancias derivadas de ácidos
aminados (pertenecientes al grupo amino) y ácidos grasos. Otro ejemplo puede
serlos catalizadores inorgánicos utilizados actualmente (como el usado en el
laboratorio, Bióxido de manganeso).
7. ¿Qué otros factores, además de los cambios en la temperatura y en el pH,
influyen en la actividad de una enzima?
R// La concentración de sustrato y enzima *Inhibidores enzimáticos (Competitivos
y no competitivos) * Activadores *Cofactores (necesario para la acción de una
enzima)
8. Desde el punto de vista enzimático, ¿Qué diferencia hay entre la leche cruda y
la pasteurizada?
R//En la leche cruda todos los nutrientes están intactos, por lo tanto, las enzimas
también estarán intactas. Por otro lado, en la leche pasteurizada se destruyen
enzimas, pero a la vez también se destruyen bacterias, por lo que es un proceso
de ambigua utilidad.
9. ¿Cómo explicaría el hecho de que la ptialina de la saliva actúe sobre el almidón
en la boca, pero no en el estómago?
R// La ptialina presente en la saliva empieza a actuar sobre el almidón que entra,
degradándolo y formando maltosa, una vez degradado y vuelto un producto, la
enzima no puede volver a degradarlo, a partir de allí entraría la función del
estómago con sus ácidos y otras enzimas que tomarán sus propios sustratos (bolo
alimenticio) y los convertirán por medio de una segunda transformación en otros
productos (quimo).
10. Cite cinco enzimas con los sustratos respectivos sobre los cuales actúan y los
productos que se obtienen: