FUNDAMENTOS DE ESPECTROFOTOMETRÍA

ESPECTROFOTOMETRÍA
 Es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto
en solución. Para lo que usamos el espectrofotómetro que es un instrumento que
permite compara la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene
una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de
la misma sustancia.
 El color de las sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda
de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas
longitudes de onda no absorbida.

ESPECTRO
El espectro de absorción se observa cuando se pasa a través de una sustancia una
radiación de una gama de frecuencias. Se absorben aquellas frecuencias que son
capaces de producir excitación electrónica

ABSORBANCIA
Proporciona información cualitativa y cuantitativa sobre moléculas organicas,
inorgánicas y bioquímicas.

TRASMITANCIA
Es la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en determinada cantidad de tiempo

PRÁCTICA N° 2: ESPECTROFOTOMETRÍA
MATERIALES: 10 fiolas, beacker, espectrofotómetro, pipetas, propipetas, balanza
analítica, agua destilada, espátula.
REACTIVOS: Amoniaco (NH3), Sulfato de cobre (SO4Cu)
PROCEDIMIENTO:
1. Calculamos la cantidad que se va a pesar para la solución madre:
 Sulfato de cobre (SO4Cu) PM: 159,62 g/mol Eq. g. =2
 Agua (H2O) PM: 90 Eq. g. =1

159,62 g/mol
(SO4Cu) = 79,81 + 90 = 169,8 g
2
Ahora haremos una regla de tres simple:
169,8 g 1M 16,98g 1000 ml
X 0,1 M x 100 ml
X = 16,98g
x = 1.69g
 2. Pesamos 1,69 g. de Sulfato de cobre (SO4Cu) y lo colocamos en un beacker,
luego agregamos 20 ml de agua destilada para después colocarlo en una fiola
de 100 ml y llenar agua destilada hasta el menisco superior (solución coloreada).
Se obtuvo una solución de sulfato de cobre valorada (Solución madre 0,1 M)

Solución madre preparada

3. A continuación vamos a preparar soluciones con 1ml, 2 ml, 3,5 ml, 5 ml, 6ml,7,
ml, 8,5 ml, y 10 ml de la solución madre de sulfato de cobre, agregándole 10 ml
de amoniaco a cada una de ellas para luego enrasar con agua destilada.
Con la ayuda de una propipeta vamos a colocar en un beacker 10 ml de amoniaco +
2ml de solución madre, lo que va formar un complejo cuproamoniacal (azul intenso),
luego llevamos a una fiola de 100 ml para agregar agua destilada hasta el aforo (enrace
superior), para que se homogenice bien realizaremos agitación por inversión y
movimiento. El mismo procedimiento haremos con las demás disoluciones.

1 10 ml de amónico + 2 ml de solución madre

2 10 ml de amónico + 5 ml de solución madre

Solución
10 ml de amónico + 7 ml de solución madre madre
3

4 3 2 1
4 10 ml de amónico + 10 ml de solución madre

Complejos cuproamoniacales

4. Prepararemos el blanco: Extraemos con una pipeta 10 ml de amoniaco, lo

colocamos en un beacker y luego agregamos agua destilada.
 5. Utilizaremos unas cubetas para espectrofotómetro y colocaremos 1ml de todas
las disoluciones que hemos preparado en cada una de las cubetas.

Cubetas con las respectivas disoluciones

6. Ahora con mucho cuidado colocamos las cubetas en el número respectivo dentro
del espectrofotómetro, éstas deben de coincidir con la ventana del portacubeta.
Al finalizar con la lectura que nos dará el espectrofotómetro obtendremos lo
siguiente:

Blanco: 0,112 Podemos apreciar que las

disoluciones se han ido
Disolución 1: 0,181 incrementando, por lo tanto, a
Disolución 2: 0,260 mayor concentración, mayor
absorbancia ya que las moléculas
Disolución 3: 0,403 coloreadas absorben más energía,
porque tienen electrones
Disolución 4: 0,414
excitados en las últimas capas.
RESULTADOS:
Para hallar la absorbancia de las disoluciones, debemos restar la absorbancia
del blanco con cada una de ellas.
Calculando las concentraciones con la
 Blanco: 0,112 siguiente fórmula: C1.V1 = C2.V2

Disolución 1: 0,181 - 0,112 = 0.069 Sol. 1ml: 0.1x 1=C2 x 100 = 0.001

Disolución 2: 0,260 - 0,112 = 0.148 Sol. 2 ml: 0.1x 2=C2 x 100 = 0.002

Disolución 3: 0,403- 0,112 = 0.291 Sol. 3,5 ml: 0.1x 3,5=C2 x 100 = 0.0035

Disolución 4: 0,414- 0,112 = 0.302 Sol. 5 ml: 0.1x 5=C2 x 100 = 0.005
 Sol. 6 ml: 0.1x 6=C2 x 100 = 0.006

Sol. 7 ml: 0.1x 7=C2 x 100 = 0.007

Sol. 8,5 ml: 0.1x 8,5 =C2 x 100 = 0.0085

Sol. 10 ml: 0.1x 10=C2 x 100 = 0.01

Graficaremos en una una curva de calibración las concentraciones y

absorbancias que se ha calculado.
T VOLUMEN DEL VOLUMEN DEL ABSORBANCIA CONCENTRACIÓN DEL
u AMONIACO/FIOLA SULFATO DE MEDIDA COMPLEJO
b DE 100 ml COBRE 0,1 M CUPROAMONIACAL (mol/l)
o
1 10 ml 1 ml 0.030 0.001
2 10 ml 2 ml 0.069 0.002
3 10 ml 3,5 ml 0.098 0.0035
4 10 ml 5 ml 0.148 0.005
5 10 ml 6 ml 0.252 0.006
6 10 ml 7 ml 0.291 0.007
7 10 ml 8,5 ml 0.299 0.0085
8 10 ml 10 ml 0.302 0.01

CONCLUSIONES:
 Se aprendió a manejar un espectrofotómetro, que mide la absorbancia de una
sustancia a diferentes longitudes de onda.
 Para la obtención de los espectros del sulfato de cobre (disolución madre) se
puede observar que, a mayor concentración, el máximo de absorbancia es
mayor a comparación de una disolución menos concentrada.
 Comprobamos la ley de Lambert-Beer donde la Absorbancia y la Concentración
son directamente proporcionales, a mayor concentración del soluto en una
solución mayor será la cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra.
 Se dio a conocer los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación
de concentraciones en soluciones, así como también se adquirió la noción sobre
conceptos básicos, como lo es la absorbancia, transmitancia, espectro de
absorción y curva estándar.
 Para enrasar soluciones coloreadas y opacas la curvatura del menisco debe ser
superior y para soluciones transparentes debe ser inferior.
RECOMENDACIONES:
 Los materiales a usar deben enjuagarse con agua destilada.
 Es necesario asegurarse de que las cubetas a utilizar están perfectamente
limpias, no ralladas o adherencias en las paredes por las que ha de pasar la
radiación.
 Utilizar el principio de capilaridad a la hora de pasar la solución del beacker al
matraz, es decir, pegar a la gota al vidrio.
 Homogenizar bien la solución, para evitar valores incorrectos.
 Utilizar la pizeta a la hora de enrasar, agregando lentamente por las paredes del
envase el agua destilada y así evitar turbulencias, burbujas y salpicaduras, y
permitirnos ver a la altura de la vista un enrase correcto.
 Utilizar mascarilla cuando se manipula sustancias como el amoniaco que tiene
un olor fuerte y penetrante.