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21-09-2017

Microscópio
1. Lentes oculares
2. Revólver
3. Lentes objectivas
4. Parafuso macrométrico
5. Parafuso micrométrico
6. Platina
7. Foco luminoso (Lâmpada ou espelho)
8. Condensador e diafragma
9. Braço
10. base

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Microscópio - Componentes mecânicos

• pé ou base – apoio a todos os componentes do • revólver – suporte das lentes objectivas, permite
microscópio trocar a lente objectiva rodando sobre um eixo
• braço – fixo à base, serve de suporte às lentes e à • tubo ou canhão – suporta a ocular na extremidade
platina superior
• platina – base de suporte e fixação da preparação, • parafuso macrométrico – permite movimentos
tem uma abertura central (sobre a qual é colocada verticais da grande amplitude da platina
a preparação) que deixa passar a luz. As pinças
• parafuso micrométrico – permite movimentos
ajudam à fixação da preparação. A platina pode ser
verticais lentos de pequena amplitude da platina
deslocada nos microscópios mais modernos, nos
para focagem precisa da image
antigos tinha que se mover a própria amostra,
segura pelas pinças.

Microscópio - Componentes ópticos


• condensador – sistema de duas lentes (ou mais) • lente objectiva – conjunto de lentes fixas no
convergentes que orientam e distribuem a luz emitida revolver, que girando permite alterar a objectiva
de forma igual pelo campo de visão do microscópio consoante a ampliação necessária. É a lente que
• diafragma – regula a quantidade de luz que atinge o fica mais próxima do objecto a observar,
campo de visão do microscópio, através de uma projectando uma imagem real, ampliada e
abertura que abre ou fecha em diâmetro (semelhante invertida do mesmo.
às máquinas fotográficas) • As objectivas secas, geralmente com ampliação de
• fonte luminosa – actualmente utiliza-se luz artificial 10x, 40x e 50x, são assim designadas porque entre
emitida por uma lâmpada incluída no próprio a sua extremidade e a preparação existe somente
microscópio com um interruptor e algumas vezes com ar.
um reóstato que permite regular a intensidade da luz. • As objectivas de imersão (ampliação até 100x),
• lente ocular – cilindro com duas ou mais lentes que pelo contrário, têm a sua extremidade mergulhada
permitem ampliar a imagem real fornecida pela em óleo com o intuito de aumentar o poder de
objectiva, formando uma imagem virtual mais próxima resolução da objectiva: como o índice de refracção
dos olhos do observador. As oculares podem ser de de óleo é semelhante ao do vidro o feixe de luz
diferentes ampliações sendo a mais comum de 10x. A não é tão desviado para fora da objectiva.
imagem criada pela ocular é ampliada, direita e virtual.

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Microscópio
• Em qualquer microscópio binocular, há pelo menos uma ocular que
pode ser focada. Após o ajuste para da distância interocular
(separação entre os olhos), foque o exemplar utilizando a ocular fixa.
De seguida, ajuste a outra ocular de modo a que ambos os olhos
estejam confortavelmente focados no mesmo plano.
• A maioria dos microscópios modernos têm várias objetivas ,
oferecendo uma escolha de ampliações. Os nossos microscópios são
todos " parafocais – mantêm-se focados quando se muda de
objetiva”. Deste modo só é necessário ajuste micrométrico, quando
se muda de objetiva.

Três regras para o transporte de um microscópio :

• Concentre toda a sua atenção no que está a fazer.


• Use as duas mãos (uma na base outra no braço)
• Sempre carregue o microscópio vertical (caso contrário, as oculares
pode cair para fora ) .

Regras para a limpeza de um microscópio


• 1. Não faça!
É fácil danificar um microscópio por limpeza imprudente .
A menos que tenha recebido treino adequado para limpar um
microscópio, por favor não tente .
• Nunca toque a superfície das lentes.
• As superfícies ópticas só devem ser limpas quando absolutamente
necessário .
• É melhor ignorar a sujidade do que para causar danos permanentes
ao microscópio.

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Regras para a limpeza de um microscópio


• Se consegue ver a sujidade, use a lógica e a experiência para determinar onde
está localizada

• Sujidade numa preparação (lâmina), mexe-se quando desloca a platina.

• Sujidade no condensador, fica dentro e fora de foco quando se mexe o


condensador para cima ou para baixo.

• Sujidade numa ocular move-se quando roda a ocular.


• Sujidade numa objetiva não se consegue ver durante a visualização através do
microscópio, mas manifesta-se diminuindo a qualidade da imagem.

Regras para a limpeza de um microscópio


• Se a sujidade puder ser retirada:
• Comece por simplesmente soprando poeira .
• Use papel para lentes limpo e a humidade do bafo de ar.
• Limpe cuidadosamente em numa única direção.
• Não utilize um movimento circular ;
• não esfregue .
• Não tente limpar uma lente objetiva ;
• Peça ajuda.

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Técnica de Kohler para a iluminação no


microscópio óptico

• A principal vantagem de iluminação Köhler é a iluminação uniforme


da amostra. Com esta técnica, reduzem-se os artefatos da imagem e
fornece um alto contraste da amostra.
• Ela requer elementos ópticos adicionais, que são mais caros e podem
não estar presentes em todos os mais microscópios.

Iluminação Kohler – 1

a) elevação do condensador

b) Focar a peparação (objetiva


de x10, por exemplo)

Iluminação Kohler - 2

c) Fechar o diafragma de campo


até 1/3 da abertura

d) Baixar o condensador até


que as lâminas do diafragma de
campo fiquem focadas

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Iluminação Kohler -3

e) Centrar o diafragma no
campo visual

f) Abrir o diafragma até que


desapareça do campo visual.
Pode-se retirar a ocular para
melhor observar.

Iluminação Kohler - 4

g) Retirar a ocular e abrir o


diafragma de modo a iluminar
cerca de ¾ do campo visual

Repetir todo o processo


sempre que mudar de objetiva

filme método Kholer

Medição de exemplares
• Ocular micrométrica
• Objetiva micrométrica

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Medição de exemplares
Questões?

1) Em qual das imagens estamos a utilizar uma maior ampliação ?

2) Sabendo que a régua tem uma escala de 1 mm, indique para a objetiva a,
qual a dimensão de um objeto que mede 40 divisões da ocular
micrométrica.

3) E se fosse na objetiva b, qual seria o valor ?

Cálculo do poder de resolução de uma objetiva

Questão:

1) Com auxílio da fórmula acima apresentada, calcule o poder de resolução para cada
uma das objetivas do microscópio que está a utilizar.
2) Com que objetiva é que estruturas muito próximas, ainda se conseguem individualizar
? Qual a distância mínima entre elas ?

Fotografia com smartphone


• As imagens das aulas de histologia que devem utilizar para estudo,
devem ser obtidas através do smartphone.
• Sobre elas devem elaborar a legenda

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