paenriquez@espe.edu.ec, rigongora@espe.edu.ec
Resumen— respect the fast prior to the extraction and analysis of the
El análisis de sangre es una de las prácticas más relevantes sample. Fundamentally the work sought to bring the student
para determinar las condiciones en las que se encuentra el to the methods and instruments used in the laboratory to
individuo de interés. En el presente trabajo se detallan los analyze blood samples, as well as to understand the
análisis bioquímicos que se realizaron a dos estudiantes de la biochemical foundations that explain each of the conditions
carrera de Ingeniería en Biotecnología, M1 y M2 (diseases) that may occur in the body if there is any deficiency
respectivamente. Se tomaron muestras de 5 mL de sangre no or excess at the level of metabolism, such as diabetes,
consecutivas en un periodo de dos meses, cada dos semanas coronary heart disease, gout, etc.
se tomó una muestra de sangre por estudiante (dos) para Keywords— Venipuncture, glucose, cholesterol, urea, uric
aplicar el protocolo correspondiente a cada estudio que se iba acid, blood.
a realizar (glucosa, triglicéridos, colesterol, etc.) se utilizó
jeringuilla y vacutainer, con una finalidad didacta, I. INTRODUCCIÓN
familiarizar al estudiante con ambos protocolos de extracción
de sangre. Cabe recalcar que los resultados obtenidos en cada Son de gran importancia los análisis de sangre
ensayo no reflejan realmente el estado de salud del estudiante debido a que proporcionan información acerca del
debido a que en algunas prácticas, los estudiantes no metabolismo del paciente y además permiten el diagnóstico y
respetaron el ayuno previo a la extracción y análisis de la seguimiento de las diversas patologías como aterosclerosis,
muestra. Para el análisis de glucosa se usó el KIT de HUMAN, diabetes y desnutrición (Martínez, 2012).
para los otros análisis los Kits de Linear Chemicals. Para los análisis se debe tomar en cuenta algunas
Fundamentalmente el trabajo buscó acercar al estudiante a los variables biológicas que son importantes para las diferentes
métodos e instrumentos que se utilizan en el laboratorio para interpretaciones de los resultados, tales como: edad, sexo,
analizar muestras de sangre, así como entender los ayuno, ingesta de medicamentos, gestación entre otros.
fundamentos bioquímicos que explican cada una de las Respecto a la calidad de los valores obtenidos se deben al
condiciones (enfermedades) que se puedan presentar en el cumplimiento correcto de los parámetros del funcionamiento
organismo si existe alguna deficiencia o exceso a nivel del de cada instrumento no obstante se obtendría unos valores
metabolismo, como por ejemplo la diabetes, las fuera de los rangos adecuados (Hernández, 2010).
enfermedades coronarias, la gota, etc. La sangre es un tejido conectivo compuesto por una
Palabras Claves— Venopunción, glucosa, colesterol, úrea, ácido fase liquida, el plasma y por elementos formes, eritrocitos,
úrico, sangre leucocitos y trombocitos, los cuales están suspendidos en el
plasma. Su principal función es el transporte de nutrientes,
Abstract— Escribir el resumen en inglés. hormonas, productos del metabolismo y oxígeno a todas las
células del organismo (Rodak, 2005).
The blood test is one of the most relevant practices to La venopunción es una técnica que permite la
determine the conditions in which the individual of interest extracción de sangre venosa de la fosa antecubital del brazo
is. In the present work the biochemical analyzes that were o del dorso de la mano usando jeringuilla o vacutainer, previo
carried out to two students of the Biotechnology Engineering a su realización se debe conocer el volumen de sangre
career, M1 and M2 respectively, are detailed. Samples of 5 requerido y el análisis a realizar con el fin de darle el
mL of non-consecutive blood were taken in a period of two tratamiento adecuado a la muestra como son el tipo de tubo o
months, every two weeks a blood sample was taken per la temperatura de almacenamiento. La técnica debe ser
student (two) to apply the protocol corresponding to each realizada por personal capacitado, el cual conozca y cumpla
study that was going to be performed (glucose, triglycerides, las normas de bioseguridad con el fin de evitar accidentes
cholesterol , etc.) syringe and vacutainer were used, with a (Rodak, 2005).
didactic purpose, to familiarize the student with both blood Haciendo referencia a la glucosa, los carbohidratos
extraction protocols. It should be noted that the results ingeridos son metabolizados hasta convertirse en glucosa la
obtained in each trial do not really reflect the health status of cual es liberada al torrente sanguíneo, en respuesta, el
the student because in some practices, students did not páncreas secreta insulina la cual permite la absorción de
glucosa para su uso. La glucosa debe encontrarse en niveles
normales de 60 a 90 mg/dL antes de comer o 120 mg/dL Ecuador).
después de comer. Por otro lado el análisis de glucemia es
necesario para conocer el estado metabólico del individuo, La obtención de datos se realizó a partir de dos
principalmente se lo realiza a individuos con diabetes, en caso estudiantes de Ingeniería en Biotecnología (muestra de
de que exista una deficiencia de glucosa se le conoce como estudio), su información se detalla en (tabla I).
hipoglucemia o un exceso, hiperglicemia.
Otro análisis importante es el colesterol ya que este Tabla I: Datos de los pacientes estudiados.
es un esterol o molécula lipídica absolutamente necesaria
para el organismo de los animales ya que forma parte de las Estudiante 1 Estudiante 2
membranas plasmáticas de las células eucariotas, siendo un (M1) (M2)
componente esencial para su estabilidad estructural y
funcional. Además es el precursor de otros esteroides que cumplen
importantes funciones fisiológicas tales como ácidos biliares,
Edad 22 años y 3 meses 21 años y 7 meses
hormonas esteroideas, vitamina D, entre otros (Garrido & Teijón,
2006). Peso 68 kg 75 kg
Existen problemas asociados al colesterol que se
producen cuando se encuentra en cantidades superiores a las Medicación No No
normales, esto es debido a que se deposita en la pared de los
conductos sanguíneos, las arterias, produciendo una pátina de Género Masculino Masculino
grasa que va creciendo en el paso del tiempo hasta taparlas,
lo que produciría un infarto de miocardio (Luis, 2009).
Dentro de la dieta, los triglicéridos representan un
90% de las grasas que se ingieren y el resto está formado por
colesterol. Su metabolismo puede verse afectado por factores
genéticos, ambientales, nutricionales y el estilo de vida, que
no permiten la correcta degradación de colesterol y
triglicéridos que pueden causar alteraciones metabólicas
(Hernández, 2010).
La urea es un compuesto químico nitrogenado y
cristalino, es un producto terminal del metabolismo de las
proteínas en el organismo. Las proteínas están formadas por
una cadena muy larga de aminoácidos que, al degradarse,
liberan amonio, un compuesto muy tóxico para el cerebro.
Nuestro organismo lo elimina convirtiéndolo en urea,
mediante una serie de reacciones enzimáticas cíclicas, el ciclo
de la urea, que convierten el amonio tóxico en urea, que no es
tóxica y se elimina fácilmente por la orina. (Universidad de
Barcelona, 2008)
Finalmente el ácido úrico es el producto del desecho
terminal del metabolismo purinico en donde los riñones
filtran la mayor parte del ácido úrico presente en la sangre y
lo eliminan del organismo a través de la orina. Los médicos
solicitan análisis de ácido úrico en sangre si sospechan que
hay niveles elevados de ácido úrico en el torrente sanguíneo
porque el cuerpo está descomponiendo células con demasiada
rapidez o no está expulsando el ácido úrico como debiera.
(Nemours, 2011)
II. MÉTODO
Locación.
En la presente revisión se exponen resultados obtenidos a
partir de muestras de sangre tomadas en los laboratorios de
docencia de la carrera de Ingeniería en Biotecnología
perteneciente a la Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE
(Av. General Rumiñahui s/n y Ambato, Sangolquí –
. Glucosa.
Blanco Estándar M1 M2
RGT 1000 µl 1000 µl 1000 µl 1000 µl
STD - 10 µl - -
M1 - - 10 µl -
M2 - - - 10µl
Las muestras se incubaron a 37°C por 5 minutos a baño Ilustración4: Detalle del contenido del KIT.
maría. Posteriormente se midió la absorbancia a 546 nm de
longitud en el espectrofotómetro (se lo calibró usando el
Las muestras se incubaron a 37°C por 5 minutos a baño
Blanco) para proceder con la medición de las muestras.
maría. Posteriormente se agregó el R3 para incubar a 37°C
Se calculó la concentración de colesterol mediante la
por 5 minutos a baño maría nuevamente. Luego, se midió la
siguiente fórmula:
absorbancia a 590 nm de longitud en el espectrofotómetro (se
lo calibró usando el Blanco) para proceder con la medición
∆Amuestra de las muestras.
C = 100 x [mg/dl]
∆A STD Se calculó la concentración de urea mediante la siguiente
fórmula:
La finalidad de todas estas determinaciones es evaluar
tentativamente el estado de salud del estudiante, aunque cabe ∆Amuestra
recalcar que los análisis no fueron tan rigurosos, en vista de C = 50x [mg/dl]
∆APatrón
que no se respetaron las condiciones que debía cumplir el
paciente ara que los resultados sean aceptados.
Ácido Úrico.
Para el análisis del ácido úrico en sangre se utilizaron los factores que más influye en el análisis sanguíneo es el ayuno
reactivos del KIT URIC ACID MR desarrollado por Linear aunque existen algunos hábitos que pueden alterar la muestra
Chemicals. El método utilizado fue ácido úrico MR, una y entonces el valor que se obtenga no necesariamente refleja
prueba enzimática colorimétrica. El ácido úrico se oxida por la verdadera situación del paciente.
la acción de la enzima uricasa en presencia de agua, dando Respecto al análisis de glucosa en suero se obtuvo que:
como resultado alantoina y peróxido de hidrógeno. Este
último compuesto actua en presencia de la peroxidasa Tabla VI: Absorbancia y concentración de glucosa en
condensando la mezcla de diclorofenol sulfonato (DCFS) y 4 suero.
– aminoantipirina (4 – AA), formando una quinonaimina
coloreada proporcional a la concentración de ácido úrico en Absorbancia Concentración
la muestra. [mg/dL]
STD 0,249 -
Para realizar este análisis se extrajeron 5 mL de sangre por
cada estudiante (M1 y M2); para utilizar el KIT se obtuvo M1 0,419 168,27
suero de las muestras mediante su centrifugación a 5000 rpm M2 0,185 74,70
por 5 minutos. Siguiendo la guía facilitada por la docente a
cargo para este análisis colorimétrico, se emplearon 4 tubos:
Blanco, Reactivo de trabajo, M1, M2 (Tabla V). De acuerdo a los valores de glucosa que se encuentren una
vez realizado el análisis, todos aquellos que entren en el
Tabla V. Distribución volumétrica para el ensayo intervalo de 75 a 115 mg/dl pueden ser aceptados como
normales, (Human, 2005).
Blanco Patrón M1 M2 Respecto al análisis de colesterol en suero se obtuvo que:
R1(Monor 1,0mL 1,0mL 1,0mL 1,0mL
eactivo) Tabla VII: Absorbancia y concentración de colesterol en
CAL - 25 µl - - suero.
(Patrón)
M1 - - 25 µl - Absorbancia Concentración
M2 - - - 25µl [mg/dL]
STD 0,283 -
El KIT que se utilizó contiene los siguiente reactivos: M1 0,231 163,25
M2 0,239 168,91
De acuerdo a los valores de colesterol que se encuentren
una vez realizado el análisis, todos aquellos sean menores a
200 mg/dL, (Linear, S.F.).
Respecto al análisis de HDL en suero se obtuvo que:
Ilustración5: Detalle del contenido del KIT.
Tabla VIII: Absorbancia y concentración de HDL en
Las muestras se incubaron a 37°C por 5 minutos a baño suero.
maría. Posteriormente, se midió la absorbancia a 520 nm de
longitud en el espectrofotómetro (se lo calibró usando el Absorbancia Concentración
Blanco) para proceder con la medición de las muestras. [mg/dL]
Se calculó la concentración de urea mediante la siguiente STD 0,087 -
fórmula: M1 0,172 98,85