Anda di halaman 1dari 5

Isolasi Bakteri

Bacterial Isolation

Hajrazul Pitri
hajrazulpitri.bio17@fkip.unsyiah.ac.id

Abstrak
Praktikum yang berjudul Isolasi Bakteri telah dilaksanakan pada tanggal 20 Maret 2019 di
Laboratorium Pendidikan Biologi. Praktikum ini bertujuan untuk mempelajari teknik cawan gores
dan cawan sebar untuk memisahkan sel dari kultur campuran sehingga diperoleh koloni terpisah.
Metode yang dilakukan pada praktikum ini adalah dengan pengamatan secara langsung. Objek yang
diamati adalah bakteri. Dalam suatu suspensi bakteri, terdapat beberapa jenis atau spesies bakteri.
Untuk mendapatkan suatu spesies yang kita inginkan, maka digunakanlah teknik isolasi. Isolasi
merupakan teknik kultur bakteri yang bertujuan untuk memperoleh biakan murni. Isolat merupakan
hasil dari teknik isolasi, sehingga isolat ini terdiri atas satu jenis bakteri. Teknik isolasi terdiri atas
dua cara, yaitu teknik cawan gores dan teknik cawan sebar.
Kata Kunci: Bakteri, isolasi, isolat.

Abstract

The practice entitled Bacterial Isolation was held on March 20, 2019 at the Biology Education
Laboratory. This practice aims to study the technique of scratch plates and scatter plates to separate
cells from mixed cultures to obtain separate colonies. The method carried out in this practicum is by
direct observation. The object observed is bacteria. In a bacterial suspension, there are several types
or species of bacteria. To get a species that we want, isolation techniques are used. Isolation is a
bacterial culture technique that aims to obtain pure culture. Isolates are the result of isolation
techniques, so that these isolates consist of one type of bacteria. The isolation technique consists of
two ways, namely the scratch cup technique and the scatter technique.
Keywords: Bacteria, isolation, isolates.

1
Hajrazul Pitri : Isolasi Bakteri

Pendahuluan yang dibutuhkan oleh mikroorganisme dan


Mikroorganisme pada suatu lingkungan komponennya tidak diketahui dengan pasti.
alami merupakan populasi campuran dari Media ini umumnya kaya akan nutrisi sehingga
berbagai jenis, baik mikroorganisme pada membantu pertumbuhan mikroorganisme yang
tanah, air, udara, makanan, maupun yang kita inginkan. Beberapa ekstrak seperti ekstrak
terdapat pada tubuh hewan maupun tumbuhan. daging, khamir, tanah, dan daun tersebut sering
Pemisahan suatu bakteri diperlukan untuk digunakan untuk isoasi atau menumbuhkan
mengetahui suatu jenis, mempelajari kultural, mikroorganisme tertentu (Hidayat, 2018, p.
morfologi, fisiologi, dan karakteristik. Teknik 32).
pemisahan tersebut disebut isolasi yang
disertai dengan pemurnian. Pengertian isolasi Metode/ Cara Kerja
bakteri yaitu suatu proses mengambil bakteri Waktu dan Tempat
dari medium atau dari lingkungan asalnya lalu Praktikum dilakukan di Laboratorium
menumbuhkannya di medium buatan sehingga Pendidikan Biologi FKIP Universitas Syiah
diperoleh biakan yang murni (Sabbathini dkk, Kuala Darussalam Banda Aceh pada tanggal
2017, pp. 60-61). 20 Maret 2019.
Isolasi merupakan teknik memperoleh
Target/Subjek/Populasi/Sampel
kultur murni dengan cara memisahkan satu
Mahasiswa/i di Fakultas Keguruan dan
jenis sel mikroba dari campuran mikroba
ilmu pendidikan, prodi Pendidikan Biologi,
lainnya. Tujuan isolasi dalam penelitian ini
Universitas Syiah Kuala dari leting 2017
adalah untuk memperoleh sebuah kultur murni
melakukan praktikum ini dengan tujuan untuk
(Kusumaningrum, 2015, p. 3).
mempelajari teknik cawan gores dan cawan
Isolasi merupakan suatu cara untuk
sebar untuk memisahkan sel dari kultur
memisahkan mikroba dalam hal ini bakteri dari
campuran sehingga diperoleh koloni terpisah.
sampel atau alam dan menumbuhkannya dalam
media kultur secara in vitro sehingga diperoleh Prosedur
biakan murni. Adapun faktor-faktor yang Pada prosedur praktikum teknik isolasi
mempengaruhi hasil kultur mikroba adalah membuat kultur murni bakteri, disediakan alat
jenis media kultur, sifat mikroba dan metode dan bahan, yakni suspensi bakteri, PDA
atau teknik laboratorium (Kambey, 2016, p. 6). sintesis 3,2 gram, aquades 16 mL, autoclave,
Medium pertumbuhan dapat berbentuk hot plate stirer, laminar air flow, jarum ose, dan
cair, padat atau semisolid. Pertumbuhan inkubator. Langkah pertama adalah
bakteri pada media cair ditandai dengan dicampurkan PDA sintesis 3,2 gram ke dalam
kekeruhan media, sedang pada media padat aquades 16 mL, lalu di homogenkan dengan
ditandau dengan terbentuknya koloni. Medua menggunakan hot plate stirer. Setelah itu,
semisolis umumnya dipergunakan untuk larutan PDA tersebut disterilkan ke dalam
melihat motilitas bakteri. Media pertumbuhan autoclave. Setelah sterilisasi, PDA dituang ke
mikroba diperkaya dengan asam amino, dalam cawan petri. Proses penuangan ini
vitamin, sumber karbon dan sumber nitrogen dilakukan di dalam laminar air flow agar
(Marwani, 2015, p. 152). terhindar dari kontaminasi bakteri udara
Media kompleks merupakan media yang ruangan. Setelah itu, PDA di diamkan selama
mengandung seluruh komponen-komponen kurang lebih 3 jam sehingga membentuk agar

2
Hajrazul Pitri: Isolasi Bakteri

sebagai medium dalam teknik isolasi kultur dari dua jenis mikroorganisme, yang dengan
bakteri. sengaja dipelihara satu sama lain dalam
Untuk prosedur cawan gores adalah asosiasi, dikenal sebagai biakan dua-jenis.
dilakukan di dalam laminar air flow. Untuk Fatiqin (2019) menyatakan bahwa,
mengambil suspensi bakteri digunakan alat ose dalam suatu kegiatan mikrobiologi yakni
yang sebelumnya sudah dibakar dengan proses pembuatan isolat dilakukan dengan cara
menggunakan bunsen lalu suspensi bakteri mengambil sampel mikrobiologi dari
diambil dan digoreskan di atas medium agar lingkungan yang ingin diteliti. Dari sampel
secara quadran. Setelah selesai digores, tersebut maka kemudian dibiakkan dengan
medium tersebut disilk dengan menggunakan menggunakan media universal atau media
plastik wrap dan disimpan di dalam inkubator. selektif, tergantung tujuan yang ingin dicapai.
Jika menggunakan media universal akan
Data, Instrumen, dan Teknik Pengumpulan
diperoleh biakan mikroba campuran. Untuk
Data
proses identifikasi maupun isolasi jenis
Data pada praktikum ini merupakan
tertentu saja, dilakukan proses pembuatan
gambar dari hasil pengamatan yang dilakukan.
isolat tunggal dari isolat campuran tersebut.
Teknik pengumpulan data yaitu berupa
Isolat tunggal atau biakan murni merupakan
pengamatan langsung terhadap bahan yang
biakan yang asalnya dari pembelahan satu sel
tersedia.
tunggal.
Teknik Analisis Data Sahlan (2013) menyatakan bahwa, ada
Adapun metode yang dilakukan pada beberapa metode untuk memperoleh biakan
pengamatan ini adalah dengan melakukan murni dari isolat campuran. Dua di antaranya
pengamatan terhadap objek atau preparatnya yang sering digunakan adalah teknik cawan
secara langsung. Metode yang kami lakukan gores dan teknik cawan tuang. Prinsip dari
bersifat kualitatif yang akan dibahas pada kedua teknik tersebut sama, yaitu
pembahan. mengencerkan biakan campuran hingga setiap
individu spesies dapat dipisahkan, sehingga
Hasil dan Pembahasan setiap koloni yang terbentuk merupakan hasil
Alam dkk (2013) menyatakan bahwa, dari pembelahan satu sel
isolasi adalah mengambil mikroorganisme
yang terdapat di alam dan menumbuhkannya
dalam suatu medium buatan. Prinsip dari
isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis
mikroba dengan mikroba lainnya yang berasal
dari campuran bermacam-macam mikroba. Hal
ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya
dalam media padat sel-sel mikroba akan
membentuk suatu koloni sel yang tetap pada
tempatnya. Isolasi bakteri atau biakan yang
terdiri dari satu jenis mikroorganisme (bakteri)
dikenal sebagai biakan murni atau biakan
aksenik. Biakan yang berisi lebih dari satu
macam mikroorganisme (bakteri) dikenal
sebagai biakan campuran, jika hanya terdiri Gambar 1. Teknik Cawan Gores
3
Hajrazul Pitri : Isolasi Bakteri

Ada beberapa jenis metode untuk kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari
memperoleh biakan murni dari suatu sampel pembelahan dari satu sel tunggal.
tertentu. Dua diantaranya yang paling sering
digunakan adalah teknik cawan gores dan Simpulan dan Saran
cawan tuang. Kedua metode ini didasarkan Simpulan
pada prinsip yang sama yaitu mengencerkan Berdasarkan hasil praktikum dapat
organisme sedemikian sedangkan sehingga disimpulkan bahwa isolasi merupakan suatu
individu spesies dapat dipisahkan dari lainnya, teknik dalam mengambil mikroorganisme
dengan anggapan bahwa koloni terpisah yang yang terdapat di alam dan menumbuhkannya
tampak pada cawan petri setelah diinkubasi dalam suatu medium buatan. Prinsip dari
berasal dari satu sel tunggal. isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis
Juwita (2013) menyatakan bahwa, mikroba dengan mikroba lainnya yang berasal
kegiatan identifikasi jamur secara mikroskopis dari campuran bermacam-macam mikroba.
dilakukan dengan sebuah metode mikrokultur. Ada beberapa metode untuk memperoleh
Pada masing-masing isolat mumi jamur yang biakan murni dari suatu sampel tertentu. Dua
ditumbuhkan pada media PDA adalah untuk diantaranya yang paling sering digunakan
mengetahui karakter mikroskopisnya. adalah teknik cawan gores dan cawan tuang.
Namun, dalam praktikum ini metode yang
digunakan adalah metode atau teknik cawan
gores.

Saran
Diharapkan kepada praktikan untuk
berhati-hati dalam menggoresi bakteri ke
dalam medium-medium tersebut. Upayakan
agar selalu dalam keadaan steril agar terhindar
dari kontaminasi oleh bakteri lain.

Gambar 2. Hasil Bakteri dari Teknik Cawan Daftar Pustaka


Gores Alam, M.S, Sarjono P.R, Aminin, A.L.N.
2013. Isolasi Bakteri Selulolitik
Dalam kegiatan praktikum mikrobiologi
Termofilik Kompos Pertanian Desa
pembuatan isolasi dilakukan dengan cara Bayat, Klaten, Jawa Tengah. Chem
mengambil sampel mikroba dari lingkungan Info. 1:1, 190-195.
yang ingin diteliti. Dari hasil sampel tersebut Fatiqin, Awalul., Novita, Riri., Apriani, Ike.
kemudian dikultur atau dibiakan dengan (2019). Pengujian Salmonella Dengan
menggunakan media universal atau media Menggunakan Media Ssa Dan E. Coli
selektif. Dengan teknik isolasi inilah dapat Menggunakan Media Emba Pada
Bahan Pangan. Jurnal Indobiosains.
diidentifikasi jenis bakteri tertentu baik dari 1:1, 28-36.
kelimpahan maupun morfologinya. Riski Hidayat, Nur, dkk. (2018). Mikroorganisme
(2017) menyatakan bahwa, isolasi bakteri dan Pemanfaatannya. Malang: UB
merupakan cara untuk memisahkan atau Press.
memindahkan mikroba tertentu dari Juwita, Dian Ayu., Suharti, Netty., Rasyid,
lingkungannya sehingga diperoleh kultur Roslinda. (2013). Isolasi Jamur
Pengurai Pati Dari Tanah Limbah
murni atau biakan murni. Kultur murni ialah

4
Hajrazul Pitri: Isolasi Bakteri

Sagu. Jurnal Farmasi Andalas. 1:1, Riski, Khofifu., Fakhrurrazi., Abrar, Mahdi.
35-41. (2017). Isolasi Bakteri Staphylococcus
Kambey, Debora., Fatimawali., Manampiring, Aureus Pada Ikan Asin Talang-Talang
Aaltje, E. (2016). Isolasi bakteri (Scomberoides Commersonnianus) Di
resisten merkuri dalam urin pasien Kecamatan Leupung Kabupaten Aceh
dengan tumpatan amalgam di Besar. Jimvet. 1:3, 366-374.
Puskesmas Bahu Manado. Jurnal e Sabbathini, G.C., Pujiyanto, S., Wijanarka.,
Biomedik (eBm). 4:2, 20-29. Lisdiyanti, P. (2017). Isolasi Dan
Kusumaningrum,. Yusmarini., Ali, Akhyar. Identifikasi Bakteri Genus
(2015). Isolasi Dan Identifikasi Sphingomonas Dari Daun Padi (Oryza
Bakteri Asam Laktat Amilolitik Dari Sativa) Di Area Persawahan Cibinong.
Industri Pengolahan Pati Sagu. Jom Jurnal Biologi. 6:1, 59-64
Faperta. 2:1, 11-19. Sahlan., Ahmad, Z. A. M. (2013). Isolasi dan
Marwani, Sri. (2015). Dasar-dasar Identifikasi Penyebab Penyakit
Mikrobiologi Veteriner. Malang: UB Speckle Daun Pisang. J.Hort. 13:3,
Press. 190-196.

Anda mungkin juga menyukai