LABORATORIO N°2.

OXIGENO DISUELTO OD Y DBO5 POR MÉTODO

WINKLER.
1Carlos Andrés Torrado Carrascal - 1611243; 2 Omar Botello Salón -1611242; 3Frank

Alexander Torrado-1610936; 4Mercedes García Carrillo-1611240.

Universidad Francisco de Paula Santander, Programa de Ingeniería
Biotecnológica. Cúcuta, Colombia.
(Septiembre de 2018)

1
Email carlosandrestctoc@ufps.edu.co; 2 omarbs@ufps.edu.co;
3
Frkalex99@gmail.com; 4 mercedesdelosreyesgc@ufps.edu.co.

Resumen

El oxígeno gaseoso disuelto en el agua es vital para la existencia de la mayoría de los macro y
microorganismos acuáticos de carácter aerobio. La cantidad de oxígeno en el agua se determina por la
solubilidad del gas, la presión atmosférica, la temperatura y la pureza del gas; el objetivo de la práctica se
basó en determinar la cantidad de oxígeno disuelto en distintas muestras de agua para observar viabilidad
y contaminación del líquido tomado en distintos puntos, utilizando el método de winkler, tras el desarrollo
de la práctica se logró cuantificar la cantidad de oxígeno disuelto en diferentes tipos de muestra
observando que a mayor cantidad de contaminación la presencia de oxígeno disuelto en el agua se reduce.

Palabras clave: oxígeno, agua, OD, DBO5, winkler.

Abstract

Gaseous oxygen dissolved in water is vital for the existence of most macro and aerobic aquatic
microorganisms. The amount of oxygen in the water is determined by the gas solubility, the atmospheric
pressure, the temperature and the purity of the gas; The objective of the practice is based on determining
the amount of oxygen available in different water samples for observation and contamination of the liquid
at separate points, using the detection method, through the development of the practice, it was possible to
quantify the amount of oxygen. Dissolved in different types of sample observing that the greater amount
of contamination the presence of dissolved oxygen in the water is reduced.

Keywords: oxygen, water, OD, DBO5, winkler.

 1. Introducción
El oxígeno disuelto (OD) es necesario para la
respiración de los microorganismos aerobios,
así como para otras formas de vida aerobia. No
obstante, el oxígeno es ligeramente soluble en
el agua; la cantidad real de oxígeno que puede
estar presente en la solución está determinada
por a) la solubilidad del gas, b) la presión
parcial del gas en la atmósfera, c) la
temperatura, y d) la pureza del agua (salinidad,
sólidos suspendidos). Las concentraciones de
OD en aguas naturales dependen de las
características fisicoquímicas y la actividad
bioquímica de los organismos en los cuerpos
de agua. El análisis del OD es clave en el
control de la contaminación en las aguas
naturales y en los procesos de tratamiento de
las aguas residuales industriales o domésticas.
[1]
La oxidación microbiana o mineralización de
la materia orgánica es una de las principales
reacciones que ocurren en los cuerpos
naturales de agua y constituye una de las
demandas de oxígeno, ejercida por los
microorganismos heterotróficos, que hay que
cuantificar. Uno de los ensayos más
importantes para determinar la concentración
de la materia orgánica de aguas residuales es
el ensayo de DBO a cinco días. Esencialmente,
la DBO es una medida de la cantidad de
oxigeno utilizado por los microorganismos en
la estabilización de la materia orgánica
biodegradable, en condiciones aeróbicas, en
un periodo de cinco días a 20 °C. En aguas
residuales domésticas, el valor de la DBO a
cinco días representa en promedio un 65 a 70%
del total de la materia orgánica oxidable. La
DBO, como todo ensayo biológico, requiere
cuidado especial en su realización, así como
conocimiento de las características esenciales
que deben cumplirse, con el fin de obtener
valores representativos confiables. El ensayo
supone la medida de la cantidad de oxígeno
consumido por organismos vivos en la
utilización de la materia orgánica presente en
un residuo; por tanto, es necesario garantizar
que durante todo el periodo de ensayo exista
suficiente oxígeno disuelto para ser utilizado
por los organismos. [2]
Las muestras utilizadas deben de tener por sí
misma, un número suficiente de
microorganismos adaptados, se puede obtener
agua de siembra por algunos de los métodos
siguientes: agua de recurso receptor (ríos o
lagos), libres de mercada contaminación
industrial y cuya población de
microorganismos sea la que,
mayoritariamente, se encuentre en forma
natural en tales cursos, y esencialmente libre
de sustancias toxicas o interferentes; agua
residual de origen cloacal doméstico, libre de
contaminación industrial. Luego de dejar
sedimentar la temperatura ambiente, durante
no menos de 1 hora, y no más de 36 horas, se
tomará la muestra del líquido sobrenadante;
efluentes sedimentados de una planta de
tratamientos de aguas; agua tomada corriente
abajo (preferentemente de 3 a 8 km.) de una
descarga de agua por analizar, o magua que
contenga microorganismos adaptadas al agua
por analizar y cultivados en el laboratorio
(como en el caso de efluentes industriales que
contienen sustancias que se degradan con
dificultad).[3]
2. Materiales y métodos
2.1. Oxígeno disuelto (OD)
Materiales:
 Probeta de 100 ml
 Erlenmeyer de 250 ml
 Bureta de 50 ml
 Vaso de precipitado de 250 ml
 Pipeteador
  Pipetas de 2ml
 Frascos winkler de 300ml
Reactivos
 solución de sulfato manganoso
 reactivos álcali yoduro nitruro
 ácido sulfúrico concentrado
Indicador y titulante:
 solución de almidón
 solución tiosulfato de sodio 0,025 N
Procedimiento en laboratorio
Tomar 300 ml de la muestra de agua sin que
queden burbujas en el frasco de winkler,
agregar 2 ml de sulfato manganoso,
posteriormente agregar 2 ml de álcali-yoduro
nitrato y dejar que precipite, adicionar 2 ml de
ácido sulfúrico y agitar para eliminar el
precipitado que se forma. Tomar 100 ml del
frasco y ponerlos en un Erlenmeyer, titular con
tiosulfato hasta que la solución pase a amarillo
pálido, agregar 3 gotas de almidón y seguir
titulando con tiosulfato de sodio hasta que la
muestra cambie a incoloro. Registramos el
valor de tiosulfato a 0,025 N consumido.
2.2.Demanda bioquímica de oxigeno
(DBO5)
Materiales:
 Frascos winkler para la incubación para la
DBO de 300 ml
 4 pipetas de 100 ml
 3 pipetas de 5 ml
 Pipeteador
 Probeta de 100 ml
 Erlenmeyer de 250 ml
 Bureta de 50 ml
 Vaso precipitado de 250 ml
 Bomba de acuario
 Incubadora
 Cámara de oxitop
Nutrientes:
 agua destilada
 solución amortiguadora de fosfatos
 solución de sulfato de magnesio
 solución de cloruro de calcio
 solución de cloruro férrico
Reactivos:
 solución de sulfato manganoso
 reactivo de álcali-yoduro nitruro
 ácido sulfúrico concentrado
Indicador y titulante
 solución de almidón
 solución de tiosulfato de sodio 0,025 N
Procedimiento en laboratorio
Depositar agua destilada en un recipiente
plástico y oxigenar con una bomba de acuario
durante media hora. Agregar 1 ml de los
nutrientes: (solución amortiguadora de
sulfatos, sulfato de magnesio, cloruro de calcio
cloruro férrico) por cada litro de agua
destilada, realizar agitación en repetidas
ocasiones, en caso de ser necesario inocular la
solución con el inoculo más eficiente. Medir
directamente en los frascos winkler con una
pipeta y llenar con agua destilada. Determinar
el OD inicial en uno de los frascos inoculados.
Incubar el frasco restante a 20 grados
centígrados durante 5 días y determinar el OD
final.
3. Resultados y discusiones 3.1. Cantidad de oxígeno disuelto

En el desarrollo de la práctica se
ejecutaron los procedimientos para la
medición de oxígeno disuelto OD y la
demanda bioquímica de oxigeno DBO5 de
la muestra de agua, proveniente de la
tubería del acueducto de la ciudad; una vez
obtenidos los valores de cada
procedimiento se aplicó la siguiente
ecuación para obtener las características
del agua analizada:
𝒎𝒆𝒒 𝒈𝒓 Figura 1 resultado final de OD
𝑽(𝒎𝒍) ∗ 𝑵 ( ) ∗ 𝑴𝒆𝒒 ( ) ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎
𝒎𝒍 𝒎𝒆𝒒
𝑶𝑫 =
𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 𝒅𝒆 𝒍𝒂 𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 (𝑳)
𝑶𝑫
Donde: 𝒎𝒆𝒒 𝒈𝒓
(𝟐, 𝟓 𝒎𝒍) ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟓 ( ) ∗ 𝟎, 𝟎𝟎𝟖 ( ) ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎
𝒎𝒍 𝒎𝒆𝒒
=
V= Volumen de tiosulfato gastado en 𝟎, 𝟏(𝑳)
valoración (ml).
𝑶𝑫 = 𝟓
N= Normalidad del tiosulfato 𝑁𝑎2 𝑆2 𝑂3 0,025
(meq/ ml)

Meq= 0,008 (gr/Meq)

Vm = Volumen de la muestra (L)

1000 = factor de conversión de gr a mg

(𝑶𝑫𝟏 − 𝑶𝑫𝟐 ) ∗ 𝑽𝑻
𝑫𝑩𝑶𝟓, 𝒎𝒈/𝒍𝒕 =
𝑽𝒎

Donde:
𝑂𝐷1= OD inicial de la muestra diluida (mg/L)
𝑂𝐷2= OD final de la muestra diluida desde
los 5 días de incubación a 20 °C (mg/L)
Vm= volumen de la muestra pura tomada en
la botella (ml)
Según los cálculos el valor obtenido; 5 se
encuentra entre un rango que indica un
nivel de calidad de agua aceptable, los
resultado era de esperarse debido a que la
muestra analizada era del acueducto de la
ciudad y esta es sometida a tratamientos
antes de ser distribuida en la ciudad.

VT= Volumen del sembrado (300 l)

capacidad de frasco winkler.
3.2.Demanda bioquímica de oxigeno Clasificación del agua según O2
DBO5
 Agua Pura (0 - 20 mg/Lt)
 Agua Levemente Contaminada (20 - 100
mg/Lt)
 Agua Medianamente Contaminada (100 -
500 mg/Lt)
 Agua Muy Contaminada (500 - 3000
mg/Lt)
 Agua Extremadamente Contaminada
(3000 - 15000 mg/Lt)

Según los cálculos el valor obtenido: -2,4

el resultado no fue el esperado debido a
que dio un valor negativo lo que nos indica
que hubo un error en el procedimientos de
OD2 la muestra que fue sometida a
incubación durante 5 días el OD debería
haber disminuido al pasar el tiempo debido
a la demanda de oxígeno en los
Figura 2 resultado final de DBO5 microorganismos en los procesos
metabólicos al consumir la materia
orgánica y por cual debería hacer sido
𝑶𝑫𝟏 menor al OD1 que fue el análisis inicial, no
𝒎𝒆𝒒 𝒈𝒓 fue posible repetir el análisis debido a la
(𝟑, 𝟕 𝒎𝒍) ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟓 ( ) ∗ 𝟎, 𝟎𝟎𝟖 ( ) ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎
𝒎𝒍 𝒎𝒆𝒒
= falta de muestra por un error y el resultante
𝟎, 𝟏(𝑳)
de la muestra se vertió a los contenedores
𝑶𝑫𝟏 = 𝟕. 𝟒 indicados.
𝑶𝑫𝟐
𝒎𝒆𝒒 𝒈𝒓 4. Conclusiones
(𝟒. 𝟑 𝒎𝒍) ∗ 𝟎, 𝟎𝟐𝟓 ( ) ∗ 𝟎, 𝟎𝟎𝟖 ( ) ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎
𝒎𝒍 𝒎𝒆𝒒
=
𝟎, 𝟏(𝑳)
Teniendo los valores del oxígeno disuelto en
𝑶𝑫𝟐 = 𝟖. 𝟔 una muestra de agua se pudo determinar su
(𝑶𝑫𝟏 − 𝑶𝑫𝟐 ) ∗ 𝑽𝑻 grado de contaminación, llegando a concluir
𝑫𝑩𝑶𝟓, 𝒎𝒈/𝒍𝒕 = su viabilidad para el consumo, y la capacidad
𝑽𝒎
que tiene de albergar vida aerobia.
(𝟕, 𝟒 − 𝟖, 𝟔) ∗ 𝟑𝟎𝟎
𝑫𝑩𝑶𝟓, 𝒎𝒈/𝒍𝒕 =
𝟏𝟓𝟎 La temperatura juega un papel importante en
𝒎𝒈 la retención de oxígeno disuelto, ya que el
𝑫𝑩𝑶𝟓, = −𝟐, 𝟒
𝒍𝒕 agua a menor temperatura retiene más oxígeno
que el agua a mayor temperatura.
 La medida del oxígeno disuelto puede ser
aplicada en aguas continentales tales como
ríos, aguas negras, u otras procedencias que
contengan una cantidad significativa de MO.
Bibliografía
 [1]. Gaitán María s.; Instituto de hidrología,
meteorología y estudios ambientales;
ministerio de ambiente, vivienda y desarrollo
territorial - república de Colombia
(DETERMINACIÓN DE OXÍGENO
DISUELTO MÉTODO YODOMÉTRICO
MODIFICACIÓN DE AZIDA);
(22/06/2004); Versión: 01, Pág. 2 de 9.
 [2]. NAVARRO R. M. O. Bacterióloga.;
Instituto de hidrología, meteorología y
estudios ambientales; ministerio de ambiente,
vivienda y desarrollo territorial - república de
Para el procedimiento de DBO5 se debe
incubar la muestra en la oscuridad para evitar
posibles errores en la medición.
Se pueden obtener muestras simples o
muestras compuestas.
Colombia (DEMANDA BIOQUIMICA DE
OXIGENO 5 DIAS, INCUBACION Y
ELECTROMETRIA); (04/06/2007); versión:
02, pág. 2 de 13.
 [3]. Beatriz Lermann de Abramovich, Bioq.
Maria Cristina Gilli, Lic. María Susana Eliggi,
Lic.Mariel G. Zerbatto; Carrera de Ingeniera
Química y en Alimentos FIQ-UNL, Curso
Optativo (DEMANDA BIOLOGICA DE
OXIGENO).recuperado de:
http://www.fiq.unl.edu.ar/gir/archivos_pdf/GI
R-TecnicasAnaliticas-
DemandaBiologicadeOxigeno.pdf