Instituto Politécnico Nacional

Escuela Superior de Ingeniería Química e Industrias Extractivas

Departamento de Ingeniería Química Industrial

Academia de Química Analítica
Especialidad en Análisis Instrumental

Laboratorio de Técnicas Instrumentales Avanzadas

Practica N° 1

“IDENTIFICACIÓN DE COMPONENTES DE UN ESPECTROMETRO DE MASAS”

Equipo: N° 4

Sección: B

Integrantes:

 Anaya Flores Diana Laura

 Ramírez Anaya Adriel
 Sánchez Pino Javier Jefté

Grupo: 4IM86

Profesora:

 M en C. Karla Jenny Lozano Rojas

Fecha de Entrega: 21 /Febrero /2019

OBJETIVO:

 El alumno identificará las principales partes de un espectrómetro de masas, así como

reconocerlas físicamente.
 El alumno armará y desarmará un espectrómetro de Masas adecuadamente.

FUNDAMENTO TEORICO:

Línea de Tiempo de la Espectrometría de Masas

 1912: Josep John Thomson crea el primer espectrómetro de masas ya que estaba interesado en
medir la relación masa-carga del electrón.

Figura N° 1 “Josep John Thomson”

 1918: Arthur Jeffrey Dempster descubre la electro-ionización así como el enfoque magnético
debido a su investigación sobre la existencia del isotopo del uranio 235.

Figura N° 2 “Arthur Jeffrey Dempster”

 1946: William E. Stephens crea para la técnica de espectrometría de masas el TOF (tiempo de
vuelo por sus siglas en inglés) en respuesta a sus investigación sobre las energías nucleares.

2|Página
 Figura N° 3 “William E. Stephens”

 1952: Alfred Otto Carl Nier fue el primero en utilizar la espectrometría de masas para aislar
uranio-235, que se utilizó para demostrar que 235 U podrían sufrir fisión y desarrolló la
configuración del espectrómetro de masas del sector ahora conocida como geometría de Nier-
Johnson el cual consiste en de un sector eléctrico de 90 °, una longitud de deriva intermedia
larga y un sector magnético de 60 ° de la misma dirección de curvatura.

Figura N° 4 “Alfred Otto Carl Nier”

 1953-1958: Paul, Steinwedel, Raether, Reinhard y von Zahn crean el analizador cuadrupolo para
la técnica de EM el cual consiste en lograr que los iones con cierta relación carga-masa
describan trayectorias estables en un campo electrostático hiperbólico, que se consigue
aplicando potenciales constantes y alternos a cuatro barras conductoras.

Figura N° 5 “Sistema Cuadrupolo”

 1955: W. C. Wiley and I. H. McLaren hicieron un diseño avanzado del tiempo de vuelo creado
por Stephen.

3|Página
 Figura N° 6 “Diagrama del TOF modificado”

 1956: Fred Warren McLafferty y Roland Gohlke fueron los primeros en combinar la técnica de
cromatografía de gases con la espectrometría de masas (GC-MS).

Figura N° 7 “Sistema GC-MS”

 1956: Beynon mejora la técnica ya establecida y la manda a una de alta resolución la cual tiene
una mayor precisión así como una mejor exactitud.

Figura N° 8 “Masas de alta resolución”

 1966: Munson y Field logran la ionización química debido a que la electrónica aparecía el ion
molecular a estudiar.

Figura N° 9 “Mecanismo de ionización química”

4|Página
 1968: Los investigadores Dole, Mack, Hines, M. Ferguson y Alice lograron hacer la ionización por
electrospray (ESI).

Figura N° 10 “Ionización por electrospray”

 1987-1988: Los investigadores Karas, Bachmann, Bahr, Hillenkamp, Tanaka, Waki, Ido, Akita y
Yoshida logran acoplar al TOF el ionizador MALDI (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization ),
el cual consiste en una ionización suave del analito que provoca la vaporización de intactas
moléculas termolábiles, no volátiles tales como proteínas y lípidos en un rango de peso
molecular entre 2 a 20 kDa, a un relativo bajo costo y resultado inmediato, la utilidad de esta
técnica se debe a que se obtiene un espectro propio de un organismo y comparándolo con
bases de datos, identificar a nivel de género, especie e incluso cepa aislados bacterianos y
fúngicos.

Figura N° 11 “MALDI”

 1989: Henry, Williams, Wang, Mc. Lafferty, Shabanowits y Hunt crean por primera vez la
espectrometría de masas utilizando la ionización por electrospray así como la resonancia del ion
ciclotrón debido a la investigación del crudo de petróleo ya que esta técnica logra dar con alta
exactitud y claridad los compuestos presentes en las mezclas de dicho combustible.

5|Página
 Figura N° 12 “ionización por electrospray implementada en un masas”

 1990: Las investigadoras Katta y Chait logran observar cambios conformacionales en proteínas
ionizadas por electrospray.

Figura N° 13 “Proteínas mandadas por elestrospray”

 1991: Los investigadores Hennion, Ganem, Chait y Katta descubrieron complejos covalentes en
los elementos metálicos gracias a la ionización por electrospray.

Figura N° 14 “Enlaces Covalentes”

 1993: Chait, Wang, Beavis y Kent Piels, Zurcher, Sahcr, Moser, Fitztgerald, Zhu y Smith logran
crear una secuencia con el MALDI para la identificación excata de proteínas asi como de
oligonucleótidos (secuencias de ADN o ARN con cincuenta pares de bases o menos)

Figura N° 15 “Cadena de ADN (oligonucleótidos)”

6|Página
Heptacosa.

La espectrometría de infrarrojo es un tipo de espectrometría de absorción que utiliza la región infrarroja

del espectro electromagnético. Como las demás técnicas espectroscópicas, puede ser utilizada para
identificar un compuesto o investigar la composición de una muestra.

Este compuesto no presenta volatilidad a temperatura ambiente y presenta un rango de calibración masa
carga (m/z) de 614. A pesar de que su peso molecular es de 671 Daltons, el máximo ion que produce es
de 614 m/z en una fuente de ionización de impacto electrónico (EI). Esto puede significar un límite para
los actuales softwares como Turbo Mass que tiene un límite de 1200 m/z.

Figura N° 16 “Fragmentograma de la Heptacosa”

Datos de la Heptacosa:

 Nombre comercial: Heptacosa-Acido- 10,12,17-triynedioico

 Nombre: perfluorotri- butylamine (heptacosa, FC-43)
 Formula molecular: C27H40O4
 Peso Molecular: 428.6041 g/mol o 671 Da

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 Figura N° 17 “Estructura molecular de la Heptacosa”

PARTES DEL ESPECTRÓMETRO DE MASAS:

Figura N° 18 “Esquema de un espectrómetro de masas”

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 Figura N° 19 “Fuente de Impacto electrónico”

DESARROLLO EXPERIMENTAL:

Datos del Equipo:

Mass Spectrometer
Model Q-Mass 910
Perkin Elmer
Serial Number: E4AP19A00504
Date of Manufacture: May 1994
Part N°: N633-1300 120 V 50/60 Hz 12 A

Estatus del Equipo:

 El espectrómetro de masas se encontró mal ensamblado.

 El espectrómetro de masas se encontró mal acoplado a la bomba turbomolecular.
 Cables incorrectos de voltaje y señal (opuestos).

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Herramientas Utilizadas:
Pinzas de Punta

Perico
Llave española

Desarmador y puntillas

Figura N° 20 “Caja de herramientas utilizadas para desarmado

del EM”

PROCEDIMIENTO:

Desarmado del Equipo:

1. Quitar línea de trasferencia.

2. Desmontar tapa superior del espectrómetro de masas.
3. Abrir puerta frontal del espectrómetro y quitar tornillos de la carcasa.
4. Colocar la carcasa metálica en la mesa.
5. Quitar instrumento utilizado para gas de referencia.
6. Desconectar cables de voltaje y señal del EM.
7. Quitar soportes de Neopreno que se encuentran alrededor del EM.
8. Quitar tornillos que sujetan al EM y extraer del compartimiento del área de análisis.
9. Quitar soportes de la bomba turbomolecular y el analizador del EM.
10. Desmontar la fuente de iones y el analizador.
11. Desmontar el detector de iones.

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Armado del Equipo:

1. Montar el detector de iones.

2. Montar la fuente de iones y el analizador.
3. Colocar soportes de la bomba turbomolecular y el analizador.
4. Colocar soportes de Neopreno que se encuentran alrededor del EM.
5. Colocar el equipo en el área de análisis y colocar tornillos.
6. Conectar cables de voltaje y señal del EM.
7. Colocar instrumento para gas de referencia.
8. Colocar la carcasa metálica.
9. Cerrar puerta frontal y atornillar la carcasa metálica.
10. Montar tapa superior del espectrómetro de masas.
11. Colocar de nuevo línea de transferencia.

ESPECTRÓMETRO DE MASAS MODEL Q-MASS 910 PERKIN ELMER:

Figura N° 21 “Exterior del Espectrómetro de

Masas”

Figura N° 22 “Interior del Espectrómetro de

Masas”

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Tabla de Identificación de Partes del Espectrómetro de Masas
Espectrómetro de Masas
Partes del Equipo Definición Bibliografía
Sistema de Entrada.
En el sistema de entrada, la muestra se convierte
al estado gaseoso por calentamiento a unos
400ºC y se introduce lentamente en la cámara de
ionización.
La finalidad del sistema de entrada es permitir la
introducción de una muestra representativa en la
fuente de iones con la mínima perdida de vacío.
Figura N° 23 “Espectrómetro de Masas
Mass-Q910”
Gas de Referencia.
Con el fin de disponer de picos de masas
conocidas se utilizan sustancias de referencia, de
espectro bastante complejo pero muy bien
conocido, para realizar la calibración de la escala
de masas del espectrómetro. Las sustancias de
Figura N° 24 “Tubo de Vidrio para Gas de referencia más utilizadas son heptacosa para la
Referencia” calibración de las masas en equipos de baja
Definición Laboratorio
Sistema de Entrada.
El laboratorio cuenta con un equipo, un
espectrómetro de gases acoplado a uno de
masas (CG/MS).
En el cromatógrafo de gases es donde se separa
la muestra, para posteriormente pasar al
espectrómetro de masas por medio de una línea
de transferencia.
Gas de Referencia.
En este equipo la sustancia almacenada es la
heptacosa. Este matraz tiene una válvula
automática que se abre para regular el flujo de
heptacosa hacia la fuente iónica.
La heptacosa está almacenada en un matraz muy
pequeño de vidrio que nos ayudan a realizar la
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 resolución y el PFK (perfluorkeroseno) para los de sintonía y calibración del espectrómetro de
alta. Normalmente lo que se hace es abrir la masas.
válvula de fuga para conseguir un flujo de
heptacosa hacia la fuente iónica que provoca la
presencia permanente del espectro de esta
sustancia con lo que el equipo compara el
espectro de masas detectado con el que tiene
almacenado en la memoria del ordenador.
Fuente de Ionización Fuente de Ionización
Los electrones son emitidos por un filamento La fuente de ionización es el medio por el cual los
caliente de tungsteno o renio y son acelerados iones son cargados con cierto nivel de energía y
por un potencial de aproximadamente 70 eV que de este modo provocar la fragmentación para
se aplica entre el filamento y el ánodo, las obtener espectros complejos o no complejos.
trayectorias de los electrones y las moléculas La fuente de iones de un espectrómetro de masas
están en ángulo recto y se cruzan en el centro de convierte los componentes de una muestra en
la fuente, donde colisionan y tiene lugar la iones por bombardeo con electrones, iones,
ionización. moléculas o fotones.
Figura N° 25 “Fuente de Ionización por
El producto primario son iones de una única Alternativamente, la ionización se lleva a cabo por
impacto electrónico”
carga positiva que se forman cuando los energía térmica o eléctrica.
electrones de elevada energía se acercan
suficientemente a las moléculas como para
causarles la pérdida de electrones por repulsiones
electrostáticas

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Figura N° 26 “Analizador de Masas-
Cuadrupolo”
Analizador de Masas
El instrumento cuadrupolar es un conjunto de las
cuatro barras cilíndricas que actúan como
electrodos.
Las barras se conectan eléctricamente, un par está
unido al polo positivo de una fuente variable de
corriente continua y el otro par se une a la
terminal negativa. A cada par de barras
potenciales variables de corriente alterna de
radiofrecuencia, que están desfasados 180°.
Para obtener un espectro de masas con este
dispositivo, los iones se aceleran en el espacio
entre las barras mediante un potencial de 5 a
10ev.
Generalmente, los instrumentos cuadrupolares
separan fácilmente iones que difieren en su masa
en una unidad.
Analizador de Masas
El cuadrupolo es un analizador de iones que sirve
para separarlos y transmitirlos al detector, tiene
cuatro barras, dos se conectan al polo positivo y
dos al polo negativo, estas barras se encargan de
realizar la selección de los iones lo cuales pueden
pasar al detector. Por lo general sólo transmite
iones de un pequeño intervalo de relaciones m/z.
Todos los demás iones se neutralizan y son
eliminados. Generalmente los instrumentos tienen
un recubrimiento de oro para no contaminar la
parte interna.
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Figura N° 27 “Detector de Iones”
Detector:
Es similar al multiplicador de electrones clásico,
con la principal diferencia de que no tiene
múltiples dínodos discretos, sino que está
formado por un tubo de vidrio en forma de
corneta, a veces terminado en forma de espiral o
caracol, cuyo interior está recubierto por un óxido
de plomo semiconductor de composición y
características especiales.
El final del tubo del detector se sitúa a un
potencial cercano a tierra, con lo que existirá un
gradiente continuo de potencial desde la boca al
fondo del detector. Debido a esto, los electrones
arrancados en el impacto inicial del ion volarán en
la dirección de los potenciales menos negativos,
hacia potencial cero, produciéndose una gran
cantidad de impactos en el camino, en cada uno
de los cuales se multiplicará el número de
electrones. Al final del recorrido del tubo
multiplicador se encuentran un cono colector con
la electrónica de preamplificación y amplificación
asociada. Por tanto, este detector es susceptible
de ser empleado tanto para detectar iones
positivos como negativos.
Detector:
Los iones procedentes del sistema acelerador
llegan al detector el cual generalmente está
constituido por un cátodo emisor que al recibir el
impacto producido por las partículas cargadas
emite electrones. Estos electrones son acelerados
hacia un dínodo el cual emite varios electrones
más al recibir el impacto de cada electrón. Este
proceso se repite varias veces hasta obtenerse
una cascada de electrones que llega al colector
lográndose una corriente fuertemente
amplificada, por un procedimiento muy similar al
que se utiliza en los tubos fotomultiplicadores. La
corriente obtenida puede amplificarse de nuevo
por procedimientos electrónicos y se lleva a un
sistema registrador.
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Figura N° 28 “Bomba turbomolecular”
Bomba de Vacío: Bomba de Vacío:
Las bombas turbomoleculares consiste en una La bomba turbomolecular permite generar un
turbina con una serie de alabes que se mueven a alto vacío al sistema hasta (10-8 torr), ya que para
una velocidad supersónica girando a una llevar a cabo un buen análisis en espectrometría
velocidad de 60000-90000 rpm. Cuando las de masas es necesario mantener el equipo a alto
moléculas gaseosas chocan con los alabes del vacío, esto permite que los iones formados
rotor, reciben un componente adicional de puedan desplazarse sin chocar con otros iones y
velocidad de bombeo, a fin de crear un flujo de este modo registrar un buen espectro.
macroscópico neto. Las moléculas impulsadas por
el rotor deben alcanzar los alabes de estator
antes de chocar con otra molécula, lo que las
desviaría por su trayectoria, para que se cumpla
esta condición, la velocidad de agitación térmica
de las moléculas. La presión debe ser
suficientemente baja como para que el recorrido
sea superior a la distancia del rotor y estator. En
estas condiciones se alcanza la condición de flujo
molecular y el bombeo empieza a ser eficiente.
Tabla N° 1 “Partes del Espectrómetro de Masas”
16 | P á g i n a
 OBSERVACIONES:

Ramírez Anaya Adriel

 El analizador contiene soportes de neopreno en su exterior que sirven como disipadores

de esfuerzo cuando existe un alto vacío.

 El contenedor de la heptacosa es parecido a un matraz muy pequeño y que nos ayuda a

realizar la calibración el espectrómetro de masas ya que se usa como gas de referencia.

 La bomba turbomolecular tiene unas aspas, las cuales sirven para generar el alto vacío de
al menos 10-8 torr, lo que permite que las moléculas no interaccionen con las moléculas
presentes en el aire y podamos obtener una mejor resolución de nuestro espectro.

 El impacto electrónico por donde entra la muestra, tiene un recubrimiento de oro para no
contaminarla cuando se disipa en iones.

 El analizador cuadrupolar es una parte compuesta por cuatro barras colocadas en forma
de cruz, 2 están conectadas a terminales positivas y las otras 2 a terminales negativas con
el fin de que el flujo de iones sean seleccionados y llevados al detector.

 El detector es cerámico y tiene una forma de trompeta donde recibe los iones al chocar se
depositan en un cátodo.

 CONCLUSIONES:

En esta práctica identificamos las partes que conforman el espectrómetro de masas así como su
funcionamiento y el trayecto que toma la muestra hasta ser analizada, el equipo identificado fue un
cromatógrafo de gases acoplado (CG) a un espectrómetro de masas (EM) el cuál por medio de una
línea de transferencia viaja la muestra del CG hacia el impacto electrónico del EM.
En la espectrometría de masas es importante resaltar que a diferencia de la cromatografía, ésta daba
señales de picos sin embargo en la de masas las señales son fragmentos de los picos.
Por otro lado, el espectrómetro de masas consta de un sistema de entrada, fuente de ionización, el
analizador de masas, el detector y una bomba turbomolecular, sin olvidar el compartimiento del gas
de referencia para calibrar el equipo; todos ellos cumplen una función en específico “la separación
de partículas moleculares o atómicas por su diferente masa”.

17 | P á g i n a
Finalmente podemos decir que el proceso de la espectrometría de masas comprende básicamente
cuatro etapas:
 Ionización de la muestra.
 Aceleración de los iones por un campo eléctrico.
 Dispersión de los iones según su masa/carga.
 Detección de los iones y producción de la correspondiente señal eléctrica.
Y su aplicación radica en que con esta técnica se puede determinar peso molecular de todas las
sustancias que pueden volatilizarse por la posición del pico correspondiente a la masa patrón,
también en determinar la formula molecular, si el instrumento es de gran resolución bastará la
determinación precisa de su masa molecular para poder atribuirle una fórmula empírica. Otras veces
puede determinarse por la relación entre las alturas del pico correspondiente a la masa patrón y la
de los picos de los isótopos. Por otro lado también la identificación de compuestos por su
fragmentación patrón: la fragmentación de la mayor parte de las moléculas produce un gran
número de picos que permiten la identificación de numerosos compuestos y el reconocimiento de
ciertos grupos funcionales de ellos.

18 | P á g i n a
OBSERVACIONES:

Sánchez Pino Javier Jefté

El sistema de masas dentro del equipo solo ocupa 1/3 el espacio ya que lo demás está
conformado por circuitos electrónicos.
El equipo de ionización electrónica tenía un recubrimiento de oro para su protección.
Al hacer análisis se deberá de hacer un background de aire para poder descartar
interferencias en el fragmentograma deseado.

CONCLUSIONES:

Con la finalización de la práctica el alumno comprobó la estructura de un equipo de espectrometría

de masas acoplado con un cromatografo de gases así como el espacio que ocupa específicamente
su analizador de muestras.
El equipo utilizado en la práctica fue un espectrómetro de masas modelo Q-Mass 910 con un
analizador cuádruplo, un ionzador electrónico recubierto por oro para evitar la corrosión, deterioro
así como para evitar la contaminación de las muestras, una bomba turbomolecular la cual puede
alcanzar un vacio de 10-5 a 10-8 torr (además de ser una mejor opción que las bombas diferenciales)
y un bulbo con el gas de referencia.
Al armar y desarmar el equipo el alumno corroboro el funcionamiento e importancia de todas las
partes de este instrumento de análisis cualitativo y cuantitativo así como del porque cada pieza tiene
un lugar especifico al ser colocada dentro del analizador, a su vez se comprobó el por qué existe la
unión de equipo de análisis instrumentales, ya que en este caso el masas se acoplo a un equipo de
cromatografía de gases debido a que como tal el masas no puede gasificar por sí sola la muestra
(para este modelo) el cual es un parámetro necesario para lograr el fragmentograma.
Finalmente y retomando la parte del bulbo con el gas de referencia, estos equipos utilizan estos
fluidos con el fin de obtener picos conocidos en un fragmentograma y así poder calibrarlos de una
manera correcta; para los espectrofotómetros de masas de baja resolución se ocupa la heptacosa
que es un fluido no volátil a temperatura ambiente de características amistosas para el equipo, es
decir, no daña las partes internas del mismo, en cambio para los equipos que requieren una mayor
precisión y exactitud a la hora de analizar las muestras como lo son de alta resolución se ocupa el
PFK (perfluorokerosene).

19 | P á g i n a
OBSERVACIONES:

Anaya Flores Diana Laura

 El espectrómetro de masas Perkin Elmer modelo Q Mass 910, se encontró mal ensamblado,
con los cables de voltaje y señal colocados de manera incorrecta.
 El equipo cuenta con neopreno, el cual disipa las vibraciones y el choque de los metales.
 El espectrómetro de masas 910 cuenta con bomba turbo molecular para generar vacío
acoplada a otra bomba auxiliar.
 El equipo esta acoplado a un cromatógrafo de gases por una línea de transferencia, para la
separación, identificación y cuantificación de mezclas de sustancias volátiles y semivolatiles.

CONCLUSIONES:

La espectrometría de masas está basada en la obtención de iones a partir de moléculas en fase

gaseosa, para identificar compuestos desconocidos, para cuantificar compuestos conocidos y
elucidar la estructura y propiedades químicas de las moléculas.

A lo largo de esta práctica se llevó a cabo el desarmado y armado de espectrómetro de masas

Q Mass 910 Perkin Elmer, para la identificación de sus partes así como también realizar el
análisis del recorrido que realizan las moléculas por difusión desde el sistema de entrada hasta el
detector de iones. El espectrómetro de masas se compone principalmente del sistema de
entrada, la fuente de iones, el analizador de masas y el detector de iones, los culés definen el
tipo de espectrómetro y las condiciones del sistema.

El analito como ion gaseoso es estudiado de esta forma ya que el movimiento de los iones en
fase gaseosa puede ser controlado de forma precisa en campos electromagnéticos y pueden ser
manipulados con facilidad, además que incrementa la sensibilidad del espectrómetro de masas.
El acoplamiento del cromatografo de gases al espectrómetro de masas permite separar
compuestos ya en fase gaseosa, al entrar los iones en forma gaseosa en diferentes fracciones y
en diferentes tiempos en forma continua permite un análisis secuencial de las muestras.

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BIBLIOGRAFÍA:

 Capitulo 11. “Espectrometría de masas atómicas”. Douglas A. Skoog, F. James Holler,

Timothy A, Nieman. Principios de Analisis Instrumental. 5ta edicion, Madrid España, Mc
Graw-Hill, 2001, p269 - 289
 Capitulo 20. “Espectrometría de masas molecular”. Douglas A. Skoog, F. James Holler,
Timothy A, Nieman. Principios de Analisis Instrumental. 5ta edicion, Madrid España, Mc
Graw-Hill, 2001, p537 - 575
 Harvey, D., 2002, Química Analítica Moderna, Madrid: Mc Graw Hill /Interamericana de
España s.a., 570 pgs.
 Siuzdak Gary, Mass Spectrometry for Biotechnology. Academic Press, Inc., USA, 1996

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