FACULTAD DE INGENIERIA Y

GESTION

TEMA:

Espectrofotometría de absorción
atómica
CARRERA:
Ingeniería Ambiental
CURSO:
Ecotoxicología
ALUMNOS:
 Alarcón Chávez, Maycol
 Condori Paz, Paola Fernanda
 Ccachainca Bonilla, Carmen
 Jiménez Calle, Dalia
 Iño Alcca, Irene
 Yalli Huayhuas, Jorge

AÑO
2019 1
 1. INTRODUCCION

La Espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la

detección específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su
aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc.) y
estado de agregación (sólido, líquido, gas). Los fundamentos físico-químicos de la
espectrofotometría son relativamente sencillos. Las moléculas pueden absorber energía
luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Esto permite que se inicien ciclos
vitales de muchos organismos, entre ellos el de la fotosíntesis en plantas y bacterias.

La absorción atómica es una técnica capaz de detectar y determinar cuantitativamente

la mayoría de los elementos del Sistema Periódico. Sus campos de aplicación son, por
tanto, muy diversos. Este método se puede aplicar para la determinación de ciertos
metales tales como: antimonio, cadmio, calcio, cesio, cromo, cobalto, oro, plomo, níquel,
entre otros. Se emplea en el análisis de aguas, análisis de suelos, bioquímica, toxicología,
medicina, industria farmacéutica, industria alimenticia, industria petroquímica, etc.

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2. ANTECEDENTES
2.1 ANTECEDENTES HISTÓRICOS

• El término espectroscopía significa la observación y el estudio del espectro, o

registro que se tiene de una especie tal como una molécula, un ion o un átomo,
cuando estas especies son excitadas por alguna fuente de energía que sea
apropiada para el caso. Uno de los pioneros en la espectroscopia fue Isaac Newton,
quien a principios de 1600 observó y estudió el comportamiento de la luz solar
cuando esta atraviesa por un prisma.

• En 1831, J.F. Herschel demostró que las sales de diferentes metales producen
distintas coloraciones a la flama, cuando las sales disueltas o en forma directa son
puestas en contacto con ésta. Así por ejemplo la sales de calcio dan a la flama un
color naranja, las de sodio un color amarillo, las de potasio un color violeta, las
de cobre un verde azulado, las de estroncio un color verde amarillo, etc.

• Estas observaciones fueron corroboradas posteriormente por otros investigadores

sugiriendo que de esta forma podría identificarse el metal formador de la sal en
un compuesto químico específico.
• Kirschoff y Bunsen, en 1859 ampliaron el conocimiento de la naturaleza de este
fenómeno, cuando la luz colorida producida por el metal en la flama la hicieron

3
 incidir en un depósito óptico que separa la radiación emitida por el metal, de la
luz solar.
• En 1905, Albert Einstein (1879-1955) descubre el efecto fotoeléctrico (Premio
Nobel en 1921, por este trabajo). Esta teoría explica por qué, cuando un fotón
choca con un material, un electrón es desprendido. Este es conocido como el “año
milagroso de la física”. Son las primeras observaciones con espectrometría de
fluorescencia atómica
• En 1955, el espectroscopista australiano Alan Walsh (1916- 1998), desarrolla el
espectroscopio de absorción atómica (AAS), que ha sido descrito como el avance
más significativo en la industria del análisis químico del siglo XX. J. Sherman
desarrolla los “parámetros fundamentales”; método que provee las relaciones
teóricas entre la concentración del analito y la intensidad de los rayos X .
2.2 ANTECEDENTES NACIONALES

• 2015: Determinación cuantitativa de plomo, cadmio y mercurio en huevos de

gallina de venta en mercados populares del cono norte de Lima – Perú. En el Perú
no existen normas sobre los límites permisibles de tóxicos en los alimentos, en
especial sobre metales pesados destinados a consumo humano. Los valores
encontrados con respecto al plomo varían entre 0,16 ppm y 1,359 ppm, con una
media de 0,626 ppm en la clara; 0,1266 ppm y 1,2653 ppm, con una media de
0,664 ppm en la yema y 0,16 ppm y 1,28 ppm, con una media de 0,684 ppm en el
huevo entero. Asimismo, la autoridad sanitaria debe verificar en la etapa de post-
registro las especificaciones de cumplimiento de la normativa, controlando de una
mejor manera los productos cosméticos que circulan en el país.
• 2018:Ancash, determinacion de la concentración de plomo, mercurio y cadmio en
músculo de peces y muestras de agua procedentes del Río Santa. El objetivo del
estudio fue cuantificar la concentración de Pb, Hg y Cd en músculo de peces
destinado a consumo humano y de muestras de agua de río en tres localidades
(A=Catac, B=Taricá y C=Palmira) de la ciudad de Huaraz (Ancash, Perú). Cinco
peces y una muestras de agua en cada localidad fueron analizadas mediante la
técnica de Absorción Atómica de Flama. La concentración de Pb en músculos de
peces fue 1,826, 0,321 y 0,709 mg/Kg para las zonas A, B y C respectivamente.
En el mismo orden, la concentración de Hg fue 0,344, 0,433 y 0,284 mg/Kg y de
Cd, 0,001, 0,0 y 0,002 mg/Kg respectivamente. En las tres zonas, las
concentraciones de Pb estuvieron por encima de los niveles permitidos por la

4
 Comisión Reguladora Europea. La concentración de Pb en muestras de agua fue
0,007, 0,007 y 0,01 mg/L para las zonas A, B y C respectivamente. En el mismo
orden, la concentración de Hg fue 0,063, 0,032 y 0,171 mg/L. y de Cd 0,000 mg/L
para las tres zonas, respectivamente. En las tres zonas el Hg estuvo por encima de
los niveles permitidos por la Agencia de Protección del Medio Ambiente de los
Estados Unidos. Se concluye que peces y agua representan potenciales medios de
contaminación de personas con metales pesados a partir de la ruta digestiva en
esta zona.
2.3 ANTECEDENTES INTERNACIONALES

• 1992: España, determinación de selenio en suero por espectrofotometría de

absorción atómica.

• 2006: México, determinación de mercurio en suelos y agua.

• 2012: Ecuador, 2012, Ecuador, A lo largo del tiempo se ha logrado el desarrollo

de formulaciones cosméticas inteligentes a través de la combinación exacta de
cada ingrediente, permitiendo de esta manera el desarrollo de cosméticos seguros
y tecnológicamente mejor elaborados. Es decir que estos cosméticos solían
contener metales pesados como plomo, arsénico, mercurio y antimonio, los
cuales, a pesar de contribuir a la belleza, representaban un riesgo para la salud.
• Caracterización de cemento, yeso y cal; determinación de mercurio en suelos y
agua. Un estudio de caracterización de los componentes mayoritarios,
minoritarios y traza, en materiales de uso común en la ingeniería civil tales como:
cemento, yeso, cal, pego, suelo y agua, por espectrometría de absorción atómica
en llama FAAS, es presentado. Los resultados para Calcio, Magnesio, Hierro,
Manganeso, Aluminio, Potasio y Sílice son analizados por métodos
convencionales de puesta en disolución y por un procedimiento novedoso y
simplificado de fusión alcalina que obvia el uso de los crisoles de platino, los
valores así obtenidos son comparados haciendo uso del ventajoso procedimiento
de las suspensiones, acoplando un sistema de inyección en flujo FIA,
adicionalmente se estudian cuatro materiales de referencia de similar
composición, con lo cual los procedimientos optimizados pueden ser aplicados a
otras matrices.
• 2017:Cuba, Determinación de la contaminación por metales pesados en suelos
aledaños a la empresa electroquímica de Sagua.

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3. OBJETIVOS
 La interacción de las radiaciones electromagnéticas con la materia (átomos y
moléculas) para medir la absorción o la transmisión de luz por las sustancias.
 Aplicación de la Ley de Bourguer-Lambert- Beer.
 Comprender los componentes básicos de un espectrofotómetro,
en los que se basan los métodos espectroscópicos en general.
 Conocer las aplicaciones de la espectrofotometría en las diferentes industrias, el
empleo del mismo y su utilidad en los ensayos de sustancias.

4. MARCO TEORICO
4.1 DEFINICION:
Es una técnica capaz de determinar y detectar cuantitativamente la mayoría de los
elementos del sistema periódico. Sus campos de aplicación son, por tanto, muy
diversos. Este método se puede aplicar para determinación de ciertos metales tales
como: antimonio, calcio cesio, cromo, cobalto, oro, lomo, níquel, entre otros. Se
emplea en el análisis de aguas, suelos bioquímica, toxicología, medicina, industria
farmacéutica, industria alimentaria, industria petroquímica, etc.

Este método consiste en la medición de las especies atómicas por su absorción a

una longitud de onda particular, la especie atómica se logra por atomización de la
muestra, siendo distintos procedimientos para llegar al estado fundamental del átomo
lo que diferencia las técnicas y accesorios utilizados. La técnica de atomización más
usada es la absorción atómica con flama o llama, que nebuliza la muestra y luego la
disemina en forma de aerosol dentro de una llama de aire acetileno u óxido nitroso-
acetileno.

En metalurgia la Absorción Atómica es muy útil, ya que permite determinar

diversos elementos en un amplio rango de concentraciones. Las mayores dificultades
radican en la puesta de solución de aleaciones, la que se efectúa por ataque con ácidos
fuertes, por ejemplo nítrico, clorhídrico, perclórico. Se determinar normales Fe, Pb,
Ni, Cr, Mn, Co, Sb, etc., En rangos que van desde 0.003% hasta 30%, en aleaciones
con base Cu, Zn. Al, Pb, Fe y Sn entre otras.

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 Figura: Equipo utilizado para espectrofotometría de Absorción Atómica

Aunque inicialmente se utilizó solo para la determinación de elementos

metálicos, se han desarrollado métodos indirectos que permiten la
cuantificación de una gran variedad de aniones y de compuestos
orgánicos. En la práctica, las muestras se vaporizan y se convierten en
átomos libres, proceso denominado atomización. Sobre el vapor atómico
originado se hace incidir la radiación electromagnética que será
absorbida parcialmente por el analito. En muchas ocasiones el proceso
de atomización se consigue mediante una llama, por lo que en la figura
se muestra un esquema típico de un espectrómetro de absorción atómica
con llama.

Figura: Componentes básicos de un espectrofotómetro de absorción atómica

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4.2 INSTRUMENTOS PARA LA ESPECTROFOTOMETRÍA DE
ABSORCIÓN ATÓMICA
En esencia el equipo de absorción atómica consta de tres partes como una fuente
de radiación, un medio para la obtención de átomos libres y un sistema para medir el
grado de absorción de la radiación.

4.2.1 Fuentes de energía.

La amplitud de las bandas de resonancia que se emplean en A. A. es del orden
de 0,02 Â, por lo cual no es factible la utilización de fuentes de radiación continua
(lámparas de Hj ó W) con los monocromadores de que se dispone, problema al
que Walsh en 1955 halló la solución, utilizando como fuente de energía el espectro
de emisión del elemento a determinar, mediante lámparas de cátodo hueco, y en
algunos casos lámparas de descarga o vapor del metal (Na, K, Hg). Ello limita la
versatilidad del instrumento, pues para cada elemento que se desea determinar, se
requiere la lámpara específica. Para minimizar esta dificultad se construyen
actualmente lámparas de cátodo múltiple hasta 8 elementos.

La parte más crítica de un instrumento de absorción atómica es la fuente, ya

que es muy difícil medir con buena exactitud líneas de absorción tan estrechas
como las que presentan los átomos. El problema se ha resuelto aplicando el
principio de que "cada especie química es capaz, en condiciones adecuadas, de
absorber sus propias radiaciones" . Bajo esta premisa se han desarrollado las
lámparas de cátodo hueco y las lámparas de descarga sin electrodos.

a) Lámparas de cátodo hueco: Consisten en un tubo de vidrio conteniendo argón

o neón a baja presión (1–5 torr.) y dos electrodos. El ánodo suele ser de
volframio, y el cátodo, de forma cilíndrica, está construido con el metal que
se desea determina.

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 Figura: Lámpara de cátodo hueco.

b) Lámparas de descarga sin electrodos: Consisten en un tubo de cuarzo

herméticamente cerrado conteniendo unos pocos miligramos del elemento
de interés y un gas inerte a baja presión. La activación se lleva a cabo
mediante un campo intenso de radiofrecuencias (100 kHz – 100 MHz) o
radiación de microondas (>100 MHz). Cuando opera, el gas noble se
ioniza, y los iones producidos son acelerados por el campo de
radiofrecuencia hasta que adquieren la energía suficiente para excitar a los
átomos del metal.

4.2.2 Atomizador:
En esta parte del equipo debe reducirse la muestra a un vapor atómico de sus
componentes, para lo que se han propuesto numerosas soluciones. Sin embargo,
todos los equipos comerciales emplean el mismo diseño: una llama generalmente
de acetileno-aire, en un mechero con cámara de premezcla, en la que se introduce,
por un procedimiento neumático, la disolución del problema y los gases a quemar.

En esta parte es donde residen las principales dificultades y limitaciones, pues

se exige, en primer lugar, un bajo residuo seco de la disolución (2-5 %), y, en
segundo lugar, una máxima concordancia entre la matriz de problema y los
patrones, a fin de evitar las posibles interferencias que no son de orden espectral,
sino de tipo térmico, químico o de envoltura. Para la determinación de elementos
que forman óxidos térmicamente resistentes (Ca, Ti, Al, etc.), se recurre a
combustibles que den mayores temperaturas, como acetileno-óxido nitroso.

4.2.3 Monocromador.
La única finalidad del monocromador es aislar la línea de resonancia del
elemento de interés. Para la mayor parte de los elementos, el problema suele ser

9
 sencillo, pues las diferentes líneas suelen estar bastante separadas, como se
muestra en la figura 5.9., donde se representan las líneas más características de los
elementos Ag, Pb y Zn. Ello hace que no sea necesario un moncromador de muy
alta resolución, y, en consecuencia, no demasiado costoso, siendo éste uno de los
factores que han contribuido a que la técnica sea muy utilizada en la práctica
ordinaria del análisis.

Figura: Longitudes de onda de líneas de absorción.

4.2.4 Lectura.
La lectura puede realizarse por gran variedad de métodos. El más común es
potenciométrico sobre una escala de transmisiones o absorbancias, admitiendo
también escalas convencionales. Asimismo hay equipos con lectura digital, o bien
con impresión automática de datos en cintas, etc.

Análogamente a lo que sucede con los espectrofotómetros que miden absorción

molecular, existen comercializados instrumentos de absorción atómica de haz
sencillo y de doble haz. En los de haz sencillo se mide el cambio producido en la
intensidad del haz procedente de la fuente de radiación cuando interacciona con el
vapor atómico del elemento a analizar. En los sistemas de doble haz, el haz
procedente de la fuente de radiación se divide en dos, mediante un espejo giratorio,
haciendo pasar uno a través de la muestra (vapor atómico en la llama) y desviando el
otro alrededor de la llama. Ambos haces se recombinan posteriormente y se mide la
relación entre ellos.

10
 Figura: Sistema de doble haz.

Operando con el sistema de doble haz se compensa cualquier fluctuación de la

fuente de radiación, así como del detector o del sistema electrónico. Sin embargo, es
evidente que no se corrige el ruido de fondo producido por la propia llama, ya que
ésta se encuentra únicamente en uno de los haces.

En la práctica ordinaria, muchos aparatos de absorción atómica operan con haz

sencillo, ya que, para bajos valores de absorbancia, se obtienen límites de detección
más favorables, si bien, cuando es necesaria una corrección del fondo, los
instrumentos de doble haz posibilitan la incorporación de sistemas para llevar a cabo
esa compensación.

4.3 INTERFERENCIAS

4.3.1 Interferencias físicas

Este tipo de interferencias se debe a cambios en las propiedades físicas, tales
como viscosidad, densidad, tensión superficial, etc. en la disolución del analito y en
los patrones, los cuales pueden afectar al proceso de nebulización y, en
consecuencia, al número de átomos presentes en la llama.

En ocasiones se utilizan disolventes orgánicos para aumentar la eficacia de la

nebulización y también la temperatura de la llama, si bien, la presencia de sustancias
orgánicas origina una gran variedad de interferencias, sobre todo al aumentar la
emisión de fondo de la llama y provocar fluctuaciones en su temperatura.

Cuando se utiliza atomización electrotérmica, no suelen tener lugar

interferencias físicas como las descritas anteriormente, ya que el analito se coloca
directamente en el atomizador, sin nebulización previa. Sin embargo, determinados
11
 disolventes suelen causar problemas cuando se introducen en el tubo de grafito, ya
que producen una absorción de fondo entre 200–250 nm a 2500 ºC, incluso después
de haber secado previamente la muestra.

En cualquier caso, las interferencias físicas pueden evitarse procurando que las
propiedades físicas y la matriz sea la misma en la muestra y en los patrones.
También utilizando el método de adición estándar o, incluso, a veces, simplemente
operando con disoluciones más diluidas.

4.3.2 Interferencias químicas

Las interferencias químicas son aquellas en las cuales algún tipo de compuesto
químico está presente, o se forma en la llama, con la consiguiente disminución de
la población de átomos libres.

La causa más común de este tipo de interferencia es la formación de óxidos,

hidróxidos, carburos o nitruros metálicos térmicamente estables. Estas
interferencias se evitan operando con llamas más calientes, ya que el grado de
disociación de estos compuestos aumenta con la temperatura.

También pueden utilizarse agentes complejantes protectores, los cuales evitan la

combinación del elemento de interés con la especie interferente. Uno de los más
usados con esta finalidad es el AEDT, que, además de formar quelatos estables con
muchos cationes metálicos, se descompone fácilmente en la llama.

Cuando la especie de interés pierde algún electrón, formando los iones

correspondientes, se origina la llamada interferencia de ionización. Se produce en
los elementos fácilmente ionizables, como alcalinos y alcalinotérreos. Esta
interferencia se evita con la adición de un supresor de ionización , el cual es un
elemento que proporciona una concentración de electrones relativamente alta, con
lo que inhibe la ionización del elemento de interés.

4.3.3 Interferencias espectrales

Una interferencia espectral tiene lugar cuando se produce absorción o emisión
por una especie a la misma longitud de onda que el analito, o a una longitud de onda
tan próxima que el monocromador no puede separar ambas señales.

En general, en absorción atómica, las interferencias espectrales son poco

corrientes, debido a que las líneas de la fuente son extremadamente estrechas y

12
 específicas. Sin embargo, no es cierto, como suele decirse, que la técnica está libre
de este tipo de interferencias. Pueden considerarse los siguientes casos:

a) Superposición de líneas de resonancia de algún componente de la matriz con la

línea de resonancia del analito.

Así, por ejemplo, el aluminio y el vanadio presentan líneas de resonancia a

3082.15 y 3082.11 Å, por lo que el vanadio interfiere en la determinación de
aluminio. Este tipo de interferencia es muy rara, ya que solo se han encontrado
seis pares de líneas que se interfieren mutuamente. Además, la interferencia se
evita fácilmente utilizando otra líneas de resonancia de las del analito.
Concretamente, en el ejemplo anterior, se podría utilizar la línea que presenta el
aluminio a 3097.7 Å.

b) Presencia en la llama de productos con bandas de absorción anchas.

Así, por ejemplo, la presencia de calcio en la llama aire-acetileno origina

CaOH, el cual interfiere en la determinación de bario, como puede observarse
en la figura 5.10., donde se ha representado la banda de absorción del CaOH y
la línea de resonancia del bario. La interferencia, en este caso particular, se
elimina fácilmente utilizando óxido nitroso como oxidante, en lugar de aire, ya
que la mayor temperatura alcanzada hace que se descomponga el CaOH,
desapareciendo, en consecuencia, su banda de absorción.

c) Absorción debida al fondo.

La absorción del fondo es un término que se utiliza para designar

colectivamente una serie de efectos tales como la absorción por moléculas o
radicales originados en la llama por la matriz de la muestra, por la propia llama,
así como la dispersión de radiación por partículas sólidas o gotitas de líquido,
etc.

4.4 APLICACIONES DE ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA.

La espectroscopia de absorción atómica se ha usado para analizar trazas de
muestras geológicas, biológicas, metalúrgicas, vítreas, cementos, aceites para
maquinaria, sedimentos marinos, farmacéuticos y atmosféricos. Las muestras
líquidas generalmente presentan pocos problemas de pretratamiento; entonces todas

13
 las muestras sólidas son primero disueltas. Las muestras gaseosas son casi siempre
pretratadas extrayendo el analito por burbujeo del gas en una solución y analizando
entonces esa solución, o absorbiendo los analitos en una superficie sólida y
poniéndolo entonces en solución por lixiviación con los reactivos apropiados. El
muestreo directo de sólidos puede efectuarse con un horno electrotérmico.

Existen varios tipos de muestras acuosas que se estudiarán brevemente: •

4.4.1 Aguas naturales:

Son las aguas que se encuentran en la naturaleza (aguas potables, de ríos y lagos,
de mar, las aguas subterráneas y las mineromedicinales). En este grupo se analizan
con facilidad los elementos mayoritarios. En el caso del agua de mar, para la
determinación de los elementos minoritarios será necesaria la extracción y
utilización de la cámara de grafito.

4.4.2 Aguas residuales:

Se trata de los residuos acuosos vertidos por las distintas fábricas, ciudades y
poblaciones. La preparación de la muestra suele reducirse a una simple filtración
o centrifugación.

4.4.3 Aguas ultrapuras:

Son aquellas cuyo grado de pureza es muy elevado. Los niveles de concentración
son tan bajos que prácticamente se necesita la utilización de la cámara de grafito.

4.5 METODOS DIRECTOS

Se han desarrollado métodos directos para la determinación de más de 60
elementos en las más variadas muestras: rocas, suelos, aguas, vegetales, muestras
biológicas, productos petrolíferos, metales y aleaciones, combustibles nucleares,
productos farmacéuticos, vinos, etc.. La técnica es particularmente apropiada para la
determinación de trazas de metales en muestras biológicas y medioambientales.
También es de utilidad cuando la muestra contiene un nivel elevado del elemento
metálico, pero solo se cuenta con una cantidad de muestra muy pequeña para realizar
el análisis, como, por ejemplo, en las metal-proteínas

a) Técnica de vapor frío para el mercurio.

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 El mercurio tiene la inusual propiedad (para ser un metal) de que no se oxida
fácilmente por el aire y, además, tiene una apreciable presión de vapor a
temperatura ambiente. Por ello, la determinación de mercurio combinado consiste
en originar iones Hg2+, lo cual, cuando se trata de compuestos orgánicos, se
consigue por tratamiento con un oxidante (MnO4–) y posterior reducción a Hgo
con una sal de Sn2+ (después de haber eliminado el exceso de oxidante)

b) Generación de hidruros metálicos.

La técnica se utiliza para aquellos elementos que pueden formar hidruros

covalentes volátiles: As, Se, Sb, Sn, Te, Bi, Pb. En principio, estos elementos, en
disolución, se reducen con cinc, magnesio, aluminio o borohidruro, para formar
los correspondientes hidruros, los cuales se hacen pasar al atomizador, donde se
disocian en átomos libres, midiendo su absorbancia a las longitudes de onda de
sus líneas de resonancia.

4.6 METODOS INDIRECTOS

Se ha indicado anteriormente que la espectrometría de absorción atómica se utiliza
para la determinación directa de unos sesenta elementos metálicos. Sin embargo,
existen elementos — como Th o Ce — para los cuales resulta extremadamente difícil
formar y mantener una población atómica dentro de la llama, por lo que los métodos
directos no resultan adecuados. Tampoco resultan convenientes estos métodos
cuando las determinaciones no pueden llevarse a cabo con la suficiente sensibilidad,
tal como sucede con uranio, volframio, niobio, tántalo, circonio, etc. Por otra parte,
los elementos no metálicos presentan sus líneas de resonancia en la región espectral
correspondiente al ultravioleta de vacío, y por lo tanto, no es posible su determinación
directa mediante la utilización de instrumentos convencionales.

a) Métodos basados en aumento o disminución de la absorbancia. Algunos aniones,

cationes o compuestos orgánicos producen aumento o disminución en la
absorción atómica de algún metal en particular. Estos efectos se deben
fundamentalmente a que dificultan o facilitan la formación de especies disociadas
en el proceso de atomización
b) Precipitación del analito con un ión metálico cuya absorción pueda medirse. Así,
por ejemplo, puede determinarse sulfato precipitando con exceso de Ba2+, y

15
 midiendo por absorción atómica el exceso de este elemento. También existe la
posibilidad de filtrar el precipitado de BaSO4, disolver en AEDT y medir la
absorbancia atómica del bario. Análogamente, el oxalato puede determinarse
previa precipitación con Ca2+.
c) Formación de hetero-poliácidos seguida de la extracción y medida del metal
correspondiente. Así, por ejemplo, puede determinarse silicio por reacción con
molibdato amónico, formándose el hetero-poliácido SiO4NH4(MoO3)12. La
formación de este compuesto permite la determinación de cantidades muy
pequeñas de silicio, ya que, si bien la relación de combinación en moles es de 1
a 12, en peso es de 1 a 41. Si a esto se le añade la variación del volumen en el
proceso de extracción, el incremento de la sensibilidad es aún mayor.
d) Solubilización de iones metálicos a partir de metales puros. Es posible la
determinación de cianuro o de nitrocompuestos por su reacción con plata o
cadmio metálicos respectivamente, al liberar la cantidad equivalente de Ag+ y
Cd2+, cuya absorbancia se mide.
e) Formación de compuestos de asociación iónica con quelatos metálicos, seguida
de la extracción y medida de la absorbancia atómica del metal. Esto permite la
determinación, tanto del ligando, como del agente formador del par iónico. Así,
por ejemplo, el fármaco psicotrópico bromazepam se ha determinado por
absorción atómica mediante la formación del compuesto de asociación iónica
entre el anión perclorato y su quelato con Ni2+:
f) Procesos redox, seguidos de la extracción selectiva de alguna especie. El yoduro
puede determinarse por reacción con Cr(VI), seguida de la extracción del exceso
de Cr(VI) en MIBK. Por su parte, es posible determinar yodato por oxidación de
Fe(II) seguida de extracción del Fe(III) con éter y medida del Fe(II) que
permanece en la fase acuosa.
g) Desplazamiento de iones metálicos de alguno de sus complejos. Así, por ejemplo,
el fluoruro puede determinarse por desplazamiento del hierro(III) del
correspondiente complejo con tiocianato, seguida de extracción y medida del
exceso de complejo Fe(III)-SCN.

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5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
5.1 ATOMIZACIÓN DE LA MUESTRA.

El proceso por el cual la muestra se convierte en un vapor atómico se denomina

atomización. La precisión y exactitud de los métodos atómicos dependen en
gran medida de la etapa de atomización.

En general los atomizadores son de dos tipos:

- Atomizadores continuos:
La muestra se introduce en el atomizador a una velocidad constante y
la señal espectral es constante con el tiempo. Los procesos que se
distinguen durante la atomización son los siguientes:

 Nebulización: la solución de la muestra se convierte en una

niebla de pequeñas gotas finamente dividas mediante un chorro
de gas comprimido. A continuación, el flujo de gas transporta
la muestra a una región calentada donde tiene lugar la
atomización.

 Atomización. Se trata de un conjunto complejo de los

siguientes procesos: La desolvatación, en la que el disolvente
se evapora para producir un aerosol molecular sólido finamente
dividido. La disociación de las moléculas conduce luego a la
formación de un gas atómico. A su vez, los átomos pueden
disociarse en iones y electrones. Moléculas, átomos e iones
pueden excitarse en el medio calorífico, produciéndose así
espectros de emisión moleculares y dos tipos de espectros de
emisión atómicos.

- Atomizadores discretos:
Una cantidad medida de la muestra se introduce como un bolo de
líquido o de sólido. La señal espectral en este caso alcanza un valor
máximo y luego disminuye a cero.

17
 La desolvatación se lleva a cabo al aumentar la temperatura hasta el
valor en el que tiene lugar la evaporación rápida del disolvente. A
continuación, la temperatura del aparato se aumenta drásticamente de
tal forma que las otras etapas de la atomización se producen en un breve
período de tiempo. En estas circunstancias la señal espectral adquiere
la forma de un pico bien definido.

5.2 ESPECTROS DE ABSORCIÓN ATÓMICA

En el medio gaseoso a elevada temperatura, los átomos de sodio son capaces de

absorber radiación de las longitudes de onda características de las transiciones
electrónicas del estado 3s a estados excitados más elevados. De este modo, un
espectro de absorción atómico característico consta predominantemente de línea de
resonancia, que son el resultado de transiciones del estado fundamental a niveles
superiores.

5.3 INSTRUMENTOS

5.3.1 Fuentes de radiación

La fuente de radiación característica debe poseer tres propiedades fundamentales:

 Monocromaticidad: la línea de resonancia se debe poder seleccionar
con toda precisión exactamente a la longitud de onda del elemento a
determinar.
 Intensidad: deber ser lo suficientemente intensa a la longitud de onda
de interés.
 Estabilidad: suficiente como para poder realizar las medidas
sin fluctuaciones considerables.

Actualmente hay varias fuentes de radiación utilizables: las de emisión

continua, que abarcan el espectro desde el ultravioleta lejano hasta el visible y
las fuentes de emisión discontinua, que emiten únicamente a longitudes de
onda muy concretas.

18
 Figura. Lámpara EDL

Las fuentes de emisión continua son muy buenas, pero necesitan un

monocromador de un elevado poder de resolución cuyo precio es muy alto.
Por esta razón son más utilizadas las fuentes de emisión discontinua, entre las
que se pueden distinguir las lámparas de cátodo hueco y las lámparas de
descarga sin electrodos. Tanto unas como otras requieren un período de
calentamiento antes de comenzar las mediciones. Sin embargo, se debe
destacar que las lámparas de descarga sin electrodos tienen un elevado precio
y requieren un elevado tiempo de calentamiento, pero presentan la ventaja de
alta intensidad de emisión frente a las lámparas de cátodo hueco.

5.3.2 Atomizadores con llama

Su función es convertir los átomos combinados de la muestra en átomos en

estado fundamental, para ello es necesario suministrar a las muestras una
cantidad de energía suficiente para disociar las moléculas, romper sus enlaces
y llevar los átomos al estado fundamental. En la figura 7.4 se representan las
etapas por las que pasa la muestra hasta obtener átomos en estado fundamental.
Los componentes necesarios para obtener los átomos en estado fundamental son:
 Nebulizador: cuya misión en convertir la muestra aspirada en una
nube de tamaño de gota muy pequeño.

19
  Cámara de premezcla: donde penetra la muestra una vez se ha
nebulizado. En ella se separan las pequeñas gotitas que forman la
niebla mezclándose la muestra nebulizada con el oxidante y el
combustible íntimamente.
 Mechero. Se sitúa sobre la cámara de premezcla, y por él sale la llama
con temperatura suficiente para poder comunicar a la muestra la
energía suficiente para llevar los átomos a su estado fundamental.
 La llama es el medio de aporte de energía a la muestra. Entre las
llamas se diferencia entre la de aire-acetileno y la de óxido nitroso-
acetileno. Como puede observarse en la figura 7.5, en la llama se
pueden distinguir tres zonas:
- La zona interna: es la más próxima al mechero, de color
azul y con temperatura relativamente baja.
- La zona de reacción: donde se produce la atomización.
- La zona externa: Es la parte más fría de la llama.

5.3.3 Monocromadores

Tienen como función seleccionar la línea de absorción, separándola de las otras

líneas de emisión emitidas por el cátodo hueco. Los aparatos comerciales
suelen venir equipados con monocromadores del tipo de prima o red de
difracción.

20
5.3.4 Detectores

Miden la intensidad de la radiación antes y después de la absorción por la

muestra. A partir de los valores obtenidos se podrá calcular la radiación
absorbida. En los aparatos comerciales se emplean tubos fotomultiplicadores.

5.3.5 Modulación

La llama emite energía continuamente a longitudes de onda no deseadas,

produciendo interferencia y una gran inestabilidad en las lecturas. Los
detectores que se utilizan son sensibles a determinadas frecuencias, ignorando
las señales continuas ocasionadas por la llama. Por ello, se modula el sistema
de alimentación de las lámparas a la misma frecuencia que el tubo
fotomultiplicador.

5.3.6 Sistema óptico

Su función es conducir las radiaciones emitidas por la lámpara a través del

sistema de obtención de átomos en estado fundamental y el monocromador
hasta llegar al detector. El sistema óptico está formado por:
- Espejos y lentes, que focalizan sobre la llama la mayor cantidad
de energía emitida por la lámpara y la sitúan a la entrada del
monocromador.
- Láminas planoparalelas, que se utilizan para aislar los demás
elementos del exterior.
- Rendijas que, como se ve en la figura 7.6, se sitúan una a la
entrada para obtener un haz paralelo y estrecho procedente de la
lámpara y otra a la salida para seleccionar la longitud de onda
adecuada eliminando el resto de las emisiones.

21
 Figura: Utilización de rendijas

De acuerdo con el sistema óptico, los aparatos de absorción atómica pueden ser de doble
haz y haz simple. En los aparatos de doble haz parte de la radiación pasa a través de la
muestra y otra parte va directamente al detector. Estos equipos presentan la ventaja de
variaciones de la intensidad de la fuente de radiación son compensadas automáticamente.
Sin embargo, estos aparatos son más caros que los de haz simple.

6. APLICACIONES
La Espectrofotometría de Absorción Atómica resulta útil en diversos campos para el
análisis de muestras que se encuentren en disolución o que mediante un método u otro
puedan llegar a disolverse. De gran importancia resulta la aplicación de esta técnica en
estudios medioambientales, en la determinación de sustancias contaminantes a nivel de
trazas, en particular de metales pesados. Se aplica esta técnica a los campos de análisis de
agua, industria farmacéutica, bioquímica y toxicología, metalurgia, edafología, industria
alimentaria, piensos animales, fertilizantes, productos petrolíferos, plásticos y fibras
sintéticas, rocas y suelos, minería, vidrios y productos cerámicos, cementos etc. (Cobas,
2004).

 Metalurgia

En la metalurgia, se utiliza para analizar muestras de aleaciones, siempre y cuando

se puedan poner en disolución y el tiempo para hacerlo no sea excesivamente largo
22
Aleaciones base Cobre: Por lo general, se disuelve la muestra mediante un ataque de
ácidos nítricos, tartárico y fluorhídrico. La disolución obtenida se afora a un volumen
determinado. Se efectúan lecturas para los elementos hierro, manganeso, estaño,
plomo, cinc, aluminio, níquel, y hasta se puede analizar la concentración de cobre,
aunque con poca precisión. Los rangos de concentración donde es aplicable esta
tecnología oscilan generalmente entre el 0,005% y el 50%. Aleaciones base Cinc: La
muestra se disuelve mediante un ataque con ácido clorhídrico, y en muchos casos se
complementa con una oxidación mediante agua oxigenada. La disolución obtenida
se afora a un volumen determinado y se efectúan lecturas para los elementos hierro,
plomo, cadmio, cobre, estaño, magnesio, aluminio, manganeso, cobalto y níquel en
rangos de concentración comprendidas entre el 0,0005% y el 10% en algunas
aleaciones. Aleaciones base Aluminio: La muestra generalmente se disuelve
mediante el ataque con ácido clorhídrico y agua oxigenada. La disolución obtenida
se afora a un volumen determinado y se logra realizando distintas diluciones de los
elementos magnesio, cinc, hierro, cobre, manganeso, plomo, cromo y níquel. Los
rangos de concentración óptimos en esta técnica están comprendidos entre el 0,001%
y el 15%.

 Industria alimentaria

Un espectrofotómetro es un instrumento especializado que puede ser utilizado para

medir y cuantificar las propiedades de reflectancia y transmitancia de una muestra.
Muchos de los usos de los espectrofotómetros están en la industria alimentaria, donde
los alimentos son pigmentados con colorantes alimenticios especificados y aprobados
federalmente. Debido a que estos colorantes alimenticios son inspeccionados
químicamente de forma rigurosa, tienen muchas propiedades que están bien
documentadas y que pueden ser usadas fácilmente para ser identificadas. Una de las
maneras en que los colorantes se pueden identificar rápidamente, es a través del uso
de espectrofotometría, que es un área de la ciencia que se ocupa de cómo los
materiales específicos absorben y reflejan la luz.

Los espectrofotómetros funcionan mediante la exposición de una muestra a una fuente

de luz monocromática. La luz reflejada de la muestra se divide en sus diversos
componentes dentro del espectro visible. El resultado será lo que se conoce como una
curva de reflectancia o espectral. Los datos ahora pueden ser fácilmente analizados

23
para dar una medida cuantificable de color de la muestra. Esto puede ser
especialmente importante en la industria alimenticia ya que los alimentos tienen
colorantes específicos permitidos, y cualquier desviación puede ser la causa de que se
deseche un lote de productos, crear un efecto negativo en los consumidores, o podrían
generar sanciones de agencias gubernamentales bajo ciertas circunstancias.

El fabricante está obligado a adherirse estrictamente a la etiqueta del producto en lo

que respecta a los ingredientes, incluyendo los colorantes de alimentos que
componen la fórmula para cada producto alimenticio. Por lo tanto, los productores
de alimentos tienden a ser muy cuidadoso en el análisis de los colorantes
alimenticios, y hay tres métodos principales para hacerlo:

 Medicina

El uso biomédico de la luz comprende usos diagnósticos y terapéuticos numerosos.

La espectroscopia de la hora de vuelo del fotón puede ayudar a ciertos métodos
terapéuticos (tales como terapia fotodinámica) suministrándolos los datos sobre las
propiedades ópticas que regulan la reacción del tejido.

La amortiguación y la espectroscopia seguras el dispersar (ofrecida por la

espectroscopia de la hora de vuelo) pueden estar del gran valor en diagnósticos
también, que es confirmado por su introducción reciente a la microbiología.

Por otra parte, la espectroscopia de estado estacionario, del infrarrojo cercano es una
herramienta muy importante en análisis farmacéutico. La ventaja principal de esta
técnica es una aproximación rápida y no destructiva que necesita poco o nada de
preparación de la muestra. Además, los efectivoses del chemometrics (que extrae la
información por medios dato-impulsados) han aumentado su propensión de detectar
variaciones ligeras en grupos de datos complejos.

Rupturas recientes en (una técnica basada en la tomografía óptica de la coherencia o

la proyección de imagen cuantitativa de la fase) la promesa microspectroscopy
olográfica del asimiento para la detección y la medición ópticas no invasores,
escritura de la etiqueta-libres de moléculas específicas en células humanas y tejidos
(tales como proteína de la hemoglobina).

24
 Análisis ambiental

Los métodos espectroscópicos visibles y ultravioletas han sido utilizados por años
por los científicos ambientales.

Las pruebas colorimétricas comunes que sondan diversas propiedades del agua (tales
como acidez) están disponibles ahora en formas simples del estuche, empleando
colorímetros de entonado de colores o portátiles visuales. La espectroscopia de
emisión o la absorción atómica en las regiones visibles y ultravioletas se puede
utilizar para determinar los metales en muestras del agua o de los macizo.

Estas aproximaciones requieren la inmersión del analito en la solución antes de que

el análisis pueda ser perseguido. Sin embargo, ciertas muestras sólidas o semisólidas
se pueden analizar directamente con espectroscopia de absorción atómica (usando la
pulverización electrotérmica)

La espectroscopia infrarroja es también una adición importante armamentarium a los

analistas ambientales', especialmente con la introducción de sensores infrarrojos de
largo alcance que puedan determinar la concentración de ciertas composiciones en el
Massachusetts del aire.

Además, los métodos ultravioletas del largo-camino también se utilizan cada vez
más, no obstante tan habitual como la espectroscopia infrarroja. Los métodos de la
radiografía (tales como fluorescencia de la radiografía) se pueden utilizar para
determinar la composición atómica de materiales sólidos, y los también encontraron
un lugar en la determinación de concentraciones del metal en materia en partículas
del aire, así como en muestras del suelo. La espectroscopia de la región de la
microonda y la espectroscopia de resonancia magnética se han ejecutado en una
cierta investigación ambiental, pero no son tan penetrantes.

 Análisis forense

El espectrofotómetro de absorción atómica por horno de grafito es un instrumento

analítico que utiliza la radiación electromagnética para la detección de Plomo, Bario
y Antimonio. Surge a partir de la modificación del espectrofotómetro de absorción
atómica de flama, teniendo el mismo fundamento porque detecta los cambios en los

25
niveles de energía de los electrones externos de un átomo en la longitud de onda de
máxima absorción; es un método fácil y su sensibilidad es comparable con la de
activación de neutrones, genera baja incidencia de falsos positivos, implica un
desarrollo de validación del método por su precisión y sensibilidad, permite la
corrección de fondo y el mejoramiento de estabilidad de la señal, aplica a una amplia
variedad de matrices de muestra, es de operación automática, la calibración de equipo
se realiza con diluciones automatizadas, analiza varios elementos de manera
secuencial y automatizada, permite un consumo mínimo de muestra (menos de 500
μL por determinación), se puede variar el volumen de muestreo para modificar la
sensitividad o para superar interferencias potenciales y permite el uso de
modificadores de matriz y otros agentes reductivos para preconcentrar el analito y
mejorar la sensibilidad de la determinación.

7. CONCLUSIONES
 La espectrofotometría es un método analítico indirecto porque se basa en
la medición de la absorbancia o transmitancia de las radiaciones. Es de gran
utilidad en la actualidad para la identificación de un analito en una muestra
problema.
 La ley de Bourguer-Lambert-Beer o ley general de la espectrofotometría permite
hallar la concentración de una especie química a partir de la medida de la
intensidad de luz absorbida por la muestra.
 La espectrofotometría es el método más usado, debido a que es sencillo, específico
y sensible, mide la señal del detector, la compara y genera una medida en una
escala determinada.
 La espectrofotometría es de gran utilidad en el análisis sobre todo para el químico
analítico, también es de gran utilidad en análisis cuantitativo de proteínas, en la
determinación de ácidos nucleicos incluyendo ADN / ARN, recalcando la
importancia de este método.

26
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
• Flavia Bertolotti Rivera (2018). Ancash, determinación de la concentración de
plomo, mercurio y cadmio en músculo de peces y muestras de agua procedentes
del Río Santa.Recuperado el 14/4/2019 de la siguiente página web:
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/handle/cybertesis/4439/Gonz%C3%A
1lez_es.pdf?sequence=1&isAllowed=y

• Jesús Cortés C. (2013). Aplicación de la espectrofotometría de absorción atómica

en el laboratorio de química forense. Universidad Nacional Autónoma de México,
Recuperado el 14/4/2019 de la siguiente página web:
https://www.zaragoza.unam.mx/portal/wp-
content/Portal2015/Licenciaturas/qfb/tesis/tesis_cortes_cervantes.pdf
• Luis H. Ballena S. (2012). Análisis de metales en filtros de aire para monitoreo
ambiental. Universidad nacional de ingeniería, Perú. Recuperado el 14/4/2019 de
la siguiente página web:
http://cybertesis.uni.edu.pe/bitstream/uni/7041/1/ballena_sl.pdf
• Sergio morales F. (2017). DETERMINACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN
POR METALES PESADOS EN SUELOS ALEDAÑOS A LA EMPRESA
ELECTROQUÍMICA DE SAGUA.

• Uboho. E. (2011). La espectrofotometría y su utilización para resolver problemas

profesionales del Ingeniero Metalúrgico. Recuperado la página web:
http://revista.ismm.edu.cu/index.php/revista_estudiantil/article/viewFile/14/pdf

• Cortes, J. (2013). Aplicación de la espectrofotometría de la absorción atómica

química forense. Recuperado de la siguiente página web:
https://www.zaragoza.unam.mx/portal/wpcontent/Portal2015/Licenciaturas/qfb/t
esis/tesis_cortes_cervantes.pdf

• Tomislav. T. (2001). Uso de la espectroscopia. Recuperado de la siguiente página

web: https://www.news-medical.net/life-sciences/Spectroscopy-Applications-
(Spanish).aspx

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