2678 1 3637 1 10 20121113

JSTFI
Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology

Vol.III, No 2, Juli 2014
OPTIMASI METODE ANALISIS ZINC PYRITHIONE

DENGAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
Syarif Hamdani, Adang Firmansyah, Yuanita Permana
Sekolah Tinggi Farmasi Indonesia
Abstrak
Zinc Pyrithione (ZnPT) dapat dianalisis kadarnya dengan berbagai metode, salah satunya
dengan kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Peneliti terdahulu telah mengembangkan
metode analisis ZnPT dengan KCKT fase terbalik sebagai kompleks copper pyrithione (CuPT),
tetapi setelah diaplikasikan di laboratorium, metode ini tidak memenuhi syarat kesesuaian
sistem karena koefisien variasi area lebih dari 2%. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan
kondisi optimum untuk menentukan kadar ZnPT dalam sediaan sampo dengan metode KCKT
melalui variasi perbandingan komposisi dan pH fase gerak, variasi laju alir, dan variasi suhu
kolom. Dari hasil penelitian diperoleh bahwa kondisi optimum untuk analisis ZnPT dilakukan
pada panjang gelombang 240 nm, menggunakan kolom Licrocart Lichrospher RP-18, fase gerak
campuran larutan dapar fosfat 0,2 M pH 6,0 : asetonitril (60 : 40), laju alir 1,0 mL/menit, suhu
kolom 25°C dan volume injeksi 10 µL. Hasil validasi metode analisis pada kondisi optimum
mempunyai selektivitas yang baik dan menunjukkan hubungan yang linear antara luas area
dibawah kurva dengan konsentrasi pada rentang 3,08-24,62 µg/mL dan koefisien korelasi (r2)
sebesar 0,995. Perolehan kembali hasil uji akurasi sebesar 99-101% pada konsentrasi CuPT
diatas 12,31 µg/mL dan simpangan baku relatif hasil uji presisi sebesar 0,65%. Kondisi
optimum ini efektif digunakan untuk analisis ZnPT dalam sediaan sampo dengan konsentrasi
diatas 12,31 µg/mL..
Kata kunci: zinc pyrithione, copper pyrithione, kromatografi cair kinerja tinggi, sampo anti
ketombe
Abstract
Zinc pyrithione (ZnPT) levels can be analyzed by various methods, one of common method is
using high performance liquid chromatography (HPLC). Previous researchers had developed a
method of ZnPT analysis by reverse phase HPLC as copper pyrithione complex (CuPT), but
when applied in the laboratory, this method did not qualified because coefficient variation of
the system suitability of an area more than 2%. The aims of this study was to determine
optimum conditions for determining dosage levels in shampoo ZnPT by HPLC through a variety
of comparison methods and pH of mobile phase composition, flow rate variations, and column
temperature variations. Result shown that optimum conditions for ZnPT analysis performed at a
wavelength of 240 nm, used Licrocart LiChrospher RP-18 column, mixture of 0.2 M phosphate
buffer pH 6.0: acetonitrile (60 : 40) as a mobile phase, flow rate at 1.0 mL/min, column
temperature 25°C and injection volume 10 mL. Validation analysis at optimum conditions has a
good selectivity and shown a linear relationship between area under curve with a concentration
at range of 3.08-24.62 µg/mL and correlation coefficient (r2) of 0.995. Retrieval of test results
accuracy of 99-101% at concentrations above CuPT 12.31 µg/mL and a standard deviation of
the relative precision of test results by 0.65%. The optimum condition was effectively used for
analysed shampoo contented ZnPT at concentration above 12.31 µg/mL.
.
Keywords: zinc pyrithione, copper pyrithione, high performance liquid chromatography, anti-
dandruff shampoo
22
JSTFI
PENDAHULUAN Saat ini penggunaan ZnPT dalam

Sampo adalah sediaan kosmetika formulasi sediaan sampo menurut Peraturan
yang digunakan untuk maksud keramas Kepala Badan POM No. HK.00.05.42.1018
rambut, sehingga setelah itu kulit kepala tidak boleh lebih dari 2 %. Karena
dan rambut menjadi bersih, dan sedapat penggunaan ZnPT secara berlebihan dapat
mungkin rambut menjadi lembut, mudah menyebabkan dermatitis pada kulit kepala
diatur dan berkilau. Sampo anti ketombe dan kerusakan pada rambut seperti rambut
merupakan sampo yang memiliki zat aktif rontok, berubah warna dan patah–patah.
dan mempunyai sifat kereaktifan Oleh sebab itu, diperlukan suatu metode
bakterisida, fungisida dan kontra iritan, analisis untuk mengontrol kandungan ZnPT
mengurangi atau menghalangi sekresi pada produk sampo untuk menjamin
kelenjar minyak secara berlebihan (BSN, keamanan produk (BPOM, 2009; BSN
1992). 1992).
Berbagai zat anti ketombe seperti Metode standar untuk penetapan
selenium sulfida (SeS2), zinc pyrithione, kadar ZnPT dalam sediaan sampo tidak
asam salisilat, sulfur, dan pirokton olamin tercantum dalam buku-buku resmi, seperti
telah digunakan sebagai zat tambahan Farmakope Indonesia, British
dalam sediaan sampo yang mengandung Pharmacopoeia (BP), United State
sabun atau deterjen sebagai zat utama. Pharmacopoeia (USP), dan Japanese
Tetapi zat anti ketombe yang paling banyak Pharmacopoeia, tetapi hanya terdapat pada
digunakan secara komersil adalah zinc jurnal-jurnal ilmiah.
pyrithione (BPOM, 2009; Lodewyk, 2003). Berbagai penelitian telah dilakukan
Zinc pyrithione (bis(1-hydroxy- untuk menganalisis ZnPT diantaranya
2(H)-pyridethionato-O,S)-T-4 Zinc, ZnPT) dengan metode spektrofotometri,
merupakan koordinasi kompleks seng, yang kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT)
berwujud cairan putih dan berbau khas dan kromatografi cair kinerja tinggi–mass
yang hampir tidak larut dalam air. ZnPT spektrofotometri (KCKT-MS).
sering digunakan sebagai zat aktif anti Pengembangan metoda analisis
ketombe karena dapat menghambat untuk penetapan kadar ZnPT dengan
pertumbuhan bakteri dan fungi pada infeksi metode spektrofotometri telah dilakukan
kulit. Selain sebagai anti bakteri dan anti oleh Revlon Research Center-Bronx, tetapi
fungi, ZnPT terbukti sebagai cytostatic mempunyai tahapan preparasi yang rumit
agent, yang mengurangi laju pergantian dan memerlukan waktu analisis yang lama,
epidermis, sehingga mengurangi timbulnya sehingga kurang efektif dan efisien untuk
ketombe (Martindle, 1982; Yamaguchi, diterapkan, terutama di dunia industri.
2006).
23
JSTFI
Pengembangan metode analisis optimum KCKT untuk menetapkan kadar

untuk penetapan kadar ZnPT dengan ZnPT yang terkandung dalam sediaan
metode KCKT-MS telah dilakukan oleh sampo melalui variasi perbandingan
beberapa peneliti di National Maritime komposisi dan pH fasa gerak, variasi laju
Reseach Institute-Osaka City Institute alir, dan variasi suhu kolom, sehingga
Japan, mempunyai proses analisis yang diperoleh hasil kesesuaian sistem yang
relatif mudah tetapi memerlukan sistem memenuhi persyaratan, pemisahan puncak
instrumen yang canggih dan biaya yang yang baik dan waktu analisis yang relatif
tinggi untuk penyediaan alat, sehingga singkat.
hanya pihak tertentu yang dapat
menerapkannya. METODOLOGI
Pengembangan metode analisis Alat
untuk penetapan kadar ZnPT dengan Alat yang digunakan antara lain
metode KCKT telah dilakukan oleh Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (Hitachi
beberapa peneliti di Dipartimento di LC-2010), timbangan analitik (Mettler
Scienze Farmaceutiche-Universita di Toledo, ketelitian d=0,1 mg), sentrifuge
Modena Italy. Dengan cara mengubah (Hettich), syringe, spatel, kertas timbang,
ZnPT menjadi kompleks yang lebih stabil, penyaring miliphore whatman (d=0,2 dan
yaitu kompleks copper pyrithione (CuPT) 0,45 µm), penyaring buchner, ultrasonik
sebelum disuntikkan dalam KCKT. Metode (Branson), alat-alat gelas laboratorium
ini berpotensi untuk diadopsi karena biaya
yang diperlukan untuk penyediaan alat Bahan
KCKT relatif lebih murah dibandingkan Bahan yang digunakan untuk
dengan penyediaan alat KCKT-MS, dan proses penelitian ini adalah zinc pyrithione
mempunyai tahapan preparasi yang lebih (ZnPT) 49,18 % aqueous dispersion
sederhana dibandingkan dengan metode cosmetic grade (ARCH), copper sulfate
spektrofotometri. pentahydrat (CuSO4.5H2O) GR for analysis
Departemen Quality Control-CHC (merck), potassium dihydrogen phosphate
PT. Rohto Laboratories Indonesia (KH2PO4) GR for analysis (merck), sodium
mengadopsi metode analisis ini untuk hydroksida (NaOH) GR for analysis
menentukan kadar ZnPT dalam sediaan (merck), phosphoric acid (H3PO4) 85% GR
sampo yang mereka produksi, tetapi hasil for analysis (merck), aqua DM, asetonitril
uji kesesuaian sistem KCKT tidak grade for liquid chromatography (merck),
memenuhi syarat, karena nilai koefisien dikhlorometan grade for liquid
variasi areanya lebih dari 2%, sehingga chromatography (merck), dan plasebo
pada penelitian ini akan diteliti kondisi sampo.
24
JSTFI
Pemilihan Kondisi Optimum KCKT campuran, kemudian divortex selama 5

a. Pembuatan larutan standar menit dan disentrifuge selama 15 menit
Tahap pertama yang dilakukan pada kecepatan 3000 rpm. Kemudian, fasa
sebelum menentukan kondisi pengukuran diklorometan disaring dengan membran
yang optimum adalah membuat larutan filter 0,45 µm (konsentrasi CuPT 15.38
standar dispersi ZnPT 2% dan Copper µg/mL).
Pyrithione (CuPT). Larutan standar dispersi
ZnPT dibuat dengan menimbang sebanyak b. Variasi Perbandingan Komposisi
2000,00 mg ZnPT 49,18% dalam labu ukur dan pH Fase Gerak
100 mL. Ditambahkan air sedikit demi Fasa gerak terdiri dari campuran
sedikit sampai tanda batas, kemudian larutan dapar fosfat 0,2 M dan asetonitril
dikocok sampai homogen. Larutan standar yang dibuat dengan variasi perbandingan
Copper Pyrithione (CuPT) dibuat dengan komposisi dan pH seperti tercantum dalam
mencampurkan larutan dispersi ZnPT 2% tabel 1. Kemudian dilakukan uji kesesuaian
standar sebanyak 500,00 mg dalam labu sistem dengan cara menyuntikkan larutan
ukur 50 mL, ditambahkan aqua DM sampai standar CuPT 15,38 µg/mL sebanyak 5 kali
tanda batas kemudian dikocok hingga pada kondisi pengukuran KCKT yang
homogen. Dipipet 1,00 mL larutan ke tercantum dalam tabel 2. Hasil kesesuaian
dalam tabung sentrifuge, kemudian sistem memenuhi syarat, jika memenuhi
tambahkan 2,00 mL larutan CuSO4 13 mM, kriteria parameter uji kesesuaian sistem
divortex selama 5 menit. Ditambahkan seperti yang tercantum pada tabel 3.
diklorometan sebanyak 10,00 mL ke dalam
Tabel 1. Tabel Variasi Perbandingan Komposisi dan pH Fase Gerak (Larutan Dapar
Fosfat : Asetonitril)
FG
A B C D E
(45 : 55) (50 : 50) (55 : 45) (60 : 40) (65 : 35)
pH
1 (pH 4) A1 B1 C1 D1 E1
2 (pH 5) A2 B2 C2 D2 E2
3 (pH 6) A3 B3 C3 D3 E3
4 (pH 7) A4 B4 C4 D4 E4
25
JSTFI
Tabel 2. Kondisi Pengukuran KCKT

No Parameter Spesifikasi
Licrocart Lichrospher 100 RP 18 (250 x 4,6
1 Fase Diam (Kolom) mm), oktadesil (C18), ukuran partikel isi
5μm. (Merck)
Campuran larutan dapar fosfat : acetonitril
2 Fase Gerak
sesuai tabel III.1
3 Laju Alir 1 mL/menit
4 Detektor UV-Vis (λ = 240 nm)
5 Volume Injeksi 10 µL
Tabel 3. Parameter Uji Kesesuaian Sistem

No Parameter Kriteria Penerimaan
1 Retention Time < 20 menit
2 Area RSD < 2 %
3 Asimetri 0,8–1,5
4 Resolusi >1,5
5 Teoritical plate >1000
c. Variasi Laju Alir a. Uji Slektivitas (Spesifisitas)

Larutan standar CuPT 15,38 Plasebo sampo ditimbang sebanyak
µg/mL, disuntikan pada sistem KCKT 500,00 mg dalam labu ukur, kemudian
dengan variasi laju alir 0,6 mL; 0,8 mL; 1,0 ditambah air sampai tanda batas, kemudian
mL dan 1,2 mL, kemudian dicatat hasil dikocok sampai homogen. Dipipet 1,00 mL
yang diperoleh, meliputi retention time, larutan ke dalam tabung sentrifuge,
area, asimetri, resolusi, dan teoritical plate. kemudian tambahkan 2,00 mL larutan
CuSO4 13 mM, divortex selama 5 menit.
d. Variasi Suhu Kolom Ditambahkan diklorometan sebanyak 10,00
Larutan standar CuPT 15,38 mL ke dalam campuran, kemudian divortex
µg/mL, disuntikan pada sistem KCKT selama 5 menit dan disentrifuge selama 15
dengan variasi suhu kolom 25°C; 30°C; menit pada kecepatan 3000 rpm. Kemudian,
35°C dan 40°C kemudian dicatat hasil yang fasa diklorometan disaring dengan
diperoleh, meliputi retention time, area, membran filter 0,45 µm. Larutan
asimetri, resolusi, dan teoritical plate. disuntikkan pada kondisi optimum KCKT.
Dilakukan pula penyuntikan terhadap
Validasi Metode Analisis larutan sampel dan pelarut diklorometan
Parameter validasi metode yang digunakan. Kriteria penerimaan :
analisis yang dilakukan meliputi, uji Larutan plasebo dan diklorometan tidak
selektivitas (spesifisitas), uji linearitas, uji memberikan nilai waktu retensi yang sama
akurasi (kecermatan),presisi(keseksamaan), dengan CuPT. Larutan sampel harus
dan uji robustness (ketegaran). memiliki keterpisahan yang baik.
26
JSTFI
b. Uji Linearitas kemudian tambahkan 2,00 mL larutan

Dispersi ZnPT 2% standar CuSO4 13 mM, divortex selama 5 menit.
ditimbang sebanyak 100,00 mg; 200,00 mg; Ditambahkan diklorometan sebanyak 10,00
300,00 mg; 400,00 mg; 500,00 mg; 600,00 mL ke dalam campuran, kemudian divortex
mg; 700,00 mg; 800,00 mg dalam labu ukur selama 5 menit dan disentrifuge selama 15
50,00 mL. Ditambahkan 500,00 mg menit pada kecepatan 3000 rpm. Kemudian,
plasebo sampo, kemudian ditambah air fasa diklorometan disaring dengan
sampai tanda batas, kemudian kocok membran filter 0,45 µm (diperoleh sampel
sampai homogen. Dipipet 1,00 mL larutan dengan konsentrasi CuPT 12,31; 15,38;
ke dalam tabung sentrifuge, kemudian 18,46 µg/mL). Masing-masing konsentrasi
tambahkan 2,00 mL larutan CuSO4 13 mM, disuntikkan pada kondisi optimum KCKT,
divortex selama 5 menit. Ditambahkan dan dicatat luas area yang diperoleh.
diklorometan sebanyak 10,00 mL ke dalam Kriteria penerimaan : Persen perolehan
campuran, kemudian divortex selama 5 kembali berada dalam rentang 98-102% .
menit dan disentrifuge selama 15 menit
pada kecepatan 3000 rpm. Kemudian, fasa d. Uji Presisi (Keseksamaan)
diklorometan disaring dengan membran Dispersi ZnPT 2% standar ditimbang
filter 0,45 µm (diperoleh sampel dengan sebanyak 500,00 mg dalam labu ukur 50,00
konsentrasi CuPT 3,08; 6,15; 9,23; 12,31; mL (6 replikasi). Ditambahkan 500,00 mg
15,38; 18,46; 21,54; 24,62 µg/ml). Masing- plasebo sampo, kemudian ditambah air
masing konsentrasi disuntikkan pada sampai tanda batas, kemudian kocok
kondisi optimum KCKT, dan dicatat luas sampai homogen. Dipipet 1,00 mL larutan
area yang diperoleh. Kriteria penerimaan : ke dalam tabung sentrifuge, kemudian
Hubungan yang linear antara luas area tambahkan 2,00 mL larutan CuSO4 13 mM,
dengan konsentrasi, dan koefisien korelasi divortex selama 5 menit. Ditambahkan
(r ) kurva ≥ 0,98.
2
diklorometan sebanyak 10,00 mL ke dalam
campuran, kemudian divortex selama 5
c. Uji Akurasi (Kecermatan) menit dan disentrifuge selama 15 menit
Dispersi ZnPT 2% standar pada kecepatan 3000 rpm. Kemudian, fasa
ditimbang sebanyak masing-masing 400,00 diklorometan disaring dengan membran
mg; 500,00 mg; dan 600,00 mg dalam labu filter 0,45 µm (diperoleh sampel dengan
ukur 50,00 mL (3 replikasi). Ditambahkan konsentrasi CuPT 15,38 µg/ml). Masing-
500,00 mg plasebo sampo, kemudian masing konsentrasi disuntikkan pada
ditambah air sampai tanda batas, kemudian kondisi optimum KCKT, dan dicatat luas
kocok sampai homogen. Dipipet 1,00 mL area yang diperoleh. Kriteria penerimaan :
larutan ke dalam tabung sentrifuge, RSD dari semua konsentrasi maksimal 2%.
27
JSTFI
e. Uji Robustness (Ketegaran) disimpan selama 24 jam pada suhu ruang,

Dispersi ZnPT 2% standar kemudian disuntikkan pada kondisi
ditimbang sebanyak 500,00 mg dalam labu optimum KCKT. Kriteria penerimaan :
ukur 50,00 mL. Ditambahkan 500,00 mg waktu penyimpanan tidak mempengaruhi
plasebo sampo, kemudian ditambah air perolehan kembali hasil uji.
sampai tanda batas, kemudian kocok.
Dipipet 1,00 mL larutan ke dalam tabung HASIL DAN PEMBAHASAN
sentrifuge, kemudian tambahkan 2,00 mL Hasil Pemilihan Kondisi Optimum
larutan CuSO4 13 mM, divortex selama 5 KCKT
menit. Ditambahkan diklorometan Berdasarkan percobaan yang telah
sebanyak 10,00 mL, kemudian divortex dilakukan terhadap variasi fase gerak,
selama 5 menit dan disentrifuge selama 15 diperoleh data rata-rata hasil uji kesesuaian
menit pada kecepatan 3000 rp, fasa sistem dalam tabel 4.
diklorometan disaring dengan membran
filter 0,45 µm (diperoleh sampel dengan
konsentrasi CuPT 15,38 µg/ml),
Tabel 4. Data Hasil Uji Kesesuaian Sistem
Parameter
Fase Retention RSD Teoritical Hasil
Asimetri Resolusi
Gerak Time Area Plate
A1 5,138 1,789 0,856 1,611 885 System is not suitable
A2 5,269 2,043 0,843 1,923 963 System is not suitable
A3 4,874 0,690 1,075 2,444 1379 System is suitable
A4 4,715 0,884 1,307 1,908 1256 System is suitable
B1 5,571 1,475 1,167 2,113 1023 System is suitable
B2 5,622 1,545 1,463 2,351 1341 System is not suitable
C1 7,263 1,331 1,058 3,064 1313 System is suitable
C3 7,193 1,676 1,629 3,583 1738 System is not suitable
D1 10,070 2,921 1,124 4,195 1297 System is not suitable
D3 10,205 1,200 1,061 4,607 1523 System is suitable
E1 14,268 12,460 1,022 6,617 1733 System is not suitable
28
JSTFI
Fase gerak D3 memberikan hasil resolusi mL/menit dan 0,8 mL/menit. Keduanya
(pemisahan puncak) yang paling optimal, memberikan nilai resolusi, teoritical plate
sehingga fase gerak D3 akan digunakan dan area yang paling besar, tetapi
untuk proses analisis selanjutnya. mempunyai waktu retensi yang lama, yaitu
Variasi terhadap laju alir dilakukan 16,7 menit dan 12,5 menit, sehingga
untuk mendapatkan waktu analisis yang kurang efektif jika digunakan untuk proses
paling efektif dan pemisahan yang baik, analisis. Laju alir 1,2 ml/menit memberikan
Data hasil percobaan tercantum pada tabel waktu retensi yang cepat, yaitu 8,4 menit
5. dan mempunyai resolusi yang baik, tetapi
Laju alir yang paling efektif yaitu laju alir yang tinggi, menyebabkan pompa
1,0 mL/menit, karena mempunyai waktu KCKT bekerja lebih keras, menyebabkan
retensi yang tidak terlalu lama yaitu 9,9 peningkatan pada tekanan pompa, dan
menit, resolusi baik, dan volume fase gerak volume fase gerak yang masuk ke kolom
yang masuk pada kolom tidak terlalu semakin banyak, hal ini dapat
banyak, dibandingkan .Laju alur 0,6 menyebabkan masa pakai kolom berkurang
Tabel 5. Data Hasil Uji Variasi Laju Alir
Parameter
Laju Alir
(mL/menit) Retention Teoritical
Area Asimetri Resolusi
Time Plate
0,6 16,707 536920 1,31200 5,93396 2528
0,8 12,540 438369 1,28175 5,72393 2284
1,0 9,927 356066 1,29021 5,56645 2127
1,2 8,353 315325 1,26862 5,59300 2112
Untuk mendapatkan pemisahan terhadap suhu kolom KCKT. Data hasil

yang lebih efisisen, maka dilakukan variasi percobaan tercantum pada tabel 6.
Tabel 6. Data Hasil Uji Variasi Suhu Kolom
Parameter
Suhu Kolom
(°C) Retention Teoritical
Area Asimetri Resolusi
Time Plate
25,0 9,807 296315 1,28449 5,68565 2327
30,0 9,113 320188 1,38547 5,03435 2261
35,0 8,507 328390 1,61314 4,98231 2286
45,0 7,967 306369 1,65428 4,44498 2249
29
JSTFI
Pada suhu kolom 35°C dan 40°C,

waktu retensi analit cepat, tetapi terjadi
pengekoran pada puncak dan resolusi analit
rendah, sedangkan pada suhu kolom 25°C
dan 30°C, memberikan waktu retensi yang
lebih lama, tapi tidak terjadi pengekoran
Gambar 2. Kromatogram Plasebo
pada puncak dan resolusi lebih jauh, Sampo
sehingga untuk mendapatkan puncak yang
baik dan memudahkan dalam proses
analisis (tidak memerlukan kolom oven),
maka analisis dilakukan pada suhu 25°C
(suhu ruang).
Hasil Validasi Metode Analisis
Gambar 3. Gambar Plasebo Sampo dan
Parameter validasi metode analisis
ZnPT
yang dilakukan pada percobaan ini Metode analisis ZnPT memenuhi
meliputi, uji selektivitas, uji linearitas, uji parameter uji selektivitas, karena hasil
akurasi, uji presisi dan uji robustness kromatogram diklorometan dan plasebo
(ketegaran). Pada percobaan ini uji sampo tidak memberikan puncak pada
selektivitas dilakukan dengan cara waktu retensi CuPT (memberikan hasil
menyuntikkan pelarut sampel yang negatif CuPT), dan pada kromatogram
digunakan yaitu diklorometan, plasebo plasebo yang mengandung zat aktif ZnPT,
sampo (terdiri dari acasia, sodium lauryl muncul puncak CuPT pada waktu
ether sulfate, aculyn, oil compound, retensinya (memberikan hasil positif CuPT)
bacteriostat, ethylene glycol monostearate, dan puncak mempunyai resolusi yang baik.
glyceryl monoricinoleat, comperland) serta Hal ini mengindikasikan bahwa
plasebo sampo yang mengandung ZnPT. diklorometan maupun plasebo sampo tidak
Gambar kromatogram setiap penyuntikan mengintervensi pemisahan kompleks CuPT.
dapat dilihat pada gambar 1, gambar 2 dan
gambar 3.
Gambar 1. Kromatogram Diklorometan Gambar 4. Kurva Hasil Uji Linearitas
30
JSTFI
Uji linearitas dilakukan pada rentang memenuhi syarat uji linearitas dari rentang
konsentrasi CuPT 3,08 sampai 24,62 konsentrasi 3,08-24,62 µg/mL karena
2
µg/mL. Data hasil percobaan uji linearitas menghasilkan koefisien korelasi (r ) sebesar
tercantum pada tabel 7. Hasil pengujian 0,995. Kurva hasil uji linearitas pada
menunjukkan bahwa metode analisis ZnPT gambar 4.
Tabel 7. Data Hasil Uji Linearitas

Konsentrasi CuPT (µg/mL) Massa (mg) Luas Area
3,08 115,60 47047
6,15 210,80 110949
9,23 312,10 193330
12,31 406,50 271839
15,38 504,70 353912
18,46 601,70 451966
21,54 708,00 534878
24,62 809,90 651960
Uji akurasi menunjukkan derajat hasil dan 18,46 µg/mL sebanyak 3 replikasi,
kedekatan hasil analisis dengan kadar analit kemudian dihitung hasil perolehan
yang sebenarnya. Uji akurasi dilakukan kembalinya (recovery). Data hasil uji
dengan cara menguji 3 larutan dengan akurasi tercantum pada tabel 8, 9, dan 10 .
konsentrasi 12,31 µg/mL, 15,38 µg/mL
Tabel 8. Data Hasil Uji Akurasi Konsentrasi 12,31 µg/mL
Konsentrasi Perolehan Rata-rata

Massa (mg) Luas Area
CuPT (µg/mL) Kembali/PK (%) PK (%)
404,60 129840 88,32
12,31 406,00 148464 100,64 95,26 ± 6,62
404,50 142297 96,82
Luas Area Standar = 226217, massa = 506,4 mg, kadar = 49,18%

513,80 272577 99,28
15,38 523,50 281018 100,46 100,2 ± 0,82
501,00 270025 100,86
31
JSTFI

625,60 453782 100,45
18,46 624,60 446848 99,08 99,18 ± 1,23
600,60 426689 98,01
Berdasarkan tabel diatas, hasil uji akurasi 15,38 µg/mL, sebanyak 6 replikasi. Metode
konsentrasi CuPT 12,31 µg/mL, dianggap presisi jika simpangan baru
mempunyai rata-rata perolehan kembali relatif (SBR) perolehan kembali < 2%.
95,26 ± 6,62, konsentrasi CuPT 15,38 Berdasarkan percobaan, metode analisis
µg/mL mempunyai rata-rata perolehan ZnPT memenuhi syarat uji presisi karena
kembali 100,2 ± 0,82, konsentrasi CuPT diperoleh nilai SBR perolehan kembali
18,46 µg/mL mempunyai rata-rata sebesar 0.65%.
perolehan kembali 99,18 ± 1,23. Uji robustness (ketegaran)
Metode analisis ZnPT tidak menunjukkan kapasitas prosedur analitik
memenuhi parameter akurasi karena pada untuk tidak terpengaruh oleh variasi kecil
konsentrasi 12,31 µg/mL, hasil perolehan dalam parameter metode. Pada percobaan
kembali tidak berada pada rentang 98%– ini, uji ketegaran dilakukan dengan cara
120 %, hal ini bisa disebabkan batas menyimpan larutan sampel dengan
kuantisasi metode analisis hanya dapat konsentrasi CuPT 15,38 µg/mL selama 24
dilakukan pada konsentrasi CuPT diatas jam sebelum disuntikkan pada KCKT,
CuPT 12,31 µg/mL, sehingga metode prosedur dianggap handal jika waktu
analisis tidak bisa digunakan untuk sampel penyimpanan tidak mempengaruhi
sampo dengan konsentrasi CuPT dibawah perolehan kembali hasil uji. Hasil
12,31 µg/mL, meskipun pada uji linearitas percobaan menunjukkan nilai perolehan
metode analisis masih dapat mendeteksi kembali hanya sebesar 85,98% dengan SBR
sampel dengan konsentrasi CuPT 3,08 4,74%, hal ini mengindikasikan bahwa
µg/mL. metode analisis tidak handal dan
Uji presisi (keseksamaan) terpengaruh oleh waktu penyimpanan.
menunjukkan derajat kesesuaian antara Berkurangnya hasil perolehan kembali
hasil uji individual, jika metode analisis sebesar ± 15%, dapat disebabkan kompleks
dilakukan berulang terhadap sampel yang CuPT bereaksi dengan plasebo sambo yang
diambil dari campuran yang homogen. Uji masih terbawa dalam larutan sampel selama
presisi dilakukan dengan cara menguji penyimpanan membentuk pyrithione
larutan sampel dengan konsentrasi CuPT terionisasi. Oleh sebab itu, agar diperoleh
32
JSTFI
hasil yang optimal, sebaiknya analisis DAFTAR PUSTAKA

dilakukan segera setelah sampel Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2009,
dipreparasi. “Anti Ketombe”, Natura Kos, IV
(11) : 2-4.
SIMPULAN Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
Zinc pyrithione (ZnPT) dalam 1995, Farmakope Indonesia, Edisi
sediaan sampo dapat dianalisis IV, Jakarta : 7-8, 487-488.
menggunakan kromatografi cair kinerja Ferioli, V, et al, 1995,”Analysis of
tinggi (KCKT) fase terbalik sebagai Pyrithione by Reserved Phased
kompleks copper pyrithione (CuPT). High Performance Liquid
Kondisi optimum metode analisis ZnPT Chromatography”,
dilakukan pada panjang gelombang 240 Chromatographia, 40 (11/12) :
nm, menggunakan fase diam (kolom) 669-673.
Licrocart Lichrospher 100 RP 18 (250 x 4,6 Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman,
mm) oktadesil (C18), ukuran partikel isi 2007, Kimia Farmasi
5μm (Merck), fase gerak variasi D3 yaitu Analisis,Yogyakarta, Pustaka
campuran larutan dapar fosfat 0,2 M pH 6,0 Pelajar : 325-346, 378-406.
: asetonitril (60 : 40), laju alir 1 ml/menit, Gritter R.J., et al, 1991, Pengantar
suhu 25°C dan volume injeksi 10 µL. Kromatografi, Edisi kedua,
Hasil validasi metode analisis pada Terjemahan K. Padmawinata,
kondisi optimum, memenuhi uji Bandung, ITB : 186-230.
selektivitas, uji linearitas pada rentang Ibrahim, S., 1995, “Pengembangan dan
konsentrasi CuPT 3,08 sampai 24,62 Validasi Metode Analisis Kimia
µg/mL dengan koefisien korelasi (r2) dalam Bidang Farmasi “, Seminar
sebesar 0,995, dan uji presisi kimia analitik, Bandung, Dept.
(keseksamaan) dengan nilai koefisien Farmasi FMIPA ITB.
variasi 0,65%. Pada uji akurasi Johnson, E. L. dan R, Stevenson, 1991,
(kecermatan) perolehan kembali sampel Dasar Kromatografi Cair,
dengan konsentrasi CuPT 12,31-15,38 Terjemahan Padmawinata,
µg/mL berada pada rentang 99–101%, Bandung, ITB : 1-54, 230-255,
sedangkan perolehan kembali pada 300-301.
konsentrasi 12,31 µg/ml berada diluar Kabacoff, B.L. dan C.M Fairchild, 1975,
rentang 98-102%. Hasil uji robustness “Determination of zinc Pyrithione
(ketegaran) memberikan rata-rata perolehan by Chelate Exchange”, Journal
kembali sebesar 85,98 % dengan nilai Soc. Cosmet. Chem, 26 : 453-459.
koefisien variasi 4,74%.
33
JSTFI
Lodewyk, 2003, Uji Daya Anti Fungi Dept. Farmasi FMIPA ITB,
Beberapa Sampo Anti Ketombe Bandung : 5-7.
yang Beredar di Kotamadya Snyder, L. R., et al, 1988. Practical HPLC
Bandung, Skripsi. Universitas Method Development, New York,
Padjadjaran, Bandung John Willey & Sons : 15-49.
Martindle,1982, Text Book of The Axtro Society of Japanese Pharmacopoeia, 1994,
Pharmacopoeia, Edisi 28, London, The Japanese Pharmaceutical
Pharmaceutical Press : 500. Codex (JPC) 1993, Part I, Jepang,
Menteri Kesehatan, 1988, SK Menkes RI Yakugyo Jiho, Co., Ltd : 1246.
No. 43/MENKES/SK/II/1988 Skoog, D.A., et al, 1985, Principle of
tentang Cara Pembuatan Obat Instrumental Analysis, 5th ed.,
yang Baik, Jakarta. Philadelphia, Sounders College
Mulja. M dan Suharman, 1995, Analisis Publishing : 334-345.
Instrumental, Surabaya, Airlangga The British Pharmacopoeia Commission,
University Press : 236-259, 279- 2008, British Pharmacopoeia 2008,
285. Vol IV, London, The Stationery
Munson, W. James, 1981, Analisis Farmasi Office : A142, A166
Metode Modern, Parwa B, The European Pharmacopoeia Commission,
Terjemahan Sarjono Kisman dan 2005, European Pharmacopoeia,
Slamet Ibrahim, Surabaya, 5th ed, Strasbourg, 71-72.
Airlangga University Press : 17- The Scientific Committee on Cosmetic
57. Product and Non Products Intended
Permanasari, Anna, 2005, Kromatografi for Consumers (SNCCNFP), 2002,
Cair Kinerja Tinggi (KCKT), “Zinc Pyrithione”, Plenary Meeting
Bandung, Laboratorium Kimia Colipa P 81.
Instrumen UPI. Tranggono, Rewtno Iswan dan Fatma
Okamura, Hideo, et al., 2006, “Toxicity Latifah, 2007, Buku Pegangan Ilmu
Reduction of Metal Pyrithione by Pengetahuan Kosmetik, Jakarta,
Near Ultraviolet Irradiation”, Gramedia Pustaka Utama : 68-74.
Journal Environmental Toxicology,
21(4) : 305-309.
Rengganingati, Sekarsari, 2004,
Pengembangan Formula Sabun
Cair Ekstrak Daun Sirih (Piper
betle L., piperaceae) dan Uji
Aktivitas Antimikrobanya, Skripsi,
34

2678 1 3637 1 10 20121113

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Deskripsi:

Hak Cipta:

Format Tersedia

2678 1 3637 1 10 20121113

Judul Asli:

Diunggah oleh

Deskripsi:

Hak Cipta:

Format Tersedia

JSTFI

Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology

OPTIMASI METODE ANALISIS ZINC PYRITHIONE

Syarif Hamdani, Adang Firmansyah, Yuanita Permana

Sekolah Tinggi Farmasi Indonesia

PENDAHULUAN Saat ini penggunaan ZnPT dalam

Pengembangan metode analisis optimum KCKT untuk menetapkan kadar

Pemilihan Kondisi Optimum KCKT campuran, kemudian divortex selama 5

Tabel 2. Kondisi Pengukuran KCKT

Tabel 3. Parameter Uji Kesesuaian Sistem

c. Variasi Laju Alir a. Uji Slektivitas (Spesifisitas)

b. Uji Linearitas kemudian tambahkan 2,00 mL larutan

e. Uji Robustness (Ketegaran) disimpan selama 24 jam pada suhu ruang,

Tabel 5. Data Hasil Uji Variasi Laju Alir

Untuk mendapatkan pemisahan terhadap suhu kolom KCKT. Data hasil

Tabel 6. Data Hasil Uji Variasi Suhu Kolom

Pada suhu kolom 35°C dan 40°C,

Gambar 1. Kromatogram Diklorometan Gambar 4. Kurva Hasil Uji Linearitas

Tabel 7. Data Hasil Uji Linearitas

Tabel 8. Data Hasil Uji Akurasi Konsentrasi 12,31 µg/mL

Konsentrasi Perolehan Rata-rata

Tabel 9. Data Hasil Uji Akurasi Konsentrasi 15,38 µg/mL

Konsentrasi Perolehan Rata-rata

Tabel 10. Data Hasil Uji Akurasi Konsentrasi 18,46 µg/mL

Konsentrasi Perolehan Rata-rata

hasil yang optimal, sebaiknya analisis DAFTAR PUSTAKA

Anda mungkin juga menyukai