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INTRODUCCION

Al trabajar con microorganismos se sabe que el número de variables y factores


que pueden afectar los resultados de las prácticas son mayores que cuando se realizan
experimentos con elementos sin vida. Es por esto que se deben llevar a cabo ciertos
protocolos de limpieza, esterilización y desinfección tanto en los materiales, como en el
área de trabajo.

La esterilización se define como el proceso validado, en el cual se obtiene un


producto final libre de microorganismos viables (Pommerville, 2007). Es necesario tener
en cuenta que no existe la esterilidad absoluta, y que el nivel de esterilidad se puede
medir por la cantidad de microorganismos que se encuentren en el material. Los
diferentes tipos de esterilización son: físicos y químicos.

Los métodos físicos no utilizan sustancias químicas para eliminar a los


microorganismos; el principal agente utilizado es el calor. Hay distintas maneras de
transmitirlo, como: calor húmedo, calor seco, incineración, pasteurización, ebullición,
tindalización y radiación. La pasteurización es un proceso físico peculiar, ya que,
después de que el líquido es sometido al calentamiento, se enfría rápidamente y se sella
de manera hermética. Este proceso no elimina las esporas, ni a los microorganismos
termofílicos en su totalidad. (Gutiérrez, 2001)
Para la esterilización química se utilizan distintos compuestos tales como el
etanol, formol, formol, peróxido de hidrógeno, entre otras sustancias letales para los
microorganismos. También existen sustancias bacteriostáticas que no matan al
organismo, pero impiden su reproducción. La efectividad de los diferentes métodos se
puede ver afectada por las características microbianas, el tiempo de exposición, el
ambiente y la cantidad de microbios. (Gutiérrez, 2001)

puede ser ácido clorhídrico, nítrico o mezcla sulfocrómica. El resto del material (tubos de
plástico, jeringas, etc.) se trata con distintas soluciones que se utilizan a concentraciones
superiores a las utilizadas con otros fines.
OBJETIVO GENERAL

 Conocer la importancia de la esterilización y familiarizarse con el manejo de los


procedimientos más frecuentemente utilizados para llevar a cabo
OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Identificar el material de laboratorio, su función y su método de desinfección, al


igual que el del área de trabajo.
 Aprender a preparar el material para su esterilización por medio de calor
húmedo.
 Aprender a rotular los instrumentos de laboratorio, placa Petri y pipeta

1. MARCO TEORICO

1.1. DEFINICION DE CALIDAD

El significado histórico de la palabra calidad es el de aptitud o adecuación al


uso. Se dice que un producto o servicio es de calidad cuando satisface las
necesidades y expectativas del cliente o usuario, en función de parámetros
como:
 Seguridad que el producto o servicio confieren al cliente.
 Fiabilidad o capacidad que tiene el producto o servicio para cumplir las
funciones especificadas, sin fallo y por un período determinado de
tiempo.
 Servicio o medida en que el fabricante y distribuidor responden en caso de
fallo del producto o servicio.

1.2. DEFINICION DE CALIDAD

Siempre que se presta un servicio las “características” de este deben cumplir


con determinadas condiciones o “requisitos” que conformen al cliente que lo
recibe, o a la sociedad. El sistema de gestión de la calidad es el conjunto de
actividades que se desarrollan para que las características del servicio cumplan
con los requisitos establecidos.
El planteo inicial antes de elaborar o diseñar el sistema de calidad es establecer
o averiguar cuáles son los requisitos que deben cumplir el producto o servicio.
Luego se debe decidir de qué forma se van a cumplir los requisitos usando los
recursos disponibles de la manera más eficiente. Existen normas o estándar es
de calidad que contienen requisitos de carácter general y que se pueden aplicar
a un caso particular siempre que se determina que los requisitos de dicha
norma o estándar sean equivalentes a los requisitos del propio producto o
servicio que se debe brindar. También es posible utilizar solamente aquellos
requisitos de una Norma que son aplicables al producto o servicio.
El sistema de control destinado a eliminar y/o prevenir las fallas del producto o
el servicio que se brinda y cumplir con los requisitos establecidos se denomina
“Sistema de Gestión de la Calidad” o simplemente “Sistema de Calidad”.
Sistema de calidad es el conjunto de actividades que se planifican y realizan
en una empresa, durante la fabricación de un producto o la prestación de un
servicio, para lograr efectivamente la calidad de ese producto o servicio,
tomando todas las precauciones necesarias a fin de prevenir la aparición de
fallas y desviaciones durante el proceso productivo.
Las actividades de un sistema de calidad se pueden dividir en cuatro grupos:
la planificación, el control, el aseguramiento y la mejora de la calidad.

1.3. DEFINICION DE CALIDAD

A principios de la década de los 60 del Siglo pasado, como parte de la guía


elaborada para las Buenas Prácticas de Producción (BPP) de la industria,
surgió el concepto de Buenas Prácticas de Laboratorios (BPL). En donde se
establecían los elementos que un laboratorio debía asegurar para lograr que
los resultados de sus ensayos tuvieran una confiabilidad apropiada. Esto fue lo
que posteriormente se denominó BPL. (GUTIERREZ, 2000)
Las BPL son un sistema de calidad que involucra a la organización de un
laboratorio. Dicho sistema establece las condiciones bajo las cuales se
planifican, realizan, controlan, registran, archivan e informan los estudios
realizados por un laboratorio. Estas reglas son promulgadas por organismos
como la Organization
for Economic Cooperation and Development (OCDE) las define como: "Las BPL
es todo lo relacionado con el proceso de organización y las condiciones
técnicas bajo las cuales los estudios de laboratorio se han planificado,
realizado, controlado, registrado e informado".

El propósito de las BPL es asegurar la calidad de los datos en los estudios


realizados, cuestión de vital importancia ya que constituye la base de su
aceptación entre distintos organizaciones y países. Dentro de este contexto las
Buenas Prácticas de Laboratorio son un conjunto de reglas, procedimientos
operativos y prácticas establecidas y promulgadas por un determinado
organismo, que se consideran obligatorias y buscan asegurar la calidad e
integridad de los datos producidos en determinados tipos de investigaciones o
estudios.

Así para las instalaciones, solo exige que las condiciones sean tales que
faciliten la realización correcta de los ensayos, y que las condiciones
ambientales no invaliden los resultados ni comprometan la calidad requerida.
En general, resulta importante asegurar el orden y la limpieza del laboratorio, y
en el caso de los laboratorios de microbiologías es necesario preparar
procedimientos para estas operaciones.

Con el objetivo de reducir el riesgo de contaminación y facilitar las labores de


limpieza y desinfección, se recomiendan algunas de las series de medidas
como las que se presentan a continuación, sin que éstas sean exhaustivas
- uniones cóncavas entre suelo, paredes y techos.
- iluminación empotrada en los techos.
- las áreas de trabajo deben estar debidamente ventiladas, lo que puede
conseguirse mediante ventilación natural o forzada, o mediante el uso de unidades de
aire acondicionado, equipadas con filtros para el polvo en la entrada de aire;
- disponer de suficiente espacio para almacenamiento.
Para mantener las condiciones ambientales que se requiere para los ensayos
microbiológicos, la limpieza y desinfección son cruciales. Por ello se establece
un programa documentado de limpieza y desinfección que tenga en cuenta los
resultados de la vigilancia de las condiciones ambientales y la posibilidad de
contaminación cruzada. La vigilancia tendrá en cuenta los niveles de
biocontaminación tanto el aire como de las superficies de trabajo. Se definirán
los recuentos máximos de microorganismos que se consideren aceptables y
estarán dispuestas las medidas a tomar para corregir las situaciones en que se
sobrepasen estos límites. Estas medidas incluyen, por ejemplo:
 limpieza y desinfección a fondo del laboratorio (incluyendo
superficies de trabajo y filtros del aire acondicionado)
 incremento de la frecuencia de las operaciones de limpieza y desinfección.
 modificaciones en los procedimientos de limpieza y desinfección.
 Cambio de desinfectantes.
 Con relación a las instalaciones también hay que considerar los aspectos de
bioseguridad, y por tanto las mismas se deben adaptar de acuerdo a la
clasificación de los microorganismos que se trabajen.

1.4. DEFINICION DE CALIDAD

Las Normas de Calidad tienen por objetivo ayudar y orientar al responsable de


una actividad en el diseño del sistema de calidad y en brindar herramientas de
trabajo de utilidad para detectar, evaluar y prevenir las fallas que puedan
ocurrir.

Evolución de las Normas de calidad

Las primeras normas de calidad fueron diseñadas


usando el siguiente razonamiento:
 En toda empresa se realizan un conjunto de actividades brindar un servicio.
 Cada una de esas actividades puede ser una fuente de errores y desviaciones.
 Conviene establecer medidas de control para cada una de estas actividades.

Una norma de calidad establece pautas o criterios para que durante todas
estas actividades que se realizan en el proceso productivo no se
produzcan fallas o desviaciones que afecten la calidad final del servicio
en forma significativa. Los Criterios de Calidad son la forma especial en
que se realizan todas estas actividades para evitar que constituyan una
fuente de error.

2. MATERIALES Y METODOS

2.1. MATERIALES

MATERIALES
 El mechero

El mechero bunsen es un instrumento


utilizado en laboratorios para calentar
muestras y sustancias químicas. El
mechero bunsen está constituido por un
tubo vertical que va enroscado a un pie
metálico con ingreso para el flujo de gas,
el cual se regula a través de una llave
sobre la mesa de trabajo.

 Hornos de aire caliente


Los hornos de aire caliente, también
llamados hornos de calor seco, son
dispositivos eléctricos utilizados
para esterilización que forman parte
del equipamiento de laboratorio. El
horno utiliza calor seco para esterilizar
los objetos que se introducen en él. En
general, pueden funcionar
con temperaturas comprendidas entre
50 y 300 °C (de 122 a 572 °F).
 Microscopio

El Microscopio es una herramienta óptica


muy relevante ya que desde su creación
fue posible poder apreciar elementos y
organismos ciertamente diminutos que
antes de su aparición no podían
visualizarse conforme. Por eso es que su
llegada, sin lugar a dudas, marcó un
salto en este sentido y una de las
grandes beneficiadas fue la
investigación científica que encontró en
él un gran aliado y soporte a la hora de
avanzar en ciertas investigaciones que
justamente implicaban el conocimiento
de elementos y organismos muy
pequeños.

 Laminas porta objetos

Lamina de vidrio rectangular de color


transparente utilizada para almacenar
muestras y objetos con el fin de
observarlas bajo el microscopio. Las
dimensiones típicas de un portaobjeto
son de 75mm x 25mm, sin embargo
están pueden variar dependiendo del
tipo de objeto o muestra (en geología
suelen utilizarse portaobjetos de 75 x 50
mm).

 Autoclave de Laboratorio.
Una autoclave es un recipiente de
presión metálico de paredes gruesas con
un cierre hermético que permite trabajar
a alta presión para realizar una reacción
industrial, una cocción o una
esterilización con vapor de agua. Su
construcción debe ser tal que resista
la presión y temperatura desarrollada en
su interior. La presión elevada permite
que el agua alcance temperaturas
superiores a los 100 °C..
RESULTADOS
En esta práctica no se obtuvieron resultados tangibles, ya que no hubo una
verificación de la esterilización. Sin embargo, se espera que el material haya
quedado totalmente libre de todas las formas de vida (incluyendo esporas
bacterianas), tanto por el método de calor húmedo como por el de calor seco.
Por consiguiente, se espera que, de realizarse una prueba para la
comprobación de la esterilidad del equipo, ésta revelara la ausencia de
microorganismos. Si tal prueba mostrara crecimiento de cualquier tipo de
microorganismo, esto indicaría una falla en la programación o el
funcionamiento del aparato o una contaminación posterior a la esterilización
como consecuencia de una mala preparación del material o un mal manejo
de este una vez terminado el proceso.

DISCUSIÓN

En ausencia de una verificación de la esterilización, sólo podemos mencionar, en


relación a los objetivos, que se preparó completa y correctamente el material para
esterilizarlo por ambos métodos, es decir, con tapones de algodón y papel craft para
el material de calor húmedo y con papel aluminio para el de calor seco y se metió a
esterilizar por los métodos correspondientes.

CONCLUSIONES

Resaltamos, además, la importancia de la limpieza que se le tiene que dar


al espacio de trabajo en donde se preparan los materiales para la
esterilización, así como el manejo de éste después de pasar por el
autoclave o estufa de esterilización. Materiales como el papel craft, los
tapones de algodón y el aluminio son una parte fundamental para que no
exista oportunidad de contaminación, es decir, que sirven como barreras
contra la contaminación.

Pese a la ausencia de resultados tangibles, se desarrollaron habilidades


para esterilizar el material de laboratorio por los métodos de calor seco y
calor húmedo, tomando en cuenta que el método escogido corresponde a
las necesidades de esterilización que se desean cubrir, teniendo como
variantes: el tipo de material, tiempo disponible para esterilizar, naturaleza
de los microorganismos que se desea erradicar, etc.

La práctica se desarrolló sin inconveniente, a excepción del tiempo con el


que se contaba para utilizar la estufa de esterilización, la cual tarda más del
doble en esterilizar a comparación del autoclave.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Pontificia Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias, departamento de microbiología


industrial:
:<http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/dep_micro/servicios/la
b_indica dores.htm> [Consulta: 7 Abril 2008].

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Heredero, C. de P., Agius, J. J. L. H., Romero, S. M. R., & Salgado, S. M. (2012).

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