1.

Estructura y composición química

2. Funciones
Biomembranas 3. Métodos de Estudio
1. Estructura y composición química
Estructura
Bicapa Lipídica +
Proteinas asociadas

Science, 175 (1972), pp. 720–731

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Cara o hemicapa exoplasmática
Núcleo
hidrofóbico
Vesícula
Cara o
hemicapa
citosólica

Golgi

Lis

Retículo endoplásmico

Cara o
Núcleo hemicapa luminal

Membrana
Plasmática
Interna Envoltura
Externa nuclear

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Composición química
Glicerofosfolípidos
Los fosfolípidos
1. Fosfolípidos
determinan la estructura
55-75%
de la matriz lipídica
de todas
las membranas
biológicas
2. Plasmaógenos
(o-Fosfolípidos)

Esfingolípidos
1. Esfingomielina

2. Glucoesfingolípidos
5-20%

Colesterol
15-25%

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Composición química Glicerofosfolípidos
Glicerolípidos
Plasmalógenos
Esfingomielina
Esfingolípidos
Glucoesfingolípidos

Colesterol

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 5

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Los fosfolípidos
determinan la estructura
de la matriz lipídica
de todas
las membranas biológicas
Ácido graso
Lisofosfolípido

hidrofóbico hidrofílico
Fosfatidilcolina

Liposoma

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez
Asimetría Tamaño
Polaridad Flipasas
Espesor Termodinámicamente no favorable Carga
Curvatura

Las biomembranas son estructuras fluidas a temperatura de la vida

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez
Temperatura
Estado “gel” Estado “líquido”
Composición química (menos fluida (más fluida
más ”ordenada”) menos “ordenada”)

¿Influye la temperatura en la fluidez de ↑Temp

las membranas de células animales?
↓Temp

a 37ºC Membrana  Fluida   Viscosidad ~ Ac.Oliva

Las biomembranas son estructuras fluidas a temperatura de la vida

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez Largo de la cadena: cortas 😊 o largas 🤢
Temperatura Insaturaciones 😊
Composición química Tipo de instauración: cis 😊 o trans 🤢🤢 Estado “gel” Estado “líquido”
(menos fluida (más fluida
Ácidos grasos más ”ordenada”) menos “ordenada”)
Colesterol

¿Cómo influye una dieta rica salmón y una dieta rica en

margarina sobre la fluidez de las membranas?¿Por qué?

Las biomembranas son estructuras fluidas a temperatura de la vida

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez Deformabilidad
Temperatura
Composición química

a 37ºC Membrana  Fluida   Viscosidad ~ Ac.Oliva

Las biomembranas son estructuras fluidas a temperatura de la vida

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos colesterol:esfingomielina:fosfatidilcolina (1:1:1)
Fluidez
Temperatura Microdominios de membrana/
Composición química Balsas Lipídicas/
Lipid rafts:
Ácidos grasos Ricos en SM-Col-GSL
Colesterol

¿Qué ocurrirá con la actividad de una proteína

(aumentará o disminuirá) si trasloca a un microdominio
raft desde un dominio adyacente?¿Por qué?

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez
GLs
Asimetría de Bicapa
Apoptosis (PS)
SM
Reconocimiento
Celular PC

Señalización PE Superficie de
celular Anclaje
Vía PLC Vía PKC PS

Vía PLD Vía PI3K PI

Vía PLA2

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 12

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez Asimetría
Asimetría de Bicapa

Flipasa
dependiente
de ATP

Flipasa
NO dependiente
de ATP

Simetría

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Propiedades de la Bicapa Fosfolipídica
Movimiento de los lípidos
Fluidez
Asimetría de Bicapa
Espesor
Curvatura

PC

↑↑↑ PC

↑↑↑ PE

PE

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 14

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Biosíntesis de Lípidos y Biogénesis de Membranas
Cuerpos Lipídicos

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana: clasificación

Proteínas que se extraen de la bicapa con:

¿Qué tipo de
interacción débil
🍊 alta fuerza iónica: KCl 1M Proteínas Periféricas
estabiliza la unión
de la proteína con la
🍋 con detergentes: 💪 iónicos (SDS) Proteínas que interaccionan con membrana?
🤙 no iónicos (tritón) el núcleo hidrofóbico de la bicapa

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 16

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana

Proteínas Periféricas alta fuerza iónica: KCl 1M

Interacción proteína-proteína Interacción proteína-lípido

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 17

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana

Proteínas Periféricas alta fuerza iónica: KCl 1M

Interacción proteína-lípido Interacción proteína-lípido

Deforman la membrana

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 18

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana

Proteínas Periféricas alta fuerza iónica: KCl 1M

K+ K+ -
+ K+ K+
Cl- K- Cl- Cl Cl- K+ Cl--
Cl Cl-
K+ Cl K+K+ K+
+
Cl- K- Cl- Cl- Cl- K+ K+
Cl K+ + K+K+
K Cl-
Cl-
¿Cómo se separan las proteínas
periféricas de la mezcla de reacción?

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
Proteínas que interaccionan con con detergentes
el núcleo hidrofóbico de la bicapa

Ancladas por lípidos

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 20

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
Proteínas que interaccionan con con detergentes
el núcleo hidrofóbico de la bicapa

Integradas al núcleo hidrofóbico

unipaso

dominio extracelular o luminal

multipaso

dominio transmembrana aminoácidos no polares,

hidrofóbicos

dominio citoplasmático

GPCR
7TM

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 21

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas Porina
Proteínas asociadas a la Membrana 3 subunidades

Proteínas que interaccionan con con detergentes

el núcleo hidrofóbico de la bicapa

Integradas al núcleo hidrofóbico

Canal de K+
4 subunidades

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 22

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
Proteínas que interaccionan con con detergentes
el núcleo hidrofóbico de la bicapa

🤙 no iónicos

💪 iónicos (SDS) 🤙no iónicos

🤙 Proteína en estado nativo

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 23
1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
Proteínas que interaccionan con con detergentes
el núcleo hidrofóbico de la bicapa

💪 iónicos (SDS)

💪 iónicos (SDS) 🤙no iónicos

¿Se podrá medir la actividad de

proteínas aisladas de las membranas
con SDS? ¿Por qué?
💪 Proteína desnaturalizada
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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
Modificaciones en el dominio luminal o extracelular

azúcares: oligosacáridos puentes disulfuro

(Glucocaliz)

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 25

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
🍏 Vectorialidad o direccionalidad: Asimetría de Membrana
🍏 Movimiento
👀
Composición proteica y lipídica en la
hemicapa externa o luminal

Topografías diferentes

dirección
Composición proteica y lipídica en la
hemicapa citosólica

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 26

1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
🍏 Vectorialidad: Asimetría de Membrana
🍏 Movimiento

A. Movimiento restringido dentro de “clusters” proteicos

B. Movimiento restringido por citoesqueleto (o MEC)
C. Movimiento dirigido por citoesqueleto
D. Movimiento libre y al azar

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1. Estructura y composición química Lípidos - Proteínas
Proteínas asociadas a la Membrana
FRAP
🍏 Vectorialidad: Asimetría de Membrana (fluorescence recovery after photobleaching)
🍏 Movimiento
Lípido o Proteína Reactivo
de membrana Fluorescente Área Decolorada

1 2 3

Decoloración Recuperación
marcación con Láser de Fluorescencia
Intensidad de Fluorescencia

antes

50 % “inmoviles”

50 % Difunden “moviles”

decoloración
t1 t2 t3

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2. Funciones

Regulan la actividad

Lípidos Barrera Proteínas

Impermeable Célula y el entorno Permeabilidad Selectividad
Núcleo hidrofóbico Compartimientos
Transportadores
Fluidez Señalización

Sustratos y Cofactores Receptores

Transductores de Señales
Asimetría Anclaje
Células a MEC Asimetría
Citoesqueleto

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3. ¿Cómo se estudia una membrana?

¿Qué ASPECTO se quiere ¿Qué MEMBRANA

estudiar de la membrana? se quiere estudiar?
Estructura célula entera
Fluidez compartimientos

Composición química fraccionamiento celular

Lípidos Proteínas
Métodos espectrofotométricos Cantidad Métodos espectrofotométricos

Cromatografía en placa o gaseosa Calidad Western Blot (SDS-PAGE +Blot)

Espectrometría de masa IFI

En la Membrana Función En la Membrana

Aislados (liposomas) Aisladas (liposomas)

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2018 30

Biomembranas DRA FERNÁNDEZ - 2017
2018 31