Anda di halaman 1dari 3

Translate hal 3 natrium sulfat, disaring dan dipekatkan di bawah nitrogen lembut mengalir. Untuk Stir Bar Sorptive Extraction (SBSE) 10 sampel berwarna merah anggur telah dibubuhi senyawa heterocycles pada 10 kadar (10, 20, 50, 80, 100, 150, 250, 500, 750 dan 1000 mg L1 ). sampel berduri diserahkan ke ekstraksi menggunakan batang pengaduk PDMS (Twister, 63 μL coating) (Gerstel, Mullheim an der Ruhr, Jerman) selama 1 jam pada 20 1C dan desorpsi pada 280 1C selama 10 menit.Untuk validasi, linearitas dan rentang ditentukan untuk matriks anggur Bordeaux putih dan merah.Tes pengulangan adalah dilakukan dengan anggur merah yang dibubuhi 10 mg L1 dengan semua Senyawa yang dipelajari. Pengujian reproduktifitas dilakukan pada berduri (10 mg L1 ), anggur merah, melakukan analisis pada 2 hari interval selama 21 hari. Sampel secara individual dibekukan pada hari pengukuran pertama. Untuk akurasi dan spesifisitas tes, analit dibubuhi (10 mg L1 ) dalam anggur sintetis (larutan hidroalkohol (12% v / v), pH 3,5, asam tartarat 3 g L1 ), dan anggur Bordeaux putih dan merah. Batas deteksi (LOD, konsentrasi sinyal / noise¼3) dan kuantifikasi (LOQ, konsentrasi sinyal / noise¼10) dihitung menggunakan perangkat lunak analisis data stasiun Chem (Agilent Technologies, Prancis). identifikasi senyawa heterosiklik dalam anggur dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum massa dengan yang murni standar dan dengan basis data spektrum massa NIST. Untuk studi kuantitatif 10 mL larutan standar internal, pirazin ??? d6 pada 700 mg L1 dalam larutan etanol (50% v / v), ditambahkan ke 10 mL sampel.

2.3. Ekstraksi mikro fase padat (SPME) - desain eksperimental

Serat yang digunakan (Supelco, Bellefonte, PA, USA) dilapisi dengan berbagai fase diam dan ketebalan film: divinylbenzene ?? carboxen-polydimethylsiloxane 50/30 mm (DVB / CAR / PDMS), poli dimethylsiloxane - divinylbenzene 65 mm (PDMS / DVB), carboxen polydimethylsiloxane 85 mm (CAR / PDMS), polydimethylsiloxane 7 mm dan 100 mm (masing-masing PDMS-7 dan PDMS-100) dan polyacrylate 85 mm (PA) .Mereka dikondisikan sebelum digunakan oleh penyisipan ke dalam injektor GC seperti yang direkomendasikan oleh pabrikan pabrikan. Ke dalam 20 mL headspace vial ditambahkan 10 mL sampel anggur, larutan hidroalkohol kosong 12% (v / v). Solusinya dimuat ke autosampler (lihat di bawah). Program dasar untuk serat yang dipilih terdiri dari berputar-putar vial pada 250 rpm selama 5 menit pada 40 1C, lalu masukkan serat ke dalam headspace selama 40 menit pada 40 1C saat solusinya diaduk lagi,

kemudian mentransfer serat ke injektor untuk desorpsi pada 250 1C selama 5 menit. Parameter diuji dalam desain eksperimental untuk menentukan kondisi terbaik untuk percobaan ekstraksi adalah: pH, ionik kekuatan dan waktu ekstraksi. Untuk mengevaluasi efek dan interaksi dari ketiga variabel ini, permukaan respon metologi digunakan bersama-sama dengan desain komposit pusat. Itu variabel independen dan levelnya (1, 0, 1) digunakan untuk desain eksperimental adalah: pH (3,5, 5,5, 7,5), NaCl (0, 1,5, 3,5 g) dan waktu ekstraksi (20, 40, 60 menit). Desain dibangun berdasarkan 33 desain faktorial dengan

4 replikasi titik pusat untuk memperkirakan eksperimental

kesalahan, yang mengarah ke 18 percobaan, dilakukan secara acak. Semua lari dilakukan dengan 10 mL anggur berduri (100 mg L1 ), Sebuah Serat Carboxen / PDMS digunakan, yang dipilih dalam pendahuluan tes, dan suhu ekstraksi ditetapkan pada 40 1C untuk menghindari

pembentukan produk baru dari reaksi Maillard dalam anggur. Respons yang dipilih (y) adalah rerata geometris dari semua area dari puncak individu dari semua analit, untuk memperoleh satu set unik kondisi optimal untuk ekstraksi semua analit target. Untuk memperkirakan respon, model empiris terdiri dari polinomial orde kedua dibangun (Persamaan (1)):

di mana y adalah respons yang diprediksi, β0 konstanta model, βi

koefisien efek linier, βii koefisien kuadratik

efek, βij koefisien interaksi antara faktor, xij dan

xj variabel kode independen, ε kesalahan, k jumlah

variabel dipertimbangkan, dan i dan j faktor kode dari sistem. Koefisien dihitung dengan analisis regresi dan signifikansi mereka diverifikasi menggunakan analisis varian (ANOVA) dengan program perangkat lunak Statistik (versi 7.0).

2.4. Analisis GC – MS

Semua analisis dilakukan dengan menggunakan HP 6890N (Agilent) kromatografi gas, digabungkan ke spektrometer massa quadrupole dilengkapi dengan autosampler Gerstel MPS2. Kapasitor HP5 kolom digunakan (30 m 0,25 mm, ketebalan film 0,25 mm, SGE, Courtaboeuf, Perancis) dan gas pembawa adalah helium (N55), pada a laju aliran 1,0 mL / menit. Program suhu oven kolom adalah: suhu awal 40 1C selama 4 menit, kemudian dinaikkan pada 2 1C / menit menjadi

160 1C dan ditahan selama 1 menit, dan akhirnya meningkat menjadi 230 1C pada tingkat

5 1C / mnt dan ditahan selama 5 mnt. Untuk penentuan kuantitatif

mode pemantauan ion selektif (SIM) digunakan. Antarmuka disimpan pada 280 1C dan mode ionisasi adalah dampak elektron (70 eV). Analit dan standar internal (IS) dipantau sesuai dengan ion yang ditunjukkan pada Tabel 1. Sebelum kuantifikasi dalam mode SIM, mode pemindaian penuh (m / z 40–250) digunakan untuk identifikasi semua senyawa target berdasarkan spektrum massa mereka dan waktu retensi GC.

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. Metode optimasi 3.1.1. Mode ekstraksi dan pengenceran sampel Senyawa heterosiklik yang diekstraksi dengan metode ini berasal dari berbagai keluarga senyawa dengan bahan kimia yang berbeda karakteristik, terutama dalam hal polaritas. Jadi, itu perlu membandingkan berbagai serat SPME untuk menemukan kompromi yang akan memberikan pilihan terbaik untuk seluruh rangkaian senyawa heterosiklik dipelajari. Selain microextraction fase padat (SPME), cairan– ekstraksi cair (LLE), dengan proporsi sampel yang berbeda: diklor ??? ometana (5: 1, 5: 3 dan 5: 5 v / v), dan SBSE dengan pengaduk berlapis PDMS bar diuji. LLE telah ditinggalkan karena waktu dan konsumsi pelarut dan sistem SBSE ditinggalkan karena tingkat penyerapan rendah dari heterocycles pada batang pengaduk. Hasil SBSE menunjukkan bahwa untuk kadar yang lebih rendah hingga 100 mg L1, 4-methylthiazole, trimethyloxazole tidak terdeteksi dan linieritasnya tidak baik untuk dua senyawa lainnya (R2¼0.73 untuk 2-asetilthiazole dan R2¼0.13 untuk ethylpyrazine). Mempertimbangkan tingkat heterocycles di anggur (sebagian besar waktu lebih rendah hingga 10 mg / L), ekstraksi PDMS SBSE tekniknya tidak efisien. Ketika senyawa dievaluasi tidak diekstraksi dengan diklorometana, itu tidak digunakan untuk membandingkan LLE dengan Serat SPME. Gambar 1A menunjukkan bahwa serat Carboxen / PDMS adalah pilihan terbaik untuk semua senyawa heterosiklik dan memberikan spesifisitas yang lebih besar untuk tiofena dan tiazol. Yu et al. [15] menggunakan serat yang sama ini untuk analisis senyawa heterosiklik sulfur, diproduksi melalui reaksi Maillard antara sistein dan asam askorbat. Pérez-Palacios et al. [16] juga menggunakan serat Carboxen / PDMS untuk ekstraksi senyawa furanic dari dilapisi goreng produk. Fan et al. [10] menunjukkan bahwa serat Carboxen / PDMS adalah jenis serat yang paling sensitif untuk ekstraksi pirazin Minuman keras cina. Namun, tidak ada penelitian yang menunjukkan