Hindawi Publishing Perusahaan Journal of

Immunology Penelitian Volume 2014, ID Artikel

762.514, 4 halaman
http://dx.doi.org/10.1155/2014/762514

Artikel Penelitian
Asosiasi Helicobacter pylori dan
iNOS Produksi oleh Makrofag dan Limfosit dalam lambung
Mukosa di Gastritis Kronis

Lilia A. Cherdantseva, Oksana V. Potapova, Tatyana V. Sharkova, Yana Yu.

Belyaeva, dan Vyacheslav A. Shkurupiy

FSBI Pusat Penelitian Klinis dan Experimental Medicine, SB RAM, Timakova Street 2, Novosibirsk 630.117, Rusia

Korespondensi harus ditujukan kepada Tatyana V. Sharkova; tasharkova@yandex.ru Diterima Juli 2014 17; Revisi 1 September 2014;

Diterima 2 September 2014; Diterbitkan 18 September 2014 Akademik Editor: David B. Ordiz

Copyright © 2014 Lilia A. Cherdantseva et al. Ini adalah sebuah artikel akses terbuka didistribusikan di bawah lisensi Creative Commons Atribusi, yang memungkinkan
penggunaan tak terbatas, distribusi, dan reproduksi dalam media apapun, asalkan karya asli benar dikutip.

Helicobacter pylori adalah salah satu dari themost penyebab umum dari gastritis.With kronis perkembangan penyakit infiltrat inflamasi selular terdiri dari limfosit,
sel plasma, dan makrofag terbentuk pada epitel dan lamina propria dari perut. Sel-sel ini mampu mensekresi sejumlah zat aktif, termasuk oksida nitrat sintase
diinduksi (iNOS). Kami meneliti hubungan antara H. pylori dan sekresi iNOS oleh sel-sel infiltrat inflamasi pada gastritis kronis dengan mikroskop cahaya dan
imunohistokimia. Data yang diperoleh menunjukkan bahwa stimulasi H. pylori sel-sel sistem kekebalan tubuh dari organisme inang selama pengembangan
penyebab gastritis kronis peningkatan jumlah makrofag dan limfosit dalam infiltrat inflamasi dari mukosa lambung. Hal ini disertai dengan peningkatan ekspresi
diinduksi NO-synthase dengan radikal bebas yang berlebihan di jaringan, yang mengarah ke perubahan sekunder dan memperburuk peradangan dengan proses
regenerasi terganggu.

1. Perkenalan
Helicobacter pylori adalah salah satu penyebab paling umum dari gastritis
kronis. Populasi manusia global yang terinfeksi oleh H. pylori sedini di masa
kecil dan remaja. Kronis
H. pylori- terkait gastritis berkembang di lebih dari 50% dari orang yang
terinfeksi [ 1 ]. H. pylori telah terbukti menjadi faktor etiologi dari tipe B
gastritis kronis, ulkus lambung dan duodenum, dan penyakit pencernaan
lainnya yang terkait dengan perubahan morfologi dari mukosa lambung dan
manifestasi dysregenerative seperti atrofi, metaplasia, dan displasia proses
neoplastik yang mendasari [ 2 ].
Hal ini diketahui bahwa infiltrasi seluler inflamasi, contain- ing terutama
limfosit, plasmocytes, dan makrofag, dihasilkan dalam epitel dan lamina
propria dari ach stom- selama pengembangan gastritis kronis, termasuk
kronis H. pylori- terkait gastritis [ 3 ]. Limfosit, mocytes plas-, dan makrofag
Itu H. pylori antigen dapat menginduksi iNOS ekspresi oleh makrofag
dan limfosit dari inflamasi trate infil- seluler dalam kondisi pencernaan
kronis. urease, H. pylori
faktor patogenisitas, dapat langsung menghambat ity activ- fagositosis
makrofag menurut data literatur [ 5 ]. Urease dapat mempengaruhi tingkat
ekspresi iNOS oleh sel infiltrat inflamasi dan akumulasi nitrogen oksida dan
dengan demikian mengatur proses inflamasi [ 6 - 8 ]. The iNOS ekspresi
kronis H. pylori- terkait gastritis juga disebabkan oleh lipopolisakarida
membran luar bakteri yang memiliki sifat antigen dan menginduksi tuan
antibac- terial respon dan destruktif perubahan lambung mukosa [ 9 ]
.Namun, sastra kontemporer tidak memiliki data tentang peran limfosit dan
makrofag dalam mekanisme oksigen tergantung dari perlindungan dari H.
pylori infeksi pada jaringan dan sel tingkat, diperoleh lambung studi biopsi
mukosa. Tersebut di atas tujuan dari studywas saat ini untuk inves- tigate
yang H. pylori- diinduksi iNOS ekspresi oleh limfosit dan makrofag dari

menyebabkan kerusakan sitokin dari gastricmucosa dengan inducibleNO- mukosa lambung pada gastritis kronis.
synthase (iNOS) menjadi faktor campuran [ 4 ].
2 Journal of Immunology Penelitian

2. Bahan-bahan dan metode-metode

Untuk penyelidikan ini kami menggunakan biopsi antrum parafin-embedded dari arsip
klinik dari Pusat Penelitian Klinis dan Experimental Medicine (Novosibirsk, Rusia). Sampel
jaringan yang diperoleh pada endoskopi dengan biopsi mukosa antrum lambung dari
pasien dengan gastritis kronis pertama kali didiagnosis pada 2009-2013. Tes urease (Jatrox-
HP-Test, Jerman) digunakan untuk mendeteksi H. pylori pada sampel jaringan secara tidak
langsung.

Bagian dari ketebalan 3-mikron disiapkan pada mikrotom putar

HM355S ( “mikroM”, Jerman) dan diwarnai dengan hematoxylin dan eosin
oleh prosedur standar untuk menentukan keparahan dan aktivitas gastritis Gambar 1: mukosa antrum di H. pylori- terkait gastritis: massa lendir dengan H. pylori aglomerasi
di permukaan mukosa, pewarnaan Giemsa, besarnya × 200.

kronis; teknik standar mikroskop cahaya yang digunakan. Untuk H. pylori visualisasi
teknik pewarnaan Giemsa digunakan. penilaian morfologi dari biopsi
dilakukan oleh skala analog visual dalam tarian accor- dengan “sistem Sydney”
dan klasifikasi gastritis kronis dijelaskan oleh Dixon et al. [ 10 ] Dan Aruin et al. [
9 ] Dengan penilaian semikuantitatif dari tingkat kontaminasi dari mukosa
lambung H. pylori.

Setelah evaluasi histologis awal dua kelompok belajar dibentuk.

Kelompok pertama (62 spesimen biopsi) adalah pasien dengan moderat
kronis H. pylori- terkait gastritis dengan aktivitas sedang dan tingkat rendah
kontaminasi bakteri ( H. pylori +). Usia rata-rata pasien dalam kelompok ini
adalah 56 tahun. Kelompok kedua (56 spesimen biopsi) terdiri dari pasien
dengan moderat kronis

Gambar 2: mukosa antrum di H. pylori- gastritis terkait: metaplasia enterik fokus

H. pylori- gastritis negatif dengan aktivitas sedang dan rata-rata usia 58
epitel, yang infiltrasi lymphocytoplasmocytic dari lamina propria dengan
tahun.
campuran neutrofil, fibrosis fokal, hematoxylin dan eosin, besarnya × 200.
Imunohistokimia (IHC) analisis dilakukan dengan menggunakan metode
streptavidin-peroxidase tidak langsung dengan antibodi primer spesifik
terhadap sintasa oksida nitrat (iNOS, “Musim Semi Bioscience”) dan makrofag
penanda CD68 ( “DBS”). Untuk memvisualisasikan antibodi “NovoLink” sistem
3. Hasil
deteksi ( “Novocastra”) digunakan. Untuk IHC studi bagian yang dewaxed dan
direhidrasi. Setelah antigen unmasking dalam oven microwave pada daya
Tanda-tanda gastritis kronis moderat dengan aktivitas sedang dan rendahnya
700W selama 20-25 menit dan cuci dengan air suling, dapar fosfat,
tingkat •. pylori kontaminasi (+) terdeteksi pada kelompok studi pertama
peroksidase endogen diblokir dalam waktu 5 menit. waktu paparan antibodi
menggunakan mikroskop cahaya umum antrum biopsi bagian histologis materi
primer adalah 30-45 menit pada 37 ∘ C. Bagian diinkubasi dengan kompleks
( Gambar 1 ). mukosa lambung mewakili epitel hipersekresi dewasa dengan
dan DAB-substrat streptavidin-peroksidase dan lebih counterstained
erosi, situs hiperplasia foveolar, dan metaplasia enterik fokus epitel foveolar.
hematoxylin withMayer ini.
Ada edema ringan, focal infiltrasi lymphocytoplasmocytic dengan proporsi lebih
dari 50% dari plasmocytes, dan campuran neutrofil dan fibrosis fokal di lamina
propria ( Gambar 2 ). Tanda-tanda aktivitas gastritis withmoderate kronis
moderat dan tidak ada tanda-tanda •. pylori kontaminasi ( -) terdeteksi dalam
studi morfometri elemen struktur jaringan dilakukan dengan kelompok studi kedua. mukosa lambung mewakili epitel dewasa dengan situs
menggunakan sistem tes tertutup yang terdiri dari 100 poin, persegi 3,6 × 10 5 metaplasia enterik epitel lar foveo-. Moderat infiltrasi lymphocytoplasmocytic
μ m 2. kepadatan volume yang ada tercatat (Vv) dari infiltrat inflamasi di lamina dengan proporsi lebih dari 60% dari plasmocytes dan campuran neutrofil dan
propria dan kepadatan numerik (Nai) limfosit, plasmocytes, dan CD68 + fokus fibrosis kecil terdeteksi di lamina propria.
makrofag dan sel mengekspresikan iNOS [ 11 ]. Analisis statistik dari hasil
dilakukan dengan menggunakan paket analisis statistik Microsoft Office Excel
2007 dan paket perangkat lunak standar STATISTICA v.6. mean aritmetik nilai
(M) dan standard error mean (m) ditentukan. Untuk mengidentifikasi
probabilitas signifikansi perbedaan nilai rata-rata dibandingkan Mahasiswa •-
test digunakan. Perbedaan dianggap signifikan secara statistik pada tingkat Studi morfometrik bagian histologis pada kedua kelompok tidak
signifikansi 5% ( • <0,05). menunjukkan perbedaan yang signifikan antara nilai kepadatan volume
infiltrat inflamasi di lam- ina propria ( Gambar 3 ). Kepadatan numerik dari
cytes lympho- di infiltrat inflamasi lambung lamina propria
Journal of Immunology Penelitian 3

500

450

18 400

16 350

14 300

nai
vv

12 250

10 050

68 200

24 150

0 100
HP + HP -

density Volume (Vv) infiltrat inflamasi (%) Gambar 5: mukosa antrum di H. pylori- gastritis terkait: yang bymacrophages ekspresi iNOS

numerik (Nai) dari plasmocytes dan limfosit dari infiltrat inflamasi pada lamina propria, besarnya × 400.

density numerik (Nai) limfosit kepadatan

density numerik (Nai) dari CD68 + makrofag

Gambar 3: kepadatan Volume (Vv) dari infiltrat inflamasi dan kepadatan 160
numerik (Nai) limfosit, plasmocytes, dan hasil CD68 + studi makrofag.
140

120

100

nai 80

60

40

20

0
HP + HP -

Numerik density (Nai) iNOS + limfosit kepadatan

numerik (Nai) iNOS + makrofag

Gambar 6: Kepadatan numerik (Nai) limfosit dan makrofag mengekspresikan iNOS.

Gambar 4: Antrummucosa di H. pylori- terkait gastritis.

terkait dengan kerusakan pada molekuler, seluler, dan jaringan tingkat

dan dengan manifestasi dysregenerative [ 12 ].
pada kelompok kedua adalah 1,5 kali lipat lebih tinggi dibandingkan kelompok pertama
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kepadatan volume infiltrat
( Gambar 3 ). sejumlah besar CD68 + makrofag terdeteksi pada bahan biopsi
inflamasi pada kelompok 1 dan 2 tidak memiliki perbedaan yang signifikan.
mukosa lambung pada kelompok studi pertama. Kepadatan numerik pada
Namun, kehadiran H. pylori di mukosa lambung memiliki dampak yang
kelompok pertama adalah 1,4 kali lipat lebih tinggi dibandingkan kelompok kedua
signifikan pada komposisi seluler infiltrat yang menunjukkan penurunan
(Angka 3 dan 4 ). kepadatan numerik iNOS + limfosit dan iNOS + makrofag pada
jumlah limfosit dan peningkatan jumlah makrofag pada kelompok 1
kelompok studi pertama ( Gambar 5 ) Adalah 2 kali lipat lebih tinggi dibandingkan
dibandingkan dengan kelompok 2.
dengan kelompok studi kedua ( Gambar 6 ). SEBUAH

Aktivasi faktor transkripsi nuklir NF κ j dalam sel epitel dan neutrofil dari
1,3 kali lipat kepadatan numerik lebih tinggi dari iNOS + makrofag
gastricmucosa selama interaksi mereka dengan b1 g 0 protein dari •. pylori membran
dibandingkan dengan iNOS limfosit + tercatat pada kedua kelompok.
luar adalah momen kunci inisiasi peradangan yang menghasilkan
Dengan demikian jumlah iNOS + sel secara signifikan lebih tinggi di antrum
pelepasan banyak sitokin proinflamasi [ 13 ]. Data literatur menunjukkan
mukosa dalam kasus kronis H. pylori-
bahwa selama chronization peradangan sitokin ini mendukung kemotaksis
terkait gastritis dengan rendahnya tingkat kontaminasi bakteri dari dalam
dan chemokinesis leukosit dan makrofag dengan peningkatan jumlah mereka
kasus kronis H. pylori- gastritis negatif ( Gambar 6 ).
di daerah peradangan [ 3 . 14 . 15 ].

4. Diskusi
Saat sitokin, •. pylori antigen, dan cluster gen patogenisitas yang dianggap
salah satu faktor patogenisitas •. pylori. aktivasi mereka meluncurkan
sejumlah mekanisme patogen peradangan mukosa lambung
Hal ini diketahui bahwa migrasi leukosit dan makrofag peradangan
daerah dikaitkan dengan timbangkan gen- bentuk oksigen aktif dan
kerusakan sel dengan pelepasan enzim sitotoksik menentukan perubahan
destruktif dalam lambung mukosa [ 9 ]. proses inflamasi di
 4 Journal of Immunology
jaringan gastrointestinal juga dikaitkan dengan peningkatan aktivitas
sekretori limfosit dan makrofag. Proin- produksi sitokin flammatory dapat
disertai dengan iNOS ekspresi oleh sel-sel infiltrat inflamasi [ 16 - 18 ].
Jumlah limfosit andmacrophages mengekspresikan iNOS di antrum
mukosa dihitung untuk mengevaluasi diinduksi ekspresi NO-sintase pada
jaringan dan tingkat seluler. Data yang diperoleh menunjukkan bahwa
kontaminasi mukosa lambung oleh H. pylori menyebabkan aktivasi sel efektor
dari sistem kekebalan tubuh dari host organismmanifesting dua kali lipat
peningkatan jumlah makrofag dan limfosit mengekspresikan bentuk diinduksi
NO-synthase.
The inducibleNO-synthase adalah associatedwith tion produc- NO yang
merupakan faktor dari sistem oksigen tergantung perlindungan antivirus dan
antibakteri [ 19 ]. Namun, akumulasi berlebihan dari oxygenmetabolites reaktif dalam
jaringan menyebabkan efek toksik pada sel-sel jaringan, perubahan yang merusak
parah, dan gangguan dysregenerative. Hal ini konsisten dengan lebih banyak
perubahan destruktif signifikan dari mukosa lambung, erosi, dan gangguan
regenerasi seperti metaplasia enterik fokus terdeteksi dalam penelitian histologis H.
pylori- terkait gastritis.
5. Kesimpulan
Data yang diperoleh sebagai hasil dari pemeriksaan histologi dari mukosa lambung
pada jaringan dan tingkat seluler menunjukkan bahwa H. pylori stimulasi sel imun dari Dekker, New York, NY, USA, 1990. [12] P. Voland, Minggu DL, EA Marcus, C. Prinz, G.
host-organ isme selama perkembangan gastritis kronis menyebabkan peningkatan
jumlah makrofag dan limfosit dalam infiltrasi matory inflam- dari mukosa lambung
dengan aktivasi aktivitas fungsional mereka, termasuk anisms mech- oksigen
tergantung dari respon imun . Hal
ini associatedwith peningkatan makrofag dan limfosit ekspresi sintase NO
diinduksi dan akumulasi-berlebih radikal bebas dalam jaringan yang
mengarah ke perubahan sekunder, terlepas dari kehadiran faktor etiologi dan
intensitas, dan mempromosikan ketekunan dan kejengkelan proses inflamasi
dengan manifestasi dysregenerative.
Konflik kepentingan
Para penulis menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan mengenai
publikasi makalah ini.
Referensi
[1] JG Fox dan TC Wang, “Peradangan, atrofi, dan lambung
kanker," Journal of Clinical Investigation, vol. 117, tidak ada. 1, pp. 60-69, 2007.
[2] RM Genta dan M. Rugge, “Menilai risiko untuk kanker lambung:
alat-alat baru untuk patolog,” World Journal of Gastroenterology,
vol. 12, tidak ada. 35, pp. 5622-5627, 2006.
[3] JA Spitzer dan JJ Spitzer, “toleransi Lipopolysaccharide dan
etanol memodulasi produksi nitrat oksida hati dengan cara yang tergantung
gender,” Alkohol, vol. 21, tidak ada. 1, pp. 27-35, 2000. [4] A. Zicari, G. Corrado, C.
Pacchiarotti et al., “Muntah siklik
Sindrom: In vitro nitrat oksida dan interleukin-6 rilis oleh esofagus dan
gastricmucosa,” Penyakit Pencernaan dan Ilmu,
vol. 46, tidak ada. 4, pp. 831-835 2001.
Penelitian
[5] A.Makristathis, E. Rokita, A. LABIGNE, B.Willinger, ML Rotter,
ANDA. M. Hirschi, “peran sangat signifikan Helicobacter pylori
urease inphagocytosis andproductionof oxygenmetabolites oleh granulosit manusia,”
Journal of Infectious Diseases, vol. 177, tidak ada.
3, pp. 803-806,
1998.
[6] AP GOBERT, BD Mersey, Y. Cheng, DR Blumberg, J.
C. Newton, dan KT Wilson, “Pemotongan tepi: urease rilis oleh
Helicobacter pylori merangsang makrofag sintasa oksida nitrat,” Journal of
Immunology, vol. 168, tidak ada. 12, pp. 6002-6006, 2002.
[7] AP Moran, “Peran lipopolisakarida di Helicobacter
pylori patogenesis,” Pencernaan Farmakologi & Therapeutics, vol.
10, suplemen 1, pp. 39-50, 1996. [8] M. Michetti, CP Kelly, JP
Kraehenbuhl, H. Bouzourene,
dan P. Michetti, “mukosa lambung α 4 β limfosit CD4 T 7-integrin-positif dan
perlindungan kekebalan tubuh terhadap infeksi Helicobacter pada tikus,” gastroenterologi,
vol. 119, tidak ada. 1, pp. 109-118,
200
0.
[9] LI Aruin, LL Kapuller, dan VA Isakov, Secara morfologi
Diagnosis Penyakit Perut dan Usus, Triada-Kh, Moskow, Rusia, 1998.
[10] MF Dixon, RM Genta, JH Yardley et al., “Klasifikasi dan
kadar gastritis: sistem Sydney diperbarui,” The American Journal of Pathology
Bedah, vol. 20, tidak ada. 10, pp 1161-1181, 1996. [11] ER Weibel, “Morfometri:. Teori
stereological dan praktis
metode,”di Model Penyakit Paru: Mikroskop dan Metode Struktural, pp. 199-252,
Sachs,
dan D. Scott, “Interaksi antara tujuh Helicobacter pylori
protein yang dikodekan oleh cluster gen urease,” American Journal of
Physiology: Gastrointestinal dan Hati Fisiologi, vol. 284, tidak ada.
1, pp. G96-G106, 2003.
[13] MC Gunn, JC Stephens, JD Stewart, dan BJ Rathbone,
“Deteksi dan mengetik virulensi faktor penentu CagA dan Vaca dari
Helicobacter pylori langsung dari DNA biopsi: berada di vitro strain perwakilan
dari strain in vivo “? European Journal of Gastroenterology dan Hepatology, vol.
10, tidak ada. 8, pp. 683-687,
1998.
[14] G. Rieder, W. Einsiedl, RA Hatz, M. Stolte, GA Enders,
dan A. Walz, “Perbandingan CXC kemokin ENA-78 dan interleukin-8 ekspresi dalam
Helicobacter pylori terkait gas-tritis,” Infeksi dan Imunitas, vol. 69, tidak ada. 1, pp. 81-88,
2001. [15] N. Yoshida, DN Granger, DJ Evans Jr et al., “Mekanisme
terlibat dalam Helicobacter pylori peradangan imbas,” troenterology gas-, vol.
105, tidak ada. 5, pp. 1431-1440, 1993. [16] PR Harris, HLT Mobley, GI Perez-Perez,
MJ Blaser, dan
PD Smith, “Helicobacter pylori urease adalah stimulus ampuh aktivasi fagosit
mononuklear dan produksi sitokin inflamasi,” gastroenterologi, vol. 111, tidak ada.
2, pp. 419-425, 1996. [17] S. Hasegawa, S. Nishikawa, T. Miura et al., “Tumor
necrosis
faktor- α diperlukan untuk gastritis disebabkan oleh Helicobacter felis inmice infeksi,”
Mikroba Patogenesis, vol. 37, tidak ada. 3, pp. 119-
124 2004.
[18] ND Lewis, M. Asim, DP Barry et al., “Arginase II Membatasi
tuan rumah pertahanan untuk Helicobacter pylori oleh pelemahan diinduksi nitrat
oksida sintase terjemahan dalam makrofag,” The Journal of Immunology, vol. 184, tidak
ada. 5, pp. 2572-2582, 2010. [19] C. Bogdan, “Nitrat oksida dan respon kekebalan
tubuh,” Alam
Imunologi, vol. 2, tidak ada. 10, pp. 907-916 2001.
 MEDIATOR dari

PERADANGAN

The Scientific Gastroenterologi Penelitian Jurnal dari

World Journal dan Praktek diabetes Research penyakit Penanda

Jurnal dari International Journal of

Imunologi Penelitian Endokrinologi

Menyerahkan naskah Anda di

http://www.hindawi.com

BioMed Penelitian
Penelitian PPAR Internasional

Jurnal dari

Kegemukan

Bukti Berbasis
Jurnal dari Stem Cells Pelengkap dan Jurnal dari

Ophthalmology International Pengobatan Alternatif onkologi

Penyakit
Parkinson

Komputasi dan Matematika

Metode dalam Kedokteran perilaku AIDS Oksidatif Kedokteran dan Seluler

Neurology Penelitian dan Pengobatan Panjang Umur