Judul: Cytotoxicity Brine Shrimp Activity of Leptadenia Hastata (PER) Decne

Leaves, Stem-Bark and Root Extract (Sitotoksisitas aktivitas udang laut dari daun
Leptadenia Hastata (PER), ekstrak batang, dan ekstrak akar.

Tujuan Penelitian: Penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas Cytotocity

udang air asin dari daun Leptadenia hastata in vivo, ekstrak batang dan akar setelah
maserasi berturut-turut dalam lima pelarut (n-heksana, diklorometana (DCM) etil
asetat, kloroform dan metanol) dan mengkorelasikan hasil sitotoksisitas sitotoksisitas
dengan aktivitas farmakologis tanaman yang diketahui.

Metode: Sitotoksisitas dievaluasi berdasarkan LC50 (konsentrasi lethality), 10 nauplii

ditambahkan ke dalam tiga ulangan dari setiap konsentrasi ekstrak tanaman, dan
setelah 24 jam larva udang air asin yang masih hidup dihitung, dan LC50 dinilai.

Hasil: Sitotoksisitas poten ditemukan baik untuk daun, kulit batang dan ekstrak akar
Leptadenia hastata, hasil menunjukkan peningkatan konsentrasi yang bergantung pada
tingkat mortalitas udang air asin Nauplii dan fraksi diklorometana etil asetat n klorida,
kloroform dan fraksi metanol dari Ekstrak daun, kulit batang dan akar yang kuat
terhadap udang air garam, dengan ekstrak daun kloroform memiliki 3460,00 tertinggi
dan Metanol sebagai LC50 terendah dengan 651,292.

Kesimpulan: Hasil menunjukkan bahwa komponen bioaktif hadir dalam tanaman ini
yang dapat dipertanggungjawabkan efek farmakologisnya. Dengan demikian, hasilnya
mendukung penggunaan spesies tanaman ini dalam pengobatan tradisional.

Penetasan Udang Brine

Penetasan udang air asin, 1,5 g kista Artemia salina (Sanders Great Salt Lake, Brine
Shrimp Company U. S. A.) diangin-anginkan dalam wadah kaca berkapasitas 1 L
berisi air laut yang disaring (dikumpulkan dari pantai Damai di Kuching-Sarawak).
Pompa udara dipasang ke air untuk memastikan aerasi lengkap kista setelah 48 jam
inkubasi pada suhu kamar antara 27-29 ° C di bawah penerangan terus menerus lampu
fluoresensi, nauplii renang bebas yang baru menetas dipanen dari bagian bawah
wadah gelas . Nauplii yang baru menetas digunakan untuk bioassay.

Preparation of Test Samples

Prosedur pengenceran alternatif yang dikembangkan oleh McLaughlin, et al. [1].

diadopsi dalam persiapan pengenceran berbeda dari ekstrak tanaman, 4 mg
masing-masing ekstrak dilarutkan dalam 200 μl DMSO (RCI Labscan terbatas) dan
seri konsentrasi yang lebih rendah dipilih disiapkan dengan pengenceran serial dengan
DMSO. Sistem pengujian disiapkan dengan 5 ml air laut yang disaring yang
mengandung konsentrasi ekstrak yang dipilih dan 1% ekstrak ragi (untuk pemberian
makan) dalam microplate 6-sumur yang telah ditandai sebelumnya dan 10 udang air
garam dengan hati-hati diambil dengan mikropipet dan dimasukkan ke dalam
masing-masing microplate, ini dilakukan dalam rangkap tiga membuat total 30 udang
air asin per konsentrasi. Dalam penelitian ini DMSO (Dimethyl sulfuroxide) dan air
laut digunakan sebagai kontrol negatif sedangkan thymol digunakan sebagai standar
positif (+ ve). Air laut yang disaring ditambahkan ke DMSO dalam satu set 3 lempeng
mikro 6-sumur yang telah ditandai sebelumnya dan 10 udang air garam diambil
dengan hati-hati dengan mikropipet dan dimasukkan ke setiap lempeng mikro, ini
digunakan sebagai kelompok kontrol (-ve)

Jika udang air asin dalam lempeng-lempeng mikro ini menunjukkan tingkat kematian
yang cepat, maka tes tersebut dianggap tidak valid karena nauplii mungkin telah
mati karena beberapa alasan selain dari sitotoksisitas ekstrak. Pengaturan
dibiarkan tetap selama 24 jam di bawah penerangan yang konstan dari neon dan
jumlah nauplii yang selamat dihitung dengan lensa tangan, dari data kematian
rata-rata udang air asin pada konsentrasi ekstrak yang berbeda dan LC50
tanaman dihitung menggunakan regresi probit oleh perangkat lunak statistik
SPSS 22 dan hasilnya dinyatakan sebagai rata-rata + SEM pada tingkat
kepercayaan 95% (p <0,05).

Hasil dan Diskusi

Hasil
Konsentrasi mematikan LC50 dinilai pada kepercayaan 95% menggunakan analisis
probit. telah diamati nilai LC50 kurang dari 1000 μg / mL bersifat toksik
sedangkan nilai LC50 lebih besar dari 1000 μg / mL tidak beracun. Tabel
menunjukkan kematian rata-rata Artemia salina pada konsentrasi yang berbeda dari
lima ekstrak kasar Leptadenia hastata. Dalam penelitian ini DMSO (Dimethyl
sulfuroxide) dan air laut digunakan sebagai kontrol negatif sedangkan thymol
digunakan sebagai standar positif yang nilai LC50 terhadap udang air asin adalah 1,16
μg / mL. Kematian rata-rata Artemia salina pada konsentrasi Leptadenia hastata yang
berbeda setelah 24 jam ditunjukkan pada tabel di bawah ini. Gambar 1-5, ditampilkan
persentase (%) kematian udang air asin terhadap konsentrasi ekstrak kasar Leptadenia
hastata. Analisis ekstrak kasar untuk menentukan toksisitasnya terhadap udang air
garam menunjukkan hal itu Konsentrasi pelarut Leptadenia hastata memberikan
cytotocity lemah dengan LC50 seperti yang ditunjukkan pada tabel berikut; hasilnya
adalah rata-rata + SD. N = 30, tabel 1. Di atas menunjukkan rata-rata kematian dan
LC50 udang Artemia salina brine pada konsentrasi yang berbeda dari ekstrak daun
heksana, kulit batang dan akar Leptadenia hastata.

DISKUSI
Hasil uji kematian udang air asin ditunjukkan pada Tabel 1-5, ekstrak pelarut
pada konsentrasi yang berbeda dari tiga bagian tanaman Leptadenia hastata
diuji menunjukkan aktivitas air garam udang yang baik Larvisidal. Konsentrasi
mematikan (LC50 daun, kulit batang dan ekstrak akar masing-masing adalah 1, 10, 25,
50, 100, dan 500ppm (μg / mL). Tingkat kematian berbanding lurus dengan
konsentrasi ekstrak di semua bagian tanaman. Kematian maksimum diamati
pada konsentrasi ekstrak 500ppm di semua bagian tanaman (daun, kulit batang
dan akar). Berdasarkan hasil, kematian udang air asin bagian tanaman ditemukan
konsentrasi Namun, kematian diamati dari tiga bagian ekstrak untuk udang air garam
menunjukkan adanya komponen sitotoksik yang kuat dan mungkin antitumor.
Kematian rata-rata Artemia salina pada konsentrasi yang berbeda dari ekstrak heksana
kasar Daun Leptadenia hastata, kulit batang dan akar pada tabel 1, menunjukkan
cytotocity terhadap udang air asin dengan nilai LC50 masing-masing 942.149,
4657.358, dan 4657.358 masing-masing untuk ekstrak heksana. Kematian
rata-rata udang air asin untuk ekstrak daun sedikit lebih tinggi dengan nilai
LC50 942.149 jika dibandingkan dengan kulit batang dan akar. Pada konsentrasi 500
μg / mL yang lebih tinggi daun menyebabkan kematian udang air asin rata-rata 26,7%
sedangkan batang-belakang dan akar masing-masing 14,7% dan 16,7% pada
konsentrasi yang sama. Diamati bahwa peningkatan konsentrasi ekstrak heksana
dari tingkat kematian bagian tanaman dari udang air asin memberikan bukti
tidak beracun dari ekstrak heksana tanaman Leptadenia hastata. Namun,
konsentrasi ekstrak kasar Dichloromethane daun L. hastata, kulit batang dan akar,
menunjukkan lebih sedikit sitotoksisitas terhadap udang air asin dengan nilai LC50
masing-masing 1419.40, 1500.229 dan 1500.230 lebih besar dari 1000 μg / mL.
Daunnya menyebabkan rata-rata 10% kematian udang air garam dibandingkan dengan
kulit batang (3,33 ± 0,58) dan akar (3,33 ± 0,58) dengan rata-rata masing-masing
33,3%. Kematian yang diamati dalam ekstrak ini juga ditemukan berbanding lurus
dengan ekstraktif mulai dari yang terendah (1 μg / mL) hingga yang tertinggi (500 μg
/ mL), peningkatan yang tergantung pada konsentrasi ini pada tingkat kematian udang
air asin Nauphii menunjukkan prinsip sitotoksik dalam ekstraktif.
Dalam tabel 3: Ekstrak etil asetat daun kasar menunjukkan aktivitas terendah dengan
nilai LC50 2821,103 mengingat fakta bahwa lebih tinggi dari 1000 μg / mL tidak
beracun, sehingga menyebabkan sejumlah kematian udang air asin rata-rata 10%
sedangkan fraksi kulit batang dan akar menunjukkan kematian udang air asin tertinggi
dengan nilai LC50 833.774μg / mL bila dibandingkan dengan daun, yang
menyebabkan sejumlah kematian udang air asin masing-masing sebesar 3,33 ± 0,58μg
/ mL atau rata-rata 33,3% masing-masing ketika dibandingkan dengan laporan
Meyers, et al. [1], lebih rendah dari 1000 μg / mL dianggap beracun, tetapi ini agak
lemah-toksik jika dibandingkan dengan timol kontrol positif 1,16 μg / mL.
Konsentrasi mematikan LC50 dari ekstrak kasar pada tabel 4 dinilai pada kepercayaan
95% menggunakan analisis probit. Diamati bahwa ekstrak kasar daun menunjukkan
daya serang terhadap udang air asin dengan nilai LC50 3460 μg / mL. Hal ini
menyebabkan beberapa kematian udang air asin pada rata-rata 30% sedangkan fraksi
kulit batang dan akar menunjukkan nilai toksisitas tertinggi 813,96 μg / mL dan
803,69 μg / mL yang menyebabkan beberapa kematian pada rata-rata 43,3%,
namun, itu lemah-toksik bila dibandingkan dengan evaluasi toksisitas ekstrak
tanaman oleh bioassay lethality udang air asin 1000 μg / mL dianggap beracun.
Dalam uji udang air garam di antara ekstrak yang dievaluasi pada tabel 5, dua fraksi,
ekstrak kasar batang dan akar LC50 juga kurang dari 1000 μg / mL. (992.985>
1000 μg / mL) dengan demikian menunjukkan toksisitas yang lemah bila
dibandingkan dengan kontrol positif timol (1.16 μg / mL) yang menunjukkan
toksisitas yang kuat. Ekstrak kasar daun diamati lebih toksik, nilai LC50 dari ekstrak
adalah 651,292 lebih rendah dari 1000μg / mL, namun menyebabkan kematian udang
air asin pada 1,33 ± 0,73 atau rata-rata 13,3% pada konsentrasi 500μg / mL.
Kesimpulan
Ekstrak ini menunjukkan aktivitas sitotoksik terhadap udang air asin. Oleh
karena itu, dianggap mengandung komponen aktif atau potensial dengan nilai
LC50 kurang dari 1000 ppm (μg / mL). Dari hasil ini, terbukti bahwa daun, kulit
batang dan akar tanaman yang digunakan dalam penelitian ini mungkin memiliki sifat
kuratif terhadap beberapa patogen manusia yang menunjukkan pentingnya
terutama untuk ekstrak dari etil asetat, kloroform dan metanol, hasilnya
mendukung penggunaan spesies tanaman ini dalam pengobatan tradisional. Ini
juga dapat digunakan dalam sintesis obat-obatan yang lebih bermanfaat karena
potensi toksisitasnya ringan.