UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL

“CALIBRACION DEL MICROMETRO DEL OCULAR – MEDICION

DE MICROORGANISMOS”
PRIMER LABORATORIO DELCURSO DE MICROBIOLOGIA SANITARIA II

ARISTA VILLARRUEL MARTIN HIPOLITO -20170613H

DOCENTE: ING. CESAR TELLO C.

LIMA, PERU 2019

MICROBIOLOGIA SANITARIA II
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INDICE

RESUMEN
MICROBIOLOGIA SANITARIA II
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En el laboratorio realizamos mediciones que tienden a ser exactas, para asegurarnos de
ello tenemos que corroborar primeramente el estado en que se encuentran los materiales
para luego ajustarlos o calibrarlos según sus usos. En el laboratorio es primordial poseer
un microscopio y este debe estar en buenas condiciones, en tanto debemos verificar ello
para realizar la calibración.

Para realizar la calibración usamos el micrómetro de platina y el micrómetro de ocular, ya

que con esas dos herramientas y con alguna muestra de un microorganismo que en este
caso usaremos una muestra de algas de un estanque perteneciente a la facultad de
Arquitectura de la Universidad Nacional de Ingeniería, teniendo todo listo procedemos a
usar los micrómetros y superponer lo observado, encontrar una relación en sus medidas
para luego tomar la muestra de algas y conlleva a obtener mediciones de los
microorganismos, teniendo estas mediciones encontramos un error en la calibración ya
que tenemos diferentes objetivos en el microscopio.

En el cálculo del error, se comprueba si los microscopios están calibrados correctamente

para poder usarlos correctamente.

En caso no pueda realizarse una correcta calibración dependerá tanto del microscopio por
algún error de fábrica o el error humano.

INTRODUCCION

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La calibración está definida como un conjunto de operaciones que proporcionan la
relación entre las indicaciones de un instrumento de medición y los correspondientes
valores del mensurando. Si recordamos que la medición es definida como el conjunto de
operaciones que tienen el objetivo de determinar un valor de una cantidad, se puede
concluir que la calibración es tu tipo especial de medición

El micrómetro ocular consiste en una placa circular de vidrio que se coloca entre las dos
lentes del ocular de Huygens, en el diafragma, que es donde se forma la imagen
producida por el objetivo y donde está el foco del ocular. Posee una escala numerada, en
este caso del 0 al 10 con 10 divisiones entra cada número. Si colocamos
simultáneamente ambos micrómetros podremos asignar a las divisiones del micrómetro
objetivo, un número de divisiones del micrómetro ocular, por ejemplo, a 10 divisiones del
objetivo (10 x 0,01 mm = 0,1 mm) le corresponden 13 del micrómetro ocular. Conocida
esta equivalencia, sustituimos el micrómetro objetivo por cualquier preparación que
queramos medir, sin alterar las condiciones, bastará contar las divisiones que ocupa del
micrómetro ocular y efectuar un simple cálculo ya que sabemos que 13 corresponden a
0,1 mm.
Un microscopio compuesto tiene más de una lente objetivo. Los microscopios compuestos
se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan
finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos
y organismos no visibles a simple vista. Además del aumento una propiedad del
microscopio es su poder resolutivo.El microscopio compuesto consta de dos partes, una
parte mecánica que tiene la finalidad de sostener la preparación a examinar y soportar
todo el sistema óptico del microscopio. Y una parte óptica que considera los dos sistemas
de lentes convergentes centrados sobre un eje óptico común, denominado ocular y
objetivo. También esta parte integra un sistema de iluminación que facilita la observación
microscópica.

OBJETIVOS

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OBJETIVOS GENERALES:

 Realizar correctamente la medición de las dimensiones de los

microorganismos con su respectivo error de medición.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:
 Aprender a calibrar el micrómetro del ocular para objetivos de 10x y 43x y en
algunos casos objetivos de 10x y 40x con el micrómetro de platina para poder
medir microorganismos y células.

 Calculo de las dimensiones (largo y ancho) de las células de algas (reservorio

de arquitectura) en el laboratorio con objetivos de 10x y 43x.

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 MARCO TEORICO
El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea para aumentar o
ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El
microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:
1.-El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van
instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque.
2.- El sistema óptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera
que produce el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas
3.- El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan,
transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a
través del microscopio.
En los siguientes puntos describiremos cada uno de los sistemas nombrados, a fin
de tener un conocimiento completo del microscopio.
Campo del Microscopio
Se denomina "campo del microscopio" al círculo visible que se observa a través del
microscopio. También podemos definirlo como la porción del plano visible
observado a través del microscopio.

Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es

inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el diámetro del
campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrómetro, al
que se hará referencia en el siguiente punto.

SISTEMA ÓPTICO:
 OCULAR:Lente situada cerca de ojo del observador,amplía la imagen del objetivo.
 OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de esta.
 CONDESNADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
 DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
 FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

SISTEMA MECÁNICO:

 SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
 PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.
 CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares.puede ser monocular,
binocular.
 REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar
los objetivos.
 TORNILLOS DE ENFOQUE: Macro métrico que aproxima el enfoque y micro
métrico que consigue el enfoque correcto.

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A) Calibración del micrómetro ocular:

Un micrómetro ocular es un disco de vidrio que encaja en un ocular de

microscopio que tiene una escala que se utiliza para medir el tamaño de los
objetos magnificados. La longitud física de las marcas en la escala dependerá del
grado de ampliación. Como es en el caso de este laboratorio, donde se utiliza
10x, y 43x como grados.

Micrómetro Ocular para Microscopio

Micrómetro de Platina

Un micrómetro es simplemente un portaobjetos de microscopio con una

finamente dividido
escala marcada en la superficie. En este laboratorio, nuestra platina tenía 10
divisiones donde cada una medía 0.1mm.

Entonces según el Laboratorio Nacional de Física, del Instituto Nacional de

Medida del Reino Unido, los factores que pueden influir en la calibración de este
micrómetro son:

 Cualquier inexactitud inherente de las lentes del objetivo

 Las variaciones en el sistema óptico en sí (como la longitud efectiva del
tubo)
 Las imprecisiones en la escala del retículo.
 Error personal de medida.

Estos errores combinados deben ser tenidos en cuenta y cuantificar si las

mediciones tomadas con el microscopio se consideran precisas dentro de los
límites definidos de incertidumbre

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PROCEDIMIENTO
Muestras: Muestra de algas (estanque de arquitectura).

MICRÓMETRO DE PLATINA: En el microscopio se ven las rayas de color blanco, de 0 a

10 es una división compuesta por 10 subdivisiones, cada uno de 0.1mm, entonces el
micrómetro de la platina mide 1mm.

MICRÓMETRO DEL OCULAR: En el microscopio se ven las rayas negras, tiene 50

divisiones

Teniendo esas consideraciones pasamos a los pasos del procedimiento:

1. Colocar el micrómetro del ocular en el objetivo de nuestro microscopio. Tener cuidado
de colocarlo de tal manera que se pueda ver los números de manera correcta.

2. Proceder a colocar el micrómetro de platina en el microscopio y seguidamente

proceder a calibrar el microscopio con el objetivo de 10X.
3. Hacer que las líneas del micrómetro ocular concuerden con las del micrómetro ocular,
y hacer lo mismo con el objetivo de 43X.

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4. Ajustar el microscopio para ver con el objetivo las divisiones del micrómetro de
platina.Coincidir las divisiones del micrómetro de platina con las divisiones del
micrómetro del ocular
Calibración del micrómetro ocular:
5. Determinar cuántas divisiones del micrómetro ocular coinciden con las divisiones del
micrómetro de platina. Con objetivo de 10x y 43x.

Sea:
a = División de la platina……………… líneas blancas
b = División del ocular………………… líneas negras
aX <> bY
dato: X=0.1mm
Y=(a/b) x0.1mm = cμ
Y= distancia de las divisiones del micrómetro del ocular.
Esto se hace para objetivos de 10x y 43 x.

Medición de los microorganismos:

6. Con el micrómetro del ocular, se realiza la medida de microorganismos, calculando el
ancho y el largo tanto con el objetivo de 10x y 43x.

7. Graficar los datos en papel milimetrado.

8. Mostrar la tabla de resultados.

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MATERIALES
MICROSCOPIO N° 12
MICRÓMETRO DE LA PLATINA
MUESTRA DE ESTANQUE DE ARQUITECTURA: ALGAS
MICRÓMETRO DEL OCULAR

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RESULTADOS
CÁLCULO, TABLA Y GRÁFICA DE RESULTADOS: Microscopio Nº 7

Cuerpo del microorganismo

ANCHO

LARGO

OBJETIVO 10x:

Calibración del micrómetro ocular:

1 división de platina <> 7 divisiones del ocular

1X <> 7Y, dato: X=0.1mm
Y = (1/7) x0.1mm =14.28 μm

Medición del microorganismo:

a = 6y =85.68μm

L = 22y =314.16μm

OBJETIVO 43x:

Calibración del micrómetro ocular:

1 división de platina <> 29 divisiones del ocular

1X <>29 Y, dato: X=0.1mm
Y = (1/29) x0.1mm =3.44 μm

Medición del microorganismo:

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 a = 19y =65.36μm

L=49y=168.56μm

Calculo del error

Se tomará como base el objetivo de 10x como valor real:

e(10 X )−e( 43 X )
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100%
e(10 x )

65.36 μm−85.68 μm
Error ancho= x 100 =11.08
85.68 μm

125.9 μm−116.69 μm
Error largo= x 100=7.89
116.69 μm

Calibración Medición Error de

Objetivo Objetivo 10x Objetivo calibración
Microscopi Objetivo 43x 43x (algunos 40x) (%)
o 10x (alguno a L a L a L
s 40x)

1 1x <> 10y 1x <> 42y 7y 2y 27y 6y 8.2 28.6

y=10 μm y=2.38 μm 70 μm 20μm 64.26μm 14.28μm
2 1x < > 7y 1x < > 27y 1.5y 4y 6y 15y
y= 14.3µm y= 3.7µm 21.45µ 57.2µm 22.2µm 55.5µm 3.38 2.97
m
13 2 <>20 1 < > 42 2y 6y 9y 28y
y = 10 μm y= 20μm 60μm 21.42μm 66.64μm 7.1 11.06
2.38μm
10 1x <> 6y 1x <> 28y 1y 3y 5Y 15y
y=16.67μ y=3.57μm 16.67μ 50μm 17.85μm 53.55μm 7.07 7.1
m m
7 1X<>10Y 1X <> 43Y 2Y 7Y 14Y 19Y
y=10 μm Y=2.32μm 20 μm 70μm 32.56μm 44.08μm 62.8 37.03

14 1X<>7Y 1X <> 27Y 1.5y 4y 6y 15y

y=14μm Y = 3.1μm 21μm 56 μm 18.6 μm 46.15μm 11.42 17.58
9 1x < > 6y 1X<>27 1y 4y 5y 16y

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 Y=16.6µm Y=3.70µm 16.6μm 66.4μm 18.5μm 59.2 µm 11.44 10.84

DISCUSION DE RESULTADOS

 Los microscopios con mayor porcentaje de calibración fuero los números 7, 1 y 14 con
37.03%, 28.6% y 17.58% respectivamente

 Faltaron datos de otros microscopios para realizar la completa comparación de los

microscopios de laboratorio.

 Algunos microscopios no tenían un adecuado funcionamiento o no tenían

mantenimiento.

CONCLUSIONES

 Para el microscopio número 9 se obtuvo como porcentaje de error de calibración en el

largo de 10.84%, con lo cual podemos observar que se encuentra fuera del rango
admisible.

 El error del microscopio en el ancho es de 11,44%, el cual se encuentra fuera del

rango admisible.

 Por el tamaño de los microorganismos podremos saber qué tipo de filtro se debe de
usar para el tratamiento de aguas.

 El error de medición no puede ser calculado ya que necesitamos los datos obtenidos
por un microscopio de la misma marca y calibrado que es difícil de conseguir.

 El error del microscopio número 13 (el que yo uso) en el largo es de 0.308%, se puede
ver que es menos del 2%, por lo tanto está dentro de los valores admisibles.

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 En el caso del ancho el error es de 5.886%, lo que se concluye que esta fuera del
rango admisible y se debe volver a hacer el laboratorio.
 En el gráfica del papel milimetrado podemos notar que la pendiente de la recta de 10x
es menos con respecto a la de 43x, concluyendo que a mayor sea el objetivo, menor
será la medida de una división del micrómetro ocular.
 Se concluye que sabiendo el tamaño de los microorganismos podemos saber qué tipo
de filtro usar para el tratamiento de aguas.
 Se concluye que los microscopios 6 y 15 se encuentran dentro del rango admisible
tanto en la medida del ancho y del largo.
 El microscopio número 12 tiene que volver a hacer el laboratorio ya que le salió un
error de 57.16%

RECOMENDACIONES
 Tener sumo cuidado con micrómetro del ocular y de la platina, ya que si sufren
una caída se pueden quebrar o hasta romper.
 Verificar la calidad de cada microscopio y de sus objetivos, para no tener
problemas de visión en el futuro.
 Si ya encontró el alga con el objetivo de 10x, para pasar al objetivo de 43x
simplemente ya no mueva el portaobjetos y cambie de objetivo ligeramente
levante y baje el lente hasta encontrar el alga.
 Diferenciar claramente el micrómetro del ocular y de la platina para su correcta
calibración.
 Tener las precauciones al trabajar con lámparas ya que se calientan muy
rápido y algunas están defectuosas.
 Si deseamos calcular el error de calibración necesitamos un microscopio
patrón para poder realizar esta medición.

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CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFIA

 Libro Microbiología Sanitaria, autor : Pelczar,

 Libro de Biologia de los microorganismos/ Brock

 www.alihuen.org.ar/preguntas-frecuentes-faq-/que-son-las-algas.html - 49k

 www.asturnatura.com/algas/algas.html - 17k

 bc.inter.edu/facultad/yserrano/MICROPROtozoarios.htm - 13k

 http://www.pysersgi.com/images/thumbnails/Graticules/Stage
%20Micromete rs%20web.pd

 http://www.npl.co.uk/

 http://www.mailxmail.com/curso-microscopio/partes-microscopio-optico

 http://www.alihuen.org.ar/preguntas-frecuentes-faq-/que-son-las-algas.html

ANEXOS

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