ESCUELA CIENCIAS DE LA SALUD

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TEMA:
PRACTICA 09
“CALIBRACIÓN DE UN ESPECTROFOTÓMETRO POR EL
MÉTODO DE ADICIÓN ESTÁNDAR”

PROFESOR:
QF. DAVID RUIDÍAS ROMERO
CICLO:
IV
CURSO:
ANALISIS INSTRUMENTAL
INTEGRANTES.
 RÍOS PAREDES, JENIFER
 RIVASPLATA AGUIRRE, KAREN
 REYES CUEVA ROCIO
 NEYRA VASQUES KATY

TRUJILLO-PERU-2019
 PRACTICA 04

CALIBRACIÓN DE UN ESPECTROFOTÓMETRO POR EL

MÉTODO DE ADICIÓN ESTÁNDAR

I. INTRODUCCION

La espectrofotometría es uno de los métodos de análisis más usados, y se basa en la

relación que existe entre la absorción de luz por parte de un compuesto y su
concentración. Cuando se hace incidir luz monocromática (de una sola longitud de onda)
sobre un medio homogéneo, una parte de la luz incidente es absorbida por el medio y
otra transmitida, como consecuencia de la intensidad del rayo de luz sea atenuada desde
po a p, siendo po la intensidad de la luz incidente y p la intensidad del rayo de luz
transmitido. Dependiendo del compuesto y el tipo de absorción a medir, la muestra puede
estar en fase líquida, sólida o gaseosa. (2)
En las regiones visibles y ultravioleta del espectro electromagnético, la muestra es
generalmente disuelta para formar una solución. cada sustancia tiene su propio espectro
de absorción, el cual es una curva que muestra la cantidad de energía radiante absorbida,
absorbancia, por la sustancia en cada longitud de onda del espectro electromagnético, es
decir, a una determinada longitud de onda de la energía radiante, cada sustancia absorbe
una cantidad de radiación que es distinta a la que absorbe otro compuesto el método de
adición estándar es una técnica de análisis cuantitativo utilizada para minimizar
los efectos de matriz que interfieran con las señales de medición de analitos. (5)
Las concentraciones del componente desconocido son a menudo dilucidar a través
de una gama de técnicas analíticas, tales como luz espectroscopia y
espectrometría de masas electroquímica. Sin embargo, la medición puede verse
afectado por otros componentes de la muestra, llamada la matriz y causar la
reducción inadvertida o realce de la señal, llamado efectos de matriz, estos efectos
pueden sesgar los resultados y causar errores significativos en el análisis, el
método de adición estándar puede utilizarse para minimizar efectos de matriz en
las señales de medición, esto se realiza mediante la adición de volúmenes precisa
de una solución conocida de analíto a la muestra.(2)
 OBJETIVOS.
 Representar gráficamente los datos de S (absorbancias) versus el volumen de
solución patrón añadido.
 Obtener la ecuación de la recta, pendiente, intercepto, coeficiente de
determinación.
 Calcular la concentración de la solución muestra y la desviación estándar
empleando las ecuaciones del presente instructivo de práctica.

II. MATERIALES Y METODOS

2.1. Materiales
 Spectroquant Prove 300
 Balanza analítica de precisión de diezmilésima de gramo.
 Cubeta de cuarzo para ultravioleta.
 Espátula de metal muy fina.
 Papel metálico de aluminio de 2 X 4 cm.
 Frasco lavador de 500 mL.
 Tissú o pañuelos suaves desechables.
 Matraces volumétricos de 10 mL.
 Pipetas de 1 y 10 mL.
 Propipeta de 1 mL.
 Vasos de precipitación de 50 y 250 mL.
 Paracetamol Estándar USP.
 Etanol de 96°
 Agua destilada.
 2.2. Procedimiento

SOLUCION
STOCK

10mg Paracetamol +
etanol 96°

10Ml

S. Patrón S. muestra

0.2 ml s.
1ml s. stock +
10Ml stock +etanol
10Ml etanol 96°
96°

Concentración 100 ug/ml Concentración 20 ug/ml

1ml S. muestra

10Ml 10Ml 10Ml 10Ml

10Ml

0 ml s. patrón 0.1 ml s. 0.2 ml s. 0.4 ml s. 0.8 ml s.

patrón patrón patrón patrón
 UTILIZACIÓN DE DATOS.

1. Representar los datos de S (absorbancia) versus el volumen desolución

PATRÓN añadido (mL). 2. Obtener la ecuación de la recta, la pendiente
(m), el intercepto (b) y el coeficiente de determinación (R2 ).
2. Calcular la concentración de la solución MUESTRA (Cx) mediante la
ecuación 5 y la alternativa gráfica.
3. Calcular la desviación estándar de la concentración de la solución
MUESTRA (Sc) mediante la ecuación 8.

III. RESULTADOS
IV. DISCUSION
En la práctica se observó que obtuvimos medidas exactas de concentración del
acetaminofén en el etanol gracias al espectrofotómetro. Un espectrofotómetro mide la
cantidad de energía radiante absorbida por las moléculas de una muestra en función de
las longitudes de onda específicas. La energía absorbida o absorbancia (A) y la longitud
de onda (λ). Son los parámetros que intervienen y los que hay que considerar a la hora
de calibrar el equipo Para asegurar la trazabilidad de las mediciones realizadas con un
espectrofotómetro se calibra el instrumento mediante una serie de pruebas. Cada
prueba usa un patrón distinto. (3)
Según Almeida Varela A. La ley de Bourguer-Lambert-Beer, ley de Lambert-Beer o ley
general de la espectrofotometría, permite hallar la concentración de una especie
química a partir de la medida de la intensidad de luz absorbida por la muestra. Según
esta ley cuando un haz de luz monocromático de cierta intensidad incide
perpendicularmente sobre un medio que contiene partículas distribuidas
homogéneamente estas son capaces de absorber esa radiación, existiendo una relación
entre la intensidad de la luz entrante (lo) y la intensidad de la luz saliente (II). (3).
Para obtener una concentración del acetaminofén se usó el método de estándar
externo. Según Sánchez Rodríguez J, Villalobos Galindo M. Un estándar o patrón
externo, es aquel que se prepara fuera de la muestra problema. Se aplica este método
cuando se desea determinar la concentración de un analito en la que, ni los
componentes de la matriz de la muestra ni los reactivos usados en el procedimiento
interfieren en el análisis. También se puede usar en el caso en que las interferencias se
conozcan y se mantengan siempre constantes en las medidas, con lo cual se podrán
corregir estas posteriormente. (4)
La química con ayuda de la estadística Trata los resultados de los análisis aplicando
herramientas estadísticas. Calcula la incertidumbre de los resultados. Valora la
necesidad de determinar la incertidumbre para cada resultado obtenido. Aplica en los
cálculos las unidades del Sistema Internacional de medidas (SI) (4)
V. CONCLUSIONES

 Se identificó que el equipo presenta una adecuada precisión y exactitud

determinando que las mediciones realizadas en este pueden ser confiables.

 El conocer el adecuado uso del espectrofotómetro permitió obtener en el

laboratorio resultados con alta calidad analítica en las mediciones que son
emitidas por éste.

 Nos di a conocer la concentración de la solución muestra y la desviación

estándar empleando las ecuaciones del presente instructivo de práctica

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Skoog, D. A., Holler, F.J. & T. A. Nieman (2001) Principios de Análisis

Instrumental. 5ta Edición, Editorial McGraw Hill, México. 1028 pp.
2. Harris Daniel C. “Análisis Químico Cuantitativo”, 2ª edición. Editorial Reverte,
España 2001.
3. Almeida Varela A. Espectrosoft Barrido V1.0: aplicación basada en Labview
paraespectrofotómetros del modelo Genesys2. La Habana: D - Instituto
Superior Politécnico JoséAntonio Echeverría. CUJAE; 2011.
4. Sánchez Rodríguez J, Villalobos Galindo M. Tratamiento de los resultados
analíticos: aplicación dela estadística en el laboratorio. Barcelona: Cano Pina;
2010.
5. Danzer Klaus, Currie Lloyd A. “Guidelines for calibration in analytical chemistry
Part I. Fundamentals and single component calibration”, IUPAC Pure & Appl.
Chem, Vol.70, No.4, pp.993-1014, 1998.