PROPOSAL PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

Pengaruh Ekstrak Etanol Kulit Terong Ungu (Solanum melongena L.) terhadap
Penghambatan Migrasi dan Ekspresi Protein p53 pada Sel Kanker Payudara
T47D

BIDANG KEGIATAN :
PKM ARTIKEL ILMIAH

Diusulkan oleh :
Rengganis Seppatria Ketua 155010033/2015

Sharfina Sukma Permatasari Haryono Anggota 1 155010016/2015

Kharista Khasanyzulaikhah Anggota 2 165010040/2016

UNIVERSITAS WAHID HASYIM

SEMARANG
2018

i
PENGESAHAN PKM ARTIKEL ILMIAH
 1

Pengaruh Ekstrak Etanol Kulit Terong Ungu (Solanum melongena L.) terhadap
Penghambatan Migrasi dan Ekspresi Protein p53 pada Sel Kanker Payudara
T47D

Rengganis Seppatria1), Sharfina Sukma Permatasari Haryono1), Kharista

Khasanyzulaikhah1), Ibrahim Arifin1)
1)
Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
Jl. Menoreh Tengah X No. 22, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia

ABSTRAK
Kanker adalah suatu penyakit akibat hilangnya pengendalian dan mekanisme
sel yang normal, sehingga sel akan tumbuh secara tidak teratur. Pengobatan kanker
payudara dengan agen kemoterapi masih menjadi pilihan utama, namun memiliki efek
samping kardiotoksik. Hal inilah yang mendasari dilakukannya pengembangan obat
anti kanker berbasis bahan alam, diantaranya dengan memanfaatkan limbah kulit
terong ungu (Solanum melongena L.) Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan
potensi kulit terong ungu sebagai agen penghambatan migrasi dan ekspresi protein p53
terhadap sel kanker payudara T47D. Kulit terong ungu diekstraksi menggunakan
metode ultrasonik dengan pelarut etanol 70%; HCl 1%. MTT Assay dilakukan untuk
mengetahui potensi ekstrak etanol kulit terong ungu (EEKTU) dalam aktivitas
sitotoksik terhadap sel kanker T47D. Kemampuan menghambat migrasi digunakan
metode scratch wound healing assay. Sedangkan untuk mengetahui ekpresi protein p53
menggunakan metode imunositokimia. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak
etanol kulit terong ungu mempunyai aktivitas sitotoksik dengan nilai IC50 301,150
µg/mL. Efek penghambatan migrasi dari EEKTU sebesar konsentrasi 150: 75; 37,5
µg/ml mampu menghambat kecepatan migrasi pada inkubasi jam ke- 18, 24 dan 42
dibandingkan dengan kontrol sel. Ekspresi protein p53 Hasil tersebut menunjukkan
peningkatan ekspresi protein p53 lebih dari 8 kali lipat setelah perlakuan EEKTU 300
µg/mL, peningkatan lebih dari 6 kali lipat setelah perlakuan EEKTU 150 µg/mL, dan
peningkatan lebih dari 3 kali lipat setelah perlakuan EEKTU 75 µg/mL dibandingkan
dengan kontrol sel tanpa perlakuan yang dicat dengan antibodi p53.
Kata kunci : Solanum melongena, T47D, MTT Assay, Scratch wound healing assay,
imunositokimia

ABSTRACT
Cancer is a disease due to loss of control and normal cell mechanism, cells will
grow irregularly. Up to now breast cancer treatment with chemotherapy agent
Doxorubicin is still the main choice, but it has Cardio toxic side effects. This underlies
the development of natural-based anti-cancer drugs, includes the use of purple
eggplant peel waste (Solanum melongena L.). This study aimed to develop the potential
of purple eggplant peel as an agent for inhibiting migration and p53 protein expression
to T47D breast cancer cells. Purple eggplant skin extracted using ultrasonic method
 2

with 70% and 1% HCl. MTT Assay was done to determine the potential of purple
eggplant peel ethanol extract (EEKTU) in cytotoxic activity against T47D cancer cells.
The ability to inhibit migration using the scratch wound healing assay method.
Whereas to determine the expression of p53 protein using the immunocytochemical
method. The results showed that the ethanol extract of purple eggplant peel had
cytotoxic activity with value of IC50 300,150 µg / mL. The effect of the inhibition of
migration from EEKTU is the concentration of 150: 75; 37.5 µg / ml was able to inhibit
the speed of migration in incubation on 18th, 24th and 42nd hours compared to cell
control. Results on P53 protein expression showed the increase of p53 protein
expression by more than 8 times after EEKTU 300 µg/mL treatment, the increase more
than 6 times after EEKTU 150 µg/mL treatment, the increase more than 3 times after
EEKTU 75 µg/mL compared with untreated cell control painted with p53 antibodies.
Keywords: Solanum melongena, T47D cell, MTT Assay, Scratch wound healing
assay, immunocytochemical

PENDAHULUAN
Kanker merupakan penyebab
kematian terbanyak di dunia setelah
penyakit jantung; menurut American
Cancer Society (2015), 25% kematian di
Amerika disebabkan kanker. Pada tahun
2007 diperkirakan sekitar 1500 per hari
warga Amerika meninggal karena kanker.
Jenis kanker yang paling banyak diderita
perempuan adalah kanker payudara (26%
dari seluruh kasus kanker), dan 15% dari
kasus tersebut berakhir dengan kematian
(Jemal et al., 2007).
Sel kanker dapat melakukan
proliferasi, migrasi yang memicu invasi.
Kemampuan sel untuk berkembang biak,
bermigrasi dan menyerang dianggap
sebagai penentu penting dalam proses
tumorigenesis. Sel-sel tumor mampu
mengikatkan dirinya pada matriks
ekstrasel, menguraikan dan kemudian
menembus matriks tersebut untuk
terjadinya proses invasi (Arun et al.,
2002).
Kanker payudara dapat terjadi
karena adanya perubahan ekspresi
maupun fungsi dari suppressor tumor
seperti BRCA, p53 dan ER. Salah satu
perubahan ekspresi maupun fungsi yang
banyak terjadi pada kanker payudara
adalah adanya mutasi pada p53. Pada sel
normal, p53 berperan dalam menginduksi
terjadinya apoptosis dan siklus sel. Mutasi
pada p53 dapat menyebabkan hilangnya
growth suppression serta mempengaruhi
progresi siklus sel yang tidak terkontrol
yang mengarah ke kanker (Nurkhasanah
et al., 2017).
Penanganan kanker payudara
dapat menggunakan Mammogram,
Magnetic Resonance Imaging (MRI), dan
penggunaan agen kemoterapi (Bapsy et
al., 2004). Sampai saat ini penggunaan
agen terapi memiliki efek samping yang

berbahaya seperti kardiotoksik dan
hepatotoksik (Rašković, 2011). Oleh
karena itu, pengaruh bahan alam sebagai
obat kanker terus dilakukan.
Salah satu bahan alam yang dapat
digunakan sebagai anti kanker adalah
kulit terong ungu. Penelitian yang
dilakukan Sadilova (2006)
mengemukakan bahwa kulit dari terong
ungu mengandung flavonoid salah
satunya Antosianin Delphinidin.
Antosianin Dephinidin pada kulit terong
ungu terbukti sebagai antioksidan yang
berpotensi sebagai anti kanker (Sabana,
2013). Delphinidin dapat mengurangi
translokasi membrane PKCα dan
fosforilasi STAT3 oleh faktor
pertumbuhan hepatosit, menghambat
translokasi nuklir NFκB / p65 dan dengan
demikian menghambat invasi sel yang
meliputi proses migrasi sel (Syed et al.,
2008)
Senyawa antosianin dapat
menginduksi apoptosis dengan
TUJUAN
Penelitian ini bertujuan mengkaji penghambatan migrasi EEKTU dan
aktivitas sitotoksik EEKTU terhadap sel ekspresi protein p53 pada sel kanker
kanker payudara T47D, mengetahui Payudara T47D.
METODE
Bahan Penelitian
Kulit terong ungu, etanol 70
%, HCl 1%. Kultur sel ditumbuhkan
dalam Dulbecco’s Modified Eagle Media
(DMEM) (Gibco), yang mengandung
Fetal Bovine Serum (FBS) 10% (v/v)
(Gibco). Tripsin EDTA 0.25% (Gibco)
digunakan untuk membantu melepas sel.
3
melibatkan pengaturan regulasi p53 pada
sel melanoma B16-F10 (Wang et al.,
2017). Peran dari p53 terkait dengan
siklus sel dan induksi apoptosis(Bai et al.,
2006)
Senyawa flavonoid Antosianin
merupakan senyawa polar. Ekstraksi
senyawa Antosianin dari kulit terong ungu
lebih efisien menggunakan pelarut
beralkohol yang diasamkan yaitu etanol
70% & HCl 1% (Todaro., 2009).
Penyarian yang dilakukan dengan metode
ultrasonik ternyata mampu memberikan
hasil randemen yang lebih tinggi
dibandingkan dengan metode ekstraksi
konvensional sehingga efisien (Rouhani
et al., 2009).
Berdasarkan latar belakang di atas,
penulis meneliti pengaruh dari ekstrak
etanol kuli terong ungu (EEKTU) dalam
pengembangan bahan alam sebagai anti
kanker dengan mekanisme penghambatan
migrasi sel dan pengaruh EEKTU dalam
ekspresi protein p53.
RPMI, reagen MTT, media kultur (MK),
DMSO, PBS, SDS 10%, akuades, loading
buffer, prestained marker, sodium
dodecyl sulfate (SDS) running buffer yang
mengandung trisbase, glycine dan 0.1%
SDS, reaction buffer (40mM Tris-HCl pH
8, 10mM CaCl2, 0,02% NaN3), primary
antibody monoclonal anti-p53(Dako),

antibodisekunder :biotinylated secondary
antibody(Novocastra), blocking solution :
H2O2 dan Metanol (Merck) (1:9),
blocking serum(Dako), DAB 10 µL dalam
Buffer Substrat 1000µL, larutan
MayeHaematoxylin (Novocastra)
(Haryanti, 2017).
Alat Penelitian
Neraca analitik, alat penyerbuk,
pengaduk, alumunium foil, oven listrik,
rotary evaporator, corong buchner,
vacuum, blender, moisture balance,
batang pengaduk, glassware, pisau kulit
terong, alat ultrasonic, pipa kapiler,
chamber, lampu uv 254 nm dan 366 nm,
inkubator CO2 5% (Herasceus), ELISA
reader, 96-well plate, sentrifugator, 24-
well plate, 6 well plate, TCD 3, laminar
air flow hood, inverted microscope,
hemocytometer, cell counter, mikropipet,
shaker, conical tube, blue tip, yellow tip,
vortex, mikroskop fluoresen, tabung
reaksi, kamera digital, lemari pendingin,
tabung reaksi kecil atau eppendorf, Cover
slip(Nunc), Object glass (Haryanti, 2017).
Jalannya Penelitian
Pengumpulan Bahan
Bahan uji yang digunakan adalah
kulit terong ungu yang dipanen dari Desa
Kembangan, Kecamatan Mranggen,
Uji Sitotoksik
Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol Kulit
Terong Ungu
Uji sitotoksik dilakukan dengan
MTT assay, melalui pengamatan
viabilitas pada sel kanker payudara T47D.
Kultur sel yang telah konfluen dipanen
kemudian didistribusikan ke dalam
sumuran 96-well microplate dengan
3
Kabupaten Demak. Terong yang
digunakan masih segar dan tidak
berpenyakit.
Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman dilakukan di
Laboratorium Ekologi dan Biosistematika
Jurusan Biologi Fakultas MIPA
Universitas Diponegoro Semarang.
Pembuatan Senyawa Uji
Pembuatan Serbuk Kulit Terong Ungu
Kulit terong ungu dicuci bersih
dengan air mengalir, lalu dikeringkan
dalam oven dengan suhu maksimum
600C. Simplisia yang sudah kering
dihaluskan dengan blender. Serbuk diukur
kadar airnya menggunakan moisture
balance. Serbuk simplisia memiliki mutu
yang baik jika kadar air <10% (Depkes RI,
2000).
Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit
Terong Ungu .
Pembuatan ekstrak dengan metode
ultrasonik, 30 g serbuk kulit terong ungu
diekstraksi dengan menggunakan
sonikator dengan perbandingan serbuk
dan 300 mL etanol 70% dan 3 mL HCL
selama 1 jam dan didiamkan selama 24
jam kemudian dipekatkan menggunakan
rotary evaporator dengan suhu 40oC dan
kecepatan 60 rpm.
jumlah 104 sel/sumuran. Sel tersebut
diinkubasi selama 24 jam di dalam
inkubator CO2 agar dapat beradaptasi
sehingga siap untuk perlakuan. Larutan
uji dibuat stok dalam pelarut DMSO
kemudian diencerkan menggunakan
media kultur sesuai seri konsentrasi yang
ditentukan yaitu 1000; 500; 400; 300; 200;
100; 80 µg/ml. Sel dicuci dengan PBS 1x

kemudian larutan uji dimasukkan ke
dalam sumuran (triplo). Sel diinkubasi
kembali selama 24 jam di dalam inkubator
CO2. Setelah inkubasi, larutan uji dibuang
dan ditambahkan pereaksi MTT sejumlah
100 μl/sumuran. Pereaksi stopper
Uji Scratch Wound Healing Assay
Scratch Wound Healing Assay
digunakan untuk mengetahui
penghambatan migrasi sel T47D.
Sejumlah 7x104 sel T47D ditumbuhkan
hingga konfluen pada 24-well plate.
Selanjutnya dibuat scratch di tengah
koloni sel mengggunakan yellow tip.
Kultur sel dicuci dengan PBS 1x masing-
masing 500 µL hingga bersih. Buang PBS
dari sumuran dengan pipet secara
perlahan-lahan, kemudian diberi
perlakuan tunggal dengan konsentrasi
Uji Imunositokimia
Sel T47D yang sudah konfluen
dipanen dan dihitung dengan jumlah
kurang lebih 5x104 sel/sumuran kemudian
sebanyak 200 µL dimasukkan ke cover
slip dalam 6-well plate sampai 80%
konfluen. Sel diinubasikan dalam
inkubator selama 30 menit supaya sel
menempel pada cover slip. Saat sel sudah
menempel ditambahkan media kultur
RPMI sebanyak 800 µL dengan hati-hati
dan diinkubasikan kembali dalam
inkubator CO2 bersuhu 37°C selama
semalam. Cover slip yang memuat sel
diangkat, diletakkan di dalam 6 well plate.
Preparat difiksasi dengan methanol
dingin. Preparat dicuci dengan PBS,
kemudian ditetesi dengan hidrogen
peroxidase blocking solution selama 10
4
ditambahkan setelah 4 jam inkubasi
dengan MTT. Sel diinkubasi semalam
pada suhu kamar dan terlindung dari
cahaya. Pada akhir inkubasi sel dibaca
dengan ELISA reader pada panjang
gelombang 595 nm (Zahroh, 2017).
yang telah ditentukan (500 µL/sumuran).
Media kultur yang digunakan
mengandung 0.5 % FBS, kemudian
diinkubasi dalam inkubator CO2.
Dokumentasi scratch dilakukan pada jam
ke-0, 18, 24, dan 42 dengan perbesaran
mikroskop dan kamera yang selalu sama.
Luasan area scratch dianalisa
menggunakan imageJ software dan
dihitung menggunakan Ms. Excel 2013
(Liang et al., 2007).
menit pada suhu kamar, kemudian
dibuang. Preparat diinkubasi dengan
prediluted blocking serum selama 10
menit pada suhu kamar, lalu dibuang.
Selanjutnya ditetesi dengan Primer
Antibodi Monoklonal anti p53 sebanyak
100 µL dan diinkubasi 1 jam. Setelah itu,
dicuci sumuran dengan 300 µL PBS
sebanyak 2 kali. Pada akhir inkubasi
preparat dicuci dengan PBS selama 5
menit, kemudian diinkubasi dengan
biotinylated universal secondary antibody
selama 10 menit dan dicuci PBS selama 5
menit. Preparat diinkubasi dalam
streptavidin-peroxidase complex reagen
selama 10 menit dan dicuci PBS selama 5
menit. Selanjutnya, 36 preparat diinkubasi
dalam substrate solution DAB selama 10
 5

menit lalu dicuci dengan akuades. kemudian ditetesi dengan mounting

Preparat direndam dalam Mayer
Haematoxylin selama 3 menit dan dicuci
akuades, lalu dicelupkan dalam alkohol,
dibersihkan, dicelupkan dalam xylol
HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi Tanaman
Determinasi bertujuan untuk
mendapatkan identitas yang benar dari
tanaman yang digunakan dalam
penelitian, sehingga dipastikan bahwa
tanaman yang digunakan dalam penelitian
ini benar-benar terong ungu (Solanum
melongena L.). Terong ungu yang
digunakan dalam penelitian ini dipanen
dari satu tempat yaitu perkebunan yang
menanam terong ungu yang terletak di
Desa Kembangan, Kembangarum, Kec.
Mranggen, Kab. Demak, Jawa Tengah.
media dan ditutup cover slip. Ekspresi
protein p53 diamati di bawah mikroskop
cahaya perbesaran 100-400x (Haryanti,
2008).
Hasil yang didapatkan pada determinasi
adalah sebagai berikut : Kingdom ;
Plantae (tumbuhan) ; Subkingdom :
Tracheobionta (berpembuluh) ;
Superdivisio : Spermatophyta
(menghasilkan biji) ; Division :
Magnoliophyta (berbunga) ; Kelas :
Dicotylodoneae ; Subkelas : - ; Ordo :
Solanes ; Family : Solanaceae ; Genus :
Solanum ; Species : Solanum melongena
L. (Terong Ungu).

Uji Sitotoksisitas Dengan Metode MTT

Assay
Hasil uji sitotoksik pada berbagai uji EEKTU terhadap viabilitas sel kanker
sel menunjukkan bahwa EEKTU payudara T47D dapat dilihat pada gambar
memiliki aktivitas sitotoksik dengan nilai 1.
IC50 sebesar 301,150 µg/ml. Efek senyawa
100
Viabilitas sel (%)

y = -35.82x + 138.79
80
R² = 0.9634
60
40
20
0
0 200 400 600
konsentrasi EEKTU (ug/mL)

Gambar 1. Efek konsentrasi ekstrak etanol kulit terong ungu terhadap

viabilitas sel kanker payudara T47D (dokumentasi pribadi)

Hasil Uji sitotoksisitas
memperlihatkan bahwa kenaikan kadar
EEKTU menyebabkan penurunan
persentase viabilitas sel, atau dapat
dikatakan bahwa pelakuan EEKTU
terhadap sel kanker payudara T47D
bersifat dose-dependent. Fenomena
tersebut menunjukkan bahwa semakin
Uji Migrasi Sel dengan Metode Scratch
Wound Healing Assay
Salah satu metode in vitro untuk
mempelajari kemampuan sel untuk
bermigrasi adalah scratch wound healing
assay. Setelah sel konfluen, media diganti
dengan FBS 0,5% untuk membuat sel
berpuasa (tahap starvasi). Dengan adanya
tahap starvasi diharapkan sel kanker
payudara akan kehilangan nutrisi dan
tenaga untuk melakukan pembelahan diri
0H
150
100
50
0
KS 1/2 IC50
Gambar 2. Hasil pengamatan migrasi sel T47D dalam % closure.
Pengamatan migrasi sel kanker
payudara T47D ditandai dengan %
closure, dimana semakin kecil % closure
maka semakin baik penghambatan
migrasi sel. Kontrol sel mengalami
migrasi (% closure) jam ke 18, 24 dan 42
secara berturut-turut sebesar 70%, 77%
dan 100%. Perlakuan dengan EEKTU ½
IC50 diperoleh hasil 30% pada jam ke 18,
6
tinggi dosis yang diberikan maka semakin
besar pula toksisitas EEKTU terhadap sel
kanker payudara T47D. Hal ini ditandai
dengan semakin rendahnya % viabilitas
sel. Tiap konsentrasi perlakuan ekstrak
etanolik kulit terong ungu dilakukan
replikasi sebanyak 6 kali.
(proliferasi), sehingga apabila terjadi
perpidahan sel dari pinggir menuju ke
tengah sumuran diharapkan sel benar -
benar melakukan migrasi, bukan
proliferasi. Hasil uji migrasi sel dapat
dilihat pada persentase penutupan setelah
area digores yang diamati pada jam ke 0,
18, 24 dan 42. Sebagaimana terlihat pada
gambar 2.
18 H 42 H
1/4 IC50 1/8 IC50
dan jam ke 24, 42 adalah 50% dan 84%.
EEKTU ¼ IC50 diperoleh hasil setelah
inkubasi ke 18, 24 dan 42 secara berurutan
sebesar 39%, 52% dan 95%. EEKTU 1/8
IC50 diperoleh hasil % closure pada jam ke
18 sebesar 41%, jam ke 24 adalah 67%
dan jam ke 42 sebesar 89%. Hal ini
menunjukkan bahwa EEKTU mampu
menghambat adanya migrasi sel kanker
 7

T47D dimana hasil dari EEKTU memiliki

% closure yang lebih kecil daripada
kontrol sel.
Uji Ekspresi Protein p53 dengan
Metode Imunositokimia
Imunositokimia mempunyai
prinsip pengikatan antigen dan antibodi
spesifik yang dilabel sehingga akan
mengubah substrat kromogen DAB
(diaminobenzidin) menjadi berwarna
coklat (Nodus Biological, 2018). Antibodi
primer akan berikatan dengan antibodi
sekunder dan menjadi kompleks dan akan
mengikat protein p53 yang terdapat pada
sel kanker payudara T47D. Ketika
mengekspresikan p53 maka akan
memberikan warna coklat dengan
penambahan substrat kromogen DAB
(Nodus Biological, 2018).
Apabila sel mengekperesikan p53
maka akan terbentuk warna coklat pada
inti sel namun apabila sel tidak
mengekpresikan p53 maka akan berwarna
biru atau ungu. Hasil dapat dilihat
dibawah mikroskop cahaya perbesaran
400x dan diambil gambar untuk dianalisis
menggunakan software ImageJ. Hasil
ekspresi protein p53 dapat dilihat pada
gambar 3.

(A) (B) (C)

(D) (E)
Gambar 3. Hasil ekspresi protein p53 setelah perlakuan EEKTU.
Diamati menggunakan mikroskop cahaya dengan perbesaran 400 x.
(A) Kontrol sel tanpa perlakuan sampel tanpa pengecatan. (B) Kontrol sel
tanpa perlakuan sampel dengan penegcatan. (C) Perlakuan sampel
konsentrasi 300 µg/mL. (D) Perlakuan sampel konsentrasi 150 µg/mL. (E)
Perlakuan sampel konsentrasi 75 µg/mL.

Analisis data dilakukan dengan ekspresi protein p53 dengan menghitung

menggunakan software ImageJ secara jumlah pixel threshold (area) serta
semi kuantitatif untuk menghitung persentasepixel threshold (% area) per
 8

satu lapang pandang (Arianingrum et al.,
2016). Hasil yang didapatkan melalui
image quantification dari rerata lima
lapang pandang, menunjukkan bahwa
ekspresi protein p53 pada kontrol sel
tanpa perlakuan sebesar 0,69% ± 0,22 dari
area lapang pandang, sedangkan ekspresi
8.00
protein p53 pada perlakuan sampel
EEKTU dengan konsentrasi IC50 (300
µg/mL) ; ½ IC (150 µg/mL) dan ¼ IC50 (75
µg/mL) berturut-turut yaitu 6,06% ± 1,18
; 4,26% ± 1,14 dan 2,67% ± 0,96. Hasil ini
dapat dilihat pada gambar 4.

Axis Title 6.00

4.00
2.00
0.00
Kontrol sel 75 µg/mL 150 µg/mL 300 µg/mL
Konsentrasi EEKTU

Gambar 4. Hasil analisis ekpresi protein p53 setelah perlakuan EEKTU.

Kontrol sel tanpa perlakuan dengan pengecatan antibody p53 dan perlakuan sampel
dengan konsentrasi IC50 (300 µg/mL) ; ½ IC (150 µg/mL) dan ¼ IC50 (75 µg/mL)
dianalisis secara semikuantitatif menggunakan software ImageJ.

KESIMPULAN
Ekstrak etanol kulit terong ungu
memiliki sitotoksisitas pada sel T47D
yang ditandai dengan IC50 301.150
µg/mL. Uji migrasi sel membuktikan
bahwa EEKTU memiliki penghambatan
migrasi terhadap sel kanker payudara
UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis ingin menyampaikan
terimakasih kepada Allah S.W.T,
Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi
Departemen Pendidikan Nasional yang
telah membiayai penelitian ini. Bapak
T47D lebih baik dibanding kontrol sel. Uji
ekspresi protein p53 membuktikan bahwa
EEKTU mempengaruhi peningkatan
ekspresi protein p53 pada sel kanker
payudara T47D.
Drs. H. Ibrahim Arfin, M.Sc., Apt. yang
telah membimbing kami dan kepada
semua pihak yang tidak dapat penulis
sebutkan satu persatu.

DAFTAR PUSTAKA
American Cancer Society. 2015. Global Arun B, Hortobagyi GN. 2002. Progress
Cancer Facts & Figures 3rd in Breast Cancer
Edition. Atlanta: American Chemoprevention. Endocrine-
Cancer Society. related Cancer. 9: 15-32.

Bai L, Zhu W. 2006. p53: Structure,
Function and Therapeutic
Applications. Journal of Cancer
Molecules. 2(4): 141-153
Bapsy PP, Sahoo TP. 2004. Recent
Advances in the Management of
Metastatic Breast Cancer. Indian
Journal Of Medical & Paediatric
Oncology. 25 (2): 19-27.
Depkes RI. 2000. Parameter Standar
Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. Jakarta. 11.
Haryanti S . 2008. Efek Ekstrak Etanolik
Hedyotis corymbosa L. terhadap
Aktivitas Sitotoksik Doxorubicin
pada Sel MCF-7. Tesis.
Universitas Gadjah Mada
Yogyakarta.
Haryanti S. 2017. Potensi Antikanker
Kombinasi Ekstrak Tanaman
dengan Doxorubicin Melalui
Penghambatan Proliferasi dan
Metastasis pada Sel Kanker
Payudara Secara In Vitro.
Disertasi. Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta.
Jemal A, Siegel R, Ward E, Murray T,
Jiaquan-Xu, Michael JT. 2007.
Cancer Statistic 2007. CA Cancer
J Clin. 57: 43-66.
Liang C-C, Park AY, Guan J-L. 2007. In
vitro scratch assay: a convenient
and inexpensive method for
analysis of cell migration in vitro.
Nature Protocols, 2: 329–333.
9
Nodus Biological, 2018,
Immunocytochemistry (ICC) Handbook,
Biotechne.
Nurkhasanah, Sulistyani N, Mahdi L.
2017. Fraksi Kloroform Ekstrak
Etanol Daun Tapak Liman
(Elephantopus scaber Linn.)
Meningkatkan Ekspresi p53 pada
Sel Kanker Payudara T47D.
Pharmaciana. Vol.7, No.2, Hlm
141-146.
Rašković A, Stilinović N, Kolarović J,
Vasović V, Vukmirović S, Mikov
M. 2011. The Protective Effects of
Silymarin against Doxorubicin-
Induced Cardiotoxicity and
Hepatotoxicity in Rats. Molecules.
8601-8613.
Rouhani S, Alizadeh N, Salimi S, Haji-
Ghasemi T. 2009. Ultrasonic
Assisted Extraction of Natural
Pigments from Rhizomes of
Curcuma Longa L. Journal of
Progress in Color, Colorants and
Coatings. 2, 103-113.
Sabana MM, Salama MM, Ezzat SM,
Ismail LR. 2013. In Vitro and In
Vivo Anticancer Activity of the
Fruit Peels of Solanum melongna
L. againt Hepatocellular
Carcinoma. Journal Carcinogene
Mutagene. 4:3.
Sadilova E, Stintzing FC, Carle R. 2006.
Anthocyanins, Colour and
Antioxidant Properties of
Eggplant (Solanum melongena L.)
and Violet Pepper (Capsicum
annuum L.) Peel Extracts. Verlag
 10

der Zeitschrift fur Natuforschung. Wang E, Yanjun L, Caina X, Jingbo L.

527-535. 2017. Antiproliferative and
Syed DN, Afaq F, Sarfaraz S, Khan N, Proapoptotic Activities of
Kedlaya R, Setaluri V. 2008. Anthocyanin and Anthocyanidin
Delphinidin inhibits cell Extracts From Blueberry Fruits on
proliferation and invasion via B16-F10 Melanoma Cells. Food
modulation of Met receptor & Nutrition Research.. Vol.61.
phosphorylation. Toxicol Appl Zahroh F. 2017. Uji Aktivitas Sitotoksik
Pharmacol. 231: 52–60. dan Ekspresi Protein BCL-2
Todaro A, Cimino F, Rapisarda P, Ekstrak Etanolik Daun Selasih
Catalano AE, Barbagallo RN, (Ocimum basilicum L.) pada Sel
Spagna G. 2009. Recovery of Kanker Payudara MCF7. Skripsi.
Anthocyanins from eggplant peel. Universitas Wahid Hasyim
Food Chemistry. 434-439. Semarang.