Anda di halaman 1dari 39

ANTIMIKROBA RUMPUT LAUT: ISOLASI, KARAKTERISTIK,

DAN POTENSI PENGGUNAAN DALAM PANGAN


FUNGSIONAL

Tugas

Oleh :
Fahri Prawiro (15051104019)
Tita Massie (16051104007)
Toar Senduk (16051104011)

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN


UNIVERSITAS SAM RATULANGI
MANADO
2018
13. ANTIMIKROBA RUMPUT LAUT: ISOLASI,
KARAKTERISTIK, DAN POTENSI PENGGUNAAN DALAM
PANGAN FUNGSIONAL
13.1 PENGANTAR
Tumbuhan telah digunakan sebagai sumber makanan bagi manusia dan hewan selama berabad-
abad. Mereka juga punya peran untuk bermain dalam pengobatan dan pencegahan penyakit, karena
fakta bahwa banyak mengandung senyawa bioaktif (Houghton & Raman 2003; Biesalski dkk.
2009). Senyawa alami bioaktif adalah bahan kimiasenyawa yang dihasilkan oleh organisme hidup
yang menggunakan efek biologis pada organisme lain (Colegate &Molyneux 2008). Pada
tumbuhan, mereka bermanfaat bagi kesehatan secara keseluruhan dan berperan dalam memerangi
penyakit, tetapi mereka biasanya tidak diperlukan untuk fungsi normal (Houghton & Raman
2003). Banyak tumbuhan yang diturunkanSenyawa bioaktif memiliki sifat antimikroba,
antiinflamasi, dan antioksidan (Colegate &Molyneux 2008; Biesalski dkk. 2009). Beberapa telah
dieksploitasi untuk perawatan dan / atau pencegahanpenyakit manusia, seperti kanker dan penyakit
kardiovaskular (CVD), serta infeksi danpenyakit yang berkaitan dengan usia (El Gamal 2010).
Rumput laut kaya akan senyawa bioaktif, termasuk yang memiliki sifat antimikroba, yangadalah
fokus dari bab ini (Smit 2004; Imhoff dkk. 2011). Banyak dari senyawa ini mungkinmenjadi novel
dan memiliki potensi sebagai alternatif terhadap antibiotik, antivirus, dan anti-jamur yang sudah
ada Ini penting, karena kebanyakan antibiotik yang digunakan saat ini adalah turunan dari
antibiotik! -Laktam dan sulfonamidepertama kali ditemukan pada 1930-an, dengan hanya
beberapa senyawa baru yang disetujui untuk digunakan dalam20 tahun terakhir. Ini terutama
karena alasan ekonomi tetapi juga merupakan hasil dari kesulitanmemperoleh senyawa baru dari
antimikroba yang ada (Butler & Buss 2006; Butler & Cooper2011). Banyak antimikroba yang
disetujui berasal dari produk alami, sehingga penemuan antimikroba baru-baru iniberfokus pada
produk alami sebagai bahan awal (Butler & Cooper 2011; Donadioet al. 2011).
Secara umum, penemuan antimikroba baru dari sumber-sumber alam melibatkan penyaringan
massalekstrak produk alami mentah untuk aktivitas antimikroba, pemisahan dan isolasi
antimikrobasenyawa dari ekstrak kasar, dan akhirnya identifikasi senyawa antimikroba. Tidak ada
yang tunggalekstraksi, pemisahan, atau metode isolasi dapat digunakan untuk semua jenis sampel
alami yang berbeda.
Oleh karena itu, penting bagi para peneliti untuk memilih pendekatan yang akan menghasilkan
"bukti" terbaikkonsep "untuk sampel yang menarik. Bab ini memberikan ikhtisar tentang metode
yang digunakan untukekstraksi, pemisahan, dan identifikasi senyawa antimikroba dari rumput laut,
serta atinjauan antimikroba yang berasal dari rumput laut yang diidentifikasi hingga saat ini,
mendiskusikan aplikasi potensial mereka dimakanan fungsional

13.2 RUMPUT LAUT


13.2.1 Klasifikasi Rumput Laut
Lautan didominasi oleh alga, tanaman evolusi primitif, dan makroskopik bentik dan
multiselulerorganisme laut (Lobban & Harrison 1997). Makroalga laut, lebih dikenal
sebagairumput laut, diklasifikasikan dalam Algae subkingdom dalam kerajaan Protista, yang
bukan tanamanatau hewan. Mereka dibagi menjadi tiga filum: Rhodophyta, Chlorophyta, dan
Phaeophyta, berdasarkanpada perbedaan konsentrasi protein pigmen fotosintetik (Stoloff 1962;
Thirumaran et al.2009). Sebagai contoh, Rhodophyta (rumput laut merah) berwarna merah karena
tingginya kandungan phycoerythrin dan phycocyanin, yang menutupi pigmen lainnya, sementara
Chlorophyta (rumput laut hijau) berwarna hijau, seperti konsentrasi klorofil a dan b mereka mirip
dengan yang ditemukan pada tumbuhan tingkat tinggi (Graham & Wilcox 2000), dan Phaeophyta
(rumput laut coklat) berwarna coklat karena konsentrasinya yang tinggi fucoxanthin dan
karotenoid xanthophyll lainnya (Karleskint et al. 2009).
Rumput laut selanjutnya dibedakan berdasarkan cadangan makanan mereka, komposisi dinding
sel, reproduksikarakterisasi, struktur tanaman, dan bentuk. Misalnya, karakteristik utama rumput
laut coklat,selain dari banyaknya karotenoid xanthophyll, adalah penyimpanan produk fotosintesis
berlebih dalam bentuk laminaran dan manitol dan fakta bahwa dinding sel mereka terdiri dari
selulosa, asam fucinic, dan asam alginat (Kumar & Singh 1979; Wiencke et al. 2007). Rumput laut
hijau menyimpan kelebihan produk fotosintesis dalam bentuk pati dan dinding sel mereka tersusun
terutama dari selulosa senyawa (Kumar & Singh 1979). Rumput laut merah memiliki pigmen
fotosintesis yang berbeda dengan hijau dan rumput laut coklat dan dinding sel mereka terdiri dari
selulosa dan pektin, dengan ester polysulfated glukosa; karakteristik unik lainnya adalah cara di
mana mereka menyimpan produk fotosintesis berlebih: dalam bentuk pati floridean dan
galactoside floridosides, yang terakumulasi di luar daripada di dalam sitoplasma (Viola et al.
2001).
Kelompok rumput laut coklat mengandung beberapa rumput laut terbesar, dengan kelps, misalnya,
mencapai panjang 20 m. Di sisi lain, beberapa spesies coklat yang lebih kecil hanya tumbuh hingga
Panjangnya 60 cm. Rumput laut merah biasanya lebih kecil dari rumput laut coklat (Nomura 2004),
sementara hijau rumput laut adalah yang terkecil. Rumput laut hijau dikaitkan dengan aktivitas
gangguan, seperti fouling kapal, permukaan batu, dan danau (Raven & Taylor 2003). Contoh dari
setiap kelas ditunjukkan dalam Gambar 13.1

13.2.2 Ekologi Rumput Laut


Rumput laut tumbuh subur di lokasi di mana mereka terkena air laut dan sinar matahari. Proporsi
besar ditemukan di pantai (di zona pasang surut (lower littoral) dan di pinggiran sublittoral;
Gambar 13.2) (Chapman 1974), di pantai berbatu (Chopin & Sawhney 2009), dan di muara sungai
(Valiela et al. 1997). Rumput laut bentik yang lebih kecil akan menempel pada tanaman laut atau
batu yang lebih besar untuk perlindungan dari yang kuat arus laut (Lobban & Harrison 1997).
Rumput laut yang lebih kecil ini ada sebagai epiphytes (tanaman yang tumbuh pada tanaman lain).
Sebagai contoh, adalah umum untuk menemukan Polysiphonia lanosa (rumput laut merah) tumbuh
Ascophyllum nodosum (rumput laut coklat) atau Fucus spp. (Lining & Garbary 1992; Ciciotte &
Thomas 1997). Rumput laut yang tumbuh di pantai berlumpur atau berpasir telah menembus,
seperti pijakan tegap, yang memainkan peran dalam serapan nutrisi tetapi terutama berfungsi untuk
jangkar tanaman sehingga tidak dicuci dari pantai. Rumput laut juga ditemukan di muara, di mana
air laut dan campuran air sungai (segar), dan mekar di muara kaya nutrisi ditemukan di seluruh
dunia, seperti di Peel-Harvey Estuary di Australia dan Venice Lagoon di Italia. Beberapa rumput
laut juga tumbuh di air tawar; misalnya, Bangia (Rhodophyta) banyak ditemukan di berbagai
lokasi air tawar di Belanda (Geesink 1973). Namun, sebagian besar (seperti yang ditemukan di
danau) sensitif terhadap polusi dan mereka biasanya tumbuh di daerah konstan aliran air, karena
ini menyediakan nutrisi segar dan karbon dioksida (Graham & Wilcox 2000).
Rumput laut yang tumbuh di zona intertidal (pesisir) di pantai mengalami perendaman terus
menerus dan emersion karena aksi gelombang dan memperoleh sinar matahari untuk fotosintesis
selama emersi (Lobban & Harrison 1997). Dalam kondisi seperti itu, rumput laut juga
menyediakan habitat untuk berbagai kecil organisme, seperti nematoda dan amphipoda, karena
mereka memberikan perlindungan terhadap pemangsa dan gelombang aksi (Ranjitham et al. 2008).
Rumput laut coklat biasanya ditemukan di daerah intertidal bawah (dekat daerah mid-littoral yang
lebih rendah; Gambar 13.2) dari pantai di Jepang, Pasifik Amerika Utara, Australia Selatan, dan
Kepulauan Inggris (Graham & Wilcox 2000), sementara rumput laut merah umumnya ditemukan
di intertidal wilayah, tetapi lebih dekat ke daerah litoral yang lebih rendah (Gambar 13.2), perairan
tropis dan subtropis (Turner 2003). Rumput laut hijau sebagian besar adalah rumput laut yang
ditemukan di sepanjang pantai. Mereka mekar kaya nutrisi daerah, yang dapat menimbulkan
masalah bagi industri pariwisata di banyak negara (Raven & Taylor 2003; Chopin & Sawhney
2009).

13.2.3 Struktur dan Morfologi Rumput Laut


Tubuh utama rumput laut disebut sebagai "thallus," di mana stipe (batang) mendukung sisanya
tanaman (Graham & Wilcox 2000). Stipe bervariasi dalam fleksibilitas, memungkinkan rumput
laut bergerak bebas di dalam air. Daun, juga dikenal sebagai "pisau," menyediakan luas permukaan
yang besar untuk penyerapan sinar matahari, baik untuk fotosintesis dan untuk produksi spora
reproduksi. Baling-balingnya seperti gelembung struktur, yang dikenal sebagai "air bladders" atau
"floats," yang membuat bagian-bagian fotosintesis menjadi ringan sehingga mereka dapat
menyerap sinar matahari. Rumput laut juga memiliki struktur mirip akar yang dikenal sebagai
"holdfast" yang memungkinkannya berlabuh ke batu dan tumbuhan laut yang lebih besar (Edyvane
& Turner 2004).
Sebagian besar rumput laut bersifat multiseluler. Namun, ada beberapa, seperti ganggang hijau
siphonous, yang membentuk sel-sel tunggal multinukleat besar (acellular), yang didukung oleh
tekanan turgor. Lain Spesies Chlorophyta memiliki banyak siphon intersweaving sempit bukannya
sifon multiseluler (Lobban & Harrison 1997; Graham & Wilcox 2000). Komponen utama dinding
sel rumput laut adalah selulosa, asam fucinic, asam alginat, dan polisakarida (Kumar & Singh
1979; Viola et al. 2001; Rinaudo 2008; Rehm 2009). Selulosa memberikan dukungan untuk
dinding sel, sedangkan sulfat polisakarida di Fucus penting untuk melekatnya zigot fucoid ke
substrat intertidal, mencegahnya dicuci di lepas pantai (Graham & Wilcox 2000). Alginat, selulosa
dan pektin setara dengan rumput laut coklat, menyumbang 35% dari berat kering rumput laut
coklat. Rumput laut merah sebagian besar terdiri dari carrageenans dan agars (Rinaudo 2008;
Rehm 2009).

13.2.4 Penggunaan Rumput Laut


Rumput laut digunakan secara luas oleh manusia sebagai sumber makanan (McHugh 1991; Khan
& Satam 2003; Chopin & Sawhney 2009), sebagai pupuk dan kondisioner tanah, dalam kosmetik
(Patier et al. 1993; Turner 2003), sebagai pakan ternak dan suplemen pakan (Allen et al. 2001),
sebagai biomassa untuk bahan bakar (Chynoweth et al. 2001), dalam pengolahan air limbah,
dalam akuakultur terintegrasi, dan dalam pengobatan tradisional (McHugh 1991). Rumput laut
dieksploitasi sebagai sumber makanan di Jepang, Korea, dan Cina, dengan hampir 94% diperoleh
dari budidaya (McHugh 1991, 2003). Misalnya, rumput laut merah Porphyra, yang memiliki
protein tinggi konten (lebih tinggi dari kedelai), sering dikonsumsi di Jepang dengan nama "nori,"
di mana itu telah dibudidayakan sejak awal 1960-an (Fleurence 1999; Wikfors & Ohno 2001;
Turner 2003).
Rumput laut juga mengandung konsentrasi polisakarida yang tinggi, yang memiliki berbagai
macam aplikasi. Polisakarida yang larut dalam air (phycocolloids) banyak digunakan sebagai
penstabil dan penebalan agen di industri makanan (misalnya di jeli, yogurt, cokelat, sup, dll.), di
media kultur dan gel di laboratorium, dalam pembuatan cetakan dalam kedokteran gigi, dan dalam
dressing luka (Rinaudo 2008; Brownlee et al. 2009). Polisakarida yang tidak larut dalam air, di sisi
lain, dapat bertindak sebagai serat makanan (Burtin 2003). Rumput laut juga memiliki kandungan
mineral yang tinggi — setinggi 36% dari total berat kering (Burtin 2003). Misalnya, rumput laut
telah banyak digunakan sebagai suplemen, baik secara tradisional maupun dalam bentuk tablet,
untuk pengobatan gondok tiroid, karena kandungan yodium yang tinggi (Eliason 1998). Rumput
laut Konsumsi juga diyakini bermanfaat bagi wanita hamil, remaja, dan lansia karena kandungan
kalsiumnya yang tinggi (Eliason 1998). Selanjutnya, rumput laut telah banyak digunakan di bidang
pertanian sebagai pupuk dan pestisida tanaman. Di masa lalu, seluruh rumput laut digunakan,
tetapi semprotan ekstrak rumput laut sejak itu telah terbukti meningkatkan hasil, serapan hara,
ketahanan terhadap embun beku, dan kondisi stres, seperti baik untuk memperpanjang umur
simpan, meningkatkan perkecambahan biji, dan mengurangi serangan jamur dan serangga (Patier
et al. 1993; Rathore dkk. 2009).
Oleh karena itu, meskipun rumput laut telah dieksploitasi selama berabad-abad dalam berbagai
aplikasi, banyak dari ini dapat dianggap relatif "nilai rendah." Akibatnya, ada minat yang cukup
besar dalam pengembangan produk “nilai tambah” dari rumput laut, terutama sebagai sarana untuk
mendorong keberlanjutan pembangunan ekonomi di sektor kelautan (Fitzgerald et al. 2011; Freitas
dkk. 2012; Mohamed et al. 2012). Sebagaimana diuraikan dalam pengantar bab ini, rumput laut
mengandung banyak bioaktif senyawa, dengan aktivitas mulai dari antioksidan (Shanab 2007;
Devi dkk. 2008; Patra dkk. 2008; Cox dkk. 2010) untuk antiinflamasi (Boonchum dkk. 2011),
menurunkan kolesterol (Jimenez-Escrig & Sanchez-Muniz 2000; Hata dkk. 2001; Burtin 2003;
Sathivel dkk. 2008; Hassan dkk. 2011), antitumor (de Sousa dkk. 2007), prebiotik (Allen dkk.
2001; Burtin 2003; Gardiner dkk. 2008; O’Sullivan dkk. 2010), dan antimikroba (Shanab 2007;
Devi dkk. 2008; Patra dkk. 2008; Cox dkk. 2010; Boonchum et al. 2011). Fokus bab ini adalah
antimikroba yang berasal dari rumput laut. Meskipun rumput laut dikenal sebagai sumber
antimikroba, banyak penelitian yang dilakukan pada mereka hingga saat ini telah dilakukan secara
in vitro dengan ekstrak mentah. Penting untuk memisahkan, mengisolasi, dan mengidentifikasi
senyawa bioaktif (s) bertanggung jawab dan melakukan penelitian in vivo, terutama jika produk
dimaksudkan untuk digunakan dalam farmasi atau makanan fungsional.
Bagian berikut akan membahas tantangan yang terlibat dalam mengekstraksi, memisahkan,
mengisolasi, dan mengidentifikasi senyawa antimikroba dari rumput laut dan akan menawarkan
beberapa panduan tentang pemilihan metodologi yang tepat.

13.3 EKSTRAKSI SENYAWA ANTIMIKROBA DARI RUMPUT LAUT


Ada sejumlah masalah yang harus dipertimbangkan ketika mengekstraksi antimikroba senyawa
dari rumput laut. Ini termasuk penanganan sampel dan persiapan sebelum ekstraksi, jenis metode
ekstraksi yang digunakan, dan pemilihan pelarut yang tepat untuk ekstraksi bioaktif senyawa.

13.3.1 Persiapan Sampel


Langkah pertama adalah membersihkan biomas rumput laut segar dari garam, pasir, dan
kontaminasi epifit. Itu Langkah selanjutnya adalah menjaga sampel tetap segar dan terlindung dari
degradasi mikroba dan enzimatik selama waktu yang berlalu antara pengumpulan dan pemrosesan
sampel (Vadivambal & Jayas 2007). Pengeringan rumput laut segar adalah salah satu solusi.
Bahkan, sebagian besar penelitian dilakukan hingga saat ini, khususnya pada tanaman dengan obat
tradisional, data laporan yang dihasilkan dari sampel kering. Sampel dapat berupa oven, udara,
matahari, atau beku kering. Dalam banyak kasus, pengeringan juga meningkatkan hasil bioaktif.
Misalnya, dalam sebuah studi oleh Salvador dkk. (2007), semua 87 sampel rumput laut kering-
beku menunjukkan hasil ekstraksi yang lebih baik daripada rekan-rekan beku mereka,
menunjukkan bahwa pengeringan beku adalah metode superior untuk pelestarian senyawa bioaktif
dalam rumput laut, karena penghapusan air. Studi oleh de Campos-Takaki et al. (1988) dan Rao
& Parekh (1981) juga membuktikan bahwa rumput laut yang dikeringkan sebelum ekstraksi
menghasilkan aktivitas antimikroba yang lebih besar daripada rekan-rekan baru mereka
Sampel kering lebih mudah untuk ditangani, karena penghapusan air mengurangi ukuran dan berat
sampel. Sampel kering juga memiliki komposisi senyawa bioaktif yang relatif stabil dibandingkan
dengan sampel segar, faktor penting jika ekstrak harus digunakan sebagai agen antimikroba
(Ncube et al. 2010). Namun, dalam beberapa kasus sampel baru digunakan untuk ekstraksi, karena
teknik pengeringan dapat menyebabkan untuk degradasi senyawa bioaktif yang peka panas atau
sangat mudah menguap. Ini ditunjukkan dalam studi oleh Kolanjinathan & Stella (2009), di mana
ekstrak yang dihasilkan dari sampel udara kering memiliki lebih rendah aktivitas antimikroba dari
sampel segar, karena hilangnya beberapa senyawa volatil selama proses pengeringan udara.
Sejumlah penelitian telah meneliti pengaruh berbagai proses pengeringan pada bioaktivitas hayati.
Sebuah studi perbandingan efek dari tiga metode pengeringan yang berbeda (matahari, oven, dan
pengeringan beku) pada nilai gizi Sargassum hemiphyllum mengungkapkan bahwa pengeringan
beku diawetkan tertinggi kandungan asam amino, asam lemak tak jenuh ganda (PUFAs), dan
vitamin C dibandingkan dengan matahari dan pengeringan oven (Chan et al. 1997). Demikian pula,
Robic et al. (2008) menyimpulkan bahwa perlakuan udara panas adalah bukan metode pengeringan
yang cocok, karena pemanasan menyebabkan hilangnya senyawa volatil dan mengakibatkan
pengerasan dari bahan permukaan. Perlakuan yang lebih ringan (yaitu pengeringan beku)
ditemukan untuk mempertahankan sulfat polisakarida ulvan dari rumput laut hijau Ulva rotundata
(Robic et al. 2008). Pengeringan beku adalah juga ditemukan untuk lebih baik mempertahankan
senyawa lipofilik dalam rumput laut coklat Dictyota cilialata dan Dictyota menstrualis daripada
pembekuan saja (Cronin et al. 1995). Metode pengeringan lain yang biasa digunakan termasuk
microwave dan pengeringan oven. Gerard & Roberts (2004) melaporkan bahwa pengeringan
microwave adalah a metode yang baik untuk melestarikan antioksidan yang berasal dari tumbuhan
yang tidak peka panas, karena enzim bertanggung jawab untuk degradasi antioksidan dihancurkan
lebih cepat oleh transfer panas yang lebih cepat di microwave.
Pilihan perawatan pengeringan dengan demikian tergantung pada stabilitas senyawa bioaktif
dalam mencicipi. Misalnya, jika senyawa bioaktif peka terhadap panas, gelombang mikro atau
suhu tinggi perawatan oven tidak akan menjadi sarana yang baik untuk mengeringkan sampel.
Pengeringan matahari dan oven memiliki laju yang lebih lambat transfer panas, yang menghasilkan
degradasi enzim lebih cepat (Lim & Murtijaya 2007), membuat ini metode tidak cocok untuk
senyawa yang kurang stabil. Suhu tinggi dan durasi pengeringan yang lama dapat menyebabkan
penguapan senyawa volatil tanaman bersama dengan uap air selama pengeringan, dengan a
resultan hilangnya senyawa antioksidan (Vadivambal & Jayas 2007). Pengeringan beku adalah
pengeringan yang lebih baik metode jika sampel mengandung senyawa peka panas, tetapi harus
digunakan dengan hati-hati sebagai ekstrem vakum dapat menyebabkan penghilangan senyawa
yang tidak stabil dan mudah menguap (Cronin et al. 1995). Kesimpulan, pemilihan metode
pengeringan yang hati-hati diperlukan untuk mempertahankan kedua sampel dan senyawa bioaktif
yang dikandungnya.

13.3.2 Metode Ektraksi


Langkah pertama dari prosedur ekstraksi adalah isolasi senyawa yang diinginkan dari sel tanaman.
Untuk ekstraksi menjadi efisien, penting bagi pelarut untuk menembus sel. Senyawa menjadi
diekstraksi juga harus larut dalam sistem pelarut, untuk memungkinkan pengumpulan senyawa
bunga dari pelarut ekstraksi (Houghton & Raman 2003). Untuk memfasilitasi difusi pelarut ke
dalam sel, bahan tanaman sering dicampur menjadi ukuran partikel yang lebih kecil karena ini
meningkatkan permukaan daerah yang terkena pelarut. Meningkatkan suhu ekstraksi juga dapat
mendukung stabilisasi senyawa dalam pelarut (Sarker et al. 2006). Metode ekstraksi yang paling
sederhana melibatkan memungkinkan bahan tanaman untuk duduk dalam pelarut ekstraksi untuk
jangka waktu tertentu dan pada suhu yang bervariasi, dengan atau tanpa homogenisasi, sampai
pelarut jenuh dengan senyawa dari bahan tanaman (Houghton & Raman 2003; Sarker dkk. 2006).
Metode ini sederhana dan tidak memerlukan khusus peralatan. Namun, dapat menyebabkan
degradasi senyawa bioaktif yang tidak stabil jika dibiarkan lama periode waktu dan itu
menggunakan sejumlah besar pelarut (Sarker et al. 2006). Metode ekstraksi yang paling umum
digunakan kedua adalah ekstraksi Soxhlet. Metode ini kurang waktu dan pelarut tetapi tidak cocok
untuk ekstraksi senyawa termosensitif, seperti sampel terus dipanaskan (Houghton & Raman 2003;
Sarker et al. 2006). Dalam penelitian yang dilakukan oleh De Rodriguez & Kuruvadi (1991), nilai
karet dan resin yang lebih tinggi diperoleh dari penduduk asli Meksiko tanaman karet ketika
ekstraksi Soxhlet digunakan sebagai pengganti metode ekstraksi pelarut sederhana. Soxhlet
ekstraksi juga metode yang lebih baik untuk ekstraksi senyawa hidrokarbon alifatik pendek ("18
karbon) daripada ekstraksi cairan supercritical (SFE), tetapi kedua metode memiliki efisiensi yang
sama ketika itu datang ke ekstraksi hidrokarbon alifatik lebih lama (# 18 karbon) (Crespo & Yusty
2006). SFE lebih disukai daripada ekstraksi Soxhlet karena waktu berjalannya lebih pendek dan
pelarut yang lebih rendah konsumsi. Meski begitu, pengembangan metode yang tepat harus
dilakukan, sebagai kondisi yang berbeda mempengaruhi jenis senyawa yang diekstraksi. Misalnya,
meningkatkan suhu SFE dari asam lemak dari Sargassum hemiphyllum menghasilkan hasil yang
lebih rendah dari total lipid dan asam lemak, terutama senyawa hidrokarbon dari 22 karbon, tetapi
meningkatkan tekanan memfasilitasi ekstraksi yang lebih besar jumlah PUFA (Cheung et al.
1998).
Ekstraksi bantuan ultrasound (UAE) adalah metode lain yang dapat digunakan. Ini menggunakan
sonication untuk memecah dinding sel tanaman, menghasilkan peningkatan difusi pelarut ke dalam
sel dan dengan demikian pelepasan lebih banyak senyawa (Khan et al. 2010). Metode ini
memungkinkan penggunaan jumlah yang lebih kecil sampel dan memiliki biaya yang lebih rendah
(Roldan-Gutierrez et al. 2008). Dalam sebuah penelitian yang membandingkan berbeda metode
untuk ekstraksi hexabromocyclododecanes dari Sargassum fusiforme, ditemukan bahwa ekstraksi
cair bertekanan (PLE) dan UEA menghasilkan hasil yang lebih unggul dibandingkan dengan
microwave ekstraksi (MAE) atau ekstraksi Soxhlet (Han et al. 2010). MAE, versi perbaikan dari
Ekstraksi Soxhlet yang menggunakan energi gelombang mikro untuk memanaskan sampel,
menghasilkan waktu ekstraksi yang lebih singkat dan konsumsi pelarut yang lebih rendah. Namun,
seperti ekstraksi Soxhlet, itu tidak cocok untuk ekstraksi Senyawa peka panas.
Singkatnya, homogenisasi rumput laut dengan pelarut adalah metode ekstraksi yang paling
sederhana dan tidak tidak memerlukan peralatan mahal, tetapi mengkonsumsi pelarut dalam
jumlah besar dan dapat menghasilkan degradasi majemuk karena periode ekstraksi yang panjang.
Sebagai perbandingan, ekstraksi Soxhlet, SFE, PLE, UEA, dan MAE membutuhkan lebih sedikit
pelarut dan memiliki waktu ekstraksi yang lebih pendek, tetapi masing-masing memiliki
keterbatasan. Oleh karena itu, sebelum metode ekstraksi dipilih, orang harus mempertimbangkan
biaya dan waktu yang terlibat dan, yang paling penting, sifat-sifat senyawa bioaktif yang menarik.
Jika senyawa yang menarik tidak diketahui, metode ekstraksi pelarut sederhana dapat digunakan
bersamaan dengan waktu ekstraksi singkat untuk menghilangkan kemungkinan kehilangan
senyawa sebagai akibat dari suhu, tekanan, atau sonication

13.3.3 Pemilihan Pelarut


Selain metode ekstraksi, pilihan utama dalam ekstraksi senyawa antimikroba dari rumput laut
adalah pelarut yang tepat. Penting bahwa pelarut memiliki polaritas yang akan dihasilkan dalam
ekstraksi maksimum dari komponen target. Polaritas terkait dengan distribusi listrik mengisi
seluruh molekul dan khususnya untuk jumlah elektron $ dan elektron pasangan mandiri di
molekul, yang terkait dengan indeks polaritas (Houghton & Raman 2003). Indeks polaritas
mengukur tingkat interaksi pelarut dengan pelarut polar lainnya, dengan indeks yang lebih tinggi
menunjukkan bahwa pelarut lebih polar. Tabel 13.1 merangkum sifat antimikroba yang
ditunjukkan oleh berbagai rumput laut diekstraksi menggunakan pelarut dari polaritas yang
berbeda. Untuk senyawa hidrofilik, pelarut polar seperti metanol, etanol, dan aseton digunakan,
sementara untuk senyawa lipofilik lebih, diklorometana (DCM), heksana, atau pelarut nonpolar
lainnya digunakan.
Jika polaritas senyawa antimikroba tidak diketahui, sejumlah pelarut berbeda dengan kisaran
polaritas dapat digunakan, diikuti oleh skrining antimikroba, untuk menemukan pelarut ekstraksi
dengan polaritas yang cocok dengan komponen yang menarik. Misalnya, penyaringan Gracilaria
ekstrak changii untuk aktivitas antimikroba terhadap 22 bakteri, 6 khamir, dan 11 jamur
menunjukkan itu sampel diekstraksi menggunakan metanol, metanol-kloroform, dietil eter, etil
asetat, dan butanol yang sama efektif terhadap mikroorganisme yang diuji (Sasidharan et al. 2009).
Demikian pula, ekstraksi a berbagai macam rumput laut merah, coklat, dan hijau dari pantai India
dengan pelarut dari polaritas yang berbeda menunjukkan bahwa setiap ekstrak aktif terhadap
setidaknya satu dari Gram-positif patogen dan Bakteri gram negatif diuji (Karthikaidevi et al.
2009; Lavanya & Veerappan 2011) (Tabel 13.1). Sistem pelarut ini berkisar dari kutub (air) hingga
nonpolar (heksana), menunjukkan bahwa bioaktif komponen yang diekstraksi juga berkisar dari
kutub ke nonpolar.
Namun, mengekstrak rumput laut menggunakan berbagai pelarut memakan waktu, dan hanya
terbatas jumlah rumput laut dapat disaring secara bersamaan. Karena itu, sebagian besar penelitian
skrining mengekstrak secara luas kisaran rumput laut hanya dengan satu atau dua pelarut, tetapi
dengan pendekatan ini ada risiko kehilangan sebagian senyawa antimikroba ampuh lainnya dari
polaritas yang sama sekali berbeda. Dari literatur, sudah jelas bahwa mayoritas penelitian
menggunakan metanol, etanol, atau aseton sebagai pelarut pilihan untuk antimikroba ekstraksi dari
rumput laut (Tabel 13.1). Pelarut ini sering mengekstrak senyawa dengan spektrum yang sama
aktivitas. Sebagai contoh, ekstrak Codium adherens yang diperoleh menggunakan metanol, etanol,
atau aseton semua aktif terhadap Staphylococcus aureus, Streptococcus sp., Vibrio flurialis, dan
Salmonella sp., sedangkan yang dihasilkan dari Ulva reticulata menggunakan tiga pelarut yang
sama aktif terhadap Enterococcus sp., Proteus sp., Dan Salmonella sp. (Karthikaidevi et al. 2009).
Namun, ini benar tidak selalu berarti bahwa metanol, etanol, dan aseton adalah pelarut yang paling
cocok untuk ekstraksi. Sebuah studi skrining antimikroba dilakukan pada decorticatum Codium,
Caulerpa scalpelliformis, Gracilaria crassa, Acanthophora spicifera, Sargassum wightii, dan
Turbinaria conoides mengungkapkan bahwaair dan kloroform mampu mengekstrak senyawa
antimikroba yang paling kuat; itulah mereka aktif terhadap setidaknya 90% dari bakteri yang diuji,
sedangkan ekstrak aseton memiliki spektrum yang paling sempit kegiatan (Lavanya & Veerappan
2011). Oleh karena itu, pelarut ekstraksi yang paling cocok berbeda dari satu spesies rumput laut
/ genus ke yang lain.
Seperti yang baru saja disebutkan, metanol adalah salah satu pelarut yang paling umum digunakan.
Biasanya ekstrak senyawa antimikroba dengan spektrum aktivitas penghambatan terluas. Ekstrak
metanol keduanya Falkenbergia hillebrandii segar dan kering teduh (rumput laut merah)
menunjukkan antimikroba tertinggi aktivitas melawan S. Typhi, E. faecalis, dan Shigella sp .;
sebenarnya, mereka dua kali lebih aktif dari mereka dihasilkan menggunakan etil asetat atau DCM
(Manilal et al. 2009). Ekstrak Metanol dari beberapa rumput laut merah, seperti G. lithophila
(Manikandan et al. 2011) dan G. changii (Mariana et al. 2011) aktif terhadap E. coli multidrug
tahan, P. aeruginosa, dan S. aureus, dan ekstrak G. changii juga dapat membantu dalam
penyembuhan luka yang terinfeksi-methicillin-aureus aureus (MRSA) terkait-panas. Sebuah
angka penelitian lain juga telah menghasilkan ekstrak rumput laut metanol dengan aktivitas
antimikroba yang kuat (Tabel 13.1).
Aseton juga digunakan untuk ekstraksi antimikroba, karena kemampuannya untuk
mengekstraksinya secara luas berbagai senyawa. Ekstrak aseton G. edulis, H. musciformis, T.
conoides, dan S. myricystum aktif terhadap E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, K. pneumoniae, dan
E. aecalis (Kolanjinathan & Stella 2009), sedangkan yang diekstrak dari C. adherens, U. reticulata,
dan H. tuna aktif melawan K. pneumoniae, S. aureus, Proteus sp., dan P. aeruginosa (Karthikaidevi
et al. 2009). Dalam penelitian lain, ekstrak acetone ofChondrus crispus, Dilsea carnosa, Laurencia
pinnatifida, Polysiphonia lanosa, Ulva lactuca, Codium rapuh, Laminaria digitata, Laminaria
saccharina, Dictyota dichotoma, Ascophyllum nodosum, dan Halidrys siliquosa menunjukkan
aktivitas yang menjanjikan melawan S. aureus (Hornsey & Hide 1976). Eloff (1998)
mengembangkan sistem penilaian sewenang-wenang untuk mengevaluasi berbagai pelarut
(aseton, etanol, metanol, metilen diklorida, metanol-kloroform-air, dan air) untuk ekstraksi
senyawa antimikroba dari Anthocleista grandiflora. Makalah ini menunjukkan hal itu aseton
menghasilkan ekstrak dengan kapasitas antimikroba terbesar, karena diekstraksi baik hidrofilik
dan senyawa lipofilik (Eloff 1998).
Hal ini sering terjadi bahwa campuran pelarut digunakan untuk ekstraksi antimikroba dari rumput
laut. Misalnya, Cronin dkk. (1995) menggunakan campuran 2: 1 dari DCM dan metanol untuk
ekstraksi berbagai senyawa lipofilik dari Ulva sp. karena metanol, yang sangat polar alam,
menembus membran sel dan mengekstrak senyawa lipofilik. Senyawa lipofilik ini pada gilirannya
larut dalam DCM polaritas rendah. Pemulihan tinggi (90%) dari dictyol lipofilik diperoleh dari
Ulva sp. menggunakan pendekatan ini (Cronin et al. 1995). Ekstrak yang dihasilkan dari Palmaria
palmata dan C. crispus menggunakan 60% campuran metanol-air, etanol-air, dan aseton-air
ditemukan kedua aktivitas antioksidan dan antimikroba (Cox et al. 2010). Demikian pula, ekstrak
L. saccharina, L. digitata, dan H. elongate yang dihasilkan menggunakan 60% metanol-air
mengandung senyawa antimikroba dengan aktivitas penghambatan mirip dengan pengawet
makanan yang digunakan secara komersial natrium benzoate dan natrium nitrit (Gupta et al. 2010).
Bioaktivitas yang diamati dalam ekstrak tumbuhan mentah dapat disebabkan oleh satu atau
kombinasi dari senyawa yang terkandung dalam ekstrak. Beberapa senyawa memiliki efek sinergis
atau antagonis dengan orang lain dari sumber yang sama atau berbeda. Misalnya, minyak esensial
Pelargonium KSTRAPenambahan minyak esensial P. graveolens mengurangi dosis efektif
norfloxacin minimum dan berpotensi meminimalkan efek samping antibiotik (Rosato et al. 2007).
Selanjutnya, sesquiterpenes diisolasi dari Laurencia chondrioides kurang efektif terhadap beberapa
bakteri daripada yang berasal dari ekstrak kasar, menunjukkan efek sinergis seskuiterpen dengan
senyawa lain yang ditemukan di dalamnya rumput laut (Bansemir et al. 2004). Sebaliknya,
bioaktivitas suatu senyawa dapat dikurangi atau dihilangkan oleh kehadiran senyawa lain.
Misalnya, aktivitas anti-MRSA dalam suatu U. lactuca ekstrak hanya terlihat ketika ekstrak kasar
dipisahkan dengan kromatografi lapis tipis (TLC), yang memisahkan senyawa antagonis dari
mereka yang memiliki aktivitas antimikroba (Tan et al. 2011). Oleh karena itu, pemisahan ekstrak
mentah dan pemurnian senyawa antimikroba penting untuk memahami sifat-sifat antimikroba dan
membangun keberadaan senyawa lain dengan potensi efek sinergis atau antagonis.

13.4 PEMISAHAN DAN PEMURNIAN SENYAWA ANTIMIKROBA DARI


RUMPUT LAUT
13.4.1 Ekstraksi Pelarut-pelarut
Ekstraksi pelarut awal rumput laut menghasilkan ekstrak kasar yang mengandung berbagai macam
senyawa polaritas yang berbeda. Tidak ada langkah tunggal yang dikenal yang akan mengisolasi
senyawa individu dari ekstrak kasar. Total isolasi senyawa bioaktif harus dilakukan dengan
pertimbangan yang cermat. Gambar 13.3 menunjukkan contoh beberapa ekstraksi dan metode
isolasi yang digunakan oleh peneliti untuk mengisolasi kelas senyawa yang berbeda dari rumput
laut. Ekstrak mentah pertama harus difraksinasi menjadi sejumlah fraksi yang lebih besar dengan
polaritas atau berat molekuler yang serupa untuk memisahkan senyawa menjadi berbeda kelas
produk alami (Sarker et al. 2006). Ini dapat dicapai dengan menggunakan partisi cair-cair, di mana
senyawa tanaman dipisahkan berdasarkan perbedaan koefisien partisi mereka (Sarker et al. 2006).
"Koefisien partisi" didefinisikan sebagai rasio konsentrasi kesetimbangan antara dua pelarut yang
tidak dapat bercampur (Chiou et al. 1977).
Ekstraksi pelarut-pelarut adalah jenis partisi cair-cair yang digunakan untuk "membersihkan"
rumput laut mentah ekstrak. Dalam satu contoh, ekstrak kasar dipartisi dengan n-heksana (dalam
langkah "penghilangan") ke menghilangkan senyawa nonpolar seperti lipid, minyak, lilin, dan
pigmen klorofil (Houghton & Raman 2003; Sarker dkk. 2006). Ini diikuti dengan penambahan
kloroform atau DCM (hapus alkaloid yang lebih rendah polar, terpen, dan minyak atsiri), dietil
eter atau etil asetat (menghilangkan alkaloid polar, monoglikosida, fenolik, dan senyawa
terhalogenasi), butanol (menghilangkan glikosida terutama polar, termasuk polifenol), dan air
(menghilangkan gula, asam amino, dan glikosida kutub) (Houghton & Raman 2003; Vairappan
2003; Xu et al. 2003; Sarker dkk. 2006; Chakraborty dkk. 2010a). Untuk contoh, partisi ekstrak
etanol mentah dari U. lactuca (rumput laut hijau) dengan etil eter, etil asetat, heksana, dan air
menghasilkan fraksi etil eter yang terisolasi yang aktif terhadap MRSA (Kim et al. 2007). Jika
tidak, partisi ekstrak rumput laut metanol dengan dietil eter dan hasil air dalam pemisahan awal
senyawa aktif terhalogenasi, sementara partisi dengan kloroform dan metanol dapat menyebabkan
pemisahan terpen sedikit nonpolar (Gambar 13.3). Fraksi aktif ini dapat lebih lanjut dikenakan
ekstraksi fase padat (SPE) untuk mengisolasi senyawa aktif (Gambar 13.3)

13.4.2 Ekstraksi Fase Padat


SPE adalah metode memisahkan senyawa berdasarkan adsorpsi mereka ke fase padat. Itu
dipengaruhi oleh sifat fisik dan kimia dari senyawa (Thurman & Mills 1998; Sarkeret al. 2006).
Teknik SPE untuk isolasi dan pemurnian senyawa bioaktif termasuk kertas kromatografi (untuk
senyawa yang larut dalam air seperti karbohidrat, asam nukleat, dan fenolik senyawa), TLC (untuk
senyawa lipofilik seperti steroid, karotenoid, lipid, kuinin sederhana, dan klorofil), dan berbagai
metode kromatografi kolom lainnya (untuk asam lemak, mono dan seskuiterpen, hidrokarbon, dan
senyawa sulfur) (Harborne 1998; Arunkumar dkk. 2005; Chakraborty et al. 2010b). Dengan SPE,
pemisahan senyawa bergantung pada fase padat (partikel — biasanya berbasis silika — di mana
senyawa menempel) dan fase gerak (pelarut yang digunakan untuk melepaskan senyawa dari fase
padat). Pemisahan didasarkan pada fakta bahwa senyawa berbeda dalam minyak mentah ekstrak
akan memiliki sifat yang berbeda (yaitu bereaksi berbeda dengan pelarut yang berbeda dan
memiliki berbeda retensi ke fase padat). Teknik kromatografi yang sesuai — serta seluler fase (s)
-untuk pemisahan senyawa dalam ekstrak mentah tergantung pada sifat senyawa bunga.
Keuntungan menggunakan kromatografi kertas adalah: (1) kemudahan penggunaan, (2) tidak ada
persyaratan khusus atau peralatan mahal, dan (3) tingkat reproduktifitas tinggi (Chiou et al. 1977;
Thurman & Mills 1998). Kromatografi kertas telah banyak digunakan dalam kualifikasi dan
kuantifikasi asam amino nonprotein% -aminobutyric acid, diproduksi dari paocai, fermentasi Cina
tradisional produk nabati (Li et al. 2009). TLC mirip dengan kromatografi kertas tetapi memiliki
variasi yang lebih besar fase padat, meskipun yang paling umum adalah silika (Harborne 1998).
Metode ini cepat, mudah lari, dan murah, dan telah banyak digunakan dalam isolasi produk alami
bioaktif, terutama di Indonesia analisis biaya rendah (Poole 2003; Sarker et al. 2006). Misalnya,
telah digunakan untuk pemisahan senyawa antimikroba dari rumput laut Osmundaria serrata
(Barreto & Meyer 2006) dan Laurencia chondrioides (Bansemir et al. 2004). Metode ini cocok
untuk pemisahan senyawa dan pengujian antimikroba, dan dapat digunakan untuk keduanya secara
bersamaan dalam metode bioautografi (lihat Bagian 13.6.1.3).
Sedangkan kromatografi kertas dan TLC adalah teknik kromatografi planar, teknik kolom
melibatkan pengemasan fase diam — biasanya silika dengan berbagai ukuran partikel — ke dalam
tabung atau kolom (Thurman & Mills 1998). Sampel dimuat di bagian atas kolom, di mana ia
berinteraksidengan fase diam. Pemisahan selanjutnya dicapai melalui perubahan fase gerak
komposisi (Houghton & Raman 2003). Fase stasioner berbeda dengan fungsi berikat yang berbeda
kelompok digunakan untuk berbagai jenis pemisahan, termasuk fase normal (fase diam polar,
lesspolar fase gerak), fase terbalik (fase diam nonpolar, fase gerak polar), dan pertukaran ion (diisi
fase stasioner organik dengan fase gerak polar atau nonpolar) (Thurman & Mills 1998). Pemilihan
fase diam dan bergerak secara hati-hati diperlukan untuk isolasi senyawa bunga.
Untuk memperoleh senyawa murni, sejumlah siklus pemisahan mungkin diperlukan. Misalnya,
diisolasi bromofenol dari rumput laut Rhodomela confervoides, fraksi etil asetat pertama kali
dipisahkan melalui kolom silika di bawah elusi gradien kloroform-metanol, dan kemudian
menjalani kromatografi kolom ukuran eksklusi dengan kloroform-etil asetat (Xu et al. 2003). Itu
Senyawa terpisah selanjutnya dimurnikan menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC),
dengan beberapa yang direkristalisasi (Xu et al. 2003). Demikian juga beberapa teknik
kromatografi kolom digunakan untuk isolasi derivatif lanosol dari O. serrata (ganggang merah),
termasuk sejumlah siklus kromatografi kolom silika dengan fase gerak heksana-etil asetat, silika
gel TLC dengan fase gerak heksana-etil asetat, dan kromatografi kolom Sephadex LH-20 dengan
etanol fase gerak (Barreto & Meyer 2006).
Penelitian lain yang telah menggunakan metode kromatografi untuk isolasi senyawa antimikroba
dari rumput laut dirangkum dalam Tabel 13.2. Antimikroba yang diisolasi hingga saat ini dari
rumput laut telah diidentifikasi sebagai fenolik, terpene, senyawa terhalogenasi, dan lipid (Tabel
13.2). Tergantung pada sifat senyawa, mereka aktif terhadap berbagai agen infeksi yang relevan
secara klinis (beberapa multidrug-resistant) dan patogen bawaan makanan dan ikan. Beberapa
penelitian juga telah mengisolasi antivirus agen dari rumput laut coklat, yang sejak itu
diidentifikasi sebagai fucoidan (Ponce et al. 2003; Araya et al. 2011). Secara umum, rumput laut
merah dan coklat tampaknya menjadi sumber antimikroba yang lebih baik daripada rumput laut
hijau (Tabel 13.2).
13.5 ELUSIDASI STRUKTUR SENYAWA ANTIMIKROBA RUMPUT
LAUT
Langkah selanjutnya adalah penjelasan struktural senyawa antimikroba yang dimurnikan (s). Ini
memakan waktu dan menantang. Jika senyawa telah diidentifikasi, itu agak lebih mudah sebagai
perbandingan dan konfirmasi dengan database seperti MarinLit, Institut Nasional Standar dan
Teknologi (NIST 2012), dan CHEMnetBASE (www.chemnetbase.com) dapat dilakukan. Namun,
jika senyawa tersebut adalah metode baru, kimia, fisik, dan spektroskopi harus digunakan terlebih
dahulu (Sarker et al. 2006). Metode spektroskopi yang paling umum digunakan adalah:
spektroskopi ultraviolet-terlihat (UV-Vis), yang memberikan informasi tentang kromofora di
dalam senyawa; mass spectroscopy (MS), yang memberikan informasi tentang massa molekul,
rumus molekul, dan pola fragmentasi senyawa; inframerah (IR) spektroskopi, yang
mengidentifikasi kelompok-kelompok fungsional yang berbeda dalam senyawa; dan resonansi
magnetik nuklir (NMR), yang memberikan informasi tentang jumlah dan jenis karbon dan
hidrogen dominan (Sarker et al. 2006). Kristalografi sinar-X dapat dilakukan jika analisis
spektroskopi tidak dapat disimpulkan, karena ia menyediakan gambar tiga dimensi dari senyawa
tersebut (Colegate & Molyneux 2008). Tabel 13.3 merangkum beberapa senyawa antimikroba
yang diisolasi dari rumput laut yang telah dijelaskan secara struktural menggunakan satu atau lebih
teknik yang diuraikan di atas.
Teknik spektroskopi melibatkan absorbansi UV-Vis dan spektroskopi IR. Seperti telah disebutkan,
spektroskopi UV-Vis memberikan informasi tentang tipe-tipe senyawa, berdasarkan jenis ikatan
yang terbentuk. Sebagai contoh, senyawa organik tidak jenuh memiliki rentang absorbansi yang
luas dari UV ke daerah yang terlihat, tetapi senyawa terkonjugasi yang lebih panjang akan
menggeser puncak absorbansi ke panjang gelombang yang lebih panjang (Skoog 2004). Senyawa
jenuh memiliki rentang absorbansi yang lebih rendah 170-250 nm, tetapi keberadaan atom elektron
pasangan elektron (oksigen atau nitrogen) menggeser absorbansi ke panjang gelombang yang lebih
tinggi (&). Ini karena lebih sedikit energi yang dibutuhkan untuk eksitasi molekul, dan oleh karena
itu energi frekuensi rendah diserap. Spektroskopi IR juga dapat digunakan untuk menunjukkan
jenis ikatan antara atom dalam molekul yang menarik, berdasarkan getaran antar ikatan. Daerah
serapan yang signifikan termasuk puncak dari ikatan hidrogen antara gugus –OH yang terdeteksi
pada 3100–3600 cm − 1, tergantung pada pemasangan kelompok lain, dan dari gugus karbonil
dengan sinyal kuat antara 1630 dan 1850 cm − 1 (Field et al. 2008 ). Labdane diterpenoid yang
diisolasi dari U. fasciata memiliki absorbansi maksimum (& max) antara 225 dan 227nm dan
puncak yang signifikan antara 3415 dan 3563cm-1, menunjukkan adanya rantai samping -OH
(Tabel 13.3) (Chakraborty et al. 2010a) .
Gas kromatografi-spektrometri massa (GC-MS) menggunakan ionisasi elektron (atau kimia) untuk
membuat berbagai fragmen, yang dapat digunakan untuk perbandingan dengan database spektrum
massa perpustakaan. Namun, sebagian besar produk alami terlalu besar untuk analisis GC-MS,
sehingga kromatografi cair-massa spektroskopi (LC-MS) digunakan sebagai gantinya. Selain itu,
senyawa harus stabil secara termal dan memiliki titik didih rendah jika GC-MS akan digunakan.
LC-MS memberikan fragmentasi molekul besar yang lebih baik, sehingga memberikan spektrum
massa yang lebih baik. Namun, spektrum massa akan berbeda antara instrumen karena fragmen
molekul dihasilkan karena tabrakan energi rendah dari gas inert (Hill et al. 2009). Kadang-kadang,
penganalisis MS quadrupole time-of-flight (Q-TOF) digunakan, karena ini memberikan data yang
lebih akurat, dengan berbagai ukuran ion bergerak pada kecepatan yang berbeda, tanpa batas massa
(Cheng et al. 2008). Hal pertama yang diperiksa dalam spektrum massa adalah ion induk, diikuti
oleh puncak terbesar berikutnya, untuk menentukan jenis-jenis fragmen yang dihasilkan.
Misalnya, pola massa-ke-muatan (m / z) dari 125, 111, 97, 83, 69, 55, dan 43 adalah tipikal dari
ester metil asam lemak, sementara puncak tajam pada m / z 149 menunjukkan adanya phthalate
ester (Rane et al. 1993; George & Perst 2001). Senyawa isotop dapat dengan mudah dideteksi;
Unsur karbon dan nitrogen memiliki unsur "A + 1" (A adalah elemen monoisotop), di mana dua
puncak berbeda oleh satu unit massa, sementara oksigen, sulfur, silikon, klorin, dan bromin
menunjukkan puncak "A + 2", di mana puncak berbeda oleh dua satuan massa (Lee 1998). Klor
dapat dideteksi sebagai dua puncak sekitar 1: 3 rasio kelimpahan relatif (dua satuan massa
terpisah), sementara bromin dapat dideteksi sebagai tiga puncak sekitar 1: 2: 1 rasio kelimpahan
relatif (dua unit massa terpisah) (Lee 1998).
NMR terutama menyediakan lebih banyak informasi tentang hubungan antara atom karbon dan
hidrogen dalam molekul, memungkinkan pengaturan setiap elemen dan kelompok fungsional
mereka ditentukan. Data pergeseran kimia dalam spektra NMR menunjukkan fungsi yang ada
dalam molekul. Kombinasi data pergeseran kimia dan integrasi puncak dapat menghasilkan
informasi tentang jumlah dan jenis proton dan karbon yang ada dalam senyawa yang diminati.
Misalnya, triplet dalam spektrum 1H mengindikasikan bahwa hidrogen dilekatkan pada karbon
dengan dua proton yang berdekatan, sedangkan sinyal yang dideteksi pada 5,32 (1H) dan 111 ppm
(13C) menunjukkan adanya senyawa olefin dalam fucosterolmolecule yang diisolasi dari rumput
laut hijau. U. lactuca (Gibbons et al. 1968; El Ashry dkk. 2011). Teknik yang lebih kuat tersedia
untuk memberikan informasi yang lebih spesifik pada molekul yang menarik. Sebagai contoh,
spin-spin coupling dalam molekul dapat diperoleh dengan menggunakan spektroskopi korelasi
(COZY), yang mengungkapkan jumlah hidrogen yang melekat pada atom karbon tertentu. Teknik
pergeseran kimia heteronuklir seperti koherensi tunggal-kuantum heteronuklear (HSQC) dan
korelasi multi-kuantum heteronuklir (HMQC) memberikan informasi tentang atom hidrogen yang
tepat yang melekat pada atom karbon tertentu (Byrne 2008). Metode pergeseran kimia heteronuklir
jangka panjang memberikan informasi terakhir: keterikatan yang tepat dari setiap atom karbon
dalam molekul (Byrne 2008).
Seringkali ditemukan bahwa setelah senyawa diidentifikasi, standar dapat dibeli secara komersial
untuk konfirmasi. Sebagai contoh, keberadaan fucosterol dalam U. lactuca dan E. intestinalis
dikonfirmasi dengan perbandingan dengan IR, MS, dan spektra NMR yang diperoleh dari
fucosterol yang tersedia secara komersial (Gibbons et al. 1968). Setelah senyawa telah
diidentifikasi, sifat fisik seperti warna, titik leleh, dan titik didih dapat diselidiki sebagai tes
konfirmasi.

13.6 UJI IN VITRO AKTIVITAS ANTIMIKROBA RUMPUT LAUT DAN


SENYAWA TURUNAN RUMPUT LAUT
Sejumlah penelitian telah mengevaluasi rumput laut secara in vitro untuk aktivitas antimikroba.
Bagian ini pertama-tama akan menguraikan metode yang digunakan dan kemudian
mendiskusikan hasil studi. Metode yang paling umum adalah disk-difusi, kaldu-pengenceran,
dan uji bioautografi (Rios et al. 1988; Cos et al. 2006; Reller et al. 2009). Masing-masing akan
dibahas di sini, bersama dengan kelebihan dan kekurangannya. Metode yang berbeda diperlukan
untuk penilaian aktivitas antiviral, tetapi ini tidak akan dibahas di sini.

13.6.1 Metode Menguji Aktivitas Antimikroba Rumput Laut

Pada setiap langkah dari proses penemuan antimikroba, metode yang dapat diandalkan dan mudah
digunakan untuk menilai aktivitas antimikrobial diperlukan. Ini berlaku dari penyaringan awal
ekstrak kasar sampai ke evaluasi senyawa murni. Faktor yang paling penting untuk
dipertimbangkan ketika memilih suatu uji meliputi: (1) kemudahan penggunaan, (2) waktu yang
diperlukan, (3) biaya, (4) sifat ekstrak rumput laut yang diuji dan jumlah yang tersedia, (5) jenis
indikator bakteri dan inokulum, (6) jenis media kultur, dan (7) kondisi inkubasi (Rios et al. 1988;
Cos et al. 2006).

13.6.1.1 Alat Uji Difusi-lempeng dan Difusi-sumur


Uji difusi-lempeng adalah uji yang paling umum digunakan untuk pengujian antimikroba dalam
penelitian produk alami, dan metode standar telah ditetapkan oleh Clinical and Laboratory
Standards Institute (CLSI) (Wikler et al. 2009a). Ekstrak alami dimuat ke disk kertas kosong dan
ditempatkan ke permukaan media agar yang telah diusap dengan kultur bakteri yang relevan
(disesuaikan dengan 107-108 unit pembentuk koloni (CFU) / ml atau 0,5 McFarland Standard) .
Uji difusi-sumur didasarkan pada prinsip yang sama, kecuali bahwa substansi uji ditambahkan ke
dalam sumur yang sedang dalam media agar. Pelat agar-agar diinkubasi dan aktivitas antimikroba
dinilai berdasarkan ada / tidaknya zona penghambatan jelas di sekitar disk (Cos et al. 2006; Wikler
et al. 2009a). Namun, metode ini tergantung pada difusi senyawa ke dalam agar agar sehingga ada
kemungkinan hasil falsepositif dari senyawa yang memiliki sifat difusi yang baik tetapi kapasitas
penghambatan rendah (Rios et al. 1988; Scorzoni et al. 2007). Selanjutnya, meskipun berguna
untuk penyaringan awal kualitatif rumput laut untuk aktivitas antimikroba, metode ini tidak dapat
digunakan untuk menentukan konsentrasi hambat minimum (MIC) dari ekstrak / senyawa
antimikroba.
Keuntungan dari metode disk dan difusi sumur adalah bahwa mereka hanya memerlukan sedikit
sampel, mereka sederhana dan memfasilitasi penyaringan cepat dari beberapa sampel secara
bersamaan di piring yang sama, dan mereka murah dan mudah dilakukan. Kerugiannya adalah
bahwa mereka tidak dapat digunakan untuk senyawa lipofilik atau senyawa yang tidak dapat
berdifusi melalui agar dan, sebagaimana telah disebutkan, mereka tidak dapat digunakan untuk
menentukan nilai MIC (Rios dkk. 1988; Hadacek & Greger 2000; Cos et al. 2006; Reller et al.
2009). Uji difusi disk secara khusus telah banyak digunakan untuk studi skrining antimikroba yang
besar pada rumput laut yang dikumpulkan dari berbagai daerah di dunia, dari Asia (Horikawa et
al. 1999; Kandhasamy & Arunachalam 2008; Boonchum dkk. 2011) ke Eropa (Gonzalez del Val
dkk. 2001; Taskin dkk. 2007; Ibtissam dkk. 2009) ke Benua Amerika (Lustigman & Brown 1991).
Tes ini memungkinkan pemilihan ekstrak antimikroba yang paling menjanjikan untuk studi lebih
lanjut (yaitu pemisahan, isolasi, dan karakterisasi senyawa antimikroba).

13.6.1.2 Alat Uji Pengenceran Kaldu


Metode pengenceran kaldu didasarkan pada dispersi homogen dari sampel uji dalam media biakan
(Cos et al. 2006; Wikler et al. 2009b) dan karena itu hanya cocok untuk zat yang mampu larut
dalam medium kultur. Ini adalah metode yang paling tepat untuk penentuan kuantitatif MIC dari
ekstrak / agen antimikroba (s) (Rios dkk. 1988; Cos dkk. 2006; Reller dkk. 2009). Namun metode
yang paling rumit, sebagai sistem pengiriman yang tepat harus digunakan untuk membubarkan
senyawa (s) dalam medium kultur. Di sisi lain, ini juga merupakan metode yang paling efisien,
karena dapat menentukan sifat bakteriostatik dan bakterisida dari ekstrak rumput laut (Cos et al.
2006). Kuantifikasi efek penghambatan dapat diperoleh dengan mengukur kekeruhan yang
disebabkan oleh pertumbuhan bakteri atau perubahan warna dari pewarna indikator tetrazolium
(Cos et al. 2006). Yang terakhir ini didasarkan pada fakta bahwa sel bakteri hidup akan mengubah
pewarna tetrazolium tak berwarna ke dalam formazan senyawa berwarna merah.
Seperti diuraikan di sini, metode pengenceran kaldu digunakan untuk penentuan nilai MIC,
biasanya dari senyawa yang diisolasi dan dimurnikan yang telah diperoleh dari ekstrak kasar.
Misalnya, senyawa antimikroba terhalogenasi yang diisolasi dari Laurencia spp. ditemukan
memiliki nilai MIC 100 (g / ml terhadap V. cholera dan 125 (g / ml terhadap Staphylococcus sp.
dan Salmonella sp (MIC yang lebih rendah menunjukkan agen antimikroba yang lebih poten)
(Vairappan et al. 2010). beberapa kasus, uji pengenceran kaldu digunakan untuk menentukan MIC
dari ekstrak kasar, misalnya, dalam penelitian terhadap 21 rumput laut coklat yang dikumpulkan
dari pantai Irlandia dan Inggris, semua ekstrak mentah yang dihasilkan menggunakan kloroform:
metanol ditemukan mengandung aktivitas antimikobakteri dan antiprotozoan dengan MIC 256 (g
/ ml terhadap kedua mikroorganisme (Spavieri et al. 2010).

13.6.1.3 Uji bioautografi


Bioautografi didasarkan pada difusi senyawa yang terpisah dari pelat TLC ke dalam agar. Aktivitas
penghambatan divisualisasikan menggunakan agen pendeteksi aktivitas dehidrogenase seperti
pewarna tetrazolium, yang fungsinya telah diuraikan (Rios et al. 1988). Metode ini cepat dan
serbaguna dalam mengidentifikasi senyawa terisolasi yang memiliki sifat antimikroba (Hadacek
& Greger 2000). Metode bioautographic overlay yang sederhana melibatkan overlay lapisan
bakteri-benih agar pada piring TLC dengan ekstrak, tanpa terlebih dahulu memisahkan senyawa
(Botz et al. 2005). Namun, mayoritas penelitian memilih untuk memisahkan senyawa sebelum
overlaying piring, karena ini tidak hanya mengungkapkan jumlah senyawa yang terpisah tetapi
juga mengidentifikasi fraksi yang memiliki aktivitas antimikroba. Sebagai contoh, senyawa anti-
MRSA dari U. lactuca berhasil dipisahkan dari senyawa nonaktif hanya dengan meningkatkan
pemisahan TLC ke pemisahan TLC preparatif berdasarkan hasil bioautografi (Tan et al. 2011).
Hal ini membuat prosedur pemisahan lebih mudah, karena area yang mengandung senyawa
antimikroba dapat dibedakan dengan bioautografi kemudian dikeluarkan dari pelat TLC dan
digunakan sebagai bahan awal untuk langkah pemisahan berikutnya. Campuran senyawa asam-
rantai-lemak-panjang, antimikobakteri berhasil diisolasi dari Polysiphonia virgata menggunakan
metodologi fraksinasi yang dipandu biotopografi ini (Saravanakumar et al. 2008). Keuntungan lain
dari bioautografi adalah pemisahan ekstrak mentah oleh TLC memungkinkan pemisahan senyawa
antagonis. Misalnya, dalam studi oleh Tan et al. (2011), ekstrak U. laktuca mentah tidak
menunjukkan aktivitas antimikroba ketika diuji menggunakan uji difusi disk. Namun, ketika
dipisahkan dan diperiksa dengan bioautografi, zona inhibisi besar diamati, menunjukkan bahwa
senyawa antimikroba berhasil dipisahkan dari senyawa antagonis dengan TLC (Tan et al. 2011).
Kerugian dari metode ini adalah bahwa ia membutuhkan penggunaan pewarna tetrazolium untuk
visualisasi zona inhibisi dan pemilihan fase gerak yang sesuai untuk pemisahan senyawa antagonis
yang berhasil.
Selanjutnya, tidak seperti uji difusi-cakram dan pengenceran kaldu, tidak ada metode standar untuk
bioautografi senyawa alami. Singkatnya, uji difusi disk dapat digunakan untuk skrining cepat
sejumlah besar sampel rumput laut untuk aktivitas antimikroba, tetapi bioautografi dapat
digunakan jika pemisahan dan isolasi senyawa antimikroba adalah tujuan akhir. Setelah senyawa
telah diisolasi, metode pengenceran kaldu dapat digunakan untuk menentukan MIC dari agen
antimikroba (s). Pemilihan bioasai yang tepat adalah penting, karena memfasilitasi penilaian yang
akurat dari kapasitas antimikroba ekstrak rumput laut dan / atau senyawa murni yang berasal dari
rumput laut. Bagian berikut akan merangkum hasil dari studi yang telah mengevaluasi aktivitas
antimikroba / anti-infeksi rumput laut dan senyawa turunan rumput laut secara in vitro dan in vivo
hingga saat ini.

3.6.2 Uji In Vitro Aktivitas Antimikroba Rumput Laut


Studi aktivitas antimikroba rumput laut tanggal kembali ke 1954, ketika brownseaweed A.
Nodosum ditemukan aktif terhadap berbagai bakteri Gram-positif dan Gram-negatif, termasuk K.
pneumonia, M. pyogenes, E. coli, dan P. aeruginosa (Vacca & Walsh 1954). Beberapa penelitian
yang lebih baru akan dirangkum di sini. Target mereka biasanya bakteri (meskipun beberapa
penelitian telah menyelidiki aktivitas antivirus dan antijamur), yang berkisar dari patogen manusia,
hewan, dan ikan hingga yang menyebabkan penyakit bawaan makanan. Ekstrak metanol dari
rumput laut merah, coklat, dan hijau dari Laut Aegea di Turki (Taskin et al. 2007) dan rumput laut
hijau dan coklat dari pantai Atlantik dan Mediterania Maroko (Ibtissam dkk. 2009) menunjukkan
aktivitas yang menjanjikan melawan bakteri patogenik, seperti S. aureus, E. faecalis, E. coli, dan
E. aerogenes. Ekstrak aseton, dihasilkan dengan 1: 2 b / v sampel / pelarut dari Halimedia gracilis
(Chlorophyta), Gracilaria edulis, Hypnea musiformis (Rhodophyta), Turbinaria conoides, dan
Sargassum myricystum (Phaeophyta) dari pantai tenggara India, aktif melawan manusia
bakteri Gram negatif patogen E. coli dan P. aeruginosa, serta patogen Gram-positif S. aureus, K.
pneumoniae, dan E. faecalis (Kolanjinathan & Stella 2009). Beberapa rumput laut juga dilaporkan
aktif terhadap bakteri yang resistan terhadap berbagai obat, seperti MRSA (Horikawa et al. 1999;
Kim et al. 007; Amghalia et al. 2009) dan strain resisten antibiotik E. coli, K. pneumoniae, dan P
Aeruginosa (Manikandan et al. 2011).
Ekstrak air yang dihasilkan dari T. conoides menunjukkan spektrum aktivitas antimikroba yang
luas terhadap patogen kulit, termasuk MRSA, Proteus mirabilis, dan Candida albicans (Boonchum
et al. 2011). Juga telah dilaporkan bahwa sterol yang diisolasi dari U. lactuca dapat berpotensi
digunakan sebagai pengganti antibiotik ampisilin yang umum digunakan, agen antijamur dapat
digunakan, dan agen antiinflamasi indometasin (Awad 2000). Sterol memiliki efek antimikroba,
antijamur, dan antiinflamasi yang serupa / lebih baik dibandingkan sterol dibandingkan dengan
perlakuan standar bila digunakan pada konsentrasi yang sama secara in vitro (Awad 2000). Hal ini
menunjukkan bahwa rumput laut mengandung banyak senyawa bioaktif dengan potensi untuk
menggantikan obat yang tersedia secara komersial saat ini.
Ekstrak rumput laut juga telah ditemukan efektif terhadap patogen bawaan makanan dan karena
itu mungkin memiliki potensi penggunaan sebagai biopreservatif. Lima dari enam ekstrak metanol
mentah yang dihasilkan dari rumput laut Irlandia yang dapat dimakan menunjukkan aktivitas
antimikroba yang kuat terhadap patogen bawaan makanan Salmonella Abony dan Listeria
monocytogenes pada konsentrasi antara 0,4 dan 8,0 mg / ml, tergantung pada spesies rumput laut
(Cox et al. 2010) . Itu juga menemukan bahwa ekstrak metanol (1: 10 b / v) yang dihasilkan dari
Haligra dan Sargassum spp. lebih unggul dalam aktivitas mereka melawan S. Aureus yang
ditularkan melalui makanan dibandingkan dengan pengawet makanan sintetis natrium benzoat,
bahkan pada konsentrasi yang lebih rendah (Devi dkk. 2008; Patra dkk. 2008). Sargassum
dentifolium, Laurencia papillosa, dan Jania corniculata juga memiliki spektrum khasiat
antimikroba yang luas, menghambat bakteri Gram-positif dan Gram-negatif dan C. albicans
(Shanab 2007). Sebuah studi yang lebih baru dari ekstrak etil asetat antimikroba yang kuat dari
Padina tetrastomatica (rumput laut coklat) dan Jania rubens (rumput laut merah) dari pantai barat
India mengungkapkan adanya fenol, tanin, saponin, glikosida jantung, terpenoid, alkaloid, dan
flavonoid, yang mungkin bertanggung jawab atas aktivitas ekstrak ini (Kotnala dkk. 2009).
Semua studi ini menunjukkan bahwa senyawa yang ditemukan dalam rumput laut memiliki
aktivitas antimikroba yang kuat dan berpotensi digunakan untuk menggantikan obat sintetik dan
pengawet makanan yang biasa digunakan, banyak yang memiliki efek samping, belum lagi
perkembangan resistensi bakteri terhadap mereka. Namun, studi rinci tentang senyawa spesifik
yang bertanggung jawab untuk efek antimikroba diperlukan sehingga dosis yang tepat dan / atau
tingkat inklusi dapat ditentukan dan persetujuan peraturan dapat diperoleh. Misalnya, Bansemir
dkk. (2004) menemukan bahwa dua turunan seskuiterpena dari alga merah Laurencia chondrioides
bertanggung jawab atas aktivitas antimikroba melawan sejumlah patogen manusia dan ikan.
Sementara hanya 200 (g / ml dari sesquiterpenes terisolasi cukup untuk mendapatkan efek
antimikroba, 2 mg / ml ekstrak kasar diperlukan. Senyawa lanosol biologis aktif juga telah diisolasi
dari rumput laut merah O. serrata, yang menunjukkan bakteriostatik tinggi dan aktivitas fungistatik
pada konsentrasi 270 dan 690 (g / ml, masing-masing (Barreto & Meyer 2006).
Studi baru-baru ini diterpenoid yang diisolasi dariU. fasciata melaporkan aktivitas antimikroba
yang menjanjikan terhadap patogen ikan Gram-negatif multiresisten pada konsentrasi serendah 30
(g / ml (Chakraborty et al. 2010a). Oleh karena itu, sebagaimana diuraikan dalam bagian
sebelumnya, pemisahan dan isolasi senyawa antimikroba dari ekstrak rumput laut mentah adalah
sangat penting.

13.6.3 Aktivitas Antiadesi Rumput Laut


Sebagian besar agen antimikroba bekerja dengan membunuh sel bakteri melalui penghancuran
dinding sel (Bugg & Walsh 1992) atau gangguan dengan pompa penghabisan pada membran luar
(Ma et al. 1994; Nikaido 1998; Beveridge 1999; Pag`es et al. 2005; Pag`es & Amaral 2009; Bolla
dkk. 2011). Namun, ada kelas senyawa lain, yang disebut sebagai senyawa "antiadhesion", yang
mencegah pengikatan patogen ke sel inang (Wade et al. 1994; Ofek dkk. 2003; Abreu & Barreto
2012). Agar bakteri menjadi patogen, mereka harus mengikat ke sel inang, menjajah area umum,
dan kemudian dalam beberapa kasus menyerbu / menginfeksi sel. Oleh karena itu, jika suatu
senyawa dapat berhasil menghambat pelekatan patogen ke sel inang, ia dapat mencegah infeksi.
Makanan yang paling umum dipelajari dengan aktivitas antiadhesion adalah cranberry dan susu
manusia. Proanthocyanidins hadir dalam cranberry telah terbukti bertanggung jawab untuk
mencegah lampiran E. coli uropatogen untuk host sel-sel uroepithelial, sehingga mencegah infeksi
saluran kemih (UTI) (Howell 2007; Abreu & Barreto 2012). Demikian pula, berbagai jenis
oligosakarida hadir dalam ASI dapat bertindak sebagai inhibitor adhesi bakteri dalam usus,
melindungi bayi yang baru lahir terhadap penyakit gastrointestinal (Ofek et al. 2003; Abreu &
Barreto 2012).
Rumput laut juga telah dilaporkan mengandung senyawa dengan sifat antiadhesion. Sebagai
contoh, dosis rendah (1 (g / ml) fucoidan sulfat yang diekstraksi dari rumput laut Mekabu (Undaria
pinnatifida) efektif dalam mengurangi jumlah oosit Cryptosporidium parvum yang melekat pada
sel usus in vitro (Maruyama et al. 2007). Maruyama dkk. al. (2007) menyimpulkan bahwa dosis
ini tidak beracun baik untuk sel usus dan oosit dan oleh karena itu pengurangan jumlah oosit adalah
karena sifat antiadhesive dari fucoidan sulfat dan tidak efek antiparasit dari ekstrak. Para penulis
yang sama juga menyarankan bahwa adalah komponen sulfat dari fucoidan yang bertanggung
jawab untuk pencegahan lampiran oosit, karena fucoidan yang tidak digantikan tidak
efektif.Dalam studi lain, Mandal et al. (2007) melaporkan bahwa fucan sulfat diekstrak dari
Cystoseira indica menghambat adsorpsi virus Herpes simplex ( HSV) pada sel Vero (African green
monkey kidney) tetapi tidak memiliki efek antivirus langsung ketika diuji secara in vitro.
Penghambatan pelekatan virus lebih efektif ketika Sel Vero terkena polisakarida sebelum adsorpsi
virus daripada setelah paparan virus, lebih lanjut mendukung mekanisme antiadhesion (Mandal et
al. 2007).
Selain aktivitas antiadhesion terhadap parasit dan virus, ekstrak rumput laut juga telah ditunjukkan
untuk mencegah keterikatan bakteri dengan sel inang. Sebagai contoh, dalam percobaan
menggunakan berbagai jenis fucoidan yang diekstrak dari dua genus makroalga, Cladosiphon dan
Fucus, dilaporkan bahwa fucoidan sulfat mencegah perlekatan Helicobacter pylori pada lambung
lambung babi in vitro (Shibata dkk. 2003). Studi-studi ini, meskipun terbatas, menunjukkan bahwa
polisakarida — terutama polisakarida tersulfat — dari rumput laut coklat memiliki potensi untuk
bertindak sebagai zat antiadhesion terhadap bakteri, parasit, dan virus. Studi tambahan diperlukan,
terutama dengan senyawa dari rumput laut merah dan hijau.

13.6.4 Uji Aktivitas Antimikroba Dan Antiadhesi Rumput Laut Dalam


Penelitian Pada Hewan
Studi in vitro memberikan data yang berguna tentang aktivitas antimikroba rumput laut,
memfasilitasi pemilihan spesies yang paling menjanjikan dan memungkinkan identifikasi senyawa
yang bertanggung jawab. Namun, studi in vivo juga diperlukan, terutama jika suatu produk sedang
dikembangkan dan persetujuan peraturan sedang dicari. Studi in vivo pada akhirnya harus
dilakukan pada manusia, tetapi uji coba pada hewan cukup jika produk tersebut ditujukan untuk
digunakan hanya pada hewan. Percobaan pada hewan juga dilakukan sebagai langkah awal untuk
membangun kemanjuran dan keamanan sebelum melanjutkan studi pada manusia. Antimikroba
rumput laut dapat memiliki sejumlah aplikasi pakan biomedis, hewan, makanan, atau hewan,
tergantung pada spektrum aktivitas mereka. Karena fokus dari bab ini adalah makanan fungsional,
hanya penelitian hewan yang telah mengevaluasi pemberian oral rumput laut atau senyawa turunan
rumput laut yang akan dibahas.
Lebih sering daripada tidak, percobaan makan pada hewan ternak menyelidiki efek pada bakteri
indikator usus, bukan pada patogen itu sendiri. Biasanya, kedua indikator menguntungkan dan
patogenik diukur; ini penting, karena tujuannya adalah untuk menemukan agen antimikroba yang
cukup selektif untuk menargetkan usus patogen tanpa mempengaruhi bakteri komensal. Namun,
tujuan ini tidak selalu dipenuhi dengan ekstrak rumput laut. Misalnya, suplementasi diet dengan
ekstrak A. nodosum mentah pada babi finisher menghasilkan berkurangnya jumlah coliform ileum
tetapi juga mengurangi bifidobacteria cecal, yang dianggap menguntungkan (Gardiner et al. 2008).
Demikian pula, Reilly dkk. (2008) melaporkan penurunan enterobacteria tetapi juga pada
bifidobacteria dan lactobacilli yang berpotensi menguntungkan pada sekum dan / atau usus babi
yang disapih yang diberi ekstrak L. digitata yang mengandung laminan dan fucoidan. Efek serupa
terlihat pada kelompok yang diberi L. hiperborea (juga mengandung laminan dan fucoidan),
kecuali enterobakteria yang tidak berkurang. Namun, kombinasi dari kedua ekstrak menghasilkan
pengurangan enterobacteria dan lactobacilli di sekum dan kolon tetapi tidak berpengaruh pada
bifidobacteria, menunjukkan bahwa kombinasi ekstrak rumput laut mungkin menguntungkan.
Mengidentifikasi senyawa (s) yang bertanggung jawab untuk aktivitas antimikroba dan
menentukan aktivitas mereka in vivo memungkinkan untuk pemilihan agen yang paling
berkhasiat. Misalnya, McDonnell dkk. (2009) menemukan bahwa laminasi rumput laut yang diberi
makan sendiri atau dalam kombinasi dengan fucoidan mengurangi fecal E. coli pada babi weanling
tetapi tidak ada pengobatan yang mempengaruhi lactobacilli. Namun, fucoidan sendiri
meningkatkan lactobacilli dan oleh karena itu penulis menyarankan bahwa laminan memiliki
aktivitas antimikroba dan fucoidan bertindak sebagai prebiotik; yaitu, selektif merangsang bakteri
usus yang menguntungkan. Ekstrak rumput laut laminar-fucoidan juga menurunkan E. coli feses
pada babi sapih yang diberi makanan rendah atau laktosa tinggi dibandingkan dengan mereka yang
diberi makanan nonseaweed, sampai tingkat yang sama dengan yang diamati pada babi yang diberi
diet laktosa tinggi saja (O'Doherty et al. 2010). Data ini menunjukkan bahwa ekstrak rumput laut
dapat bertindak sebagai pengganti yang lebih efektif untuk laktosa dalam diet babi. Sebuah studi
oleh Janczyk et al. (2010) juga melaporkan efek antimikroba di usus babi yang diberi alginat
(polisakarida yang diisolasi dari dinding sel rumput laut coklat), tetapi hanya genus Lactobacillus
yang berpotensi menguntungkan yang berkurang. Namun, analisis molekuler dari mikrobiota usus
dengan denaturasi elektroforesis gel gradien juga menunjukkan keragaman mikroba yang lebih
tinggi di usus kecil bagian distal babi yang diberi alginat. Sepengetahuan kami, ini adalah satu-
satunya penelitian hingga saat ini yang telah meneliti efek dari senyawa rumput laut / turunan
rumput laut pada mikroflora usus pada tingkat molekuler.
Beberapa penelitian pada hewan secara khusus berfokus pada aktivitas antimikroba ekstrak rumput
laut terhadap patogen enterik seperti E. coli, Salmonella, Listeria, Shigella, Campylobacter, dan
sebagainya. Mereka yang melakukannya dengan maksud untuk mengurangi pelepasan patogen
pada hewan ternak sebagai strategi untuk meningkatkan keamanan pangan; yaitu mencegah
penularan ke manusia. Meskipun demikian, penelitian ini memberikan beberapa wawasan ke
dalam aktivitas antimikroba spesifik dari rumput laut yang diberikan secara oral di saluran usus.
Misalnya, persiapan kering rumput laut coklat A. nodosum mengurangi penumpahan feses E. coli
0157: H7 pada sapi yang baik secara alami melepaskan atau sengaja ditantang dengan patogen,
yang pada gilirannya mengurangi kontaminasi karkas (Braden et al. 2004; Bach et al. 2008). Di
sisi lain, dalam sebuah percobaan yang dirancang untuk mensimulasikan infeksi usus pasca-
menyapih pada babi, laminaran dan laminatedan rumput laut baik fucalan penipisan Salmonella
Typhimurium (Sweeney et al. 2011).
Secara keseluruhan, beberapa penelitian tentang makan babi dan sapi telah menunjukkan bahwa
ekstrak rumput laut dan senyawa rumput laut dapat mengurangi bakteri patogen atau patogen
enterik in vivo. Tidak ada efek toksik yang diamati pada hewan ternak sampai saat ini, dan pada
kenyataannya pengurangan patogen disertai dalam banyak kasus oleh peningkatan kinerja
pertumbuhan dan kesehatan usus (Gahan et al. 2009; McDonnell dkk. 2009; Janczyk et al. 2010).
Namun, ini biasanya hanya ketika senyawa murni diberi makan, dan penurunan berat badan telah
dilaporkan pada babi yang diberi ekstrak A. nodosum mentah (Gardiner et al. 2008).
Selanjutnya, paparan senyawa rumput laut, seperti karagenan, telah dikaitkan dengan terjadinya
ulserasi usus dan neoplasma pada hewan pengerat (Tobacman 2001). Oleh karena itu, studi
toksisitas juga diperlukan. Perlu juga diingat bahwa mekanisme yang tepat dari tindakan
antimikroba rumput laut di usus tidak diketahui dan akan bervariasi dari satu senyawa ke yang
lain. Dalam kebanyakan kasus, data in vitro - bahkan pada spektrum aktivitas - tidak menyertai
temuan in vivo, atau setidaknya tidak dirujuk oleh penulis. Peningkatan bakteri menguntungkan
yang dilaporkan oleh beberapa penelitian menunjukkan bahwa pengurangan bakteri patogen /
indikator dapat terjadi akibat pergeseran ekologi mikroba usus daripada efek antimikroba
langsung. Studi molekuler tambahan untuk menilai dampak dari rumput laut / senyawa turunan
rumput laut pada mikrobiota usus karena itu diperlukan, terutama mengingat peningkatan
ketersediaan teknologi sequencing generasi-throughput tinggi.
Sebagaimana diuraikan dalam Bagian 13.6.3, kesempatan lain untuk mengeksplorasi ketika
mempertimbangkan eksploitasi rumput laut untuk meningkatkan kesehatan usus adalah
kemampuan mereka untuk mencegah patogen mengikat sel-sel epitel usus. Beberapa penelitian
yang digariskan dalam Bagian 13.6.3 melakukan percobaan makan hewan sebagai lanjutan dari
eksperimen in vitro. Sebagai contoh, fucoidan sulfat yang diisolasi dari rumput laut coklat
Mekabuwas ditemukan secara efektif mencegah kepatuhan parasit C. parvum pada epitel usus pada
tikus neonatal, sehingga mencegah kerusakan usus (Maruyama et al. 2007). Dalam penelitian yang
dilakukan oleh Shibata dkk. (2003), fucoidan yang berasal dari Cladosiphon secara nyata
mengurangi H. pylori-induced gastritis dan prevalensi infeksi H. pylori pada gerbil Mongolia.
Selanjutnya, tidak menunjukkan efek toksik, tidak seperti fucoidan yang berasal dari Fucus, yang
menunjukkan efek pro-inflamasi in vitro (Shibata et al. 2000). Ini menyoroti kebutuhan untuk
pemilihan senyawa rumput laut yang teliti. Dalam kedua studi, memberi makan tikus fucoidan
sebelum inokulasi dengan agen infeksius (C. parvum oocytes dan H. pylori) lebih efektif dalam
mengurangi infeksi daripada pasca infeksi administrasi. Hal ini menunjukkan bahwa fungsi
fucoidan lebih efektif sebagai pencegahan daripada agen terapeutik dan karenanya dapat menjadi
kandidat bahan makanan fungsional yang baik. Deville dkk. (2007) juga menyarankan, dari
temuan dalam penelitian tikus, bahwa laminan, jenis lain dari polisakarida yang diisolasi dari
rumput laut coklat, dapat bertindak sebagai antiadhesive dengan memodifikasi sekresi dan
metabolisme musin, yang mempengaruhi kepatuhan bakteri untuk menjadi tuan rumah sel epitel.
Selain aktivitas antiadhesion ini, laminaran juga bertindak sebagai prebiotik, menjadikannya juga
kandidat yang baik sebagai bahan makanan fungsional. Namun, studi tambahan diperlukan untuk
mengeksplorasi sifat antiadhesinya.
Hasil dari penelitian hewan ini, terutama yang dilakukan pada babi, berpotensi diekstrapolasikan
ke manusia (Groenen et al. 2012). Namun, jika antimikroba yang berasal dari rumput laut
dimaksudkan untuk digunakan dalam makanan fungsional, keamanan dan kemanjurannya harus
ditunjukkan dalam uji coba pada manusia.

13.6.5 Uji Aktivitas Antimikroba Dan Antiadhesi Rumput Laut Dalam


Penelitian Pada Manusia
Ada banyak penelitian yang menunjukkan bahwa rumput laut dan produk rumput laut dapat
mengurangi risiko penyakit manusia kronis seperti hipertensi vaskular (Hata et al. 2001; Kang et
al. 2003), diabetes (Lee et al. 2010), osteoarthritis (Myers et. al. 2011), dan kanker (Kato et al.
1990; Ikeguchi et al. 2011). Namun, tidak ada penelitian pada manusia hingga saat ini telah
menyelidiki pemberian antimikrobial rumput laut secara oral. Studi yang paling dekat meneliti
sifat protektif fucoidan terhadap perkembangan penyakit tipe T-limfotropik virus-1 (HTLV-1)
manusia (Araya et al. 2011). Dalam penelitian ini, pemberian oral fucoidan mengurangi beban
provirus HTLV-1 pada pasien dengan penyakit neurologis terkait HTLV-1 dengan mencegah
penularan sel-ke-sel virus.

13.7 POTENSI APLIKASI ANTIMIKROBA RUMPUT LAUT DALAM


PANGAN FUNGSIONAL
13.7.1 Konsep Pangan Fungsional
Makanan tidak hanya menyediakan nutrisi dan energi untuk fungsi fisiologis normal tetapi
mungkin memiliki peran dalam pencegahan penyakit. Pada tahun 460 SM, Hippocrates berkata,
“Biarkan makanan menjadi obatmu dan obat-obatan menjadi makananmu.” Pada abad kesembilan
belas, penekanan beralih dari “makanan” menjadi “nutrisi,” sebagaimana penelitian telah
menunjukkan bahwa makanan tertentu, ketika dikonsumsi dalam jumlah yang tepat. , bisa
mengarah pada peningkatan kesehatan. Pada pergantian abad ke-20, arah berubah lagi ke arah
penggunaan makanan untuk mencegah / meminimalkan risiko perkembangan penyakit, dan
disinilah konsep "makanan fungsional" berasal. Saat ini tidak ada definisi yang diterima secara
universal untuk "makanan fungsional," tetapi makanan dianggap fungsional ketika senyawa yang
menunjukkan manfaat fisiologis dan / atau mengurangi risiko penyakit ditambahkan ke dalamnya,
sehingga memberikan manfaat kesehatan di luar kepuasan tradisional persyaratan gizi (Hasler
2000, 2002; Roberfroid 2011). Penting juga bahwa makanan fungsional adalah makanan dan
bukan obat-obatan; yaitu, mereka harus dikonsumsi dalam bentuk aslinya dan bukan sebagai
kapsul atau pil. Dalam hal ini, mereka hanya dapat dianggap efektif dalam mengurangi risiko
mengembangkan penyakit dan tidak dalam mengobati / menyembuhkan penyakit, karena yang
terakhir adalah bidang obat-obatan (Roberfroid 2011).
Konsep makanan fungsional pertama kali diusulkan di Jepang pada tahun 1980 oleh Kementerian
Kesehatan dan Kesejahteraan, dengan tujuan meningkatkan kesehatan bangsa secara keseluruhan
(Hasler 2002). Di Eropa, Aksi Konser Komisi Eropa tentang Fungsional Food Science (FUFOSE)
dikembangkan pada tahun 1996 dengan tujuan membangun pendekatan berbasis sains untuk
konsep dalam ilmu pangan fungsional (Roberfroid 2011). Menurut FUFOSE, makanan fungsional
harus: (1) menjadi makanan konvensional atau sehari-hari; (2) dikonsumsi sebagai bagian dari diet
normal; (3) terdiri dari senyawa yang terjadi secara alami yang hadir pada konsentrasi yang tidak
biasa atau yang biasanya tidak mengandung; dan (4) memiliki efek positif di luar nilai gizi (Holdt
& Kraan 2011; Roberfroid 2011). Peraturan Uni Eropa No. 1924/2006 tentang klaim gizi dan
kesehatan, yang mulai berlaku pada tahun 2007, mengontrol jenis bahan fungsional yang dapat
ditambahkan ke makanan dan klaim yang dapat dibuat untuk itu (EC 2006; Holdt & Kraan 2011).
Salah satu tujuan utama dari peraturan ini adalah untuk memastikan bahwa klaim apa pun yang
dibuat pada label makanan fungsional jelas dan didukung oleh bukti ilmiah. Setiap perusahaan
yang ingin memasarkan makanan fungsional harus mengajukan permohonan kepada Otoritas
Keamanan Makanan Eropa (EFSA) untuk otorisasi klaim kesehatan. Pada akhirnya, penelitian
intervensi manusia yang dirancang dengan baik dengan ukuran hasil yang tepat diperlukan untuk
pembuktian fungsi dan klaim pengurangan risiko penyakit.
Makanan fungsional mendapatkan popularitas sebagai akibat dari meningkatnya biaya perawatan
kesehatan, meningkatnya insiden "perawatan diri," dan meningkatnya bukti hubungan antara diet
dan kesehatan (Hasler 2000). Angka-angka pasar mencerminkan hal ini, dengan pasar makanan
fungsional global tumbuh pada tingkat tahunan 6,4% sejak 2011 dan diperkirakan bernilai
∼USD200 miliar pada tahun 2016 (Sugla 2011). Oleh karena itu, penambahan bahan yang
mempromosikan kesehatan memberikan kesempatan untuk menambah nilai pada produk
makanan. Beberapa contoh dari jenis bahan fungsional yang paling umum digunakan dalam
produk makanan fungsional yang tersedia secara komersial di seluruh dunia disajikan pada Tabel
13.4. Ini termasuk probiotik ("mikroorganisme hidup yang bila diberikan dalam jumlah yang
cukup memberikan manfaat kesehatan pada host": FAO / WHO 2002), sterol, dan asam lemak
omega-3. Namun, harus diingat bahwa karena variasi dalam undang-undang dari satu yurisdiksi
ke yang lain, tidak semua produk ini disetujui untuk digunakan di semua negara. Selanjutnya,
sebagai akibat dari undang-undang Uni Eropa yang baru saja disebutkan, sejumlah klaim
kesehatan mereka saat ini sedang dievaluasi oleh EFSA, dan beberapa bahkan telah ditolak.

13.7.2 Potensi Antimikroba Rumput Laut Sebagai Bahan Fungsional


Antimikroba dapat memiliki sejumlah aplikasi; mereka umumnya digunakan dalam pengobatan
manusia dan hewan untuk mengobati atau mencegah infeksi yang disebabkan oleh bakteri, virus,
jamur, atau parasit dan dalam industri makanan sebagai pengawet makanan. Mereka juga sering
tercantum dalam artikel ulasan sebagai bahan makanan fungsional (Plaza et al. 2008; Mohamed
dkk. 2012), meskipun saat ini tidak ada produk makanan fungsional di pasaran yang mengandung
senyawa antimikroba. Target paling jelas untuk makanan fungsional yang mengandung
antimikroba adalah gangguan gastrointestinal. Gangguan terkait usus yang paling umum adalah
diare, yang menempati urutan ketiga di antara kematian penyakit menular di seluruh dunia, dengan
perkiraan 2 juta kematian per tahun (WHO 2009). Sebagian besar kasus berada di negara
berkembang, dan pelancong yang mengunjungi negara-negara ini juga berisiko tinggi (WHO
2009). Selain itu, UNICEF telah melaporkan bahwa diare adalah penyebab kematian kedua,
setelah pneumonia, pada anak-anak di bawah usia 5 tahun, terutama di negara-negara dunia ketiga
(UNICEF 2012). Penyebab diare yang paling umum adalah bakteri, termasuk Salmonella,
Shigella, E. coli, Yersinia, Vibrio, S. aureus, dan C. perfringens, virus seperti rotavirus, dan parasit
seperti Cryptosporidium (WHO 2009, 2012). Oleh karena itu, senyawa dengan aktivitas melawan
ini dan patogen gastrointestinal lainnya, khususnya mereka seperti C. difficile yang resisten
terhadap antibiotik, menarik untuk dimasukkan ke dalam makanan fungsional.
Sebagaimana diuraikan dalam Bagian 13.6.2 dan 13.6.3, sejumlah ekstrak rumput laut dan
senyawa turunan rumput laut yang aktif terhadap satu atau sejumlah patogen ini telah dihasilkan /
diisolasi hingga saat ini, sementara yang lain memiliki sifat anti-perekat. Beberapa kemudian
terbukti mencegah infeksi atau mengurangi indikator patogenik ketika digunakan sebagai bahan
makanan dalam uji coba pada hewan (lihat Bagian 13.6.4), meskipun data dari penelitian manusia
masih kurang. Antimikroba rumput laut dapat berpotensi dimanfaatkan sebagai bahan makanan
fungsional. Bahkan, beberapa penelitian telah memasukkan antimikroba rumput laut ke dalam
produk makanan, termasuk produk daging (Cofrades dkk. 2008, 2011), sosis kalkun (Ayadi dkk.
2009), dan pasta (Prabhasankar dkk. 2009; Kadam & Prabhasankar 2010) . Namun, ini dengan
maksud untuk mengevaluasi keampuhan mereka sebagai pengawet makanan daripada sebagai
agen yang mempromosikan kesehatan (Devi dkk. 2008; Patra dkk. 2008; Brownlee dkk. 2009;
Cofrades dkk. 2011; Gupta & Abu- Ghannam 2011). Tidak ada penelitian sampai saat ini telah
memasukkan antimikroba apa pun, baik dari rumput laut atau dari sumber lain, ke dalam makanan
khusus dengan tujuan mencegah penyakit. Namun, sejumlah mikroorganisme probiotik, termasuk
beberapa yang hadir dalam makanan fungsional yang tersedia secara komersial, menghasilkan
antimikroba (produksi antimikroba pada kenyataannya dianggap sebagai salah satu mekanisme
aksi mereka; lihat Tabel 13.4).
Kurangnya ketersediaan makanan fungsional yang mengandung antimikroba mungkin terkait
dengan tantangan yang terkait dengan pengembangan jenis produk ini. Misalnya, antimikroba
dapat dianggap lebih cocok untuk medis daripada untuk aplikasi makanan, karena antimikroba
lebih sering digunakan untuk pengobatan daripada untuk pencegahan infeksi, yang tidak sesuai
dengan konsep makanan fungsional. Faktor lain adalah kemungkinan pengembangan resistensi
bakteri karena konsumsi berlebihan dari agen antimikroba, karena makanan fungsional harus
makanan konvensional atau sehari-hari yang dikonsumsi secara teratur sebagai bagian dari diet
normal (Holdt & Kraan 2011; Roberfroid 2011). Namun, risiko mengembangkan resistansi lebih
rendah jika antimikroba adalah senyawa baru; misalnya, nisin, antimikroba yang dihasilkan bakteri
baru dan satu-satunya yang disetujui saat ini sebagai pengawet makanan, telah banyak digunakan
selama beberapa tahun dalam makanan seperti keju olahan, susu, makanan kaleng, sosis, dan bir
tanpa dilaporkan kasus resistensi (Delves-Broughton 2005). Dalam hal ini, rumput laut adalah
kandidat sumber antimikroba yang baik untuk tambahan makanan fungsional, karena banyak
senyawa yang dikandungnya cenderung menjadi novel (Chanda dkk. 2010; El Gamal 2010; Blunt
et al. 2011). Selain itu, ada risiko lebih rendah mengembangkan resistensi jika senyawa
antimikroba ditambahkan pada konsentrasi rendah. Misalnya, sejumlah kecil antimikroba baru
telah dimasukkan ke dalam makanan sebagai pengawet untuk mencegah dan mengendalikan
pertumbuhan mikroorganisme pembusuk dan patogen, tanpa ada kasus resistensi bakteri yang
dilaporkan (O'Sullivan et al. 2002; Delves-Broughton 2005 ). Tantangan lain adalah untuk
menemukan agen antimikroba yang selektif membunuh patogen usus tanpa mempengaruhi
mikroflora usus komensal. Dalam hal ini, senyawa rumput laut dengan spektrum penghambatan
sempit mungkin lebih cocok untuk tambahan makanan fungsional. Alternatif lain, penggunaan
senyawa dengan sifat antiadhesive daripada aktivitas antimikroba per se dapat mengatasi beberapa
masalah ini, karena mereka mencegah keterikatan mikroorganisme untuk sel inang daripada
langsung membunuh / menonaktifkan mereka (Ofek et al. 2003; Abreu & Barreto 2012 ). Namun,
sulit untuk menemukan senyawa yang memiliki sifat anti-perekat yang dapat secara efektif
mencegah perlekatan bakteri, terutama bakteri dengan berbagai jenis reseptor lampiran (Ofek et
al. 2003).
Ada sejumlah pertimbangan lain yang perlu dipertimbangkan ketika memilih antimikroba untuk
tambahan makanan fungsional. Seperti halnya bahan makanan fungsional, mereka harus: (1) tidak
beracun; (2) tidak mengubah rasa atau tekstur makanan; (3) menolak pengolahan makanan; dan
(4) memiliki umur simpan yang sama dengan makanan di mana mereka dimasukkan (Bonner et
al. 1999; Roberfroid 2011). Sebagai contoh, chitosan ditemukan secara efektif menghambat
pertumbuhan E. coli dan S. aureus pada konsentrasi serendah 0,5%, tetapi menghasilkan aftertaste
yang tidak menyenangkan ketika ditambahkan ke jus apel (Fernandes et al. 2008). Hal ini penting
untuk melakukan percobaan pengolahan makanan serta in vitro dan in vivo, untuk menguji
stabilitas, kemanjuran, dan keamanan senyawa antimikroba yang berasal dari rumput laut, baik
sebelum dan setelah penggabungan ke dalam makanan fungsional. Studi tambahan di bidang ini
dijamin untuk pembuktian ilmiah antimikroba rumput laut sebagai bahan makanan fungsional.

13.8 KESIMPULAN
Meskipun rumput laut telah menunjukkan berbagai kegiatan antimikroba, beberapa penelitian
telah mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa yang bertanggung jawab. Isolasi senyawa
antimikroba ini penting, karena ekstrak kasar mengandung banyak sekali komponen, banyak di
antaranya dapat berinteraksi dengan agen aktif, yang menyebabkan peningkatan atau penurunan
kemanjuran. Identifikasi senyawa antimikroba yang terisolasi, banyak yang mungkin baru, juga
akan memfasilitasi pemahaman menyeluruh dari mekanisme aksi mereka, yang diperlukan
sebelum aplikasi apa pun. Antimikroba yang berasal dari rumput laut, seperti yang berasal dari
sumber lain, dapat menemukan aplikasi di sejumlah bidang, termasuk pengobatan manusia dan
hewan dan industri makanan.
Makanan fungsional adalah satu area di mana antimikroba rumput laut memiliki potensi yang
sangat besar. Namun, ada sejumlah tantangan yang harus diatasi terlebih dahulu. Khususnya,
penelitian tambahan, terutama uji coba pada manusia, diperlukan untuk memastikan bahwa
antimikroba rumput laut dapat digunakan dengan aman dan efektif sebagai bahan fungsional.

UCAPAN TERIMA KASIH


Para penulis mengucapkan terima kasih kepada Institut Teknologi Irlandia Penelitian Sektor
Teknologi Strand III Core Research Strengths Enhancement Program untuk pendanaan.