Anda di halaman 1dari 20

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
Dalam metabolisme sekunder yang terjadi pada tumbuhan akan menghasilkan
beberapa senyawa yang tidak digunakan sebagai cadangan energy melainkan untuk
menunjang kelangsungan hidupnya seperti untuk pertahanan dari predaptor. Beberapa
senyawa seperti alkaloid, triterpen dan golongan fenol merupakan senyawa-senyawa
yang dihasilkan dari metabolisme skunder.Golongan fenol dicirikan oleh adanya cincin
aromatik dengan satu atau dua gugus hidroksil. Kelompok fenol terdiri dari ribuan
senyawa, meliputi flavonoid, fenilpropanoid, asam fenolat, antosianin, pigmen kuinon,
melanin, lignin, dan tanin, yang tersebar luas di berbagai jenis tumbuhan.
Tanin merupakan senyawa fenolik yang mengandung protein. Tanin terdiri atas
bermacam-macam kelompok oligomer dan polimer. Oleh karena itu ada beberapa
kesimpangsiuran tentang terminologi yang digunakan untuk mengidentifikasi ataupun
mengelompokkan senyawa tanin. Salah satu definisi yang paling baik yang diberikan
oleh Horvath (1981), Tanin adalah suatu senyawa fenolik dengan berat molekul cukup
tinggi yang mengandung hidroksil dan kelompok lain yang cocok (seperti karboksil)
untuk membentuk komplek yang efektif dengan protein dan makro molekul yang lain
dibawah kondisi lingkungan tertentu yang dipelajari. Tanin merupakan bentuk kompleks
dari protein, pati, selulosa dan mineral. Tanin mempunyai struktur dengan formula
empiris C72H52O46.
Tanin terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh, dalam angiospermae terdapat
khusus dalam jaringan kayu. Secara kimia terdapat dua jenis utama tanin, yaitu tanin
terkondensasi dan tanin terhidrolisis. Tanin terkondensasi atau flavolan secara biosintesis
dapat dianggap terbentuk dengan cara kondensasi katekin tunggal (galokatekin) yang
membentuk senyawa dimer dan kemudian oligomer yang lebih tinggi. Ikatan karbon-
karbon menghubungkan satu flavon dengan satuan berikutnya melalui ikatan 4-6 atau 6-
8. Kebanyakan flavolan mempunyai 2-20 satuan flavon.
Dari hal-hal yang muncul tersebut diatas, makalah ini akan membahas tentang
tanin. Mengisolasi bagian-bagian tanaman yang mengandung tanin, karakteristik dan
penetapan kadar dari tanin.

B. Rumusan Masalah
A. Pengertian tannin ?
B. Bagaimana mengisolasi tannin dari tumbuhan, serta karakteristik tanin ?
C. Bagaimana penetapan kadar dari tannin ?

C. Tujuan
1. Mengetahui pengertian tannin
2. Mengetahui cara mengisolasi tannin, serta karakteristik tanin
3. Mengetahui cara penetapan kadar dari tannin
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Pengertian Tanin
Tanin adalah kelas utama dari metabolit sekunder yang tersebar luas pada
tanaman. Tanin merupakan polifenol yang larut dalam air dengan berat molekul biasanya
berkisar 1000-3000. Menurut definisi, tanin mampu menjadi pengompleks dan kemudian
mempercepat pengendapan protein serta dapat mengikat makromolekul lainnya. Tanin
merupakan campuran senyawa polifenol yang jika semakin banyak jumlah gugus fenolik
maka semakin besar ukuran molekul tanin. Pada mikroskop, tanin biasanya tampak
sebagai massa butiran bahan berwarna kuning, merah, atau cokelat.
Tanin dapat ditemukan di daun, tunas, biji, akar, dan batang jaringan. Sebagai
contoh dari lokasi tanin dalam jaringan batang adalah tanin sering ditemukan di daerah
pertumbuhan pohon, seperti floem sekunder dan xylem dan lapisan antara korteks dan
epidermis. Tanin dapat membantu mengatur pertumbuhan jaringan ini. Tanin berikatan
kuat dengan protein & dapat mengendapkan protein dari larutan. Tanin terdapat luas
dalam tumbuhan berpembuluh, dalam angiospermae terdapat khusus dalam jaringan
kayu. Menurut batasannya, tanin dapat bereaksi dengan protein membentuk kopolimer
mantap yang tak larut dalam air. Dalam industri, tanin adalah senyawa yang berasal dari
tumbuhan, yang mampu mengubah kulit hewan yang mentah menjadi kulit siap pakai
karena kemampuannya menyambung silang protein.
Secara fisika, tanin memiliki sifat-sifat: jika dilarutkan kedalam air akan
membentuk koloid dan memiliki rasa asam dan sepat, jika dicampur dengan alkaloid dan glatin
akan terjadi endapan, tidak dapat mengkristal, dan dapat mengendapkan protein dari larutannya
dan bersenyawa dengan protein tersebut sehingga tidak dipengaruhi oleh enzim
protiolitik. Senyawa phenol yang secara biologis dapat berperan sebagai khelat logam.
Proses pengkhlatan akan terjadi sesuai pola subtitusi dan pH senyawa phenolik itu
sendiri. Karena itulah tanin terhidrolisis memiliki potensial untuk menjadi pengkhelat
logam. Hasil khelat dari tanin ini memiliki keuntungan yaitu kuatnya daya khelat dari
senyawa tanin ini membuat khelat logam menjadi stabil dan aman dalam tubuh. Tetapi
jika tubuh mengkonsumsi tanin berlebih maka akan mengalami anemia karena zat besi
dalam darah akan dilkhelat oleh senyawa tanin tersebut.
B. Penggolongan
Senyawa tanin termasuk ke dalam senyawa polifenol yang artinya senyawa yang
memiliki bagian berupa fenolik. Senyawa tanin dibagi menjadi dua berdasarkan pada
sifat dan struktur kimianya, yaitu tanin yang terhidrolisis dan tanin yang terkondensasi.
Tanin terhidrolisis biasanya ditemukan dalam konsentrasi yang lebih rendah pada
tanaman bila dibandingkan dengan tanin terkondensasi. Tanin terkondensasi terdiri dari
beberapa unit flavanoid (flavan-3-ol) dihubungkan oleh ikatan-ikatan karbon. Tanin
terkondensasi banyak ditemukan dalam berbagai jenis tanaman seperti Acacia spp,
sericea Lespedeza serta spesies padang rumput seperti Lotus spp.
Tanin terkondensasi (condensed tannins) biasanya tidak dapat dihidrolisis, tetapi
dapat terkondensasi menghasilkan asam klorida. Tanin jenis ini kebanyakan terdiri dari
polimer flavonoid yang merupakan senyawa fenol. Nama lain dari tanin ini adalah
Proanthocyanidin. Proanthocyanidin merupakan polimer dari flavonoid yang
dihubungkan dengan melalui ikatan C-8 dengan C-4. Salah satu contohnya adalah
Sorghum procyanidin, senyawa ini merupakan trimer yang tersusun dari epiccatechin dan
catechin. Senyawa ini jika dikondensasi maka akan menghasilkan flavonoid jenis flavan
dengan bantuan nukleofil berupa floroglusinol.
Tanin terhidrolisis biasanya berikatan dengan karbohidrat dengan
membentuk jembatan oksigen, maka dari itu tanin ini dapat dihidrolisis dengan
menggunakan asam sulfat atau asam klorida. Salah satu contoh jenis tanin ini adalah
gallotanin yang merupakan senyawa gabungan dari karbohidrat dengan asam galat.
Selain membentuk gallotanin, dua asam galat akan membentuk tanin terhidrolisis yang
biasa disebut Ellagitanins. Ellagitanin sederhana disebut juga ester asam hexahydroxy
diphenic (HHDP). Senyawa ini dapat terpecah menjadi asam galic jika dilarutkan dalam
air.
BAB III
METODE KERJA
3.1.Metode I
3.1.1. Penetapan Kadar
A. Penentuan Total Senyawa Fenolik (Jurnal : Determination of Tannins of
Three Common Acacia Species of Sudan)
Total senyawa fenolik diukur dalam sampel tanaman dengan metode
Folin-Denis [25]. Folin-Denis dibuat dengan mencampurkan Na2WO4⋅2H2O
(20,66 g), asam dodeca-molybdophosphoric (4,13 g), asam fosfat (85%, 10 mL),
dan air (150 mL) dan memungkinkan campuran untuk refluks selama dua jam.
Larutan yang dihasilkan kemudian diencerkan menjadi 500 mL. Larutan natrium
karbonat dibuat dengan melarutkan Na2CO3 (106 g) dalam 1000 mL air. Larutan
asam tanat (kadar air 6%) kemudian disiapkan dengan melarutkan tanin (250 mg)
dalam air suling ganda (500 mL). Sejumlah kecil (2-3 tetes) larutan natrium azida
(0,1%) ditambahkan untuk mencegah kontaminasi oleh jamur dan bakteri.
Sebelum digunakan, sebagian besar larutan ini diencerkan 1: 100 dengan air
suling ganda. Pereaksi Folin-Denis (2 mL) ditambahkan ke alikuot (2 mL) dari
pengenceran 1: 100 yang dijelaskan di atas. Solusinya terguncang dengan kuat
dan didiamkan selama tiga menit. Larutan natrium karbonat (2 mL) ditambahkan
dan sampel diguncang lagi dan didiamkan selama dua jam. Pada saat itu, sampel
disentrifugasi dengan kecepatan rendah hingga bahan-bahan partikulatnya
dikeluarkan. Absorbansi diukur pada 725 nm oleh Spektrofotometer UV / VIS
(PerkinElmer 551). Kosong juga dianalisis dalam setiap contoh. Dengan
serangkaian pengenceran larutan tanin yang disiapkan (1: 250, 1: 50, 1: 40, 1: 25,
dan 1: 10). Kandungan fenolik dari masing-masing sampel diukur dengan metode
Folin-Denis seperti yang dijelaskan di atas. Penentuan duplikat dilakukan untuk
setiap sampel.
B. Penentuan Kadar Tanin dengan Metode Hide-Powder. (Jurnal :
Determination of Tannins of Three Common Acacia Species of Sudan)
Penentuan tanin terdiri dari 4 langkah: (i) pengukuran total bahan fenolik dalam
ekstrak sampel tanaman dengan metode Folin-Denis, (ii) persiapan terhidrasi,
chrome, kulit-bubuk, (iii) penyerapan tanin ke dalam bubuk-kulit , dan (iv)
penentuan bahan fenolik dalam larutan yang tersisa setelah langkah (iii). Bubuk
kulit terhidrasi yang digunakan dalam analisis ini dibuat dari bubuk kulit kering-
udara (dibawa dari Pusat Nasional Teknologi Kulit, Khartoum). Cukup bubuk
kering-udara-kering untuk menghasilkan 3,0 g bubuk kering-oven digunakan
untuk setiap analisis yang dilakukan. Jumlah bubuk yang diperlukan untuk
melakukan jumlah analisis yang diinginkan diizinkan untuk berdiri dengan 10 kali
berat air suling (30 menit, 25℃) dan diaduk 3 atau 4 kali selama periode ini.
Chromium potassium sulphate (tawas krom, larutan 3% air, 1 g/mL bubuk
sembunyikan) ditambahkan dan campuran diaduk setiap 15 menit selama dua
jam, dibiarkan selama semalam, dan kemudian disaring melalui sepotong kapas
putih yang tidak dikelantang, kain dan diperas atau ditekan sampai bubuk
terhidrasi mengandung sekitar 75% air (ketika kain baru digunakan, itu dicuci
untuk menghilangkan ukuran dan bahan asing lainnya). Persentase air dalam
bubuk kulit terhidrasi ditentukan berdasarkan berat (4 kali berat total bubuk kulit
ditambah berat kain). Massa bubuk-bubuk kemudian dipecah dan dicairkan
kembali dengan air 4 kali (masing-masing 15 menit) dalam jumlah air 15 kali
berat bubuk-bubuk yang digunakan. Setelah pencucian akhir, serbuk kulit diperas
hingga 72,5% kadar air (ditentukan berdasarkan berat). Hide-powder yang
disiapkan dengan cara ini harus disimpan dalam lemari es dan digunakan pada
hari yang sama dengan yang disiapkan.
a) Penentuan Air dalam Sampel Bubuk Hidrasi terhidrasi.
Sebuah alikuot (10 g) bubuk hidrasi dihilangkan dan ditempatkan dalam oven
(98∘C) dan dikeringkan selama 17 jam. Perbedaan berat digunakan untuk
menghitung persentase air dalam sampel.
b) Pengendapan Tanin dengan Bubuk Hidrasi Terhidrasi.
Bubuk kulit hidrasi yang baru disiapkan, dihidrasi, setara dengan bubuk kulit
kering 3,0 g oven, ditimbang dan ditambahkan ke dalam labu Erlenmeyer
(150 mL). Solusi untuk penentuan tanin dengan metode hide-powder dibuat
dengan melarutkan sampel tanin komersial seperti di atas dalam air suling
ganda (500 mg / L). Solusi ekstrak tanaman disiapkan dengan cara yang sama.
Larutan harus disimpan dalam lemari pendingin dan sejumlah kecil (2-3 tetes)
larutan natrium azida 0,1% ditambahkan untuk mencegah kontaminasi jamur
atau bakteri. Solusi berada pada suhu kamar saat digunakan. Aliquot larutan
tannin (50 mL) dihilangkan dan ditambahkan ke labu yang berisi sampel
bubuk-bubuk kulit yang sudah ditimbang sebelumnya (10,9 g untuk kondisi
yang diuraikan di atas). Labu kemudian diguncang selama sepuluh menit dan
bubuk kulitnya dihilangkan dengan penyaringan. Campuran disaring ke dalam
labu dengan corong Buchner plastik (7,0 cm, kertas Whatman 1) di bawah
vakum. Labu dan sampel dicuci dengan air suling ganda (10 mL). Solusi
berawan disaring ulang. Setelah filtrasi, filtrat (sekitar 60 mL) dipindahkan
secara kuantitatif ke dalam labu ukur dan disesuaikan hingga 100 mL. Kosong
dijalankan dengan air suling dan dengan bubuk hidrasi terhidrasi. Aliquot (2
mL) kemudian dikeluarkan dari masing-masing sampel dan sisa bahan fenolik
ditentukan dengan metode Folin-Denis.
C. Penentuan Tanin di Daun, Kulit, dan Buah Dewasa dan Buah belum
Matang.
Sampel daun, kulit kayu, dan bahan buah-buahan dewasa dan belum matang dari
Acacia nilotica, Acacia seyal, dan Acacia senegal ditumbuk dan diekstraksi. 10,0
g kuantitas tanah diekstraksi dengan air suling ganda (100 mL) dalam labu
Erlenmeyer (150 mL) dengan pengadukan dan pemanasan mekanis. Campuran
dipanaskan hingga mendidih selama 10 menit dan disaring (Whatman 1, 18,5 cm).
Labu dan bahan yang disaring kemudian dibilas dengan air tambahan (15 mL) dan
volumenya disesuaikan menjadi 100 mL. Aliquot dari ekstrak awal ini kemudian
dihilangkan dan diencerkan ke konsentrasi yang sesuai untuk analisis Folin-Denis,
yang dilakukan dengan cara yang dijelaskan sebelumnya. Untuk penentuan tanin
dengan metode hide-powder, alikuot dari ekstrak awal diencerkan seperti di atas
(untuk memberikan 0,05-0,2 unit absorbansi setelah presipitasi dengan hide-
powder). Alikuot larutan ini (50 mL) kemudian digunakan seperti yang dijelaskan
sebelumnya.
3.1.2. Isolasi Tanin
(Jurnal : Isolation of tannins from the leaves of Nephelium lappaceum L.
(Sapindaceae) and the HPTLC of the isolated compound)
A. Pengumpulan dan Persiapan daun
Daun dikumpulkan dari Vazhayila, Distrik Thiruvananthapuram, Kerala. Lalu
itu dicuci bersih di bawah air keran, dikeringkan di tempat teduh dan
dihancurkan dalam blender listrik.
B. Metode Isolasi Tannin
100 g daun kering dihomogenisasi dalam 400 ml Metanol dengan blender. Sel
puing-puing dan bahan yang tidak larut dihilangkan dengan penyaringan
melalui kain muslin. Filtratnya adalah disentrifugasi pada 11,000 rpm selama
sepuluh menit. Jumlah yang sesuai dari 2M Potassium Dihydrogen Fosfat
ditambahkan setetes demi setetes ke supernatan bening gabungan dalam
penangas es sampai putih dan bahan wol diendapkan sepenuhnya. Endapan
dikumpulkan oleh sentrifugasi pada 1000 rpm selama sepuluh menit. Endapan
dicuci dengan Metanol tiga kali dan 1,2 N Asam klorida dalam penangas es
dengan mengaduk selama beberapa jam. Secepat kemungkinan netralisasi
dilakukan dengan menambahkan larutan Sodium Carbonate jenuh ke solusi
Tannin di penangas es. Solusinya disesuaikan hingga sekitar pH 4.0. Tanin
kering bubuk diperoleh dengan liofilisasi.
3.1.3. Karakterisasi tanin Acacia nilotica
Sampel buah matang dari koleksi individu Acacia nilotica digunakan untuk
menentukan tanin. Bahan diambil dari beberapa pohon di setiap contoh. Sampel
kering udara ditumbuk di pabrik Wiley (layar 2 mm). Untuk menentukan
komposisi tanin dalam sampel, dicirikan oleh KLT, UV, dan spektrofotometer IR
dan dibandingkan dengan referensi (standar) tanin dan fenolat terkait.
A. Identifikasi tanin oleh KLT
Buah kering dan bubuk Acacia nilotica (100 g) diguncang dengan air (500 ml)
selama 24 jam pada suhu 25 0C dengan menggunakan pengaduk mekanis,
larutan disaring melalui wol kaca. 100 ml ekstrak dimasukkan ke dalam gelas
kimia 250 ml, dan pH disesuaikan menjadi 6,2 dengan penambahan
ortopotassium dihidrogen fosfat (10 ml) dan larutan natrium hidroksida (2N,
sekitar 5 ml) dengan menggunakan pH-meter sebelum ekstraksi dengan 50 ml
etil asetat sebanyak 10 kali. Panaskan pada suhu 30 0C untuk menghilangkan
pelarut, maka bubuk amorf berwarna coklat cerah akan diperoleh.
Pelat lapisan tipis (ukuran 20 cm panjang dan lebar 20 cm) dan lainnya (20 cm
panjang 5 cm) disiapkan dengan selulosa. 6% asam asetat cair digunakan
sebagai pelarut berkembang. Ekstrak dilarutkan dalam aseton (100 ml) dan
dipisahkan oleh KLT pada selulosa, memberikan tiga fraksi ketika dijalankan
dengan KLT dua dimensi (Gbr. 1). Perbandingan standar (Tabel 2) dan tiga
fraksi yang terisolasi memberikan pola yang ditunjukkan pada Tabel 3.
B. Degradasi tanin dengan asam alkoholichydrochloric
Untuk menentukan komposisi tanin Acacia nilotica apakah dapat dihidrolisis
atau tidak, sampel buah-buahan dewasa dihidrolisis dengan alkohol asam
klorida menurut prosedur berikut: 0,5 ml ekstrak dipanaskan selama 2 jam
pada 95 0C dengan 5 ml 5% butanol-HCl, produk hidrolisis asam
dikarakterisasi dengan KLT (Tabel 3).
C. Reagen Deteksi
Setelah pengembangan kromatogram, tanin dan fenolat terkait terdeteksi oleh
uap yodium. Tanin dan fenolat terkait muncul sebagai bercak coklat setelah
terpapar dengan uap yodium dalam tangki tertutup.
D. Tes kimia uji ekstrak tanin dengan larutan besi klorida
Ke bagian 1 ml ekstrak diambil dalam tabung reaksi dan 5 tetes larutan FeCl3
dalam metanol ditambahkan. Endapan hijau ke hitam muncul di hadapan tanin
(Tabel 4).
E. Uji dengan larutan gelatin
Bagian 1 ml ekstrak diambil dalam tabung reaksi dan ditambahkan 1 ml
gelatin (larutan 1%) dan NaCl. Pembentukan endapan putih akan
menunjukkan bahwa tanin ada (Tabel 4).
F. Uji dengan larutan ferro sulfat
1 ml bagian ekstrak diambil dalam tabung reaksi dan 2 ml 0,1% FeSO4 dan
0,5% natrium kalium tartrat ditambahkan. Munculnya warna ungu
menunjukkan adanya tanin. Tes kimia tanin diterapkan untuk fraksi terisolasi
dari ekstrak buah dewasa Acacia nilotica yang diperoleh dari TLC untuk
identifikasi tanin (Tabel 4). Spektrofotometri UV tanin dan fenolat terkait 100
mg ekstrak air, (dikeringkan) buah-buahan matang Acacia nilotica dilarutkan
dalam 25 ml metanol. Standar tanin dan fenolat terkait dibuat dengan
melarutkan 10 mg dalam 25 ml metanol. Setelah itu larutan diencerkan
dengan pelarut yang sama (1: 100), dan pengukuran spektrofotometri dicatat
seperti yang terlihat pada (Tabel 5). Di sisi lain, tanin terhidrolisis asam juga
ditentukan secara spektrofotometri seperti pada (Tabel 6).
G. Spektrofotometri IR tanin dan fenolat terkait
Sekitar 1,0 g ekstrak air kering dari buah-buahan dewasa Acacia nilotica
dilarutkan dalam 5 ml metanol. Standar tanin dan fenolat terkait dilarutkan
dengan cara yang sama. Sampel dan standar menjadi sasaran pengukuran IR,
(Tabel 7). Di tangan, sampel dilarutkan dalam aseton dengan cara yang sama
seperti yang dijelaskan sebelumnya, (1,0 g dalam 5 ml), dan dikenai
pengukuran IR dan mengungkapkan spektrum IR yang sama seperti pada
Tabel 7.
3.2 Metode II

3.2.1 PENETAPAN KADAR TANIN DALAM INFUSA DAUN SALAM


(Syzygium polyanthum (Wight.) Walp)) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK

A. Pengumpulan Bahan dan Pembuatan Serbuk Daun Salam


Daun salam diambil dari BPTO Tawangmangu pada bulan Juli 2007. Daun salam
dikeringkan dengan sinar matahari dengan ditutupi kain hitam. Setelah ering
diserbuk.

B. Pembuatan Pereaksi Folin Denis


Dalam 700,0 mL aquabidestilata ditambahkan 100,0 mg natrium tungstat, 75 gram
asam fosfomolibdat dan 50 mL asam fosfat 85%, 100 mL asam klorida pekat, 100
gram litium sulfat, 50 mL dan beberapa tetes aquabidestilata, kemudain direfluks
selama 10 jam, diencerkan sampai 1,0 L (Anonim, 1996).

C. Pembuatan larutan sampel


Larutan sampel dibuat dengan metode penyarian infundasi. Sebanyak 10 gram
masing-masing sampel serbuk daun dimasukkan ke dalam panci infusa dan
ditambahkan aquadestilata sebanyak 10 kali bahan sampelnya, selanjutnya
dipanaskan sampai suhu mencapai 90°C atau selama 15 menit. Infusa disaring dengan
kain flanel saat panas.

D. Uji Kualitatif Tanin


Sebanyak 2 mL infusa ditambah beberapa tetes FeCl3 sampai terbentuk warna hitam
kebiruan, kemudian ditambah 1 mL larutan gelatin, bila terjadi endapan warna putih
menunjukkan adanya tanin.Cara lain, warna hitam kebiruan akan hilang pada
penambahan asam sulfat encer dan akan menjadi endapan coklat kekuningan yang
menunjukkan adanya tanin.

E. Penetapan panjang gelombang maksimum


Larutan baku tanin 1,0 mL dimasukkan ke dalam labu takar 10 mL yang berisi 7,5
mL aquabidestilata. Ke dalam tabung tersebut ditambahkan 0,5 mL pereaksi Folin
Denis dan 1,0 mL larutan NaCO3 jenuh. Dicampur Dengan baik kemudian
serapannya dibaca pada panjang gelombang 400-800 nm untuk memperoleh panjang
gelombang dengan serapan maksimum.

F. Pembuatan Kurva baku


Suatu seri larutan baku tanin dengan konsentrasi 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 dan 0,8
mg/mL diambil masingmasing 1,0 mL, dan dimasukkan ke dalam labu takar 10 mL
yang berisi 7,5 mL aquabidestilata. Ke dalamtabung tersebut ditambahkan 0,5 mL
pereaksi Folin Denis dan 1,0 mL larutan NaCO3 jenuh. Dicampur dengan baik
kemudian serapannya dibaca pada panjang gelombang maksimum.

G. Penetapan kadar tannin


Infusa daun salam sebanyak 2,0 mL diencerkan dengan aquabidestilata sampai 10
mL. Dipipet 1,0 mL dan dimasukkan ke dalam labu takar 10 mL yang berisi 7,5 mL
aquabidestilata. Ke dalam tabung tersebut ditambahkan 0,5 mL pereaksi Folin Denis
dan 1,0 mL larutan NaCO3 jenuh. Dicampur dengan baik kemudian serapannya
dibaca pada panjang gelombang maksimum.
BAB IV
PEMBAHASAN

4.1.Metode I
Penetapan Kadar (Jurnal : Determination of Tannins of Three Common Acacia
Species of Sudan)
Pereaksi Folin-Denis adalah campuran asam fosfomolibdat fosfotungstik, dan ketika
asam kompleks labil ini direduksi oleh fenol, oksida tungstat biru diperoleh yang diukur
secara spektrofotometri pada 725nm. Jumlah tanin ditentukan oleh persiapan larutan
tanin dan penyerapan tanin pada bubuk kulit yang dihidrasi dan dikrom. Perbedaan bahan
fenolik, seperti yang ditunjukkan oleh analisis Folin-Denis sebelum dan sesudah
perawatan dengan hidrasi, bubuk kulit krom, digunakan untuk mengukur tanin. Senyawa
fenolik dari struktur yang berbeda memberikan respons terhadap reagen Folin-Denis.
Semua hasil dalam penelitian ini telah dinyatakan dalam bentuk setara asam tanat.
Seperti yang ditunjukkan oleh metode Folin-Denis, bagian utama fenolik dalam spesies
Acacia ini terdiri dari tanin (Tabel 3). Perbedaan kecil dalam jumlah sisa bahan fenolik
setelah pengendapan tanin dengan bubuk memiliki efek yang relatif kecil pada
perhitungan persentase tanin yang ada dalam bahan tanaman asli.
Perbandingan jumlah tanin yang ada dalam daun, kulit kayu, dan buah-buahan dewasa
dan belum matang dari spesies dibuat dengan ekstrak air sampel yang dikumpulkan dari
individu tunggal (Tabel 3). Total bahan fenolik terkaya dalam buah-buahan matang,
belum matang, daun, dan kulit kayu Acacia nilotica dan Acacia seyal. Mereka lebih
rendah di kulit kayu Acacia senegal. Tren yang sama diamati untuk tanin. Studi
tambahan akan diperlukan untuk memperkirakan variasi di dalam dan di antara populasi
masing-masing spesies. Hasil penelitian menunjukkan bahwa buah dewasa dan belum
menghasilkan dari Acacia nilotica memiliki persentase tanin tertinggi (22,15% dan
22,10%, resp.), Sedangkan daun dan kulit dari spesies yang sama masing-masing
memiliki 11,8% dan 10,47%. Daun dan kulit kayu Acacia seyal memiliki nilai sedang
(6,32% dan 12,15%, resp.) Kulit kayu dari Acacia senegal memiliki persentase tanin
yang jauh lebih rendah (3,49%) (Tabel 3).

Isolasi Tanin
Jurnal : Isolation of tannins from the leaves of Nephelium lappaceum L.
(Sapindaceae) and the HPTLC of the isolated compound (Isolasi tanin dari daun
Nephelium lappaceum L (Sapindaceae) dan HPTLC dari senyawa yang diisolasi)
Tanin diisolasi dari daun Nephelium lappaceum dan dikonfirmasi dengan uji kimia.
Parameter fisiko-kimia dari tanin terisolasi ditentukan. Baik asam tanat standar dan tanin
terisolasi terlihat, HPTLC dilakukan dan dibandingkan. Dari Area Di Bawah Kurva
jumlah Tannin yang ada di daun Nephelium lappaceum serta jumlah asam Tannic yang
ada dalam standar dihitung. Jumlah asam tanan hadir dalam Standar ditemukan 0,020 mg
/ ml. Jumlah asam tanan hadir dalam daun Nephelium lappaceum L. ditemukan 0,013 mg
/ ml.
Karakteristik Tanin (Jurnal : Methods for Extraction and Characterization of
Tannins from Some Acacia Species of Sudan)
Jurnal :
Dalam penelitian ini, dua set ekstraksi dibuat, satu dengan mendidih dan yang lain
dengan mengocok sampel dalam pelarut masing-masing selama 8 jam pada suhu kamar
(Tabel 1). Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi adalah air suling, 80% metanol dan
70% aseton. Meskipun jumlah bahan yang diekstraksi oleh kedua prosedur ini tidak
berbeda jauh (P> 0,05), aseton 70% adalah pelarut yang lebih efisien daripada air atau
80% metanol (Tabel 1) dalam hal berat bahan yang diekstraksi dari yang diberikan berat
bahan spesies Acacia dan dalam persentase tanin dalam bahan fenolik yang diekstraksi,
dan persentase tanin yang dikeluarkan dari sampel kulit kayu.
Juga dalam penelitian ini, tanin ekstrak buah matang dari Acacia nilotica diidentifikasi
oleh TLC, UV dan spektrometri IR. Perbandingan spektra serapan dan kromatogram TLC
dari tanin referensi dan beberapa fenolat terkait dengan ekstrak Acacia nilotica
mengungkapkan adanya tanin yang terkondensasi dan terhidrolisis.
Hasil yang disajikan dalam penelitian kami, menunjukkan bahwa ketika ekstrak
dijalankan dengan TLC dua dimensi, itu memberikan tiga fraksi, (Gbr. 1). Perbandingan
standar dengan ekstrak memberi pola yang ditunjukkan pada Tabel 2 oleh TLC. Tiga
fraksi ekstrak pada TLC digaruk dan diambil secara terpisah, komposisi fraksi pigmen
diselidiki oleh TLC (Tabel 3). Beberapa tes kimia diterapkan untuk masing-masing dari
tiga fraksi untuk mengidentifikasi sifat atau sifat fraksi, fraksi I dan III, (Tabel 4) tidak
menunjukkan sifat tanin.
Spektrum serapan UV dari ekstrak dan standar ketika menggunakan metanol sebagai
pelarut, mereka telah menunjukkan puncak maksimum pada 280 nm, (Tabel 5),
menunjukkan adanya katekin dan asam tanat. Ketika ekstrak dan standar mengalami
hidrolisis oleh asam HCl alkohol, mereka menunjukkan puncak maksimum pada 272 nm,
(Tabel 6) menunjukkan adanya asam galat dan tanat. Catechin (Flavan-3 ols) dianggap
sebagai monomer dari tanin terkondensasi. Hidrolisis ekstrak Acacia nilotica, asam tannic
dan gallic oleh asam butanolic-HCl menghasilkan asam gallic yang dianggap sebagai
prekursor kimiawi tanin terhidrolisis.

Spektrum serapan IR dari ekstrak, menunjukkan keberadaan gugus hidroksil (OH-),


peregangan CH aromatik, gugus karbonil C = peregangan O, peregangan cincin C, C
peregangan dan pembengkokan CH di luar pesawat bila dibandingkan dengan standar.

4.2.Metode II

PENETAPAN KADAR TANIN DALAM INFUSA DAUN SALAM (Syzygium


polyanthum
(Wight.) Walp)) SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK

Untuk mengetahui kandungan tanin dalam infusa daun salam maka dilakukan uji
kualitatif dengan reaksi warna menggunakan H2SO4 dan FeCl3, serta dengan
panambahan larutan gelatin. Dengan pereaksi FeCl3 terbentuk warna hitam kebiruan
yang ketika dilakukan penambahan H2SO4 berubah menjadi coklat. Ketika dilakukan
penambahan larutan gelatin terbentuk endapan putih (Robinson, 1995). Reaksi dengan
FeCl3 melibatkan struktur tanin yang merupakan senyawa polifenol, yaitu dengan adanya
gugus fenol ini akan berikatan dengan FeCl3 membentuk kompleks berwarna hitam
kebiruan. Kompleks yang terbentuk ini tidak stabil dengan penambahan H2SO4(Anonim,
1995). Berdasarkan hasil tersebut maka dapat dinyatakan bahwa di dalam sampel infusa
daun salam mengandung tanin.

Kadar tanin dalam infusa daun salam yang berbeda usia ditetapkan dengan
metode spektrofotometri ultraviolet-visibel dengan menggunakan pereaksi Folin Denis.
Pereaksi ini mengandung asam fosfomolibdat yang akan direduksi menjadi molibdenum.
Ketika sudah mengalami reduksi maka larutan menjadi berwarna biru dan dapat diukur
serapannya pada daerah sinar tampak. Dalam hal ini, tanin berperan sebagai zat
pereduksi. Semakin banyak tanin yang terkandung dalam sampel infusa daun salam maka
semakin banyak fosfomolibdat yang tereduksi menjadi molibdenum, akibatnya warna
biru yang terbentuk semakin intensif dan nilai serapan yang terukur juga semakin besar.

Untuk analisis kuantitatif menggunakan metode spektrofotometri ultraviolet-


visibel maka perlu dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum. Setelah
dilakukan pengukuran maka diperoleh hasil bahwa pajang gelombang maksimum larutan
standar tanin adalah 745 nm, sehingga untuk mengukuran serapan dipergunakan panjang
gelombang ini.
Kurva baku dibuat dengan membuat larutan asam tanat dengan konsentrasi 0,2;
0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 dan 0,8 mg/mL. Kurva hubungan antara konsentrasi dan serapan
menunjukkan hubungan yang linier (r=0,997) dengan persamaan garis lurus y = 0,937 x +
0,0296. Kurva baku ini digunakan untuk menghitung kadar tanin dalam sampel infusa
daun salam.

Gambar 1. Hasil scanning larutan baku asam tanat setelah direaksikan dengan pereaksi
Folin Denis

Gambar 2. Kurva hubungan konsentrasi asam tanat (mg/mL) dan serapan

Hasil penetapan kadar tanin dalam sampel infusa daun salam muda dan daun
salam tua berturut-turut 2,38±0,036% (KV=1,51%) dan 2,45±0,007% (KV=0,29%).
Untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan kadar tanin dalam sampel daun salam muda
dan tua maka dilakukan analisis statistik dengan uji t. Analisis dengan uji t diperoleh nilai
t hitung 3,407 lebih besar dibandingkan t tabel. Nilai t hitung tersebut menunjukkan
adanya perbedaan yang signifikan antara kadar tanin pada daun salam muda dengan
kadar tanin pada daun salam tua.
BAB V
PENUTUP
Kesimpulan
Tanin merupakan senyawa fenolik yang mengandung protein. Tanin terdiri atas bermacam-
macam kelompok oligomer dan polimer.
5.1.Metode I
Penetapan Kadar Tanin
Kita dapat menyimpulkan bahwa, di antara tiga spesies Akasia yang diteliti, Acacia
nilotica adalah yang terkaya dalam kandungan tanin, dan di dalam bagian Acacia nilotica,
buah-buahan dewasa dan belum matang adalah yang tertinggi dalam kandungan tanin,
sedangkan kulit ketiga spesies Akasia adalah yang paling sedikit. . Metode Folin-Denis
untuk total bahan fenolik, diikuti oleh pengendapan tanin oleh kulit bubuk, adalah
prosedur yang cocok untuk evaluasi kandungan tanin.
Isolasi Tanin
Tanin diisolasi dari daun Nephelium lappaceum dan itu dikonfirmasi oleh tes kimia. Itu
Parameter fisika-kimia dari tanin terisolasi adalah ditentukan. Baik asam tanat standar
dan terisolasi Tanin terlihat, HPTLC dilakukan dan dibandingkan. Dari Area Di Bawah
Kurva jumlah Tannin yang ada di daun Nephelium lappaceum L.as serta jumlahnya hadir
asam Tannic dalam standar dihitung. Lebih lanjut karakterisasi spektral dari senyawa
yang diisolasi dapat menghasilkan obat-obatan yang menjanjikan untuk digunakan di
masa depan.
Karakteristik Tanin
Studi ini telah menunjukkan bahwa ekstraksi tiga spesies Akasia menggunakan air suling,
80% metanol dan 70% aseton telah berhasil dibuat. Ekstraksi dilakukan sekali dengan
mendidih dan yang lainnya dengan mengocok sampel dalam pelarut masing-masing
selama 8 jam pada suhu kamar. Hasil menunjukkan bahwa aseton 70% adalah pelarut
paling efisien di antara tiga pelarut yang digunakan. Selain itu, studi karakterisasi ekstrak
Acacia nilotica mengungkapkan adanya beberapa senyawa dari kedua tanin terkondensasi
dan terhidrolisis.

5.2.Metode II
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan bahwa kadar tanin pada daun salam
dengan variasi umur daun mempunyai perbedaan yang signifikan. Kandungan tanin pada
daun salam yang lebih tua lebih tinggi dibandingkan pada daun salam yang lebih muda
usianya.
DAFTAR PUSTAKA
1. Elgailani, Isam Eldin Hussein. Ishak, Christina Yacoub. 2016. Methods for Extraction
and Characterization of Tannins from Some Acacia Species of Sudan. Vol. 17, No. 1
(2016) 43 – 49.
2. Sruthi DR and Indira G. 2016. Isolation of tannins from the leaves of Nephelium
lappaceum L. (Sapindaceae) and the HPTLC of the isolated compound. 5(5): 395-
397.
3. Elgailani, Isam Eldin Hussein. Ishak, Christina Yacoub. 2014. Determination of
Tannins of Three Common Acacia Species of Sudan.
4. Mufti Kharismawati, Pri Iswati Utami, Retno Wahyuningrum 2009. Penetapan
Kadar Tanin Dalam Infusa Daun Salam (Syzygium Polyantum (Wight.) Walp))
Secara Spektrofotometri Sinar Tampak. PHARMACY,Vol.06 No. 01 April 2009

Anda mungkin juga menyukai