El complejo ATP sintasa (EC 3.6.3.

14) o complejo V o FoF1-ATP sintasa (F = factor

de acoplamiento, en ingl�s coupling factor) es una enzima transmembranal que
cataliza la s�ntesis de ATP a partir de ADP, un grupo fosfato y la energ�a
suministrada por un flujo de protones (H+). Durante la respiraci�n celular, la
s�ntesis de ATP se denomina fosforilaci�n oxidativa y el flujo de protones tiene
lugar entre el espacio intermembr�nico y la matriz mitocondrial. En el caso de la
fotos�ntesis, se habla de fotofosforilaci�n y la enzima act�a en el lumen y el
estroma de los cloroplastos.

La ATP sintasa se puede imaginar como un motor molecular que produce una gran
cantidad de ATP cuando los protones fluyen a trav�s de ella. La tasa de s�ntesis es
grande, el organismo humano en fase de reposo puede formar unas 1021 mol�culas de
ATP por segundo.1?

Mediante experimentos in vitro se ha demostrado que la ATP sintasa act�a de forma

independiente respecto a la cadena de transporte de electrones, la adici�n de un
�cido d�bil (por ejemplo �cido ac�tico) a una suspensi�n de mitocondrias aisladas
es suficiente para inducir la bios�ntesis de ATP in vitro.2?

Estructura y funciones de las unidades

La ATP sintasa tiene un di�metro de 10 nm, y es el complejo m�s peque�o
identificado hasta ahora. Trabaja con un grado de eficacia cercano al 100%.

Esta enzima est� formada por dos complejos principales. Uno, que atraviesa la
membrana mitocondrial interna o la membrana del tilacoide, se llama Fo (CFo en los
tilacoides). El otro, que sobresale de la membrana, se llama F1 (CF1 en los
tilacoides). F1 y Fo se asocian mediante interacciones electrost�ticas.

El componente Fo es el motor impulsado por protones. Se conoce como factor sensible

a la oligomicina y est� formado por las subunidades a, b2 y c10-14. Las subunidades
c forman el �anillo c�, que rota en respuesta al flujo de protones por el complejo.
El segundo complejo, F1, est� formado por las subunidades a3, �3, ?, d y e. La
parte principal del complejo F1 est� formada por tres d�meros a�. La actividad
catal�tica de este hex�mero est� localizada en las subunidades �. Las subunidades ?
y e giran impulsadas por el giro del anillo c. Cada rotaci�n de 120� de la
subunidad ? induce cambios conformacionales en las a y �. Finalmente, las
subunidades b2OSCP1 (Oligomycin Sensitiviy Conferring Protein) enlazan los
componentes F1 y Fo.2?

Teor�a quimiosm�tica
La Teor�a quimiosm�tica, tambi�n conocida como la teor�a quimiosm�tica de Mitchell,
explica la manera en que la energ�a libre que se genera por la actividad de cadena
de transporte de electrones se emplea para producir ATP a partir de la reacci�n ADP
+ Pi.

Las coenzimas reducidas procedentes del ciclo de Krebs (NADH + H+ y FADH2)

atraviesan una serie de complejos enzim�ticos (cadena de transporte de electrones)
que producen en ellas sucesivas reacciones de oxidaci�n-reducci�n cuyo objetivo es
la utilizaci�n del flujo de electrones para bombear protones al espacio
intermembrana de la mitocondria o cloroplasto, creando un gradiente electroqu�mico
un gradiente de pH (gradiente de concentraci�n) y un desequilibrio de carga
(gradiente electroqu�mico) en la membrana mitocondrial interna. Las ATP sintasa
forman ATP utilizando la energ�a libre procedente del gradiente de protones,
utilizando el hecho de que los protones tienden a volver al interior del org�nulo,
y s�lo pueden hacerlo a trav�s de la ATP sintasa, ya que la membrana interna es
impermeable a los protones.

Cuando los protones son bombeados fuera de la matriz, el espacio intermembrana se

convierte en m�s �cido y con mayor carga positiva que en la matriz. La matriz es
b�sica y con una carga negativa. Peter Dennis Mitchell (1920-1992) utiliz� el
t�rmino �quimiosm�tico� para describir las reacciones enzim�ticas en las que
intervienen, simult�neamente, una reacci�n qu�mica y un proceso de transporte.

Mecanismo de la s�ntesis de ATP

ATPsyntasens mekanisme. ATP en rojo, ADP y fosfato en rosado y la propiedad ?

rodando en negro.
La s�ntesis de ATP se escribe algunas veces como:

ADP + Pi + nH+p ? ATP + H2O + nH+P

F1 cataliza la s�ntesis, que es fuertemente enderg�nica, de ATP a partir de Pi y

ADP. Mec�nicamente se impulsa la reacci�n catal�tica con la fuerza prot�n-motriz
del gradiente de protones a trav�s de la membrana mitocondrial causando el
movimiento de giro del anillo c, ? est� unida al anillo c, provoc�ndole movimientos
de rotaci�n. Cada rotaci�n de 120� de la subunidad ? induce la aparici�n de cambios
de conformaci�n en los centros catal�ticos de las unidades � de los d�meros a�, de
forma que los centros de fijaci�n de nucle�tidos van alternando entre tres estados:

Estado O = estado abierto, L = uni�n libre y T= uni�n tensa (en ingl�s, tight).

Aunque la composici�n de amino�cidos de las tres subunidades � es id�ntica, sus

conformaciones difieren en parte por la asociaci�n a al subunidad ?.

Los d�meros a� son asim�tricos, cada uno de ellos presenta una conformaci�n
diferente en cada estado. Las tres subunidades � interaccionan de tal modo que,
cuando una adopta la conformaci�n O, otra ha de adoptar la conformaci�n L y la del
otro una conformaci�n T. La conformaci�n T posee mayor afinidad para ATP que para
ADP + Pi y disminuye con ello la constante de velocidad de la reacci�n en valores
cercano a uno; es decir, substrato y producto se encuentran en condiciones
est�ndar, cerca de la equimolaridad.

La s�ntesis de ATP se inicia en el estado L con la uni�n de ADP y Pi. El siguiente

estado es la conformaci�n T que sigue la condensaci�n del ADP y Pi a ATP con la
formaci�n de un enlace fosfodi�ster. Finalmente, el estado O deja libre el producto
ATP, y vuelve nuevamente al estado L iniciando nuevamente la siguiente ronda de
s�ntesis. Por lo tanto, una rotaci�n completa de la subunidad ? provoca que cada
subunidad � se cicle a trav�s de sus tres conformaciones posibles y en cada
rotaci�n se sintetizan y se liberan de la superficie del enzima tres mol�culas de
ATP. La interconvenci�n conducida por protones, direccional y c�clica, de los
estados O, L y T, permite una producci�n continua. Este mecanismo se conoce como
mecanismo de cambio de la fijaci�n.3?

El paso dependiente de energ�a no es la s�ntesis de ATP sino su liberaci�n de un

lugar de uni�n compacta. Esta liberaci�n se produce por la rotaci�n de ? que
requiere energ�a, que impulsa los cambios conformacionales de los d�meros a�. Esta
liberaci�n se produce simult�neamente con la uni�n del ADP y el Pi, que se hab�an
unido previamente, se unen a un lugar T para experimentar una conversaci�n
espont�nea a ATP, mientras que el lugar O, del que se liber� el ATP, une otro ADP y
Pi para empezar de nuevo el proceso.4?

Historia
En 1994, la publicaci�n, por parte del grupo de John Walker, de la estructura
cristalina del componente F1 de 371 kDa del complejo V aclar� el mecanismo que
media el paso de protones a trav�s del complejo FoF1 e impulsa la s�ntesis de ATP.
Todo esto apoy� el mecanismo propuesto por Paul Boyer varios a�os antes, el
mecanismo de cat�lisis rotacional, en el que la rotaci�n de la subunidad ? produce
cambios conformacionales de los d�meros a�.
La determinaci�n estructural del complejo FoF1 y el mecanismo de la s�ntesis de ATP
condujo al reconocimiento de Walker y Boyer como ganadores del Premio Nobel de
Qu�mica de 1997.

Acoplamiento del transporte electr�nico y la s�ntesis de ATP

El gradiente electroqu�mico acopla el ritmo de la cadena de transporte electr�nico
con el ritmo de la s�ntesis de ATP. Debido a que el flujo electr�nico necesita el
bombeo de protones, el flujo electr�nico no puede producirse m�s r�pidamente que la
utilizaci�n de los protones para s�ntesis de ATP (fosforilaci�n oxidativa
acoplada), significando en una relaci�n estrechamente acoplada entre la oxidaci�n y
la fosforilaci�n.

Esto lleva a que los sustratos se oxidan, los electrones se transportan y el

ox�geno se consuma tan solo cuando se requiere la s�ntesis de ATP. Por lo tanto,
las mitocondrias en reposo consumen ox�geno a una velocidad lenta, pero que puede
incrementarse enormemente en presencia de ADP. Las mitocondrias captan el ADP, lo
que estimula la ATP sintasa que disminuye el gradiente de protones. Entonces
aumenta la respiraci�n, puesto que se estimulan las bombas de protones para
restablecer el gradiente. Por tanto se puede resumir diciendo que el �control
respiratorio� es la dependencia de captaci�n de ox�geno por las mitocondrias seg�n
la disponibilidad de ATP.5?

Desacoplamiento
Desacopladores sint�ticos
Se trata de un fen�meno donde los protones retornan a la matriz sin pasar por la
ATP sintasa, lo que implica la no generaci�n de ATP. El desacoplamiento es
provocado por compuestos qu�micos, conocidos como desacopladores o como ion�foros
prot�nicos. Los desacoplantes suelen ser compuestos hidr�fobicos (bases o �cidos
d�biles), con un pKa cercano al pH 7, que captan protones r�pidamente en el espacio
intermembrana. Su liposolubilidad les permite difundir a trav�s de la membrana
mitocondrial interna transportando los protones y liber�ndolos en el lado de la
matriz. La entrada r�pida de protones disipa el gradiente de potencial
electroqu�mico; por tanto la ATP sintasa es incapaz de sintetizar ATP, lo cual
provoca que la membrana interna pierda su integridad estructural y, por extensi�n,
las mitocondrias tambi�n.5? En este caso se dice que son porosas (leaky).

El desacoplamiento de la fosforilaci�n oxidativa hace desaparecer el gradiente de

protones sin intervenci�n de la ATP
sintasa. De este modo se prosigue el transporte de electrones a ritmo r�pido, el
sistema hace un intento inefectivo de
restaurar el gradiente de protones oxidando m�s combustible y bombeando m�s
protones hacia el exterior de las mitocondrias.
La energ�a producida por el transporte de electrones se descarga en forma de calor
en vez de utilizarse para la s�ntesis de
ATP.

El 2,4-dinitrofenol (DNP) es una de la biomol�culas que tiene una funci�n

desacopladora, es liposoluble y puede atravesar
la membrana siendo capaz de captar protones en un medio �cido. El DNP se recomend�
en los Estados Unidos como f�rmaco
adelgazante, basado en el principio de que la disminuci�n de ATP y el aumento de
del transporte electr�nico estimulaba la
oxidaci�n del combustible. Sin embargo, varias personas fallecieron como
consecuencia de su uso. Aumenta radicalmente el
consumo de ox�geno y los combustibles metab�licos, y casi toda la energ�a
metab�lica se pierde en forma de calor. Las c�lulas
mueren tanto a causa del exceso de temperatura como de falta de ATP.2?
El �cido acetilsalic�lico desacopla la fosforilaci�n oxidativaa dosis elevadas.
Esto explica la fiebre que acompa�a a las
sobredosis t�xicas de estos f�rmacos.6? Otros desacopladores son algunos
conservantes y los antimicrobianos (por ej.
pentaclorofenol y p-cresol).

Prote�nas desacopladoras (UCP)

Ocurre en la membrana mitocondrial interior de los mam�feros. Estas prote�nas
permiten que los protones reingresen en la
matriz mitocondrial sin que se capture energ�a en forma de ATP.6?

La primera de estas UCP (uncoupling proteins) que se descubri� fue la prote�na de

desacoplamiento 1 (UCP1), llamada tambi�n
termogenina y que se encuentra de modo exclusivo en el tejido adiposo pardo. El
tejido adiposo pardo es abundante en el
reci�n nacido y en algunos mam�feros adultos. Adem�s, al parecer su color marr�n se
debe a su elevado contenido en
mitocondrias. La �nica funci�n. La UCP1 se encarga de activar la oxidaci�n de los
�cidos grasos y la producci�n de calor en
el tejido adiposo pardo, proporcionando calor corporal durante el estr�s por fr�o
en los animales j�venes y algunos adultos
as� como durante la hibernaci�n. Ello se consigue desacoplando el gradiente de
protones y generando as� calor (termog�nesis)
en lugar de ATP.

El genoma humano expresa otras cuatro prote�nas desacoplantes: UCP2, UCP3, UCP4 y
UCP5. El UCP1 es exclusiva del tejido
adiposo pardo, UCP2 se expresa de modo ubicuo, UPC3 se expresa principalmente en el
m�sculo esquel�tico, y el UCP4 y UCP5
se expresa en el cerebro. Con la expresi�n de UCP1, en se conocen bien las
funciones fisiol�gicas de estas prote�nas, sin
embargo, podr�an tener gran importancia para conocer mejor trastornos y
enfermedades como la diabetes, la obesidad, el
c�ncer, las enfermedades del tiroides y el envejecimiento. No obstante el mecanismo
real a�n se desconoce. Asimismo, el
sistema de las UCP tambi�n puede ser importante en la regulaci�n del potencial de
membrana.2?

Normalmente las mitocondrias humanas sufren un bajo nivel de escape de protones a

trav�s de la membrana mitocondrial intrena,
y de esta forma, las mitocondrias normalmente se encuentran desacopladas. Las
mitocondrias pueden desacoplarse parcialmente

Las reacciones dependientes de la luz tienen lugar en las secciones de la membrana

de los cloroplastos y tilacoides, que
ofrecen una gran superficie para absorber energ�a de la luz.

La principal funci�n de estas reacciones consiste en proveer una fuente de ATP y

NADP reducido que se usan para reducir CO2
en las reacciones independientes de la luz.

El ATP se forma en el �ltimo paso cuando los iones H + son bombeados desde la luz
del tilacoide hasta el estroma del
cloroplasto a trav�s de la enzima ATP sintasa. Esto transforma a las mol�culas de
APD en mol�culas de ATP.

Inhibidores de la ATP sintasa

La oligomicina6? se fija en el tallo de la ATP sintasa, inhibiendo el canal de
protones, por tanto previniendo el reingreso
de protones en la matriz mitocondrial. Como los gradientes de pH y el�ctricos no se
pueden disipar en presencia de la
oligomicina, el transportador de protones se detiene por la dificultad para el
bombeo de m�s protones contra los gradientes
muy inclinados. Causa una acumulaci�n de protones en el espacio intermembrana.2?

Transporte de ATP y ADP

La fuerza prot�n-motriz tambi�n sirve para impulsar varios procesos de transporte
esenciales para la fosforilaci�n oxidativa,
aunque el papel principal del gradiente de protones en las mitocondrias es
suministrar energ�a para la s�ntesis de ATP. La
membrana mitocondrial interior necesita transportadores especializados para el ADP
y Pi desde el citosol hacia el interior
de la mitocondria, al sitio donde se puede res�ntetizar a ATP, ya que la membrana
mitocondrial interna es generalmente
impermeable a las mol�culas con carga. Por tanto hay dos sistemas espec�ficos que
transportan ADP y Pi a la matriz y ATP
hacia el citosol externo. Un transportador de nucle�tidos de adenina translocasa y
fosfato translocasa son los dos sistemas
que intervienen.4? La nucle�tido de adenina translocasa une ADP y es por tanto la
encargada en transportar una mol�cula de
ADP desde el citosol hacia el interior de la mitocondria, a la vez que exporta un
ATP desde la matriz de nuevo hacia el citos
ol. Fosfato translocasa transporta en Pi junto con un prot�n a la matriz.6?

La toxina de las plantas atractil�sido inhibe de manera poderosa al transportador,

lo que resulta en un agotamiento de la
reserva de ADP intramitrocondrial e interrupci�n de la producci�n de ATP6?

Deficiencia de la ATP sintasa

Los trastornos de la fosforilaci�n oxidativa mitocondrial (OXPHOS) causan un grupo
altamente diverso de enfermedades que
afectan principalmente a los tejidos que exigen energ�a, tales como el sistema
nervioso, el m�sculo esquel�tico y el
coraz�n. Los defectos gen�ticos generan mutaciones en el DNA mitocondrial (mtDNA)
como en los genes nucleares. Mutaciones
en el DNA nuclear se involucran con m�s frecuencia en enfermedades pedi�tricas de
deficiencia mitocondrial que las
mutaciones del mtDNA. Los trastornos mendelianos del OXPHOS pueden afectar a todos
los complejos de la cadena respiratoria,
sobre todo del complejo I y IV, mientras que los trastornos de la ATP sintasa se
han reportado con menos frecuencia.

La disfunci�n aislada de la ATP sintasa puede ser causada tanto por mutaciones del
DNA mitocondrial como por defectos
gen�ticos de origen nuclear. Se han descrito varias mutaciones en el gen ATP6 en el
mtDNA que alteran la funci�n del canal
de protones y provocan p�rdida de actividad de s�ntesis de ATP, mientras que
mantiene la actividad hidrol�tica. Los
trastornos transmitidos por v�a materna se producen con frecuencia y suelen afectar
al sistema nervioso perif�rico. Los
pacientes presentan una neuropat�a, ataxia y retinitis pigmentosa (NARP), s�ndrome
de Leigh heredado por v�a materna (MILS)
o necrosis estriatal bilateral.

El origen nuclear de la deficiencia de la ATP sintasa se demostr� por primera vez

en 1999 en un ni�o con grave acidosis
l�ctica, cardiomiopat�a y hepatomegalia. Hasta ahora, s�lo unos pocos han sido
reportados s�lo con deficiencia de la ATP
sintasa debido a defectos gen�ticos en el n�cleo. Se caracterizan por un contenido
marcadamente disminuido de manera
estructural y por un funcionamiento normal de la enzima. La causa principal parece
ser un defecto en la fase inicial del
ensamblado de la enzima, que incluye la formaci�n de la parte catal�tica de F1 de
la enzima.7?

Las s�ntomas sobre cada uno de los complejos defectos no se pueden describir
claramente, suele suceder que un mismo
individuo presenta defectos en m�s de un complejo.