CODIGO: 3523
CONDICION: OBLIGATORIA
CREDITOS: 5 (2 Teoría - 1 Problemas - 2 Laboratorio)
FUNDAMENTACION.
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Cátedra de Química. Escuela de Bioanálisis. Facultad de Medicina. U.C.V.
relativos al material de laboratorio, reactivos químicos, uso adecuado de los mismos,
normativa a seguir en un laboratorio, preparación y normalización de soluciones.
Para la consecución de los objetivos planteados en el programa de la asignatura,
se sugiere a los estudiantes, la lectura de guías de estudio elaboradas por los profesores
de la Cátedra y de diferentes textos a fin de que puedan afianzar y ampliar los conceptos
impartidos en clase. Se establecen también, horas de consulta con los profesores de
modo que el estudiante tenga oportunidad de aclarar las dudas que se le pudieran
presentar.
TEMA Nº 1
QUÍMICA ANALÍTICA UNA VALIOSA HERRAMIENTA PARA EL PROFESIONAL DEL
BIOANÁLISIS.
OBJETIVO GENERAL.
Desarrollar habilidades y destrezas que le permitan obtener e interpretar
información cualitativa y cuantitativa adquirida por procedimientos teóricos y/o
experimentales a fin de resolver los diferentes problemas que se le presentarán durante
este curso, en cursos posteriores y en su ejercicio profesional.
Objetivo Terminal.
El dominio de los conceptos considerados en este tema, permitirá dar respuesta a
numerosas interrogantes que pueden surgir sobre la aplicación de técnicas de análisis
químico en el estudio de muestras biológicas cuyos resultados pueden estar asociados a
diferentes patologías.
Evaluación.
Prueba Parcial con criterios adecuados a los objetivos que deben alcanzar los
estudiantes.
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En base a las lecturas realizadas:
seleccionar el tipo de análisis químico
cuantitativo a aplicar de acuerdo al
tamaño de la muestra; seleccionar los
métodos y técnicas del análisis
químico de uso más frecuente en el
laboratorio clínico.
LA QUÍMICA ANALITICA. OBJETO. CLASIFICACIÓN E IMPORTANCIA DE LA QUÍMICA
ANALÍTICA.
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cuando se trata de una mezcla, generalmente es necesario efectuar una separación de
los componentes antes de que ésta pueda con seguridad identificarse.
Es evidente que el precipitado de BaSO4 está en contacto con una solución que
contiene Na+, Cl- , Ba+2. La presencia de Ba+2 es debido al exceso de reactivo que
generalmente se añade. Después de la filtración, el precipitado no es puro, pues está
humedecido con la solución que contiene los iones antes citados. Para eliminar estos
iones se lava el precipitado con agua en el filtro. El agua, diluye la solución que está en
contacto con el precipitado y después de atravesar el filtro deja el precipitado humedecido
con una solución más diluida de dichos iones. Repitiendo esta operación con agua, vertida
cada vez en pequeñas cantidades , queda al final el precipitado prácticamente libre de
aquellos iones. Usualmente, el precipitado es tan poco soluble en agua que para todos
los fines prácticos, puede admitirse que ha permanecido insoluble durante el tratamiento
con agua. Este procedimiento de eliminar las impurezas solubles de un precipitado se
llama LAVADO.
Para conocer si el precipitado está completamente lavado, basta ensayar el líquido
que pasa a través del filtro después del tercero y cuarto lavado. Con objeto de ver si
contiene todavía el ion que se desea eliminar( en este caso escogeremos el ion Cl- ya que
puede investigarse fácilmente) tomaremos 2 ml del líquido de lavado y agregaremos una
pequeña cantidad de reactivo AgNO3 y si no se forma precipitado de AgCl, el lavado ha
sido completo, si por el contrario se forma un precipitado de AgCl el lavado debe
proseguirse hasta que las aguas de lavado no den reacción positiva del ion Cl- con AgNO3.
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separadas de la solución obtener con reactivos adecuados, compuestos insolubles
característicos de cada clase de ion.
Al identificar una sustancia, generalmente se elige la reacción que produzca un
efecto visible y en ciertos casos que afecte el sentido del olfato. Por esta razón las
reacciones más frecuentemente empleadas son aquellas en las que tiene efecto un
cambio de estado, es decir, al operar con una sustancia soluble se forme un compuesto
sólido insoluble o un gas al añadir el reactivo adecuado.
2.- Análisis parcial o completo. Para muchos propósitos puede ser suficiente medir
solamente uno o unos cuantos componentes de la muestra. Ejemplo el análisis del
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contenido en cobre de un mineral de cobre es un análisis parcial. Un análisis completo
involucra la determinación de todos los componentes de la muestra que puedan ser
determinados mediante ensayos sensibles.
4.- Escala de Análisis: A veces se clasifican los métodos analíticos atendiendo al tamaño
de la muestra tomada o a la cantidad de material que se determina. Los límites que se
dan a continuación no deben considerarse fijos, sino sólo aproximados.
a) Macroanálisis: 0,1 a 2 g de muestra (décima de gramo)
b) Semimicroanálisis: 0,1 a 0,01 g (centésima de gramo)
c) Microanálisis: 0,01 a 0,001 mg. (miligramo de gramo)
d) Ultramicroanálisis: menos de 0,001 mg
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1.- Métodos Volumétricos: Constituyen los métodos de valoración donde la cantidad
medida es el volumen de disolución que es químicamente equivalente a las especies
deseadas. Comprende.
● Valoración ácido-base: Implican combinación de OH- con H+ para formar agua;
titulación de bases con ácidos valorados (acidimétricos) y de ácido con bases
valoradas (alcalimétricos).
● Valoraciones de precipitación: Implica la reacción de iones, excluida la del H+
con H- , para formar un precipitado, ejemplo titulación de Ag+ con cloruros.
● Valoración cuya reacción implica la formación de un ion complejo Ejemplo
titulación de cianuro con AgNO3.
● Volumetría redox: Implica el uso de soluciones valoradas de oxidantes o de
reductores.
2.- Métodos ópticos: Todo método óptico de análisis supone una o más mediciones de la
longitud de onda o de la intensidad de energía radiante. La base de las aplicaciones
analíticas de estas mediciones son los mecanismos en virtud de los cuales, la energía
radiante entra en interacción con la materia. Así los métodos ópticos pueden clasificarse
como métodos de absorción, de emisión, métodos de difracción y método de refracción.
Los métodos analíticos se clasifican ordinariamente según la propiedad que se
observa en el proceso de medición final. En el siguiente cuadro figuran las más
importantes propiedades así como los nombres de los métodos en que se basan.
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Razón masa a carga Espectrometría de masa
Propiedades térmicas Conductividad térmica y métodos de entalpía.
CONCLUSIONES.
Es interesante observar que hasta 1920 casi todos los análisis se fundaban en las
dos propiedades mencionadas, masa y volumen, en consecuencia, los procedimientos
gravimétricos y volumétricos han llegado a conocerse, como métodos clásicos de análisis.
El resto de la lista consiste en métodos instrumentales.
No es necesariamente cierto que los procedimientos instrumentales empleen
aparatos más complicados o más costosos. En realidad, el uso de una moderna balanza
automática en un análisis gravimétrico supone instrumentación más compleja y refinada
que la que se requiere para muchos de los otros métodos mencionados.
Vemos que todo investigador de las ciencias experimentales tiene ocasión de
utilizar resultados analíticos en el transcurso de su labor. Basta decir que el propio
desarrollo de la Química como ciencia ha descansado siempre en gran manera en los
resultados de observaciones cuantitativas. Ciertamente, con los años se han conseguido
refinamiento significativos de las técnicas de la sensibilidad de las mediciones y de
nuestro conocimiento de los principios en que se basan los análisis, pero sigue dándose el
hecho de que virtualmente toda investigación química implica la adquisición de resultados
analíticos.
Por consiguiente, la meta de un análisis químico es proporcionar información sobre
la composición de una muestra de materia. En ciertos casos, es suficiente la información
cualitativa referente a la presencia o ausencia de uno o mas componentes de la muestra,
en otros, se buscan datos cuantitativos. Pero , cualquiera sea la necesidad, se obtiene
finalmente la información requerida mediante la medición de cierta propiedad física que se
relaciona con el componente en cuestión.
De acuerdo a lo anteriormente expuesto deducimos la gran importancia de la
Química Analítica en los estudios de Bioanálisis, ya que ellos servirán de base a técnicas
numerosas que permitan la determinación de índices biológicos, tan importantes en el
diagnóstico, tratamiento, control y prevención de muchas enfermedades.
BIBLIOGRAFIA.
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❖ CURTMAN, L.: Análisis Químico Cualitativo, 1944.
TEMA Nº 2
SOLUCIONES
OBJETIVO:
Adquirir los conocimientos teóricos necesarios para la preparación de soluciones
tomando en cuenta las características del soluto.
EVALUACION :
Se efectuará en función de una prueba parcial escrita cuyas carácteristicas se
adecuan a los objetivos que deben alcanzar los estudiantes.
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1.1 Realizar las siguientes
lecturas.
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❖ Formas de expresarlas las diferentes
cuantitativamente: formas de expresar 2.2. En base a las lecturas
Unidades físicas de concentración la concentración de realizadas el estudiante redactará
C% p/p las soluciones. el concepto de concentración de
C% p/v una solución.
C% v/v
partes por millón (ppm) 2.3. Ilustrar las diferentes formas
mg%ml. cualitativas y cuantitativas de
Densidad de las soluciones expresar la concentración de las
Conversión C% p/p a C% p/v. soluciones.
SOLUCIONES
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agua de mar es una disolución de gases y sales en agua y del que se alimentan los
microorganismos. El agua constituye el 70 al 90% en peso de la mayor parte de formas
de vida, es el disolvente primordial de los organismos. Los fluidos de organismos vivos,
desde la hemolinfa de insectos hasta la sangre de mamíferos son disoluciones acuosas.
La composición de estas disoluciones es respecto a algunos solutos, constante y una
variación, por pequeña que sea, suele ser un síntoma de una disfunción orgánica. Es
bien conocido que los análisis de sangre y de orina proporcionan a los profesionales de la
medicina una base notable de diagnóstico en muchas enfermedades. Las verdaderas
soluciones constan de un disolvente y uno o más solutos, cuyas proporciones varían de
una a otra solución, a diferencia de lo que corresponde a una sustancia pura, que tiene
composición constante. El disolvente es el medio en el cual los solutos se disuelven. Las
unidades fundamentales de los solutos son los iones o moléculas.
Las soluciones incluyen diversas combinaciones en las que el sólido o el gas
actúan como disolvente o soluto, por ejemplo, el agua de mar es una solución acuosa
de muchas sales y algunos gases como el CO2 y O2. El agua carbonatada es una solución
saturada de CO2. Los rellenos dentales son amalgamas sólidas o soluciones de mercurio
disuelto en métales sólidos. Las aleaciones son soluciones sólidas de metales sólidos
disueltos uno en el otro.
Las soluciones son materiales, homogéneas al microscopio ordinario de
composición y propiedades variables y cuyos componentes son separables por
fraccionamiento físico (destilación, cristalización, evaporación).
El componente de la solución que se encuentra en mayor proporción se llama
solvente y el otro componente, soluto. A veces es conveniente designar un componente
como el solvente aunque esté en pequeñas cantidades, otras veces, la designación de
estas término carece de importancia, tal es el caso de las soluciones gaseosas. Ciertos
pares de sustancias se disuelven unas en otras en todas las proporciones. La miscibilidad
completa es características de los componentes de todas las soluciones gaseosas y
algunos pares de componentes de soluciones líquidas y sólidas. Para la mayoría de los
materiales, sin embargo, hay una cantidad máxima de sustancias que se disolverá en un
solvente dado.
La solubilidad de una sustancia en un determinado solvente a una
temperatura específica es la cantidad máxima de soluto que se disolverá en una
cantidad definida de solvente y que producirá un sistema estable.
Para una solución dada, la cantidad de soluto disuelto en una cantidad dada de
solvente es la concentración del soluto. Aquellas soluciones que tienen una
concentración relativamente baja de soluto se denominan soluciones diluidas y aquellas
que tienen concentraciones relativamente altas de soluto se llaman soluciones
concentradas. Si se añade un exceso de soluto (más de lo que se disuelve normalmente)
a una cantidad de solvente líquido, se establece un equilibrio entre el soluto puro y el
soluto disuelto. En este sistema, la velocidad a la cual el soluto puro se disuelve es igual a
las velocidad a la cual el soluto disuelto sale a la solución, por consiguiente, la
concentración del soluto disuelto es constante. Una disolución de este tipo se llama
solución saturada y su concentración es la solubilidad del soluto en cuestión.
Una solución no saturada o insaturada tiene una concentración de soluto menor
que una solución saturada. Por otra parte a veces se puede preparar una solución
sobresaturada o supersaturada en la cual la concentración de soluto., es mayor que la de
la solución saturada. Sin embargo, esta solución es inestable y si se agrega una pequeña
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cantidad de soluto puro, se precipitará el soluto en exceso del requerido para saturar la
solución.
Ejemplos:
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1) Calcular la concentración del Na+ en mg%ml en una solución de cloruro de sodio al
0,800 % (p/v).
22,9898 g Na+ mg
+ + -
Conc. mg Na % ml = 0,800 g Na Cl % ml -------------------------- x 1000 --------
58,4428 g/Na+Cl- g
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1000 mg/g 22,9898 g Na+
Conc. g Na+ Cl - %ml = 0,905 g Na+ Cl - % ml.
5) Calcular la concentración del Cl- en mg%ml en una solución de cloruro de calcio que
contiene 1,00 g CaCl2%ml:
Obsérvese que en este último ejemplo se ha usado el coeficiente n=2 para multiplicar
el peso fórmula del ion cloruro en vista de que éste es el número de iones cloruro que
contiene un peso fórmula de cloruro de calcio.
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100 100
% p/v = p
eso soluto
volumen solución
% p/p = peso
soluto
peso solución
peso soluto
--------------------------
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% p/v volumen solución
------------ = -----------------------------------------
% p/p peso soluto
--------------------------
peso solución
Como:
peso solución( g) = volumen solución ( cm3) x densidad (g/cm3) tendremos:
% p/p = C p/v .
densidad (g/cm3)
Molaridad:
Es el número de moles de soluto por litro de solución. Si representamos la
molaridad por M podemos establecer la siguiente fórmula para encontrarla:
moles de soluto
M = -----------------------------------
volumen solución (litros)
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o simplemente “molar” uno veinticinco molar”, etc. Significan un mol de soluto por litro de
solución, un mol y cuarto por litro de solución, etc. Como se ve, por la ecuación
anteriormente anotada, la molaridad esta expresada en unidades de moles/litro.
Cuando se conoce el número de moles en 1000 gramos de solución, la molaridad
(M) es igual al número de moles en 1.000 gramos de solución multiplicado por la densidad
de la solución.
Molalidad:
Es el número de moles de soluto por mil gramos de solvente. Esta manera de
expresar la concentración se emplea muy poco; casi exclusivamente para las aplicaciones
de la ley de Raoult. Si representamos la molalidad por m, la fórmula para encontrarla será:
moles de soluto
m = -----------------------------------
peso de solvente en kg.
Fraccion Molar:
Es el número de moles de un componente (soluto ó solvente) entre el número total
de moles presentes en la solución. Si representamos la fracción molar del soluto por Xa y
la del solvente por Xb y los moles de cada componente respectivamente por a y b
tendremos las siguientes fórmulas de acuerdo a la definición dada:
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Obsérvese que la suma de todas las fracciones molares de una solución es
siempre igual a la unidad.
a b a+b
Xa + Xb = ------------ + ------------ = ----------- = 1
a+b a+b a+b
Normalidad:
Es el número de pesos equivalentes de soluto por litro de solución o si
representamos la normalidad por N, la fórmula para calcularla será:
Ejemplo :
(*) En el ácido fosforoso, a pesar de poseer tres hidrógenos, sólo dos de ellos son ácidos,
es decir sustituibles por metal (Pauling, Pag.377).
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Peso equivalente de una base: es el peso de base que neutraliza un equivalente
de ácido (ya definido)
O sea: H+ + OH- H2O
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Peso equivalente de oxidantes y reductores: En forma elemental podríamos definir
el peso equivalente como el peso de oxidante que produce un equivalente de oxígeno.
Peso equivalente de un reductor es el peso del mismo, capaz de reducir un equivalente
de oxígeno.
Ejemplo: 2H2 + O2 2H2O
4 eq. 4 eq.
4g 32 g
1g 8g
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2Caº + Oº2 2Ca2+O2-
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(COOH)2 + Oxidante 2 C02 + H2O
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molecular o peso fórmula entre el número de electrones que gana y peso equivalente de
un reductor, es igual al peso molecular o peso fórmula entre el número de electrones que
pierde.
Estos procedimientos para encontrar los pesos equivalentes de oxidantes y
reductores por la ganancia o pérdida de electrones, son aparentemente más sencillos que
el del número de oxidación. Sin embargo, exigen el establecimiento de las dos
semiecuaciones completas e igualarlas, en cambio, el método del número de oxidación
sólo exige saber la fórmula del oxidante o reductor y la del producto en que se transforma;
no es preciso establecer ecuación.
Veamos el caso de la reacción entre el permanganato de potasio y el ácido
oxálico; por el método del número de oxidación, sólo necesitamos saber que el primero se
transforma en sal manganosa (Mn++) y el segundo en dióxido de carbono. Con sólo estos
datos podemos calcular los cambios en el número de oxidación. Consideremos ahora este
mismo ejemplo por el método de la ganancia y pérdida de electrones ,denominado
ordinariamente, método del ion – electrón:
Semiecuación de oxidación:
Procedemos en etapas:
2.- Sabemos que el reductor pierde electrones, o que una sustancia al oxidarse pierde
electrones; agregaremos el símbolo de electrones después del CO2:
3.- Como partimos de una molécula neutra, nos debe resultar en el segundo término de la
ecuación algún ion positivo para que este lado quede neutro también; será en nuestro
caso el H+:
4.- Ahora igualamos el número de átomos de cada elemento a cada lado de la ecuación:
5.- Por último igualamos las cargas: la suma de cargas positiva y negativas debe ser igual
a cada lado de la ecuación: como partimos de un compuesto neutro, la carga a la derecha
debe ser cero también; esto lo logramos multiplicando por dos la carga negativa (número
de electrones) en este lado:
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Por consiguiente, el peso equivalente del ácido oxálico será la mitad de su peso
molecular, ya que en la semiecuación nos resultan dos electrones. Si no hubiésemos
partido de dicho ácido, sino de un oxalato, nos hubiésemos evitado la etapa Nro. 3 ya que
este ioniza totalmente y habríamos escrito: (COO-)2.
Semiecuación de reducción:
3.- Debemos ver ahora como escribir el oxígeno en el segundo miembro; recordemos que
el permanganato está en solución ácida; agregamos entonces, ion hidrógeno en el lado
izquierdo; esta es una regla siempre que la forma reducida contiene menos oxígeno que
la oxidada, se agrega ion hidrógeno a ésta para que el exceso de oxígeno resulte en
forma de agua.
MnO4- + H+ + e- Mn++ + H2O (incompleta)
4.- Ahora igualamos el número de átomos de cada elemento a cada lado de la ecuación.
MnO4- +
8 H+ + e- Mn++ + 4H2O
5.- Por último, igualamos las cargas de tal forma que la suma sea igual a cada lado de la
ecuación; esto podrá ser logrado únicamente variando el número de electrones, ya que si
pretendemos hacerlo a expensas del número de iones alteramos el balance con el
número de átomos: como tenemos a la izquierda los electrones y a la derecha una carga
total de 2+ nos corresponde aumentar el número de electrones hasta que la suma con las
demás cargas de su lado, dé un total de 2+; es decir, tenemos que colocar un total de 5
electrones:
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EXPRESION DE LA CONCENTRACION EN MILIEQUIVALENTES/LITRO (meq/l;
meq%ml)
Este sistema es también muy empleado junto con el de mg% ml para expresar la
concentración de iones en líquidos biológicos.
La expresión representa el número de miliequivalentes (milésima parte de un
equivalente) por litro de solución ó por 100 ml de solución.
b.- C% p/v a meq/l: Como C% p/v se refiere a gramos de soluto en 100 ml de solución, se
multiplica la concentración en % p/v por 10 para llevar a 1.000 ml; se divide entre el peso
equivalente del soluto para llevar a normalidad y por último se multiplica por 1.000 para
llevar a meq/l. Fórmula:
Conc.g%ml
Conc.meq/l = ------------------- . 10% ml/%ml . 1000 meq/eq.
Peq g/eq
c.- mg%ml a meq/l: Se divide la concentración en mg%ml entre 1.000 mg/g para llevar a
gramos y luego entre el peso equivalente del soluto para llevar a equivalentes; después se
multiplica por 10 para llevar a litros y luego por 1.000 para llevar a miliequivalentes.
Fórmula:
mg%ml . 10%ml/%ml
Conc. meq/l = -------------------------------- . 1000 meq/eq.
1000 mg/g . Peq g/eq
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Cómo, por definición, un equivalente de cloruro de sodio contiene un equivalente de
Na+ y un equivalente de Cl- , la respuesta no requiere de cálculo alguno. Simplemente
una solución de cloruro de sodio de 137 meqNaCl por litro, contendrá también 137
meqNa+/l y 137 meqCl-/l.
1,00 gCaCl2%ml
Conc. meqCaCl2/l = ----------------------------- 10% ml/%ml . 1000 meq/eq
55,493 gCaCl2/eq
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Conc. meqCl-/l = -------------------------------------- 1.000 meqCl-/eq
1000 mg/g 35,453 gCl-/eq
BIBLIOGRAFIA.
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