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LABORATORIO

ACTIVIDAD ENZIMATICA

ACTIVIDAD: EXPERIMENTAL
HCO3. Como nota, a una parte del nombre del
1. INTRODUCCION sustrato sobre el cual actúa la enzima se le
añade el sufijo asa.
Las células poseen compuestos químicos que Como las enzimas son proteínas; los factores
controlan las reacciones que ocurren en su que afectan la estructura de la proteína,
interior. La sustancia que controla la velocidad también afectan la función o actividad de las
a la que ocurre una reacción química sin que enzimas. La temperatura, el pH y la
la célula sufra daño alguno ni se destruya se concentración son algunos de los factores que
conoce como catalizador. Las enzimas son influyen en la actividad de las enzimas.
sustancias (proteínas) que actúan como
catalizadores en las células y hacen posibles 2. OBJETIVOS
las reacciones que ocurren en las células
disminuyendo la cantidad de energía de Identificar en una reacción las enzimas y su
activación que se necesita. Las enzimas respectivo sustrato.
también controlan la velocidad a la que ocurre Observar la actividad de algunas enzimas en
la reacción para que la energía se libere a una tejidos animales y vegetales.
temperatura que no haga daño al organismo. Demostrar el efecto de la temperatura, el pH
Las miles de reacciones que constituyen el y la concentración sobre la actividad de una
metabolismo de los seres vivos están bajo enzima.
control de miles de enzimas. Demostrar la forma en que una enzima es
Diferentes enzimas controlan diferentes específica para cierto sustrato.
reacciones. La sustancia sobre la cual actúa
una enzima se llama Sustrato. Al ocurrir una 3. MATERIALES
reacción el sustrato se convierte en uno o más
productos nuevos. Laboratorio:
Beakers, tubos de ensayo pequeño, baño
E + S ======== ES ------------- E + maria, gradilla, vidrio de reloj, cajas petri,
P pinzas para tubos de ensayo, cuchilla o bisturí,
Las enzimas no se consumen en las papel absorbente, estufa, termómetro,
reacciones y se pueden volver a utilizar. Sin probetas, pipetas, cinta para rotular, pitillos
embargo una enzima particular actúa solo plástico, varias jeringas (1 y 10ml), balanzas
sobre un sustrato específico, así que una analítica, cucharas desechables, mortero,
enzima solo puede controlar un tipo de algodón.
reacción específica.
Una enzima recibe el nombre del sustrato Reactivos y Soluciones:
sobre el cual actúa; Ej. Anhidrasa carbónica, Solución de almidón, solución de lugol,
la cual actúa en la conversión del CO 2 en solución de peróxidos de hidrogeno al 6%,
agua destilada, agua en bolsa, hielo, cloruro Al tubo No 1. 0 ml; al tubo No. 2. 1 ml; al tubo
férrico (en cristales). Ácido acético, Hidróxido No. 3. 2 ml; al tubo No. 4. 4 ml, al tubo No. 5.
de sodio o amoniaco, anticoagulante 8citrato 6 ml; Describa detalladamente todo lo que
de sodio), Benedict, MnO2. observa y su explicación.
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Biológico: ____________________________________
Saliva, un pedazo de hígado, un pedazo de ____________________________________
riñón, papa, zanahorias, remolacha, sangre ____________________________________
fresca, levadura. ________________

4. PROCEDIMIENTO Cómo afecta la cantidad de sustrato la


actividad enzimática?
Para el extracto de hígado; previamente el ____________________________________
estudiante debe tomar un pedazo de hígado ____________________________________
en buen estado y macerarlo en un mortero con ____________________________________
agua destilada. ____________________________________
Luego filtre con un pedazo de tela o algodón ________________
y conserve el filtrado para la práctica.
Para la siguiente práctica utilice tubos de B. Efecto de la temperatura sobre la
ensayos grandes. Las muestras de la solución velocidad enzimática
de peroxido de hidrogeno se deben tener por
separados en tubos de ensayos antes de Rotule y prepare tres tubos de
agregar la muestra del extracto de hígado en ensayos de la siguiente forma:
los respectivos tubos de ensayos. Esto con el
fin de que las soluciones de peroxido sean Número ml de Temperatura Volumen
agregadas al mismo tiempo en cada uno de del Extracto °C de
los tubos que contengan la muestra. tubo de peróxido
hígado de
A. Efecto del volumen (enzima- hidrógeno
sustrato) con relación a la velocidad 1 2.0 Baños con 2 ml
enzimática. hielo
2 2.0 Tempera 2 ml
ambiente
Rotule y prepare 5 tubos de ensayos 3 2.0 Agua 2 ml
de la siguiente forma: hirviendo
Espere que el material que este dentro de los
Número Mililitros Volumen tubos tenga la misma temperatura que la de
del tubo (ml) de de los respectivos baños; luego agite y proceda
extracto de peróxido agregar al mismo tiempo 2 ml de peróxido de
hígado de hidrogeno a cada uno de los tubos.
hidrógeno Describa todo lo que observa y su explicación.
1 1.0 0 ml ____________________________________
2 1.0 1 ml ____________________________________
3 1.0 2 ml ____________________________________
4 1.0 4 ml ____________________________________
5 1.0 6 ml ________________

Agite cada uno de los tubos, agregue al mismo ¿Cómo afecta la temperatura la velocidad de
instante las siguientes cantidades de peróxido una reacción enzimática?
de hidrogeno: ____________________________________
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C. Efecto del pH sobre la velocidad


enzimática

Rotule y prepare tres tubos de ensayos


de la siguiente forma:

Tubo ml de pH ml de
Nº Extracto peróxido
de hígado
1 2 Ác. acético 2 ml
(5.0 gotas)
2 2 Neutro 2 ml
3 2 Amoniaco 2 ml
(5.0 gotas)

Agite cada uno de los tubos y agregue al


mismo instante 2 ml de peróxido de hidrogeno
en cada uno de ellos.
Describa todo lo que observa y su posterior
explicación.
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¿Cómo afecta el pH la velocidad de una


reacción enzimática?
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Nota: esta práctica de laboratorio es tomada y


modificada de German Blanco, Docente de la
Facultad de ingeniería.