PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS AGAR Y SIEMBRA EN PLACA.

OBJETIVO:
Aprender la forma correcta de preparación de medios de cultivos y siembra en placa.
ESPECÍFICOS:
 Aprender a preparar reactivos según especificación del fabricante.
 Agregar la siembra en placa.
 Aprender características de almacenamiento y la utilización de agares.
RESUMEN
El laboratorio de microbiología, permite seguir con esta idea del conocimiento práctico.
Hace parte esencial, tener claro los procesos que se necesitan en este tipo de práctica,
que enclaridad noson las mismas precauciones quese toman en un laboratorio de
microbiología. En este tipo de prácticas es necesario que el ambiente y los objetos estén
esterilizados, esto, para permitir un ambiente libre de bacterias o microorganismos, puesto
que, en sí, el desarrollo de las actividades se basa en inocular organismos específicos, en
medios de cultivos ricos en sustancias nutricionales. Se desarrolló la interiorización
conceptual sobre términos delentorno del laboratoriomicrobiológico, como parte de los
objetivos a alcanzar en la práctica, como lo fue, los principios generales
de la preparación y técnicas de esterilización de los materiales y los medios de cultivo.

También se comprendió el concepto de medio de cultivo. Este, constituye al aporte de

nutrientesindispensables para el crecimientode los microorganismos.

INTRODUCCIÓN

PROCEDIMIENTO Y MATERIALES
 Esterilizar el área de trabajo.

 Encender el mechero.

 Flamear todo instrumento antes de usar.

Método 1 preparación de muestra

  Hay varios tipos de agar y cada uno para diferente cultivo de microorganismo

 Con ayuda de la espátula tomamos una muestra.

 Escoger la muestra prepararla y pesarla.

 Una vez pesada la muestra en la balanza esta se la coloca en un matraz

Método 2 preparar agar

 El agar que se utilizo es para aerobios mesofilos AGAR (PCA)

 Se utiliza 17,8 gramos para un litro y 8,75 para medio litro o 500ml

 En la probeta medimos los 500ml de agua destilada y los 8,75 gramos del agar se
agita hasta quedar bien diluido.

 Luego se pone a calentar y tenemos q esperar a que este a temperatura ambiente

para poder auto clavar

 Se usa entre 45 y 55 grados

 Una vez teniendo el agar y teniendo estéril las cajas Petri y las pipetas

Tubos de ensayo

 Tomamos una muestra de agua (tecniagua) que es nuestra muestra madre

 Tomamos 1cm de la muestra madre y 9 ml de agua destilada para obtener una

nueva muestra llamada 1/10 luego 1cm de la muestra 1/10 y 9 ml de agua destilada
para obtener una nueva muestra llamada 1/100 y así sucesivamente.

 Con ayuda de la micro pipeta tomas una punta para cada muestra a obtener con el
objetivo de q no se use el mismo para cada paso.

Caja Petri
  Se toma 1 ml de los tubos de ensayo para cada caja (del tubo 1/10 a la caja Petri
1/10)

 Luego de poner la muestra en la caja Petri se adiciona el agar de 12 a 15 ml con

el fin de que cubra cada muestra.

 Agitar la caja Petri con cuidado en forma circular o forma de ocho

Método 3 almacenamiento

 El agar se solidifica a temperatura ambiente

 En refrigeración de 4 a 8 grados puede durar un mes siempre y cuando no se

contamine por que pierde la esterilidad.

 Para auto clavar las cajas Petri se mantiene a una temperatura de 121 grados por 15
minutos.

 Luego las cajas Petri se las coloca en la incubadora de 28 a 48 horas para luego su
respectivo análisis.

DISCUSIÓN
Con esta práctica se pretende aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo, su
esterilización y su almacenaje, así como la importancia de los medios de cultivo y su uso.
Además, también se pretende que el alumno se familiarice con las técnicas empleadas en
Microbiología para el cultivo y la manipulación de microorganismos en condiciones de
esterilidad.
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.
Puesto que la diversidad metabólica de los microorganismos es enorme, la variedad de
medios de cultivo es también muy grande. La mayoría de los medios de cultivo se
comercializan en forma de liofilizados que es preciso rehidratar. La preparación de un medio
de cultivo se reduce en general a pesar la cantidad de medio y re disolverla en agua destilada
siguiendo las instrucciones del fabricante. #as sustancias termolábiles se esterilizan por
filtración y se añaden al resto de los componentes previamente esterilizados en la autoclave.
CONCLUSIÓN
Mediante el desarrollo de esta práctica definimos, estudiamos y aplicamos los conocimientos
de cada proceso que se realizó para la elaboración de un medio de cultivo, es claro que esto
es referido para con la unidad que estamos estudiando, microbiología, por otro lado,
conocimos y utilizamos algunos antibióticos naturales que existen por lo que creemos
firmemente la práctica fue importante gracias a los objetivos planteados

ANEXOS