RECEPTORES DE SUPERFICIE CON ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

O ASOCIADOS A ENZIMAS
Existen una variedad importante de receptores asociados a actividad enzimática, pero
son 6 clases principales, los cuales en su mayoría son actividades de tipo quinasa, es
decir, que fosforila alguna proteína para transmitir la señal, estos gatillan respuestas
que tienen que ver con el metabolismo, la sobrevida y la proliferación celular.
- Receptor tirosina quinasa o RTK (el mismo receptor es una enzima)
- Receptor asociado a tirosinas quinasas (intracelulares, por lo que el receptor no
tiene la actividad enzimática).
- Receptor serina/treonina quinasa o Thr/Ser (tienen otros aa como blanco)
- Receptor fosfatasa de tirosina
- Receptor asociado a quinasa histidina
- Receptor guanilato ciclasa.
Los receptores con actividad enzimática se
caracterizan por ser receptores que tienen un
segmento de transmembrana, cuando el
ligando o molécula señal está presente se une
y genera la dimerización del receptor, es decir,
une dos monómeros gracias al ligando. Si
estamos hablando de un receptor con
actividad tirosina quinasa, ocurre una
transfosforilación o fosforilación cruzada del
receptor (autofosforilación: un receptor
fosforila al otro, es decir, son sus blancos
mutuos o sustratos mutuos de su actividad enzimática). Cuando los receptores son
fosforilados aumenta la actividad tirosina quinasa y la unión con las proteínas
señalizadoras o adaptadoras.
Existen distintos tipos de ligando para los receptores con actividad tirosina quinasa.

- ligando solubles: factor de crecimiento plaquetario o PDGF

- factores de crecimientos asociados a glicoproteínas de transmembrana como el
factor de crecimiento FGF (soluble completamente, pero el FGF está
interactuando con azúcares de proteínas de membrana)
- proteínas de transmembrana de una célula vecina con la cual entra en contacto.
Receptores TK

Todos los receptores

tirosina quinasa que tienen
el dominio funcional
enzimático son muy
parecidos, sobre todo la
región citoplasmática.
Tienen al lado citosólico un
dominio catalítico de
actividad tirosina quinasa
y tienen en el dominio
extracelular las regiones de
unión ligando que, en
muchos casos, son regiones
equivalentes a las
inmunoglobulinas, ricos en
cisteínas (forman puente disulfuro que resisten las condiciones adversas ayudando a las
proteínas de superficie) o tipo fibronectina (proteína clásica del extracelular). Estos
receptores son para ligandos determinantes en la regulación de las funciones celulares:
proliferación y sobrevida.

Luego de que el receptor tirosina

quinasa quedaba como dímero y se
transfosforilaba, sus tirosinas
fosforiladas, las cuales van a
funcionar como transductores de
señales, son reconocidas por
distintas proteínas señalizadoras y
van a formar una especie de cascada
de conducción de la señal.

Las proteínas señalizadoras

reconocen el dominio fosfo-tirosina,
es decir, el aa específico con su grupo
fosforilo, pero además reconocen
estas tirosinas dentro de un contexto
de los aa que están al lado, por lo tanto, las proteínas señalizadoras que se unen tienen
un dominio de unión para la cadena lateral de aa, pero con una parte la proteína une la
tirosina fosforilada y con otra reconoce lo que hay al lado, de esa manera aumenta la
especificidad de unión de estas proteínas adaptadoras, todas las diferencias están dadas
por el contexto de los aa laterales asociados a la tirosina fosforilada.
En la imagen tenemos distintos tipos de proteínas adaptadoras unidas a las tirosinas
fosforiladas como, por ejemplo, la Pi 3-quinasa, proteína activadora de GTPasa (GAP) y
una fosfolipasa C (enzima que modifica lípidos de membrana). La característica de todas
las proteínas que reconocen fosfotirosina es la presencia de dominios SH2 y SH3, los
cuales son estructuras de esta proteína (grupos de aa) que permiten reconocimiento de
la tirosina fosforilada y de la cadena lateral de aa, es decir, reconocen de manera
específica ciertas tirosinas, no cualquiera. Hay algunas proteínas (con SH2 y SH3) que
son solamente adaptadoras, o sea, no tienen en sí una actividad enzimática, sirven para
anclar una segunda proteína que va a mediar una respuesta (por ejemplo: Ras)

Una GTPasa muy importante para los

receptores de tirosinaquinasa. Ras-GTP se
logra por el cambio GDP a GTP, provocado
por una proteína que se llama GEF (factor de
intercambio de GTP). El GAP (proteína
activadora de la actividad GTPasa) se
encarga de inducir la hidrólisis de GTP a
GDP, inactivando Ras. Cada vez que estas
GTPasas monoméricas unidas a GTP está
activa, cuando está unida a GDP está
inactiva.

Vía clásica de señalización del receptor

tirosina quinasa: ¿Cómo funciona Ras y cómo es capaz de activarse? En la imagen está
el receptor tirosinaquinasa de EGF. El EGF es un factor de crecimiento que induce la
proliferación celular en distintos tejidos. El receptor de este es una proteína que está
muy frecuentemente mutada en distintos tipos de cáncer, lo cual hace que su
señalización sea constante induciendo la proliferación del tumor en ausencia de un
ligando. El ligando se une y el receptor
dimeriza y se fosforilan los dominios citosólicos
del receptor. La proteína señalizadora es el
GRB2 que tiene dominios SH2 y SH3, con los
cuales se va a unir a ciertas fosfotirosinas.

Ras es una proteína que está anclada por un

lípido a la membrana para estar siempre
cercana a los receptores. El GRB2 sirve como
adaptador para que se una el GEF de Ras, hace
una especie de puente: se une al receptor, se une el GEF y este tiene una afinidad
tremenda por Ras (al unirse se activa por la acción de GEF), por lo tanto, se genera una
cadena proteica que lo que hace es transducir la señal contenida en la fosfotirosina del
receptor hacia Ras.

MAPK quinasa (Thr/Ser)

Cuando Ras se activa también se

activa una serie de proteínas/
enzimas quinasas que se llama la vía
de las MAPK quinasas. Las MAPK
quinasas son quinasas de
serina/treonina, su nombe significa
“quinasa activada por un mitógeno”,
mitógeno es cualquier ligando que
estimula la proliferación o mitosis
como, por ejemplo, EGF. Es una
cascada porque son 3 niveles de
proteínas quinasas, tenemos la
MAP-quinasa-quinasa-quinasa (Raf)
que fosforila a la MAP-quinasa-
quinasa (Merk) que fosforila a la
MAP-quinasa (Erk). Finalmente,
Erk es la MAP-quinasa efectora que
tiene una serie de blancos que se encargan de la respuesta al interior de la célula, pero
para su activación tiene que fosforilarse, la fosforila una MAP-quinasa (porque ella es
MAP-quinasa), en este caso la Mek. Y a su vez, la quinasa de la quinasa Mek necesaria
para que esta se active es Raf (esta es fosforilada por Ras). Después de que Erk se
fosforile es posible producir cambios en la actividad de la célula (fosforilando a las
proteínas blanco) como, por ejemplo, en una proteína en el citosol que vendría siendo
una respuesta rápida de la vía de señalización. En cambio, si hablamos de proteínas
reguladoras de la expresión génica, o sea, factores que activan o silencian la
transcripción, entonces se trata de una respuesta más tardía, más lenta porque tiene
que llegar la señal hasta el núcleo de la célula.

Algunos receptores TK promueven cambios en el citoesqueleto (colapso del cono de

crecimiento)

El tipo de ligando de receptores tirosina-quinasa que están asociados a una membrana

adyacente pueden producir cambios en el
citoesqueleto celular. Esto se genera a través de
la activación de otras GTPasas monoméricas
parecidas a Ras, que en este caso es Rho. Este
receptor cuando se activa, se asocia a estas
proteínas tirosinas-quinasas que, una de ellas,
va a ser el GEF de Rho, entonces cuando esta
proteína se activa, vamos a activar Rho y esta
se encarga de estimular la contracción de los
filamentos de actina. Hay un movimiento
parecido al de los neutrófilos persiguiendo al
patógeno En la punta del axón de una neurona
hay un movimiento para alcanzar la célula
blanco y así transmitir el impulso, por lo tanto,
hay proteínas que estimulan la guía del axón para irse moviendo para llegar a sus
células blanco, como el citoesqueleto de actina está encargado del movimiento este va
modificando e su estructura de manera.

Cuando el receptor no está unido al ligando efrina

hay una activación basal de estas proteínas que
permiten la extensión del cono de crecimiento, es
decir, avanza sin ninguna desviación, sin ningún
cambio de forma. En cambio, cuando si hay unión
con efrina, la activación de este receptor va a
hacer que Rho tenga un rol principal en la
activación, ya no las otras dos proteínas, entonces
ocurre el colapso del cono de crecimiento, se
contrae y cambia de rumbo.
Vía Pi 3 – quinasa/AKT  sobrevida y crecimiento

La enzima llamada Pi 3-quinasa que modifica lípidos de membrana permitiendo la

transducción de la señal. La proteína Pi3-quinasa tiene como sustrato a este lípido que
es el Pi (4,5)-P2, el cual es fosforilado a Pi-P3. La proteína Akt es una enzima que
participa en la sobrevida de la célula haciendo que se escape de la apoptosis (los tumores
la sobre-expresan o la tienen mutada) es activada por mTOR. La proteína Akt tiene
como blanco una proteína pre-apoptótica para inhibir la apoptosis.
Bad está unida a la proteína inhibidora de la apoptosis, cuando Bad se fosforila libera a
la proteína inhibidora de la apoptosis la cual queda activa por la acción de Akt
inhibiendo la apoptosis. La regulación de esta vía Pi3-quinasa/Akt radica en la
activación y modificación de lípidos de membrana: de PiP2 a PiP3, y con esto activar a
la enzima Akt que es la proteína efectora que va a fosforilar al blanco.

Citoquinas como ligando

Para receptores asociados a quinasa

existe un tipo de ligando que son las
citoquinas, estas son moléculas que
generan, en algunos casos, respuestas
inflamatorias. La vía JAK es una vía de
respuesta de citoquinas, las JAK-STAT.
La citoquina se une al receptor y la
quinasa Jak (que es la que tiene la
actividad quinasa, el receptor no)
fosforilan al receptor para unir a
proteínas señalizadoras que son las
STAT, las cuales van al núcleo y generan
cambios en la expresión génica. El tipo
de respuesta de las citoquinas depende
del tipo celular y el tipo de citoquina que
activa la vía JAK-STAT. Tenemos el interferón γ que es el que activa a los macrófagos
cuando hay una respuesta inflamatoria importante en el tejido, el interferón α que es el
aumenta la resistencia a infecciones virales, la prolactina que estimula la producción de
leche y la hormona del crecimiento que estimula el crecimiento incluyendo la inducción
del IGF que es muy importante para transmitir sobrevida, es el factor de crecimiento
tipo insulínico, entonces actúa como la insulina lo cual activa el metabolismo de
azúcares.

Vías de señalización interconectadas

Puede haber algunos cruces de las vías de señalización mediadas por los receptores de
membrana. Los receptores tirosina-quinasa están asociados a la activación de Pi3-
quinasa y la vía Ras-MAPKquinasas, pero se mostró que Ras puede activar Pi3-quinasa
también, de esa manera dos vías que están activadas por un mismo ligando pueden
cruzar y potenciarse a la vez.
Por otro lado, dentro de las proteínas
que se unen al receptor tirosina
quinasa hay una fosfolipasa C
(modifican lípidos de membrana)
que vamos a ver principalmente en
los receptores asociados a proteínas
G, esas fosfolipasas intercomunican
las vías de señalización de
receptores tirosinasquinasas con
receptores asociados a proteínas G.
Dentro de la célula estos cruces
entre las distintas vías de
señalización se potencian 1000 o
100.000 veces, hay miles de señales
que llegan a la célula, tenemos un
montón de receptores de distintos
tipos y varios tipos de vías de señalización por
receptor, por lo tanto, la intercomunicación es
bastante alta y eso permite a la célula generar una
respuesta integrada. Se pueden integrar las
señales que provienen de dos vías estimuladas por
ligandos distintos y mediadas por receptores
diferentes. Proteínas de señalización celular
pueden integrar señales recibidas.
En resumen, los receptores asociados a enzimas
son de varios tipos, la mayoría son los receptores
tirosina-quinasa en animales y en las plantas los
más abundantes son los serina/treonina quinasa
(fosforilan tirosinas). Los receptores tirosina
quinasa van a gatillar el ensamblaje de una serie
de proteínas que son señalizadoras, en donde
vamos a tener la vía Ras (media respuestas de proliferación) que va a activar a las MAP-
quinasa.

Ras está mutada en distintos tipos de cáncer para mantenerlo unido a GTP (siempre
activo) ya que así se estimula la proliferación celular, además está constantemente
activando las MAP-quinasas. Vimos también que el receptor puede activar una vía
directa que va hacia el núcleo o media respuestas que activan proteínas a nivel local,
siendo una respuesta más rápida.