MORFOLOGIA CELULAR.

YERLYS CAROLINA GUZMAN ROMERO.

SHINDY PATRICIA PASTRANA MARTINEZ.
VALERIA URBINO BELEÑO.
JANINNY ALEJANDRA MOLINA SOTOMAYOR.

ANDREA DE JESUS DORI PEDRAZA

LISY GRACIA HERRERA.

UNIVERDIDAD DE CORDOBA.
CIENCIAS DE LA SALUD.
BACTERIOLOGIA.

MICROBIOLOGIA.
MARTES 1:00PM – 4:00PM

MONTERIA – CORDOBA.

2018.
 INTRODUCCION.
Los microorganismos se encuentran en muchos ambientes naturales, pueden
estar localizados en suelos, aguas, aire, alimentos, tracto intestinal, piel, etc. Solo
unos pocos lugares en la naturaleza con condiciones extremas y tejidos sanos de
órganos de hombres y animales están libres de ellos. Cuando se manifiestan en
los ambientes naturales, como causantes de infección, producen determinadas
sintomatología, que obliga a tomar muestras para realizar frotis y coloraciones,
para tener una rápida información sobre las características básicas del
microorganismo y poder continuar con el proceso adecuado que permita identificar
con exactitud el agente causal. La observación en el microscopio de las bacterias
nos permite diferencias tres formas típicas que son los cocos, los bacilos y los
espirales.
Los cocos son bacterias que se pueden observar en el microscopio agrupado,
distinguiéndose diplococos, racimos, estreptococos, tétradas y sarcinas.

Los bacilos son células en forma de bastón que pueden presentarse

individualmente, en cadena o en palizada.
Los espirales se presenta en forma helicoidal y generalmente no se agurpan.

Todas estas pueden ser observadas por medio de los siguientes metodos:

 Preparaciones no coloreadas: por medio de este metodo se observan las

bacterias vivas, y se puede detectar con facilidad la movilidad, en las que poseen,
y su forma.
 Preparaciones coloreadas: como las bacterias son incoloras y tienen el
mismo indice de refraccin del agua, es necesario utilizar colorante para poderlas
visualizar.
Los colorantes son sales compuestas por un ion positivo y otro negativo, uno de
los cuales esta coloreado y se conoce como cromófaro. El color de los colorantes
básicos está en el ion positivo y en los acido en el ion negativo. Bajo condiciones
de crecimiento la mayoría de bacterias tienen un pH interno de 7 y una superficie
celular cargada negativamente; por lo que atraen el ion positivo coloreado del
colorante básico. Lo colorantes más utilizados son los básicos, entre los que se
encuentran la violeta de genciana, safranina, verde malaquita, azul de metileno.
La tinción diferencial requiere más de un tipo de colorante y se utiliza para
distinguir entre varios tipos de células bacterianas. Una tinción típicamente
consiste en tres pasos principales: primero el colorante primario, el cual se utiliza
para teñir todas las células en la tinción; enseguida un paso de decoloración, el
cual remueve el colorante solo en ciertos tipos de células y finalmente un colorante
de contraste, el cual tiñe las células recién decoloradas pero no tiene efecto sobre
las células que aún tiene el colorante primario.

Objetivos.
 Demostrar la existencia de microorganismos en ambientes naturales.
 Practicar los distintos métodos de observación de las bacterias.
 Identificar al microscopio las diferentes formas bacterias.
 Comprender la importancia que tienen estas tinciones para la
caracterización e identificación de las bacterias.
 Conocer el fundamento de la coloración de Gram.
 Aplicar correctamente la coloración de Gram.
 Conocer el fundamento de la coloración de Zielh Neelzen.
 Aplicar correctamente la técnica de la coloración de Zielh Neelzen.
 Marco teórico.
Preparaciones en fresco:
La forma más simple de preparar un espécimen para su examen microscópico es
hacer una preparación en fresco. Existen dos técnicas, una preparación en fresco
simple ("entre porta y cubre") consiste en colocar una gota de líquido con los
microorganismos sobre un portaobjetos y a continuación cubrirla con un
cubreobjetos. Una preparación en gota pendiente se realiza colocando una gota
del material en un cubreobjetos y cubriéndolo con un portaobjetos (invertido) con
una excavación central (portaobjetos excavado). Hay que sellar la preparación con
vaselina alrededor de la excavación. La ventaja de esta última técnica, es que la
preparación no se seca y puede ser observada durante un tiempo más largo.
Las preparaciones en fresco se utilizan para observar microorganismos vivos. Por
ejemplo, para la búsqueda de Trichomonas vaginalis en secreciones vaginales.
Este protozoo de gran movilidad causa inflamación de la vagina y la uretra. Si en
la preparación se observan células en forma de huso que se mueven mediante
contracciones o sacudidas cruzando el campo, probablemente se tratará de T.
vaginalis, pudiéndose efectuar el diagnóstico. Sin embargo, el inconveniente de la
observación en fresco es que no permite aumentar el contraste de la preparación.
Por tanto, su uso, con un microscopio óptico de campo claro, está bastante
limitado.
La tinción simple:
La tinción simple es un procedimiento de tinción rápido y sencillo en el cual se
emplea un solo colorante, por eso se denomina simple. Se utiliza principalmente
para determinar la morfología y la organización de las células presentes en una
muestra. Naturalmente las células no tienen color, por lo que es necesario
hacerlas visibles de alguna manera cuando se observan en el microscopio.
Es importante destacar que los colorantes empleados en la tinción simple deben
ser básicos con carga positiva (catiónicos), para que puedan unirse
espontáneamente a la pared y al citoplasma celular.
Coloración de gam:
La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial
empleado en bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en
muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram (1853-
1938), que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la
morfología celular bacteriana,como para poder realizar una primera aproximación
a la diferenciación bacteriana, considerándose bacterias grampositivas a las que
se visualizan de color morado, y bacterias gramnegativas a las que se visualizan
de color rosa, rojo o grosella.

Coloración de zielh Neelsen:

La tinción de Ziehl-Neelsen es una técnica de tinción diferencial rápida y
económica, usada para la identificación de bacterias ácido-alcohol resistentes
(BAAR) , como M. tuberculosis o el Phylum Apicomplexa (coccidios intestinales)
entre otros. Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl,
un bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.
 Procedimiento.
1. PREPARACIONES NO COLOREADAS
(PREPARACIONES EN FRESCO.)
1- Realice una infusión para trabajar; tome
un escobillón estéril y frótelo sobre cualquier parte de la superficie del cuerpo o
introdúzcalo en la mucosa de la nariz frotando suavemente.
2- Introduzca el escobillón en un tubo que
contiene 1cc de solución salina estéril, mezcle y deje reposar por unos segundos.
3- Coloque la gota de la infusión con el asa
sobre el portaobjetos limpio, coloque un cubreobjetos sobre la gota evitando la
formación de burbujas, observe con los objetivos de 10x y 40x.
4- Leer rápidamente, para que la muestra
no se seque.
RESULTADOS.
La muestra biológica fue tomada del oído y la mucosa oral. En ella se puede
observar células epiteliales. Este tipo de preparación es buena para ver
organismos vivos; ver movilidad si la tienen, pero, debido la falta de contraste
limita un poco.

2. PREPARACIONES COLOREADAS.
COLORACION SIMPLE O DIRECTA: los colorantes básicos empleados son azul
de metileno, cristal violeta, safranina, fucsina y verde malaquita.
1- Tome un escobillón estéril y frótelo sobre cualquier parte de la superficie del
cuerpo o

introdúzcalo en la mucosa de la nariz frotando suavemente.

2- Haga una extensión sobre la lámina y déjela secar al aire.
3- Pásela rápidamente sobre la llama del mechero 2 o 3 veces para fijarla.
4- Coloque los portaobjetos sobre un puente de tinción.
5- Cubra el extendido con una pequeña cantidad de azul de metileno y déjelo
actuar por un minuto.
6- Lave con agua hasta eliminar el exceso de colorante.
7- Secar al aire libre.
8- Examine las reparaciones teñidas al microscopio.
RESLTADOS
Esta muestra biológica fue tomada del oído.
En ella se pueden observar células epiteliales, y bacterias como cocos
(reconocidos por su forma). En esta tinción simple se utilizó el colorante básico
azul de metileno. La tinción nos ayuda a observar de manera más clara la
morfología de las células presentes en ellas, nos permite también ver la
organización de las células. Al ser una muestra fijada con el mechero los
microorganismos no se encuentran vivos.
COLORACION DE GRAM.
1- Cogemos un hisopo estéril y lo frotamos por la superficie de nuestro cuerpo
(nariz, oído, boca, etc.)
2- Hacemos el extendido en el portaobjetos en forma de espiral de adentro
hacia afuera y lo dejamos secar a temperatura ambiente.
3- Fijamos el material al portaobjetos de modo que la muestra no se arrastre
durante el proceso de tinción. Pasando de 3 a 4 veces la muestra por el mechero
de forma rápida.
4- Colocar el preparado sobre un soporte de tinción y cubrir la superficie con
solución de cristal violeta por (1) minuto, pasado el minuto lavar con agua
destilada.
5- Cubrir el preparado con lugol de Gram por (1) minuto. Lavar nuevamente
con agua destilada.
6- Sostener el portaobjeto entre el pulgar y el índice y bañar la superficie con
gotas del colorante alcohol de acetona hasta arrastrar más colorante violeta. Esto
se requiere de unos 10 a 30 segundos. Lavar nuevamente con agua destilada y
colocar el portaobjeto sobre el soporte.
7- Cubrir la superficie con safranina (contra color), durante 1 minuto, lavar con
agua destilada.
8- Colocar el preparado en un soporte de tinción en posición vertical, dejando
que se escurra el exceso de agua y que seque el extendido.
9- Examinar el extendido al microscopio con objetivos de inmersión 100x.
RESULTADOS
Esta muestra biológica fue tomada del oído. En ella se pueden observar células
epiteliales, y bacterias como cocos. En esta tinción simple se utilizó los colorantes
básicos cristal violeta y sabranina. La tinción de gram es una tinción diferencial;
nos ayuda a diferenciar un microorganismo de otro, también, a observar de
manera más clara la morfología de las células presentes en ellas, nos permite
también ver la organización de las células. Al ser una muestra fijada con el
mechero los microorganismos no se encuentran vivos.
Los cocos, tomaron el color del cristal violeta (gram positivos) y las células
epiteliales tomaron el color del color del cristal violeta (algunas se ven rosadas, por
error en el proceso de tinción)
 CONTROL DE CALIDAD DE LA COLORACIÓN DE GRAM.
El objetivo principal del control de calidad de la coloración de Gram es evaluar, en
primer lugar la realización adecuada del proceso de coloración, teniendo en
cuenta el protocolo, los tiempos de tinción, la calidad y el estado de los colorantes
y las organizaciones al momento de realizar el procedimiento.
Se utilizan dos microorganismos cuyas características tintoriales han sido
previamente establecidas, con el fin de que el resultado de nuestra coloración
concuerde con dichas características.
PROCEDIMIENTO.
1- en un portaobjetos limpio agregue una gota de solución salina estéril o agua
destilada.
2- Con un asa previamente esterilizada tome una porción de cultivo de s.
Aureus (coco Gram positivo) y deposítela sobre la gota de solución salina.
3- Esterilice el asa y tome una porción de cultivo bacteriano E. Coli o
salmonella spp (bacilos Gram negativos) y deposítela sobre la gota de solución
salina.
4- Mezcle los dos microorganismos suavemente, sin tocar los bordes de la
placa.
5- Preparar un extendido fino del material en estudio y dejarlo secar a
temperatura ambiente.
6- Una vez seco, se fija el material al portaobjeto de modo que no sea
arrastrado durante el proceso de tinción, pasando el portaobjeto entre 3 a 4 veces
por la llama del mechero de Bunsen. (Muestra 1)
7- Realizar en un portaobjetos otro extendido de la misma forma solo con S.
Aureus. (muestra 2)
8- Realizar en un portaobjetos otro extendido de la misma forma solo con E.
Coli. (muestra 3)
9- Realice la coloración de gram en los 3 portaobjetos.
10- Deje secar las placas y observe en el microscopio con objetivo 100x.
 RESULTADOS.
Muestra 1.

En esta muestra se pueden observar los cocos Gram positivos (S. Aureus) de
color violeta y los bacilos Gram negativos (E. Coli) de color rosado. Demostrando
de esta forma que si cumple con los estándares del control de calidad; donde se
respetaron los tiempos de tinción, la organización y demás.
Muestra 2.
Con esta muestra se puede verificar que el cultivo si era efectivamente de cocos
Gram positivos (S. Aureus) porque tomaron el color correcto en la tinción.
Muestra 3.

Con esta muestra se puede verificar que el cultivo si era efectivamente de bacilos
Gram negativos (E. Coli) porque tomaron el color correcto en la tinción.
PRE – LABORATORIO.
1. Define los siguientes términos.
 Colorante: es una sustancia capaz de teñir fibras vegetales y animales. Los
colorantes se han usado desde los tiempos más remotos, empleándose como
tales diversas materias procedentes de vegetales y animales así como de distintos
minerales. Antiguamente los colorantes utilizados eran rojos, azules y amarillos.
Los rojos provenían de las raíces y de un insecto conocido como cochinilla. Los
azules eran obtenidos de hojas de plantas indigóferas y de una papa negra que
crece en el altiplano. Por otro lado, los amarillos se obtenían de los vegetales
como el árbol de pimiento, el arbusto de chilca, el nogal, la tara, la raíz de ratania,
la cúrcuma y el azafrán. El mordente es una sustancia que sirve para fijar el
colorante a las fibras, como el sulfato de aluminio y el potasio, que son utilizados
para teñir fibras animales y vegetales.
 Mordiente: es una sustancia empleada en tintorería que sirve para fijar los
colores en los productos textiles. La función del mordiente es favorecer la fijación
del colorante en las fibras. Este término es usado principalmente en la industria
textil para designar a aquellas sales metálicas (de aluminio, hierro, plomo...),
ácidos (el ácido tánico, usado para fijar colores básicos), sustancias orgánicas
(caseína, gluten, albúmina,...), etcétera, que sirven para fijar los colores de
estampados en los textiles y penetrar los colores. También existen mordientes que
sirven para fijar colorantes en tinciones biológicas de células animales o vegetales.
 Tinción diferencial: es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para
mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas
son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar
estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de
diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados
para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por
ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares (por ejemplo
clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas
dentro de células individuales.
 Tinción negativa: es una técnica de microscopía que permite contrastar las
muestras mediante una sustancia opaca a los fotones (microscopía óptica) o a los
electrones (microscopía electrónica). En el primer caso, se emplea nigrosina o
tinta china; para el caso de bacterias que esporulan, esta técnica permite
visualizar las esporas como entes refringentes sobre un campo de fondo oscuro.
En caso de microscopía electrónica de transmisión, se emplean sustancias de alto
número atómico que, por tanto, resultan opacas a los electrones transmitidos.
Típicamente, estas sustancias son acetato de uranilo, citrato de plomo o molibdato
de amonio. Al electrónico, esta técnica permite visualizar virus, flagelos, bacterias
y otros entes de escaso tamaño.
 Peptidoglucano: es un copolímero formado por una secuencia alternante
de N-acetil-glucosamina y el Ácido N-acetilmurámico unidos mediante enlaces β-
1,4. El peptidoglucano es muy resistente y protege a las bacterias de una ruptura
osmótica en ambientes acuáticos y da a los tipos diferentes de bacterias sus
formas. La cadena es recta y no ramificada. Constituye la estructura básica de la
pared celular de las bacterias y de las Prochlorophyta. Las arqueobacterias no
poseen mureína, sino pseudopeptidoglucano formado por N-acetil-glucosamina
unida a N-acetiltalosaminomurámico mediante enlace β-1,3.
 Ácido teicoico: son polímeros de un polialcohol (glicerol o ribitol) unidos
mediante enlaces fosfodiéster. Estos ácidos se encuentran en la pared celular de
las bacterias Gram-positivas, tales como Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus,
Clostridium, Corynebacterium y Listeria, extendiéndose sobre la superficie de la
capa de peptidoglicano.
 Espacio periplasmico: es el compartimento que rodea al citoplasma en
algunas células procariotas, como por ejemplo en las bacterias Gram negativas.
Aparece comprendido entre la membrana plasmática, por dentro, y la membrana
externa de las gram negativas, por fuera.
 Porinas: son proteínas con estructura barril β formadas por láminas
β.Pertenecen a las proteínas integrales de membrana, que son las que se ubican
a través de una membrana celular y funcionan como poros a través de los cuales
las moléculas se pueden difundir. A diferencia de otras proteínas de transporte de
membranas, las porinas son lo suficientemente grandes para permitir procesos de
difusión pasiva, por tanto actúan como canales que son específicos para
diferentes tipos de moléculas. Están presentes en la membrana exterior de las
bacterias gram-negativas y algunas bacterias gram-positivas del grupo Mycolata,
las mitocondrias y cloroplastos.
 Membrana celular: es una bicapa lipídica que delimita toda la célula. Es
una estructura formada por dos láminas de fosfolípidos, glucolípidos y proteínas
que rodean, limitan la forma y contribuyen a mantener el equilibrio entre el interior
(medio intracelular) y el exterior (medio extracelular) de las células. Regula la
entrada y salida de muchas sustancias entre el citoplasma y el medio extracelular.
Es similar a las membranas que delimitan los orgánulos de células eucariotas.
 Lipopolisacarido: es un componente mayoritario de la membrana externa
de las bacterias Gram negativas; está compuesto por una parte lipídica y cadenas
características de oligosacáridos y polisacáridos. Es un estimulante del sistema
inmune, con un potente efecto tóxico y entre otras funciones cumple un papel
principal en la adhesión de las bacterias a las células epiteliales. Una endotoxina
es un fracción de lipopolisacárido de la pared celular de algunas bacterias
gramnegativas, que al solubilizarse actúa como una toxina. Se libera de la bacteria
estimulando varias respuestas de inmunidad innata, como la secreción de citocina,
expresión de moléculas de adhesión en el endotelio y activación de la capacidad
microbicida del macrófago
 Preparación o montaje en fresco: La forma más simple de preparar un
espécimen para su examen microscópico es hacer una preparación en fresco.
Existen dos técnicas, una preparación en fresco simple ("entre porta y cubre")
consiste en colocar una gota de líquido con los microorganismos sobre un
portaobjetos y a continuación cubrirla con un cubreobjetos. Una preparación en
gota pendiente se realiza colocando una gota del material en un cubreobjetos y
cubriéndolo con un portaobjetos (invertido) con una excavación central
(portaobjetos excavado). Hay que sellar la preparación con vaselina alrededor de
la excavación. La ventaja de esta última técnica, es que la preparación no se seca
y puede ser observada durante un tiempo más largo. Las preparaciones en fresco
se utilizan para observar microorganismos vivos. Por ejemplo, para la búsqueda
de Trichomonas vaginalis en secreciones vaginales. Este protozoo de gran
movilidad causa inflamación de la vagina y la uretra. Si en la preparación se
observan células en forma de huso que se mueven mediante contracciones o
sacudidas cruzando el campo, probablemente se tratará de T. vaginalis,
pudiéndose efectuar el diagnóstico.
2. Ejemplos de colorantes ácidos.
Ejemplos de colorantes ácidos son la fucsina ácida, verde rápido, naranja G o la
eosina.
3. En que consiste el procedimiento de fijación de una muestra.
Se entiende por fijación toda manipulación sobre un ser vivo, o bien sobre parte de
él, que tiene por objeto mantener toda su arquitectura tanto estructural como
química lo más inalterada posible, de tal forma que sus componentes celulares
mantengan las mismas características que cuando dicho ser o tejido estaban
vivos. Es claro que la mayoría de la estructura celular se debe a la presencia de
proteínas y por tanto todo proceso de fijación debe tener en cuenta la naturaleza
química de éstas, de forma que el fijador no reacciona con las mismas. Es cierto
que existen componentes muy distintos más o menos lábiles que también se
encuentran formando parte de la estructura celular, pero son las proteínas las que
nos van a reflejar fundamentalmente si un fijador es bueno o no bueno. Por otra
parte, un fijador prepara también de alguna forma el tejido o la célula para la
posterior manipulación, bien en el proceso de inclusión, actuando como mordiente
o como fijador del colorante dependiendo de su naturaleza, por eso es importante
la elección del fijador.
4. ¿Porque las bacterias y otro tipo de microorganismo se observan
incoloros al microscopio óptico?
Porque tiene el mismo índice de refracción del agua.
5. Señale 2 razones por lo cual es importante clasificar las bacterias con
la coloración de Gram.
El diagnóstico rápido de microorganismos presentes en fluidos corporales
estériles, como el líquido cefalorraquídeo, líquido pleural, peritoneal o articular, es
de gran importancia para el diagnóstico de infecciones que, en estas
localizaciones, son generalmente graves y secuelantes. La tinción de Gram
constituye una herramienta de gran utilidad en el diagnóstico etiológico; sin
embargo, la sensibilidad de esta técnica es variable según el tipo de muestra y la
carga bacteriana presente en ella. La concentración de la muestra, como un paso
previo a su tinción mejora el rendimiento, por lo que es recomendable su uso de
rutina.
6. 3 bacterias Gram positivas y 5 Gram negativas, y las enfermedades
que causan.
Gram positivas:
 Streptococcus sanguis. Causante de endocarditis, cuando ingresa al
torrente sanguíneo a través de lesiones en su hábitat, la boca y la mucosa dental.
 Clostridium tetani. Bacterias responsables de los tétanos, entran al cuerpo
desde el suelo por traumatismos en las extremidades.
 Bacillus antracis. Se trata de la conocida bacteria del ántrax, tanto en su
versión cutánea como en la pulmonar.
Gram negativas:
 Neisseria meningitidis. Peligrosa bacteria causante de meningitis y
meningocococemias, coloniza las vías respiratorias humanas y asciende a las
meninges por vía sanguínea.
 Neisseria gonorrhoeae. Conocidísima por ser la causante de la gonorrea,
común enfermedad de transmisión sexual.
 Escherichia coli. Habitante usual del colon humano, está involucrada en las
llamadas “diarreas del viajero”, así como en meningitis neonatal, sepsis e
infecciones urinarias.
 Salmonella typhi. Bacteria responsable de la enfermedad conocida como
fiebre tifoidea, suele transmitirse por vía fecal-oral: contaminación de aguas, mala
disposición de excretas o higiene defectuosa.
 Salmonella enteritidis. Suele ocasionar enterocoitis y septicemia con
abscesos si llega a pasar del intestino a la sangre.
7. ¿se pueden clasificar todas las bacterias con la coloración de Gram?
. La Tinción de Gram no se utiliza para clasificar las arqueas, anteriormente
arqueobacterias, ya que estos microorganismos producen muy diversas
respuestas que no siguen sus grupos filogenéticos.

POS – LABORATORIO.

2. dibuje la
pared
celular de
una bacteria
gam positiva y
una Gram
negativas
señalando las principales estructuras en ellas.
 TINCION DE SIEHL NEELSEN.
INTRODUCCION.
Las micobacterias están cubiertas por un material grueso, ceroso, que resiste la
tinción (ácido micolico), no obstante una vez se tiñen las paredes celulares
bacterianas resisten a la decoloración por solventes orgánicos fuertes, como el
alcohol acido. Consecuentemente dichas bacterias son conocidas como acido
alcohol resistente, un fenómeno descubierto en 1881 por Ziehl Neelsen.
Se requiere un tratamiento especial para que el colorante primario, la
carbolfucsina, penetre en el material ceroso de los bacilos resistentes al acido. En
esta técnica se utiliza calor. Una vez que la carbolfucsina se deposita en la
superficie del extendido, se pasa por debajo del porta objeto, hacia atrás y hacia
adelante sobre la llama de un mechero. También se puede utilizar un componente
que permite la penetración de la tinción en la capsula llamado TERGITOL. Las
bacterias resistentes al acido, resisten a la decoloración alcohol ácido y las no
resistentes se colorean con colorantes de contraste como el azul de metileno o
verde de malaquita.

PROCEDIMIENTO.
1- Hacer un extendido del estiércol de vaca en la lámina porta objetos y dejar
secar a temperatura ambiente.
2- Cubra el extendido con papel filtro y agregue carbolfucsina.
3- Calentar la lámina pasando la llama de un mechero por debajo hasta el
desprendimiento de vapores. Si el colorante se empieza a secar, agregue más
colorante. Este procedimiento se hace por 5-10 minutos.
4- Con una pinza descarte el papel y lave la lámina con agua destilada.
5- Cubra el extendido con el decolorante alcohol acido por 3 minutos (hasta
decolorar), luego lavar con agua destilada.
6- Cubra el extendido con azul de metileno o verde de malaquita por 1 minuto.
7- Lave con agua y deje secar a temperatura ambiente.
8- Observe al microscopio con objetivo de inmersión (100x).
Aquí podemos observar que se ven bacterias acido alcohol resistentes de color
rosadas. Las demás bacterias de color azul.

PRE – LABORATORIO.
1- Mencione 2 bacterias acido alcohol resistentes y las enfermedades
que causan.
M. Leprae: El germen Mycobacterium leprae que es el agente etiológico de la
lepra fue obser-vado por primera vez por Hamse en 1874. Este descubrimiento fue
definitiva-mente demostrado por Neisser en 1879, aunque sus propiedades de
bacilo resis-tente y sus características morfológicas no fueron descritas hasta
después de los trabajos de Koch en Mycobacterium tubercu-loso.
El Mycobacterium leprae se trasmite a través de los objetos contaminados, por
con-tacto. Esta condición se favorece cuando disminuye la temperatura. No se ha
podido com-probar su susceptibilidad en los animales, pero se ha comprobado
que afecta en gran medida al hombre (provoca la lepra).
Los gérmenes del género Mycobacterium no forman esporas, son ácido-alcohol
resistente, inmóvil, aerobio obligado, Gram positivos y crecen lentamente en los
medios de cultivo.
M. Tuberculosis: La tuberculosis es una enfermedad infecciosa prevenible y
curable causada por la bacteria Mycobacterium tuberculosis, que se transmite por
vía aérea. La tuberculosis generalmente afecta a los pulmones, aunque también
puede afectar a otras partes del cuerpo, como el cerebro, los riñones o la columna
vertebral. Sólo transmiten la infección las personas que padecen tuberculosis
pulmonar.
Las micobacterias son un grupo de microorganismos que constituyen uno de los
problemas sanitarios de mayor gravedad a nivel mundial. Se pueden definir tres
grupos dentro del género Mycobacterium: 1) Complejo tuberculosis que produce
tuberculosis y se encuentra formado por las especies M. tuberculosis, M. bovis
(incluido M. bovis BCG), M. africanum y M. microti; 2) M. leprae que produce lepra;
3) Otras micobacteras no tuberculosas (MOTT- del inglés Mycobacteria other than
tuberculosis) que son oportunistas y producen cuadros no tuberculosos con menor
poder patógeno. El aislamiento de MOTT es cada vez más frecuente y su
diferenciación del complejo M. tuberculosis tiene gran importancia clínica y de
salud pública, ya que definen el aislamiento de los enfermos en salas especiales
de los centros sanitarios y el estudio de los contactos del enfermo.
2- Ejemplos de bacterias capsuladas.
Algunas bacterias se encerran dentro de cápsulas formadas a partir de polímeros
de moléculas de azúcar llamadas polisacáridos. La cápsula actúa un poco como
una capa externa. Las bacterias encapsuladas pueden ser más difíciles de matar
para su sistema inmune, y algunas especies de bacterias encapsuladas son
responsables de una variedad de enfermedades comunes y con frecuencia
peligrosas.
Fagocitosis
Los glóbulos blancos llamados fagocitos engullen a los invasores y luego los
destruyen, un poco como "comer" y luego digerir los patógenos. Este proceso se
llama fagocitosis. Los macrófagos, los neutrófilos y las células dendríticas son los
fagocitos más importantes en su sistema inmune. Reconocen a los invasores con
la ayuda de moléculas llamadas receptores de tipo peaje, que se unen a una
variedad de moléculas comunes en los microbios pero ausentes de las células
humanas. Las bacterias encapsuladas son más difíciles de reconocer para los
fagocitos y están mejor equipadas para sobrevivir incluso después de ser
engullidas por un fagocito.
Estreptococo
Streptococcus es un género de bacterias que incluye algunos patógenos humanos
importantes, principalmente S. pyogenes y S. pneumoniae. Ambos de estos
patógenos son bacterias encapsuladas. El primero es responsable de
enfermedades como la faringitis estreptocócica, el impétigo, la celulitis y la fascitis
necrosante; los medios a menudo se refieren a la fascitis necrosante como
"enfermedad carnívora" o "bacteria carnívora". Como su nombre lo indica, S.
pneumoniae es la causa más común de neumonía. Sus cápsulas de polisacáridos
ayudan a que estos dos agentes patógenos sean más virulentos y más peligrosos
para la salud humana.
Staphylococcus aureus
Las bacterias S. aureus se encuentran en racimos parecidos a uva cuando se
estudian bajo el microscopio. Típicamente colonizan los pasajes nasales en
humanos. Al igual que los estreptococos, son bacterias encapsuladas, aunque su
cápsula se denomina más bien "microcápsula" porque solo se puede ver con
microscopía electrónica. Los médicos no están completamente seguros del rol de
la cápsula de S. aureus en su virulencia, pero sí saben que S. aureus puede
causar una variedad de enfermedades como forúnculos, meningitis (infección de
membranas que cubren el cerebro y la médula espinal), neumonía, infecciones del
tracto urinario, mastitis (inflamación de la mama) y síndrome de shock tóxico.
Estas bacterias son especialmente problemáticas en entornos hospitalarios, donde
pueden infectar heridas en pacientes que se recuperan de una cirugía. Las cepas
colectivamente llamadas s resistentes a la meticilina. aureus o MRSA son
resistentes a muchos antibióticos comunes y representan un problema creciente.
Haemophilus Influenzae
La bacteria H. influenzae se encuentra en cepas encapsuladas y no encapsuladas.
El setenta y cinco por ciento de los niños y adultos sanos portan estas bacterias
en su nasofaringe, donde las cavidades nasales se conectan a la garganta. En
niños menores de 5 años, H. influenzae puede causar meningitis aguda; también
es responsable de algunas infecciones del oído, infecciones del tracto respiratorio
y casos de sinusitis. Los H. influenzae encapsulados de tipo B son generalmente
los responsables de la enfermedad, ya que su cápsula los ayuda a evitar los
fagocitos. Vacunar a los niños con el polisacárido que se encuentra en la cápsula
los protege de contraer enfermedades causadas por H. influenzae tipo b.

3- Mencione por lo menos dos enfermedades causadas por bacterias

formadores de espora.
BACILLUS
Bacillus cereus o B. cereus es una clase de bacterias productoras de toxinas.
Estas toxinas pueden causar dos tipos de enfermedades: una caracterizada por
diarrea y la otra, denominada toxina emética, por causar náuseas y vómitos.
Estas bacterias están presentes en los alimentos y pueden multiplicarse
rápidamente a temperatura ambiente.
Clostridium difficile (C. difficile)
Es una bacteria que causa diarrea y condiciones intestinales más graves, como la
colitis. Los síntomas incluyen:
 Diarrea acuosa (al menos tres deposiciones diarias por dos o más días)
 Fiebre
 Pérdida del apetito
 Náuseas
 Dolor o molestia abdominal
El Clostridium difficile es más común en personas que tienen que tomar
antibióticos por un largo periodo de tiempo. Los adultos mayores también tienen
un mayor riesgo de presentarla. La infección se disemina con frecuencia dentro
del hospital y residencias de adultos mayores.
Las pruebas de heces pueden diagnosticar C. difficile. En ocasiones, también
puede necesitar pruebas de imagen para ver si presenta complicaciones. Ciertos
antibióticos pueden tratar la infección. Rara vez ocurren casos graves que
necesitan cirugía.

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