Qui6106 Semana 12 Ejercicios HPLC I

QUI6106 ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL
FACULTAD INGENIERÍA
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL Y AGRONEGOCIOS
INGENIERIA AMBIENTAL
INGENIERIA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
Tema : Cromatografía Líquida de Alta Performance HPLC (I)

Semana 12
Alumnos : Aguirre Zavalet a Taly
: Ant onio O rt iz Luis Miguel
: Bobadilla
Parámetros cromatográficos
Parámetro: Definici Ejemplo :

ón :
Tiempo de retención Corresponde al tiempo transcurrido desde Compuesto A: TRA = 9

(TR) que se inyecta la muestra en el sistema,
hasta la detección del máximo del pico de Compuesto B : TRB = 19
elución
Factor de capacidad (K’) Medida práctica del grado de retención del Compuesto A:
compuesto se utiliza para describir las
𝑇& − 𝑡) velocidades de migración de los analitos en 𝐾A = 1.9
𝐾" =
𝑡) las columnas. Se interpreta considerando
que mientras mayor sea el valor de este Compuesto B:
factor menor es la velocidad de migración
de los solutos en la columna 𝐾B = 5.13
Factor de selectividad
Define que tan selectiva es una columna Factor de Selectividad
()
para separar dos picos compuestos A y B
𝑇&+ − 𝑡)
*+ =
𝑇&* − 𝑡)  = 2.78
Número de plato Mide la capacidad de la columna para Compuesto A:

teóricos (N) separar los componentes, no la retención de
2 los mismos. NA = 51.84
𝑇𝑅𝐴 La eficiencia o el número de platos se
𝑁 = 16 / 3 puede observa directamente a partir del Compuesto B:
𝑊𝐴 cromatograma, observando la agudeza de
𝑇𝑅𝐴 2 los picos. NB = 90.25
𝑁 = 5,54 / 3
𝑊(1/2)𝐴
Expresa el grado de separación que se

Resolución (R<) Resolución de compuestos A y
puede obtener en un sistema cromatográfico
B
para dos
2(𝑇&+ − 𝑇&*) componentes dados. Relaciona la
Rs = 1.54
R<= capacidad separadora de un sistema
𝑊𝐵 + 𝑊𝐴 cromatográfico para dos componentes
MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 1

1. Se tiene el siguiente cromatograma:
Determinar:
a) Tiempo de retención (TR) de los compuestos A y B.
TRA = 3.1
TRB = 4.7
b) Factor de capacidad (K’) de los compuestos A y B. ¿Qué significan estos valores?

3.1 − 0.7
𝐾𝐴 = = 3.43
0.7
4.7 − 0.7
𝐾𝐵 = = 5.71
0.7
c) Factor de selectividad (). ¿Qué significa este factor?
4.7 − 0.7
𝛼𝐴𝐵 = = 1.67
3.1 − 0.7
d) Número de plato teóricos (N) para los compuestos A y B. ¿Cómo relaciona el valor obtenido
frente a la forma de los tipos de picos observados?
3.1 2
𝑁𝐴 = 16 ( ) = 3844
0.2
4.7 2
𝑁𝐵 = 16 ( ) = 3927.11
0.3
e) Resolución (RS) considerando a los compuestos A y B.

2(4.7 − 3.1)
𝑅𝑆 𝐴𝐵 = = 6.4
0.3 + 0.2

Determinar :
a) Tiempo de retención (TR) de los compuestos A,B y C.
TRA = 1.1 TRB = 4.7 TRC = 6.3
b) Factor de capacidad (K’) de los compuestos A,B y C. ¿Qué significan estos valores?
1.1 − 0.7
𝐾𝐴 = = 0.57
0.7
4.7 − 0.7
𝐾𝐵 = = 5.71
0.7
6.3 − 0.7
𝐾𝐶 = =8
0.7
c) Factor de selectividad () y (C). ¿Qué significa este factor?

4.7 − 0.7
𝛼𝐴𝐵 = = 10
1.1 − 0.7
6.3 − 0.7
𝛼𝐴𝐵 = = 14
1.1 − 0.7
d) Número de plato teóricos (N) para los compuestos A,B y C. ¿Cómo relaciona el valor
obtenido frente a la forma de los tipos de picos observados?
1.1 2
𝑁𝐴 = 16 ( 0.1) =1936
4.7 2
𝑁𝐵 = 16 ( ) = 8836
0.2
6.3 2
𝑁𝐶 = 16 ( 0.3) =7056
e) Resolución (R<) considerando a los compuestos A y B y la resolución considerando a los
compuestos A y C.
2(4.7 − 1.1) 2(6.3 − 1.1)
𝑅𝑆 𝐴𝐵 = = 24 𝑅𝑆 𝐴𝐶 = = 26
0.2 + 0.1 0.3 + 0.1

Determinar :
TRA =
TRB =
TRC =
𝐾𝐴 = =
𝐾𝐵 = =
𝐾𝐶 = =

𝛼𝐴𝐵 = =
𝛼𝐴𝐵 = =
2
𝑁𝐴 = 16 ( ) =
2
𝑁𝐵 = 16 ( ) =
2
𝑁𝐶 = 16 ( ) =


e) Resolución (Rs) considerando a los compuestos A y B y la resolución considerando a los
compuestos A y C.
2( )
𝑅𝑆 𝐴𝐵 = =
2( )
𝑅𝑆 𝐴𝐶 = =
f) Compare el cromatograma 3 con el cromatograma 2. ¿Que diferencias puede detectar? ¿A

qué se debe la diferencia entre ambos cromatogramas?

Determinar :
TRA =
TRB =
TRC =
𝐾𝐴 = =
𝐾𝐵 = =
𝐾𝐶 = =

𝛼𝐴𝐵 = =
𝛼𝐴𝐵 = =
2
𝑁𝐴 = 16 ( ) =
2
𝑁𝐵 = 16 ( ) =
2
𝑁𝐶 = 16 ( ) =


e) Resolución (R<) considerando a los compuestos A y B y la resolución considerando a los
compuestos A y C.
2( )
𝑅𝑆 𝐴𝐵 = =
2( )
𝑅𝑆 𝐴𝐶 = =
f) Compare el cromatograma 4 con el cromatograma 3. ¿Que diferencias puede detectar?

¿A qué se debe la diferencia entre ambos cromatogramas?

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QUI6106 ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL

Tema : Cromatografía Líquida de Alta Performance HPLC (I)

Parámetro: Definici Ejemplo :

Tiempo de retención Corresponde al tiempo transcurrido desde Compuesto A: TRA = 9

Número de plato Mide la capacidad de la columna para Compuesto A:

Expresa el grado de separación que se

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 1

1. Se tiene el siguiente cromatograma:

b) Factor de capacidad (K’) de los compuestos A y B. ¿Qué significan estos valores?

c) Factor de selectividad (). ¿Qué significa este factor?

e) Resolución (RS) considerando a los compuestos A y B.

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 2

2. Se tiene el siguiente cromatograma:

c) Factor de selectividad () y (C). ¿Qué significa este factor?

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 3

3. Se tiene el siguiente cromatograma:

c) Factor de selectividad () y (C). ¿Qué significa este factor?

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 4

3. Se tiene el siguiente cromatograma:

f) Compare el cromatograma 3 con el cromatograma 2. ¿Que diferencias puede detectar? ¿A

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 5

4. Se tiene el siguiente cromatograma:

c) Factor de selectividad () y (C). ¿Qué significa este factor?

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 6

4. Se tiene el siguiente cromatograma:

f) Compare el cromatograma 4 con el cromatograma 3. ¿Que diferencias puede detectar?

MSc. Edgar Régulo Vega Carrasco 7

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