RESULTADOS

a) Método de la segunda derivada

Para este método deben de obtener la diferencia entre los valores de absorbancia y de sus diluciones.
Usando estos datos
++

Fila dilución 1/dilución Abs1 Abs2 Prom

Abs 1. Primero hagan un calculo del valor de la dilución
1 1280 0.00078125 0.414 0.39 0.4005 (1/dilución) y el promedio de sus absorbancias (columna
azul
2 640 0.0015625 0.469 0.53 0.5 2. Posteriormente van a obtener la diferencia (resta) entre
el valor de la dilución (1/dilución) mayor y el siguiente (8-
3 320 0.003125 0.565 0.74 0.652
7) y luego 7-6 y luego 6-5 y así sucesivamente (columna
4 160 0.00625 0.62 0.92 0.7675 ∆ 1/Dil)
3. Realizar el mismo cálculo para el promedio de la
5 80 0.0125 0.719 1.09 0.906 absorbancia columna (∆ Abs)
4. Cálcular el índice entre (∆ Abs) / (∆ 1/Dil)
6 40 0.025 0.727 1.1 0.914 5. Obtener la diferencia de los valores del índice (∆ Abs) /
(∆ 1/Dil), tal como se hizo para las absorbancias y las
7 20 0.05 0.754 1.1 0.9275 diluciones (columna ∆( ∆Abs/∆ 1/Dil)
6. Usar este último valor y dividirlo de nuevo entre la
8 10 0.1 1.336 1.35 1.343
diferencia de diluciones (∆ 1/Dil). Tal como se muestra
en la columna (∆( ∆Abs/∆ 1/Dil))/(∆ 1/Dil))
7. Este ultimo valor se graficará contra el logaritmo base 10 de la diferencia de las diluciones (∆ 1/Dil) (gráfica 1)
∆ 1/Dil ∆ (∆ Abs) / ∆( ∆Abs/ (∆( ∆Abs/∆ log (1/
Abs (∆ 1/Dil) ∆ 1/Dil) 1/Dil))/(∆ 1/Dil)) (1/Dil))
3.10720997

0.00078 0.1 127.36 2.80617997

1 4
0.00156 0.15 97.28 -30.08 38502.4 2.50514997
3 2 8
0.00312 0.11 36.96 -60.32 38604.8 2.20411998
5 6 3
0.00625 0.13 22.16 -14.8 4736 1.90308998
9 7
0.0125 0.00 0.64 -21.52 3443.2 1.60205999
8 1
0.025 0.01 0.54 -0.1 8 1.30102999
4 6
0.05 0.41 8.31 7.77 310.8 1
6
 Titulo de anticuerpos α-ASH de procedencia de conejo
45000

40000
38604.8

35000

30000

25000

20000

15000

10000
4736
5000

0
1 1.5 2 2.5 3 3.5

Gráfica 1. Titulo de anticuerpos α-ASH de procedencia de conejo

8. Posteriormente a partir de la gráfica deben de de identificar el punto de

inflexión, el cual representa el título de anticuerpos, para obtener el valor
deben usar la función exponencial de 10 X ya que el valor en la gráfica esta
en base log, he aquí el ejemplo de la gráfica:

*Dilución: 102.505149978 = 319.99, cercano a 320

*Por lo tanto el titulo es: 1:320

b)Método de densidad óptica

OTRO METODO POR EL QUE PUEDEN OBTENER EL TITULO DE ACs ES

EL DE LA DENSIDAD OPTICA PARA LO CUAL NECESITAN:

1) Obtener el valor promedio de Abs del control negativo

2) Multiplicar el valor anterior por 3
3) El título de anticuerpos se considera como la dilución más alta cuyo
valor de Absorbancia sea mayor o igual al valor calculado anteriormente.
Ejemplo:

Absorbancia control negativo

Abs Prom: 0.22X3=0.600

.223
.217

1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280

A 1.336 0.754 0.727 0.719 0.620 0.565 0.469 0.414
B 1.350 1.101 1.101 1.093 0.915 0.739 0.531 0.387

Por lo tanto en este ejemplo aunque la dilución de 1:160 tiene tiene un valor
promedio mayor a 0.6, la dilución más alta a la cual se obtiene un valor
promedio de Absorbancia mayor a 0.6 es el de 1:320. Lo cual coincide con lo
obtenido por el método de la segunda derivada.