Universidad Técnica de Machala

Unidad Académica de Ciencias Químicas y de la Salud

Carrera de Ingeniería en Alimentos

TRABAJO DE TITULACIÓN

Determinación de la presencia de levaduras en el cultivo madre utilizado en el

proceso de fermentación alcohólica del mosto de caña azucarera en las unidades de
producción del cantón Portovelo.
Caracterización del cultivo madre utilizado en el proceso de fermentación alcohólica Commented [JC1]: Determinación de la presencia de
levaduras en el
del mosto de caña azucarera en las unidades de producción del cantón Portovelo.

Estudiante:
Jean Carlos Cabrera Hidalgo

Docente tutor:
Ing. Ind. Verónica Patricia Bravo Bravo.

Semestre:
Noveno “A”
 Machala, 2018

Objetivo General
Caracterizar el cultivo madre utilizado en el proceso de fermentación alcohólica del mosto
de caña azucarera en las unidades de producción del cantón Portovelo.
Problema
Desconocimiento de la composición del cultivo madre y de los metabolitos que se
producen en la fermentación del mosto
 Justificación
En el campo de la micología industrial, se estudia tanto la acción nociva de los hongos
microscópicos, que pudren y malogran materias primas y productos manufacturados
(incluidos los distintos alimentos), como el empleo de estos organismos en
fermentaciones industriales y en el campo de la biotecnología. Se trata de organismos
fúngicos que muestran diferencias considerables en su estructura. Pertenecen a grupos
taxonómicos muy diversos y, si bien se pueden observar a simple vista, no obstante,
producen estructuras diminutas, reproductoras y vegetativas, que no es posible estudiar
sin la ayuda del microscopio.
Levaduras
Las levaduras son hongos que crecen generalmente en forma de agregados sueltos de
células independientes, que pueden ser globosas, ovoides, piriformes, alargadas o casi
cilíndricas En algunos casos, forman cadenas de células alargadas, adheridas de modo
suelto, semejantes a un micelio, por lo que se las denomina seudomicelio. Algunas
especies forman breves extensiones de verdadero micelio, con frecuencia ramificado. De
acuerdo con lo expuesto, y según se ha comentado ya, no existe un limite de separación
definido entre levaduras y otros hongos que forman un micelio típico.
Las levaduras, cuando crecen sobre medios sólidos, forman colonias de aspecto
característico que recuerdan a las colonias bacterianas. En casi todas las especies de
interés industrial, el modo habitual de reproducción vegetativa es por gemación. Muchas
de ellas presentan reproducción sexual por medio de ascosporas y, a diferencia de los
mohos, las levaduras no pueden identificarse solamente por sus caracteres morfológicos;
se precisa la ayuda de pruebas bioquímicas para la identificación específica.
Medios de cultivo
Muchos hongos y bacterias fitopatógenas pueden cultivarse en medios de cultivo
artificiales, sólidos o líquidos. La mayoría de los hongos crecen en medios de cultivo de
alto contenido de carbohidratos, con un pH que fluctúa entre 5 y 6, mientras que las
bacterias crecen mejor a un pH próximo a 7. No existe un medio ideal para el cultivo de
hongos y bacterias ya que las exigencias de las diferentes especies varían
considerablemente. Los medios de cultivo se clasifican de acuerdo a su composición en
dos grandes grupos: medios naturales, compuestos de infusiones de productos naturales,
cuya composición exacta no se conoce y medios sintéticos, que contienen ingredientes
de composición química conocida y por lo tanto pueden duplicarse con cierto grado de
precisión. El procedimiento para la preparación de algunos medios de cultivo aparece a
continuación:
Agar papa dextrosa (APD)
Papas peladas y partidas 200 g
Dextrosa (glucosa) 20 g
Agar 17 g
Agua destilada hasta completar 1000 ml
Cocine las papas peladas y partidas en 500 ml agua por 1 hora. Simultáneamente en otro
recipiente en baño maría, disuelva el agar en 500 ml de agua. Cuele el extracto de papa a
través de varias capas de tela de gasa, mezcle ambos líquidos, agregue la dextrosa y agite
la mezcla. Restaure el volumen a 1000 ml con agua. Dispense el medio en recipientes
apropiados y esterilice a 15 libras de presión por 20 minutos.
Papa dextrosa (PD)
Igual al agar papa dextrosa, pero sin el agar.
Manual de laboratorio para FITOPATOLOGÍA GENERAL – Eddie Echandi.
Instituto Interamericano de Ciencias Agricolas.
Url:
https://books.google.com.ec/books?id=JXYOAQAAIAAJ&printsec=frontcover&s
ource=gbs_ge_summary_r&cad=0#v=onepage&q&f=false
Papa Dextrosa Agar (PDA)
Es un medio de cultivo que sirve para aislar todo tipo de hongos.
Beauveria, Paecilomyces, Lecanicillium (Verticillium) y Metarhizium, los más
importantes hongos parásitos de insectos, al igual que los parásitos de plantas y los
hongos saprofitos crecen muy bien y esporulan en este medio. Cuando se aíslan hongos
a partir de insectos colectados del suelo, es recomendable acidificar el medio con ácido
láctico al 25%. Se agregan 3 ó 4 gotas sobre el agar solidificado de la placa con el objeto
de evitar el desarrollo de bacterias.
Con los mismos ingredientes, excluyendo el agar, se obtiene el medio líquido de Papa
Dextrosa (PD), muy utilizado para la preparación del inóculo en forma masiva.
Papa sin pelar 200 g
Dextrosa 10 g
Agar 18 g
Agua destilada 1 L
Procedimiento para la preparación de este medio de cultivo aparece a continuación:
Lavar las papas, cortarlas y hacerlas hervir en un litro de agua destilada por 20 minutos,
colar y disolver en el líquido la dextrosa y el agar. Esterilizar en autoclave durante 15
minutos a 15 libras de presión.
Siembra
La siembra se realiza con el fin de aislar o repicar los hongos para su uso inmediato o
para mantenerlos viables por un tiempo corto. La siembra o aislamiento en cultivo puro
consiste en dejar crecer el hongo elegido bajo condiciones en las que pueda desarrollar y
esporular convenientemente.
Para ello es necesario verter el medio de cultivo, dejarlo enfriar, acidificarlo -si fuera
necesario- y colocar una pizca del hongo a sembrar. Se realiza por medio de una aguja o
de un ansa, ya sea por un simple toque o por rayado continuo. Generalmente para la
siembra se utilizan placas, tubos y frascos, se coloca la fecha y se incuba durante el tiempo
conveniente hasta que se vea que el hongo ha crecido y está esporulando.
Url:
https://books.google.com.ec/books?id=lFfNuqTeit8C&pg=PA20&lpg=PA20&dq=agar
+papa+dextrosa&source=bl&ots=XBE1tLJOa5&sig=ftxYmt9dfSiXQSmPPSyWTXsm
VCY&hl=es-
419&sa=X&ved=2ahUKEwjGpYOhtercAhVHs1kKHagHAzI4FBDoATADegQICBA
B#v=onepage&q=agar%20papa%20dextrosa&f=false
http://cipotato.org/wp-content/uploads/2014/09/AN65216.pdf

Qué es Agar Papa Dextrosa

Técnica de siembre en papa dextrosa
Método de siembra en medio PDA

Figura 1. Recuento de hongos (mohos y levaduras)

 Qué es AGAR PAPA DEXTROSA
VAMOS A HACER SIEMBRA
Técnica de Siembra en papa dextrosa.
Traer dos unidades de 100ml de mosto (cultivo) en refrigeración. Para el lunes.
Usar los frascos de muestra de orina que están esterilizados. Utilizar agua, hielo y
sal para preservar en una funda hermética ziploc.
Introducción
Métodos y técnicas
Resultados
 Conclusiones

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