SEÑALE LAS DIFERENCIAS ENTRE LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS

1. Señale las diferencias entre la pared celular de las bacterias gram

positivas y negativas.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

No tiene membrana externa Membrana externa: forma un saco rígido alrededor de la

bacteria.

No tiene espacio periplásmatico Espacio periplásmatico: espacio entre la membrana

citoplasmática y la interna de la membrana externa.

Capa de peptidoglucano muy desarrollado, hasta 40 La de peptidoglucano presenta una sola capa
capas

La capa S está unida a la capa de peptidoglucano. La capa S está unida directamente a la membrana
externa
Contiene LPS
No contiene LPS

CUESTIONARIO N° 2: MICROBIOLOGÍA
Muy sensible a la penicilina Poco sensible a la penicilina

retienen la tinción azul Quedan decoloradas.

Conservan el complejo yodocolorante Pierden el complejo yodocolorante

Poseen ácidos teicoicos y lipoteicoicos, Poseen proteínas con concentraciones elevadas.

2. Señale 5 determinantes de patogenicidad de las bacterias gram positivas

y 5 de las bacterias gram negativas.

 Gram (+):  Coagulasa

.  Estafiloquinasa
 Hialuronidasa
 B lactamasa.
 Lipasas, fosfolipasas, nucleasas

 Gram (-):  Lipopolisacáridos

 enzimas hidrolíticas
 capsula
 adhesinas
 endotoxinas

3. Fundamente la coloración de gram interrumpido.

Los fundamentos de diferenciación de Gram positivo y Gram negativo. Los fundamentos de la

técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y
Gram negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de
peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la
pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en
la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también
conocido como mureína)Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas

CUESTIONARIO N° 2: MICROBIOLOGÍA
es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición
distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano
unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína,
fosfolípido y lipopolisacárido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente
debido a estas diferencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que esel
material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Grampositivas lo poseen en
mucha mayor proporción que las Gram negativas. La diferencia que se observa en la resistencia
a la decoloración se debe a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en
solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa
de peptidoglicano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de
cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa,
perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las Grampositivas, al poseer una
pared celular más resistente y con mayor proporción dé peptidoglicanos, no son susceptibles a
la acción del solvente orgánico, sino qué este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que
impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-
violácea

1. Se procede a extraer la muestra, que consiste en un raspado faríngeo, para lo cual con

ayuda del hisopo y la bajalengua.

2. Se continúa expandiendo la muestra por todo el portaobjeto.

3. Hay que fijar la muestra con ayuda de calor (mechero), sin quemar la

muestra.

4. Se tiñe con cristal violeta, esperar 1 minuto y enjuagar con agua

corriente.

5. Se agrega el mordiente (lugol), esperar 1 minuto y enjuagar con agua corriente.

6. Se decolora con el alcohol o la acetona, esperar por 30 segundos y enjuagar

7. Se tiñe con safranina, se espera por 1 minuto y se enjuaga con agua corriente.

CUESTIONARIO N° 2: MICROBIOLOGÍA
8. Se debe esperar a que se seque completamente a temperatura ambiente.

9. Se agrega el aceite de inmersión y observar en el microscopio.

CUESTIONARIO N° 2: MICROBIOLOGÍA