TOMA DE MUESTRAS

MICROBIOLOGIA

Claudia L. Colorado S.
Bacterióloga
Coordinadora Grupo de Apoyo Diagnóstico
 INTRODUCCION

Cuando la impresión diagnóstica del paciente es una patología producida

por microorganismos, se hace necesario tomar diferentes tipos de
muestras, con el fin de buscar:

Hongos Bacterias Leishmaniasis Hansen

 INTRODUCCION

ENFOQUE CENTRADO EN LA
SEGURIDAD DEL PACIENTE
 INTRODUCCION
• Antes de iniciar el procedimiento de toma de muestra es importante asegurarse de
seguir las recomendaciones para reducir las probables fuentes de error y tener en
cuenta:
– Normas de bioseguridad
– Orden y facturación correcta
– Preparación adecuada del paciente, según la muestra que se va a procesar.
– Aplicación de consentimiento informado.
– Encuesta pretest, para verificar estado actual del paciente y cumplimiento de
las condiciones
– Adecuada identificación del paciente y el material que se va a emplear
– Tomar la muestra adecuada
– Tomar muestra suficiente según la cantidad de exámenes a procesar
– Adecuado tiempo de separación y transporte interno
 PROCEDIMIENTO PARA TOMA DE
MUESTRA PARA MICROBIOLOGÍA

1. Saludo al paciente y
6. Alistamiento del
Revisión de la orden,
material que se requiere 7. Lavado de manos
factura frente al ingreso
según la solicitud medica
en el sistema

2. Confirmación de los
8. Selección de los sitios
datos con el paciente
5. Elaboración de la específicos y la lesión
(Nombre completo y
encuesta pre test. adecuada, y obtención de
documento de identidad
las muestras
correcto)

9. Notificación de
4. Explicación del oportunidad de
3. Impresión de etiqueta
consentimiento resultados
de códigos de barra
informado
Despedida del paciente
 OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES
• Se debe realizar un adecuado lavado de manos, en
los momentos recomendados por OMS/OPS:
OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES
OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES

MUESTRAS PARA ANALISIS DE

BACTERIOLOGIA
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
El estudio microbiológico de muestras
de tejidos y líquidos corporales permite
establecer el diagnóstico etiológico de
diferentes enfermedades infecciosas.
Por tal motivo es importante garantizar
la calidad en la obtención de la muestra
y la información que debe acompañarla
durante el proceso que comienza en la
fase previa al análisis, que incluye la
preparación, la obtención y el
transporte, lo cual concluye en el
análisis de la muestra.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

Para el éxito de la atención del paciente es

esencial la comunicación entre todo el equipo
de salud. El médico solicitará un estudio
microbiológico con una orientación clara de
acuerdo con la situación clínica del paciente.
El personal de enfermería y laboratorio
microbiológico requiere conocimientos e
información precisa para realizar el
procedimiento en condiciones óptimas.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

Solicitud de estudio
Antes de colectar un espécimen se debe hacer una selección cuidadosa
para garantizar que el sitio fuente representa el lugar de la enfermedad
activa.
Las muestras para cultivo de
bacterias se deben obtener con
prontitud, después del inicio de la
enfermedad activa y preferiblemente
antes del inicio de antibióticos.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

Es importante:
• Especificar el estudio requerido; por ejemplo,
examen directo, cultivo y antibiograma de lesión
abdominal, estudios de aerobios o anaerobios.
• La impresión diagnóstica es especialmente útil
cuando se solicita estudio de bacterias o de hongos.
• Informar el uso de antibióticos u otros
medicamentos (por ejemplo, inmunosupresores)
que pueden influir y que el personal del laboratorio
puede utilizar para orientar el análisis y su resultado.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
Preparación de elementos
Una vez conocida la solicitud del tipo de examen, se
debe preparar el equipo necesario para la obtención,
la conservación y el transporte correctos de la muestra
Baja lenguas
• Aplicador con algodón estéril
• Medios de cultivo Agar sangre, Agar chocolate y
caldo tioglicolato o BHI
• Laminas limpias nuevas
• Marcador o etiqueta para identificar las muestras,
mechero
• Medio de transporte suministrado por el
laboratorio de referencia, (si la muestra no va a ser
procesada en el laboratorio
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

Toma de muestra a través de hisopado faríngeo

El hisopado faríngeo se utiliza para cultivos

bacterianos esencialmente para la búsqueda de
Streptococcus pyogenes. Sin embargo, también es
utilizado en la búsqueda de Corynebacterium
diphteriae y Neisseria. La detección de levaduras y
hongos es generalmente restringida a la evaluación
microscópica de la coloración de Gram. (P Murray,
2010)
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
Toma de muestra a través de hisopado faríngeo

Para facilitar la toma de muestra se debe indicar al paciente

que emita el sonido Aah! con el objeto de levantar la úvula;
con un baja lenguas se deprime el piso de la lengua para
minimizar la contaminación de la muestra con secreciones
bucales que puedan diluir, evadir o inhibir el crecimiento de la
flora faríngea y con aplicador de algodón estéril se frotan
vigorosamente las dos tonsilas, la faringe posterior y si existen
zonas de inflamación, ulceración, exudación, etc.

• No tocar nunca la mucosa oral, lengua o úvula

• Se realiza extendido directo para Tinción de Gram
• Se siembra en caldo tioglicolato o BHI, Agar sangre, Agar
chocolate para incubar a 37°C, 5-10 % CO2 durante 24-48h
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
ABSCESOS Y ULCERAS SUPURATIVAS

Suspender tres días antes el tratamiento con antibióticos, no

aplicar talcos ni ungüentos e informar los medicamentos que esté
tomando o aplicando. (5)

El área afectada debe desinfectarse utilizando Gluconato de

Clorhexidina al 2% en asociación con alcohol isopropílico al 70%
utilizando gasas estériles, para evitar la contaminación de la
muestra con flora normal.

La forma más conveniente para obtener la muestra es por punción

aspirativa con jeringa y aguja estéril. En caso de herida abierta el
uso de hisopo o aplicador de algodón tiene un valor limitado y
debe descartarse el material de la superficie y tomar los exudados
del interior.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

ABSCESOS Y ULCERAS SUPURATIVAS

• Se debe realizar un frotis para coloración de Gram,

en una lamina nueva
• Sembrar en Agar sangre, Agar Chocolate, Agar
MacConkey utilizando ¼ de la caja del medio de
cultivo, para desupúes realizar el aislamiento en el
laboratorio.
• Depositar el escobillón en el caldo tioglicolato o BHI
• O sembrar el Medio de transporte suministrado por
el laboratorio de referencia, (si la muestra no va a
ser procesada en el laboratorio.
MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

TRACTO URINARIO -UROCULTIVOS.

ORINA OBTENIDA POR MICCIÓN MEDIA.

TOMA DE MUESTRA.

La muestra mas idónea es la primera micción de la mañana, mas aun

sino hay sintomatología infecciosa, o una sin retención cuando hay
sintomatología infecciosa
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
TRACTO URINARIO -UROCULTIVOS.

Técnicas para mujeres.

Realizar un adecuado aseo en los genitales enjuagando

con abundante agua.
Se indicará a la paciente que orine desechando la
primera parte de la micción, tras lo cual y sin interrumpir
la micción, se recogerá el resto de la orina en el
recipiente.
El frasco debe sujetarse para que no tome contacto con
piernas, vulva o ropa del paciente. Los dedos no deben
tocar el borde del frasco o su superficie interior.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

TRACTO URINARIO -UROCULTIVOS.

Técnica para hombres.

Realizar un adecuado aseo en los genitales enjuagando

con abundante agua
Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así
en todo momento, hasta que se haya recogido la orina.
Se pedirá al paciente que orine desechando los primeros
20-25 mililitros para, sin interrumpir la micción, recogerse
el resto de la orina en el recipiente estéril.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
TRACTO URINARIO -UROCULTIVOS.

Técnica para niños.

En niños y niñas mayores la orina se recoge de forma
similar a los adultos.
En niños y niñas más pequeños, la orina se recogerá en
colectores o bolsas estériles especialmente diseñadas para
ellos de la siguiente forma:
Lavado cuidadoso de los genitales y área perineal igual que
en los adultos.
Colocar la bolsa de plástico o el colector.
Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el niño
haya orinado, deben retirarse y enviarse al laboratorio para
su procesamiento.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

TRACTO URINARIO -UROCULTIVOS.

La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de

una hora. Cuando esto no sea posible debe
refrigerarse a 4ºC durante un tiempo máximo de
24 horas.
El laboratorio debe controlar el transporte,
garantizando que las muestras han sido
refrigeradas desde el momento de su toma.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA

SECRECIONES DEL TRACTO GENITAL

MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO -FLUJO

VAGINAL
Solicitar a la paciente que se abstenga de realizar el día
anterior prácticas sexuales y se realice un baño corporal
externo, suspender los antibióticos y asistir al examen en
ausencia del periodo menstrual (5 días antes o 5 días del
periodo menstrual) .
No deben utilizarse en los días previos a la recolección de la
muestra, soluciones antisépticas vaginales, óvulos ni
pomadas.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
SECRECIONES DEL TRACTO GENITAL

TOMA DE MUESTRA
La muestra debe tomarse siempre con especulo,
solo en casos excepcionales tales como embarazo,
menores de edad o si la paciente expresa no
desear la toma de muestra por este método.

Con la paciente en posición ginecológica se

introducirá un especulo "sin lubricante" (si es
necesario para lubricar utilizar agua templada),
Se debe de tomar la muestra del cuello de cerviz y
fondo del saco vaginal utilizando dos hisopos o
aplicadores de algodón rotándolos suavemente.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
SECRECIONES DEL TRACTO GENITAL

TOMA DE MUESTRA
Se realiza un frotis en una lámina depositando las muestras por rotación en la
siguiente posición:

2
0
5
0

CERVIX VAGINAL

A partir del escobillón, se mide el pH y se siembra en medios de Agar sangre,

Agar chocolate y caldo tioglicolato o BHI (cuando hay solicitud de cultivo).
El otro hisopo o aplicador de algodón debe introducirse en un tubo con
solución salina estéril para realizar el examen en fresco.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
En el área de toma de muestras, una vez tomada la muestra se debe realizar:

• Un frotis sobre la lámina para realizar la coloración de

Gram,
• Se debe presionar el escobillón sobre una cuarta parte
de la caja de los medios de cultivos (agar sangre y agra
chocolate) para posteriormente en el laboratorio de
bacteriología realizar con el asa estéril las estrías
• El escobillón se deposita en el caldo tioglicolato o BHI,
• El otro escobillón se utiliza para medir el pH mediante
la rotación de este sobre la porción de papel indicador
y se coloca luego en la solución salina para realizar un
montaje en fresco
• Si este examen no se va a realizar inmediatamente se
debe guardar la muestra hasta su procesamiento en la
incubadora a 37ºC.
 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
Eliminar todos los elementos utilizados durante la toma de muestra, cumpliendo
las normas de bioseguridad y manejo de Cortopunzantes-

Cumplir con las medidas de bioseguridad de la institución

 MUESTRAS PARA ANALISIS DE
BACTERIOLOGIA
Criterios de aceptabilidad o rechazo de muestras:

• Cuando no se mantienen las condiciones de colección y transporte

recomendadas se debe obtener una nueva muestra, siempre que
sea posible.
• Cantidades insuficientes, temperaturas inadecuadas, recipientes
rotos o con fugas o deficiente calidad de la muestra (por ejemplo,
esputo contaminado con saliva; orina obtenida de bolsa colectora),
deben ser tenidos en cuenta para no procesar el espécimen.
• Muestras sin identificar: los especímenes obtenidos por medios no
invasivos se deben volver a obtener; los obtenidos por medios
invasivos se procesan previa autorización del médico.
• Transporte demorado: definido como el tiempo superior al
recomendado para cada tipo de muestra; sólo se procesan previa
autorización del médico: de lo contrario se deben repetir.
• Muestras repetidas: en un mismo día y especímenes diferentes a
tejido o sangre, requieren confirmación de la orden por parte del
médico.
 OBTENCION DE LA MUESTRA
ASPECTOS IMPORTANTES

Muestras obtenidas cumpliendo

los criterios de calidad

Muestras preparadas
adecuadamente

Entrega de muestras a las áreas

para procesamiento

Inicia fase Analítica.

 BIBLIOGRAFIA

MANUAL DE TOMA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

SECRETARÍA DISTRITAL DE SALUD- FUNDACIÓN CIC SALUD.
BOGOTA, 2015.

PROTOCOLO TÉCNICO DE LABORATORIO FASE PRE-ANALÍTICA

BACTERIOLOGIA Código: PC-4000-080
Título

Gracias
www.dermatologia.gov.co
Av. 1ª. N° 13A - 61