Jelajahi eBook
Kategori
Jelajahi Buku audio
Kategori
Jelajahi Majalah
Kategori
Jelajahi Dokumen
Kategori
NIM : P07134117249
Prodi : D3/ Tk1
1. Lactose Broth
Bahan :
Cara Kerja :
1. Timbang media cair sebanyak 0,65 gram dalam wadah erlenmeyer 100 mL
yang sudah berlabel menggunakan neraca
2. Dilarutkan dengan air suling sebanyak ±50 mL
3. Cek pH, bila terlalu basa tambahkan HCl dan bila terlalu asam tambahkan
larutan NaOH sampai sesuai pH yang diinginkan
4. Dipipet media cair kedalam tabung ulir berdurham yang sudah berlabel
lengkap sebanyak 5 mL (Tidak aseptik)
5. Tabung ulir berdurham disimpan pada piala gelas kemudian ditutup dengan
koran ikat dengan tali kasur
6. Masukkan kedalam autoklaf dengan tekanan 15 Psi (Pound Square Inch), suhu
121˚C selama 15 menit
Poin penting :
Nutrien agar adalah medium umum untuk uji air dan produk dairy. NA juga
digunakan untuk pertumbuhan mayoritas dari mikroorganisme yang tidak selektif,
dalam artian mikroorganisme heterotrof. Media ini merupakan media sederhana
yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan agar. Na merupakan salah satu media
yang umum digunakan dalam prosedur bakteriologi seperti uji biasa dari air,
sewage, produk pangan, untuk membawa stok kultur, untuk pertumbuhan sampel
pada uji bakteri, dan untuk mengisolasi organisme dalam kultur murni. Untuk
komposisi nutrien agar adalah eksrak beef 10 g, pepton 10 g, NaCl 5 g, air
desitilat 1.000 ml dan 15 g agar/L. Agar dilarutkan dengan komposisi lain dan
disterilisasi dengan autoklaf pada 121°C selama 15 menit. Kemudian siapkan
wadah sesuai yang dibutuhkan.
Cara pembuatan Nurient Agar :
1. 1,2 gram nutrien agar (NA) ditimbang dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer.
2. Ditambahkan 50 mL akuades.
3. Dipanaskan di atas hot plate hingga mendidih sambil diaduk dengan magnetic
stirer sampai homogen, lalu dibiarkan beberapa saat.
4. Dipipet sebanyak 4 mL dan dimasukkan ke dalam tiga buah tabung reaksi.
5. Tabung reaksi disumbat dengan kertas dan ditutup dengan kertas yang diikat
dengan karet gelang.
6. Dimasukkan dalam autoklaf untuk disterilkan beserta alat-alat yang akan
digunakan selama 2 jam pada suhu 121̊C dan tekanan 15 psi.
4. Nutrient Broth
Nutrient broth merupakan media untuk mikroorganisme yang berbentuk cair.
Intinya sama dengan nutrient agar. Nutrient broth dibuat dengan cara sebagai
berikut:
1. Larutkan 5 g pepton dalam 850 ml air distilasi/akuades.
2. Larutkan 3 g ekstrak daging dalam larutan yang dibuat pada langkah pertama.
3. Atur pH sampai 7,0.
4. Beri air distilasi sebanyak 1.000 ml.
5. Sterilisasi dengan autoklaf
5. MRSA (deMann Rogosa Sharpe Agar)
MRSA merupakan media yang diperkenalkan oleh De Mann, Rogosa, dan
Shape (1960) untuk memperkaya, menumbuhkan, dan mengisolasi jenis
Lactobacillus dari seluruh jenis bahan. MRS agar mengandung polysorbat, asetat,
magnesium, dan mangan yang diketahui untuk beraksi/bertindak sebagai faktor
pertumbuhan bagi Lactobacillus, sebaik nutrien diperkaya MRS agar tidak sangat
selektif, sehingga ada kemungkinan Pediococcus dan jenis Leuconostoc serta jenis
bakteri lain dapat tumbuh. MRS agar mengandung:
1. Protein dari kasein 10 g/L
2. Ekstrak daging 8,0 g/L
3. Ekstrak ragi 4,0 g/L
4. D (+) glukosa 20 g/L
5. Magnesium sulfat 0,2 g/L
6. Agar-agar 14 g/L
7. Dipotassium hidrogen phosphate 2 g/L
8. Tween 80 1,0 g/L
9. Diamonium hidrogen sitrat 2 g/L
10. Natrium asetat 5 g/L
11. Mangan sulfat 0,04 g/L
MRSB merupakan media yang serupa dengan MRSA yang berbentuk cair/broth.
Prosedur untuk membuat media:
Pada saat penyimpanan, media tidak boleh dibekukan. Hal ini dilakukan untuk
menghindari kondensasi dan menetes ke permukaan agar yang dapat
memfasilitasi pergerakan organisme dalam koloni (1).
Nutrient Agar (NA) adalah medium serbaguna yang baik untuk pertumbuhan
bakteri. Sesuaikan pH menjadi 7,4 dan sterilkan dengan autoklaf pada suhu 121oC
selama 15 menit. Bahan-bahan untuk NA: ekstrak khamir 3 gr, pepton 5 gr, NaCl
5 gr, agar-agar 15 gr, air suling 1 L (2).
TSB adalah media broth diperkaya untuk tujuan umum, untuk isolasi, dan
penumbuhan bermacam mikroorganisme. Media ini banyak digunakan untuk
isolasi bakteri dari spesimen laboratorium dan akan mendukung pertumbuhan
mayoritas bakteri patogen. Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai
yang menyediakan asam amino dan substansi nitrogen lainnya yang membuatnya
menjadi media bernutrisi untuk bermacam mikroorganisme. Dekstrosa adalah
sumber energi dan natrium klorida mempertahankan kesetimbangan osmotik.
Dikalium fosfat ditambahkan sebagai buffer untuk mempertahankan pH.
Alat dan bahan :
Erlenmeyer 250ml
Gelas ukur 100ml
Batang pengaduk
Autoclave
Waterbath
Tabung reaksi
Inkubator
Bunsen / spritus
Kaki tiga
Kassa asbes
Aquades
Media tsb, dengan komposisi :
ü Susped 30,0 g in 1000 ml
ü Purfeld distilled water.
Cara kerja :
1. Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan
2. Menimbang 0,9 gram TSB sebanyak 0,9 gram dan dilarutkan dalam 30 ml
aquades
3. Memanaskan media pada api bunsen sampai larut
4. Memasukkan media kedalam tabung reaksi dan dibundel
5. Mengikat tabung reaksi dan membungkusnya dengan kertas
6. Mensterilkan media pada autoclave 121Oc selama 15 menit
7. Menginkubasi media pada inkubator dengan suhu 37oc selama 24 jam
Neraca analitik
Spatula
Kertas timbang
Botol kaca
Gelas ukur 1000 ml
Plate/ Petridish
Batang pengaduk
Autoclave
Bahan
Prosedur Kerja
Buang kulit kentang, cuci, lalu potong-potong kecil. Rebus dengan 1 L air
sampai kentang matang, tetapi jangan terlalu lama memasaknya.
Saring air rebusan kentang menggunakan kain saring atau penyaring
teh/santan, dan tambahkan air sampai 1 L.
Tambahkan 20 g dextrose dan 15 g agar-agar, aduk-aduk, masukkan ke dalam
penangas air mendidih, ditutup, sambil sering diaduk-aduk selama 30 menit
sampai semua agar-agar larut.
Ukur 10 mL media agar dalam keadaan panas, masukkan ke dalam tabung
reaksi steril dan tutup dengan kapas. Pengukuran dengan gelas ukur cukup 1
kali saja, selanjutnya samakan tinggi media dalam tabung reaksi.
Ikat kuat-kuat tabung reaksi dengan menggunakan beberapa karet dan tutup
kertas, lalu beri label nama media.
Sterilkan menggunakan autoklaf, suhu 121⁰C selama 15 menit. Untuk
membuka tutup autoklaf, tunggu sampai tekanan menunjukkan angka nol.
Apabila tidak ada autoklaf, bisa diganti dengan pressure cooker (alat presto).
10. Geolliti
Cara Kerja:
1. Sampel padat yang telah dihomogenkan dengan NaCl atau sampel cair (dapat
langsung di gunakan, dimasukan kedalam tabung yang telah berisi Giolliti1ml.
2. Inkubasi 24 jam suhu 37C
3. Lihat warna pada media
4. Apa bila apabila warna media menjadi hitam pemeriksaan lanjutan dilakukan.
Pembuatan :
Cara Kerja :
1. Sampel padat yang telah dihomogenkan dengan NaCl atau sampel cair (dapat
langsung di gunakan, dimasukan kedalam tabung yang telah berisi alkalis
pepton 1ml.
2. Inkubasi 24 jam suhu 37C
3. Lihat warna pada media
4. Apa bila apabila warna media menjadi keruh(tersangka V. cholera)
pemeriksaan lanjutan dilakukan.
12. Selenite
Cara Kerja :
1. Sampel padat yang telah dihomogenkan dengan NaCl atau sampel cair (dapat
langsung di gunakan, dimasukan kedalam tabung yang telah berisi selenit 1ml.
2. Inkubasi 24 jam suhu 37C
3. Lihat warna pada media
4. Apa bila apabila warna media menjadi keruh (tersangka Salmonella)
pemeriksaan lanjutan dilakukan
13. Cook Meat Medium(CMM)
Prinsip kerja : Ciran paraffin menyediakan kondisi pertumbuhan yang baik untuk
mikroorganisme anaerobic.
Prinsip kerja : Berisi irisan kecil dari jaringan otak dan dapat digunakan untuk
menumbuhkan banyak bakteri seperti streptococcus, staphylococcus,
1. Sampel padat yang telah dihomogenkan dengan NaCl atau sampel cair (dapat
langsung di gunakan, dimasukan kedalam tabung yang telah berisi BHI 1ml.
2. Inkubasi 24 jam suhu 37C
3. Lihat warna pada media
4. Apa bila apabila warna media menjadi keruh pemeriksaan lanjutan dilakukan.
SUMBER
http://unsa-73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.html
https://tulisankimia.wordpress.com/2015/03/03/pembuatan-media-cair/
https://teknologilaboratoriummedik.blogspot.co.id/2016/04/media-eosin-
methylene-blue-agar-emb.html
https://aryamanangsang2.wordpress.com/2012/12/02/panduan-praktikum-
pembuatan-media-nutrien-agar-dan-sterilisasi/
https://iheartfoods.wordpress.com/category/mrsa/
http://devyfitrii.blogspot.co.id/2013/12/laporan-media-tsb.html
https://teknologilaboratoriummedik.blogspot.co.id/2016/11/media-plate-count-
agar-pca.html
https://www.daquagrotechno.org/membuat-media-pda-potato-dextrose-agar-dan-
mea-malt
extract-agar/
http://analiskesehatan-indonesia.blogspot.co.id/2010/12/media-bag-1.html