INTRODUCCIÓN

De acuerdo al postulado celular, todos los seres vivos están compuestos por células o por
segregaciones de las mismas y, absolutamente todas las funciones metabólicas que
garantizan la supervivencia del organismo se hacen en las células. Las bacterias son
microorganismos vivos, y su metabolismo es el conjunto de reacciones químicas que
desarrolla la célula, estas reacciones pueden ser catabolicas, es decir, cuando
descomponen sustratos, o pueden ser anabólicas, cuando forman algunos compuestos a
partir de elementos más simples. Todas estas reacciones se realizan en presencia de
enzimas intracelulares o extracelulares.

En esta práctica se realizó el cultivo de 3 bacterias conocidas en un agar nutritivo sólido,

Bacillus cereus, Staphylococcus aureus y Escherichia coli, además de estas bacterias se
nos entregaron 2 muestras problema para cultivar en diferentes medios y, dependiendo de
su crecimiento en estos medios, identificar qué bacteria es. Los medios para cultivar las
muestras problema son los siguientes:

● Agar Kliger: (color rojo). Se utiliza para la diferenciación de enterobacterias en

base a la fermentación de glucosa y lactosa, y la producción de ácido sulfhídrico.
Usa sales de hierro y rojo de fenol como indicador de pH. Debido a su capacidad de
desdoblar los azúcares y liberar sulfuros es utilizado para diferenciar bacilos
gram-negativos. La fermentación de los azúcares está indicada por un cambio de
color del rojo inicial al amarillo, la producción de ácido sulfhídrico se manifiesta por
un ennegrecimiento del medio.

● Agar Citrato de Simmons: ​(Color verde) ​Esta prueba determina si una bacteria
tiene la capacidad de usar citrato como única fuente de carbono y energía. Su
principal componente es el citrato de sodio (Na​3​C​6​H​5​O​7​) como única fuente de
carbono y azul de bromotimol como indicador de pH. Las bacterias que son capaces
de usar este medio, lo alcalinizan y se manifiesta con un cambio del color verde
original a un color azul.

● Agar SIM (Indol): ​Es un medio semisólido destinado a verificar la capacidad de las
bacterias para oxidar el triptófano. La acción enzimática de la triptofanasa, enzima
que cataliza la desaminación del triptófano, produce varios metabolitos entre los
cuales está el Indol. También ayuda a diferenciar entre las especies de bacterias
capaces de producir ácido sulfhídrico y detectar la movilidad de las bacterias.
El indol producido en la desaminación del triptófano se detecta adicionando al cultivo
dos o tres gotas del reactivo de Kovacs (P-Dimetilamino-benzaldehído), se formará
un anillo de color rojo violáceo en caso de ser positivo. La producción de H​2​S se
identifica por la presencia de un precipitado negro.

● Agar Blando:g

● Caldo Urea: E​ sta prueba señala la capacidad de un microorganismo para desdoblar

Urea, por la acción de la enzima ureasa. Es particularmente útil para diferenciar
 familias de enterobacterias. Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa,
pueden utilizar el nitrógeno proveniente de la urea, la hidrolizan, liberando amoníaco
y dióxido de carbono. Estos productos metabólicos alcalinizan el medio, haciendo
virar el indicador rojo fenol del amarillo al rojo.

● Caldo rojo de fenol: ​Es usado para el estudio de la fermentación de carbohidratos,

esta fermentación es un proceso metabólico anaeróbico de óxido-reducción. Posee
un indicador de pH, rojo de fenol, y una campana de Durham cuya función es la de
capturar parte de los gases que se producen en la fermentación. El color del medio
es rojo, la producción de ácido se observa por el viraje del indicador de pH a un color
amarillo.

● Agar almidón: ​Identifica si las bacterias producen enzimas capaces de desdoblar

las moléculas complejos de los polisacáridos. Estas enzimas realizan la ruptura de
los sustratos por medio de la hidrólisis, la amilasa hidroliza el almidón cuando los
organismos que la producen son cultivados en este medio. La caja de petri es
dividida en cuadrantes, 3 son usados para el cultivo de las bacterias y el sobrante es
para control, después de incubar se cubre la superficie del agar con una solución de
lugol, este en la presencia de almidón origina un color azul oscuro. Un halo
transparente alrededor de la colonia nos indica que la bacteria hidroliza el almidón, si
no hay halo significa que no lo hizo.
 ANÁLISIS Y RESULTADOS

Muestras problema :

● Agar Kliger 1:

● Agar Kliger 2:
● Agar Citrato de Simmons 1:

● Agar Citrato de Simmons 2:

● Agar SIM (Indol) 1:

● Agar SIM (Indol) 2:

● Agar Blando 1:

● Agar Blando 2:
● Caldo Urea 1:

● Caldo Urea 2:
● Caldo rojo de fenol 1:

● Caldo rojo de fenol 2:

Caja de petri (Agar almidón):

1. Bacillus cereus: ​Se puede observar que el Bacillus cereus fue resistencia al
colorante o sustancia y pudo hidrolizar el almidón, formandose un halo transparente
alrededor del almidón
2. Staphylococcus aureus: ​Se puede observar que esta bacteria no reacciona con la
sustancia agregada,por lo tanto no hidroliza el almidón .
3. Escherichia coli: ​Logramos observar que esta bacteria no reacciona con la
sustancia agregada, y por ser gram negativa son susceptibles a este tipo de
solución por lo tanto no hidroliza.

CONCLUSIONES

● Es posible identificar bacterias analizando su metabolismo en diferentes medios de

cultivo.
● Dependiendo de las características del medio, las bacterias se verán beneficiadas o
perjudicadas por este.
● Los distintos tipos de cultivo permiten identificar diferentes géneros y especies
bacterianas.
● El número y la clase de enzimas son diferentes, debido a que la enzima está
fabricada bajo un control genético, por lo cual se dan variaciones en la utilización de
sustratos . Estas variaciones se utilizan a su vez también para ayudar a determinar
los diferentes géneros y especies bacterianas.

BIBLIOGRAFÍA

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G, Yamillé Saldarriaga O., Manual de Laboratorio de Microbiología General. 7°
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septiembre de 2017]​.D
https://www.academia.edu/28724926/Caldo_Rojo_de_Fenol