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BIOQUÍMICA CLÍNICA

PRESENTAN:
Alarcón Aguilar Teresa
Mora Martínez Hugo
Pliego Porras Gisela
Vásquez García Ma. Maribel

Q.F.B. 702
11 Septiembre 2013
Los azoados son compuestos nitrogenados no
proteicos que se encuentran en bajas
concentraciones en suero y en altas concentraciones
en la orina.

En el plasma existen más de 15 compuestos


nitrogenados no proteicos (NPN) diferentes con una
concentración total de nitrógeno de 250-400 mg/l.

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.


 La urea es el principal compuesto nitrogenado no proteico
del plasma, el cual representa aproximadamente un 45% del
total.

 Otros constituyentes principales en orden decreciente de


contribución de nitrógeno son los aminoácidos, ácido úrico,
creatinina, creatina y amoniaco.

 Como consecuencia de una baja función renal se observan


mayores concentraciones de varios de los componentes
principales, por ejemplo, urea, ácido úrico y creatinina .

Ángel M.G/M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia), Panamericana
 La enfermedad hepática puede provocar una disminución del
metabolismo de los aminoácidos con un incremento
correspondiente del nitrógeno derivado de los aminoácidos en
el plasma.
 Cuando se lesiona el túbulo se pierde la capacidad de secreción
de la urea y creatinina (secreción tubular), por lo que aumenta
en la sangre, por lo tanto en los padecimientos tubulares hay
aumento de azoados.
 Cuando hay aumento de azoados en la sangre indica que hay
daño en el glomérulo o en el túbulo y se produce un síndrome
llamado síndrome ureico.
Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.
 Azoemia es una designación bioquímica que se refiere a
cualquier aumento significativo de la concentración
plasmática de compuestos nitrogenados no proteicos,
principalmente urea y creatinina.
 La azoemia muchas veces se clasifica como prerrenal, renal y
posrenal.
 La azoemia prerrenal  es el resultado de una perfusión
inadecuada de los riñones y, por tanto, de una menor
filtración glomerular en presencia de una función renal
normal.

Amadeo J.P, Química Clínica Métodos, (1990) Buenos Aires (Argentina), Panamericana.
Es el producto final del
metabolismo proteico

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
Sintetizada por el hígado, pasa al torrente
sanguíneo, se distribuye a todos los líquidos intra
y extracelulares, y se excreta la mayor parte por
los riñones

Se excreta en cantidades mínimas en la


sudoración y es degradada por las bacterias
intestinales

Todo esto indica que una concentración


aumentada de urea no es obligatoriamente
signo de disfunción renal (insuficiencia
renal), ya que otros muchos factores pueden
influirla.
Las nefronas renales pueden concentrar
urea con un gradiente hasta 50 veces
mayor que en plasma

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
PRINCIPIO DEL ANALISIS Y USO ACTUAL

La medición analítica de la urea aún se denomina


convencionalmente nitrógeno ureico en sangre (BUN), la
determinación de la urea se practica en suero o plasma.

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
Los valores de BUN pueden ser convertidos en concentraciones de urea
de la siguiente manera:
Peso atómico del nitrógeno = 14 g/mol; peso molecular de la urea = 60.06
g/mol
La urea contiene dos átomos de nitrógeno por molécula.
El nitrógeno de urea constituye el 46.6 % de su peso (28 dividido por
60.06)
En consecuencia:
10 mg/L de BUN dividido por 0.466 = 21.46 mg/L de urea = 0.36 mmol/L de
urea ó
 mg de urea N/L x 2.146 = mg de urea/L
 mg de urea N/L x 0.036 = mmol de urea/L.

El margen de referencia para el BUN está alrededor de 6-20 mg/100 dL (2.1-


7.1mmol/l)

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
MMETODOS
ETODOS

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
sangre o suero o muestra de orina o en un
 filtrado de proteínas.

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
AMBAS REACCIONES COLORIMÉTRICAS
La reacción de Berthelot (método 2) entre el amoniaco y
el fenol–NaOCl (HIPOCLORITO DE SODIO) producía un
complejo de azul de indofenol con un máximo de
absorción en 630 nm. Esta reacción se realizaba a menudo
con nitroferricianuro de sodio como catalizador.

El método más común para determinar la concentración


de urea en suero u orina es la medición del amoniaco
formado en la reacción con la ureasa, que emplea un
sistema enzimático acoplado y una reacción NAD/NADH
indicadora (método 3). Esas reacciones se miden en a 340
nm.

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
MUESTRA
El suero y plasma heparinizado pueden ser
empleados en los métodos de diacetilmonoxima,
ureasa/GLDH y conductimétrico.

Mediante estos tres métodos es posible analizar orina en


diluciones 1:20 a 1:50, dependiendo del método y del
instrumento empleados.
Dada la susceptibilidad de la urea a la degradación bacteriana,
las muestras de orina y suero debe conservarse entre 4 a 8º C
hasta su análisis.

También puede conservarse las muestras de orina a


un ph menor de 4. 2

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
INTERVALO DE REFERENCIA
Los intervalos de referencia para el BUN sérico varían según el
método.
Estadísticamente se observan valores más elevados en los
hombres y en grupos etarios mayores. Para los adultos estas
diferencias carecen de importancia clínica.
Los niños pequeños tienen valores en
suero algo más bajos que los niños
mayores y que los adultos. Las
variaciones individuales en los valores de
BUN también dependen de los hábitos
dietéticos del individuo, las personas
que consumen menor cantidad de
proteínas poseen una menor
concentración de urea en suero.

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000) Barcelona (España), Masson
 La uremia es un síndrome clínico que puede producirse
con una intensa azoemia prolongada y comprende
acidosis, desequilibrio hidroelectrolítico, nauseas,
vómitos y otras manifestaciones incluyendo el coma.
 La azoemia posrenal  suele ser el resultado de una
obstrucción del tracto urinario, de forma que se
reabsorbe urea a la circulación.1

1Amadeo J.P, Química Clínica Métodos, (1990) Buenos Aires (Argentina), Panamericana.
La masa de creatina se encuentra
fundamentalmente en el musculo por tanto la
cantidad en plasma es reflejo de la propia masa
muscular.
Se forma en el musculo partir de
creatina.

Mediante la creatina quinasa se


convierte en fosfocreatina.

Alrededor del 2% se convierte


diariamente en creatinina.

Excretada por los riñones y en


minoría por las heces.

3 Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.


La determinación de creatinina se realiza
principalmente para estimar la funci ón renal.

En general el nivel en suero o plasma es el m ás


empleado para controlar esta funci ón.

Los valores plasmáticos junto con la velocidad de


excreción urinaria pueden ser usados para determinar
la velocidad de filtración glomerular (VFG).3

3 Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.


Por ello los valores de referencias son distintos entre
varones y mujeres.

Valores normales de creatinina en plasma


Hombres Mujeres

Mínimo Máximo Mínimo Máximo


0.5 mg/dL 1.5 mg/dL 0.5 mg/dL 1.3 mg/dL

No modifica su nivel en el suero con la dieta,


ejercicio, edad y procesos catabólicos.

4Ángel M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia),
Panamericana
MÉTODOS ENZIMÁTICOS
MUESTRA

Es posible analizar suero, plasma u orina diluida esta ultima


debe llevarse a una concentración final de creatinina de unos
34 a 68 mg/l.

Los métodos enzimáticos requieren la separación rápida de


suero y el análisis inmediato para reducir la producción de
amoniaco in vitro.2

4Ángel M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia),

Panamericana
Uno de los más utilizados se basa en la función de la
acción de la creatininasa y creatinasa.

4Ángel M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia),
Panamericana
DEPURACI ÓN DE CREATININA

Se inicia haciendo evacuar la vejiga al


paciente al comienzo de un periodo de
24 hrs. Se recoge la orina durante todo
el periodo, se vací a nuevamente la
vejiga al final y se extrae una muestra
de sangre.

Se determina el nivel de creatinina en


suero y se mide el volumen recolectado
de orina.

4Ángel M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia),
Panamericana
Se calcula la depuraci ón de creatinina mediante la
siguiente formula:

El intervalo para la depuraci ón de creatinina en personas


sanas corregido para una superficie corporal de 1.73 mts 2
es de 90-120 ml/min.

4Ángel M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia),

Panamericana
*Una elevación en los niveles de creatinina de la sangre es
observada cuando hay un marcado daño en las nefronas.

*Por lo tanto esta prueba no es conveniente para detectar


estados tempranos de enfermedad del riñón.

*Una mejor valoración de la función del riñón es dada por la


prueba de depuracion de creatinina.
*La separación de creatinina puede ser calculada con
precisión usando la concentración de la creatinina del suero y
alguna o todas las variables siguientes: sexo, edad, peso, y
raza con una recolección de orina de menos de 24 horas.

*Algunos laboratorios calcularán el ClCr si está indicado en la


forma de solicitud de la patología; y la edad, el sexo, y el peso
necesarios son incluidas en la información del paciente.
*Es el producto del catabolismo de las purinas
Rangos normales

En los hombres está comprendido entre 3.4 a 7 mg/dL


En las mujeres entre 2.4 a 5 mg/dL

Solamente el 15% de pacientes afectados de gota se


encuentran con niveles elevados (de 6 a 9.5 mg/dL).

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana


PREPARACION DEL PACIENTE
Es recomendable que 3 días antes de la determinación, se
abstenga de comer carne e ingerir vino tinto.

Se aconseja evitar el estrés y estar en reposo.

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana


MUESTRA:
Puede emplearse suero o plasma, deben evitarse el EDTA y
fluoruro.
También son útiles las alícuotas de orina de 24 horas

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana


MUESTRA SANGUINEA

La dosificación se verifica en suero y el paciente debe


estar en ayunas de 10 horas en promedio.

Rangos normales urinarios

En orina de 24 horas recogida en recipiente con adición


de 15 g de acido bórico y guardada en refrigeración, las
cifras promedio están comprendidas entre 250 a 750
mg/24 horas.

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana


DETERMINACIÓN METODOS ENZIMATICOS

+3 Ac. bromofenol

La incubación de ácido úrico con uricasa se lleva a cabo en


buffer Tris a pH de 8.5 a 37°C. la cantidad de ácido úrico en la
muestra es directamente proporcional a la absorbancia de la
coloración. La reacción se mide por la disminución de la
absorbancia a 283 nm.
Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana
RELACIÓN ACIDO URICO-CREATININA

Esta determinación se realiza en la primera orina de la


mañana y se empela como prueba discriminatoria
para la detección del síndrome de Lesch-Nyhan.

La relación también ha sido aplicada a muestras de


orina de 24hrs. de pacientes adultos con gota para
detectar la deficiencia parcial de dicha enzima.

Los valores normales de la relación acido úrico –


creatinina
 En pacientes sanos oscilan entre 0.21 y 0.59
 En pacientes con gota van de o.15 a 0.73

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana


 Algunas enfermedades, alteraciones fisiológicas, cambios
bioquímicos se asocian a modificaciones de la concentración
del acido úrico en el plasma. El aumento de la concentración
del acido úrico es más frecuente y clínicamente más
significativo.

 Entre las etiologías más comunes de la hiperuricemia se trata


de un fallo renal, tiene una relación positiva con la
hiperlipidemia, obesidad, hipertensión.

 La gota es un trastorno del metabolismo de las purinas o de la


excreción renal del acido úrico.
 Solamente el 15% de los pacientes afectados de gota se
encuentran niveles elevados. La mayoría de los gotosos están
entre los niveles de 6mg/dL a 9.5 mg/dL. 1

 Los varones constituyen más del 90% de todos los casos,


mientras que la gota no es común en las mujeres antes de la
menopausia. La edad más probable de aparición es en la quinta
década y la enfermedad es muy infrecuente antes de los 20
años.1

1Bernard H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson
Artículo en Ingles

  Automated and manual direct methods for the


determination of blood urea WH Marsh, B Fingerhut, H
Miller - Clinical chemistry, 1965 - Am Assoc Clin Chem

“Métodos directos automáticos y manuales para la


determinación de urea en sangre”.