ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DEL LITORAL

Facultad de Ingeniería en Mecánica y Ciencias de la Producción

Ingeniería en Alimentos
Laboratorio de Alimentos 101
Reporte #3
Preparación de medios de cultivo
Integrantes:
- Alex Carreño
- Natacha Suplewiche
- Anthony Triviño
- Katiuska Vergara
Profesor: Diana Coello

RESUMEN
En esta práctica se aprendió a preparar medios de cultivos sólidos y líquidos siguiendo
el protocolo de preparación de medios de cultivo de acuerdo a la Norma Técnica
Ecuatoriana INEN, para la posterior siembra de microorganismos, utilizando un caldo de
código VB y el agar que se realizó en la practica 3 en el laboratorio. Se practicó el
método de estrías, utilizando el asa de siembra y el asa en punta. En total se realizaron
8 medios de cultivos, de líquido a líquido, líquido a sólido, liquido al agar de plano
inclinado, liquido al agar, líquido a masa, de solido a sólido, de solido a líquido y de
solido ha solido con estrías en división en la placa. Por medio de la práctica se pudo
resolver las preguntas redactadas en el trascurso del informe.

INTRODUCCIÒN

Los trabajos bacteriológicos requieren siembra de cultivos puros de bacterias (Tortora

et al, 2007). Se denomina siembra al proceso de agregar una porción de una población
de microorganismos de un cultivo bacteriano a un medio nutritivo, para luego incubarlo
(Santambrosio y Ortega, 2009).

Requerimos las siguientes condiciones para realizar una siembra:

 Instrumentos y Medios de Cultivo estériles: Los medios de cultivo se
esterilizan en la autoclave y los materiales de vidrio con calor seco. Los objetos
metálicos como el asa de siembra se esterilizan en el momento del uso,
mediante la llama del mechero hasta que se pongan al rojo (Santambrosio y
Ortega, 2009).
 Inóculo sin contaminar: Por lo general se flamea las bocas de los tubos de
ensayo, matraces, etc., antes y después de la utilización, aun si fueron
esterilizados previamente para evitar la contaminación (Santambrosio y Ortega,
2009).
 Condiciones ambientales próximas a ser estériles: Se utilizan cabinas de
flujo laminar, cuando no se dispone de ellas se utiliza un mechero Bunsen para
disminuir los riesgos de contaminación, forzando la circulación del aire para crear
un ambiente semi-estéril en la zona alrededor de la llama (Santambrosio y
Ortega, 2009).
Las técnicas de siembra más utilizadas son: Suspensión de la muestra en medios
líquidos, Estría en placas de Petri o tubos en slant, Picadura en tubos con medios sólidos
o semisólidos, Extensión de las diluciones de un cultivo en placas de Petri, Vertido en
placas de Petri, Diluciones decimales (Tortora et al, 2007).
Los microorganismos se encuentran generalmente en poblaciones, formando
comunidades complejas, por lo que para su estudio se aíslan (Hernández, 2018). Las
colonias microbianas a menudo tienen un aspecto distintivo entre los
microorganismos, debido a que una colonia visible se origina en una única espora o
célula en un grupo de los mismos microorganismos (Tortora et al, 2007).
MATERIALES Y METODOS
El procedimiento se realizó siguiendo la guía de laboratorio de alimentos, practica 5. Se
utilizó el caldo de código VB y el agar realizado en la práctica 3. Se utilizó nuevos
materiales del laboratorio como el agar de triángulo y la pipeta electrónica con sus
respectivas puntas.

PREGUNTAS

¿Cómo crecen los microorganismos en el agar?

Los microorganismos crecen gracias a los nutrientes presentes en el agar los cuales
contienen compuestos específicos para diferentes tipos de microorganismos, sin
embargo, hay bacterias que pueden crecer en casi cualquier agar o medio de cultivo (de
Fátima Tomás, 2015).

¿Cuál es el objetivo de la siembra en masa?

Su objetivo principal es contar microorganismos que crecen en un medio sólido y forman
colonias después de ser incubadas (de Fátima Tomás, 2015).

¿Cuál es el objetivo de la siembra por picadura?

Su objetivo principal es cultivar microorganismos tanto aeróbicos como anaeróbicos. Sin
embargo, también se puede utilizar para conservar estos organismos a una baja
temperatura por un corto plazo de tiempo, o para amplificar un inóculo de diminuto
tamaño (Triviño, 2011).

¿Cuál es el objetivo de las técnicas de estrías?

El objetivo de esta técnica es esparcir microorganismos a través del agar, para que así
se puedan observar después de la incubación, colonias aisladas (Universidad Nacional
de Rosario, 2019).

¿Qué tipo de siembra seria el adecuado para microrganismos aerobios

obligados? ¿Por qué?
Existen dos tipos de siembra apropiados para los microorganismos aerobios obligados
los cuales son: siembra por inmersión y siembra en superficie (Wix, 2015).Estos tipos
de siembra son aptos porque los microorganismos aerobios crecen en la superficie del
agar adquiriendo suficiente cantidad de oxígeno de la atmósfera para desarrollarse que
en un medio liquido ya que se les haría más difícil porque no hay demasiado oxígeno
disuelto en agua y los microorganismos aerobios lo consumen rápidamente (Cabello,
2001).
¿Qué tipo de siembra seria el adecuado para microrganismos anaerobios
estrictos? ¿Por qué?
La siembra en capa Porque estos microorganismos se desintegran rápidamente cuando
entran en contacto con el oxígeno por lo que son revestidos por agentes solidos como
el agar para impedir el acceso del aire (General, 2019).También la siembra en masa es
ideal porque el medio liquido es regenerado por calentamiento a Baño María para
prevenir una posterior difusión de oxígeno (General, 2019).
¿Qué tipo de siembra seria el adecuado para microrganismos anaerobios
facultativos? ¿Por qué?
El tipo de siembra ideal para los microorganismos facultativos es la siembra en doble
capa y la siembra en agar inclinado por picadura (General, 2019). Los microrganismos
anaerobios facultativos son capaces de desarrollarse tanto en un medio con oxígeno o
sin la presencia de este, pero son más adecuados en los dos tipos de siembra porque
con la respiración anaeróbica pueden continuar creciendo mejor que en presencia de
oxigeno (Tortora, Funke, & Case, 2007)

BIBLIOGRAFÌA

Cabello, R. (2001). R. Microbiología y Parasitologìa Humana: Bases etiológicas de las

enfermedades infecciosas. México: Editorial Panamericana.

General, M. (2019). Microbiologia General. Obtenido de Siembra, aislamiento e

identificación de microorganismos:
https://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/169626/mod_resource/conte
nt/1/2019%20TP2%20BIOQ%20Y%20LCTA.pdf

Hernández, N. (2018). Manual de Microbiología. Universidad Rural de Guatemala.

Zacapa, Guatemala.
Santambrosio, E. & Ortega, M. (2009). Siembra y recuento de microorganismos.
Universidad Tecnológica Nacional. Rosario, Argentina.
Tortora, G.J., Funke, B.R. & Case, C.L. (2007). Introducción a la Microbiología.
Novena edición. Buenos Aires, Argentina: Ed. Médica Panamericana
Tortora, G. J., Funke, . R., & Case, . L. (2007). Introducción a la microbiologia. Editorial
Medica Panamericana.

Wix. (2015). Wix. Obtenido de Labdemicrobiologia:Técnicas y tipo de sembrado:

https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/t-cnicas-y-tipos-de-
sembrado